导读:本文包含了质体转化载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:马铃薯,多基因质体转化,光呼吸支路
质体转化载体论文文献综述
姚振,沈博然,彭新湘[1]（2018）在《马铃薯多基因质体转化载体及其在光呼吸支路构建中的应用》一文中研究指出为了将大肠杆菌的乙醇酸代谢途径引入马铃薯叶绿体构建光呼吸代谢支路,同时规避目标蛋白不能通过叶绿体信号肽定位的风险,研究采用了Cre-Lox P多基因组装、融合蛋白表达、多顺反子表达等技术构建多基因质体转化载体,一次性将目标基因引入叶绿体基因组。研究成功构建了多基因质体转化载体,将编码壮观霉素抗性筛选标记氨基葡糖苷腺苷转移酶aad A、绿色荧光蛋白GFP、大肠杆菌乙醇酸脱氢酶(EcGLC)的3个亚基,乙醛酸聚醛酶(EcGCL)和羟基丙二酸半醛还原酶(Ec TSR)的7个基因添加到受体载体,最终的载体大小为18.1 kb。在构建的过程中,研究发现供体受体质粒的大小比例、Prrn启动子在细菌中的启动基因的表达等问题严重影响重组的效率。以上研究结果为光呼吸的代谢改造研究提供了一个新的思路,并解除了质体转化载体构建中基因数量的限制,对于叶绿体中复杂的代谢途径构建具有借鉴意义。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年12期）
夏蓓蓓,翟军鹏,陈吉裕,张香琴,张兴国[2]（2010）在《番茄质体转化载体pTom-GFPaadA的构建》一文中研究指出采用Pri mStar HS DNA聚合酶从番茄基因组DNA中扩增出了质体的trnI-trnA基因序列.序列分析结果表明,所克隆的基因与GenBank公布的序列完全相同,与烟草的trnI-trnA基因序列同源性高达94%.将该片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn∷gfp-aadA∷TpsbA表达盒的番茄质体定点转化载体pTom-GFPaadA,酶切鉴定表明,所构建的载体符合预期设计.(本文来源于《西南大学学报(自然科学版)》期刊2010年04期）
孙士群[3]（2009）在《质体定位蛋白Pt-mVirD2的编码基因合成与T-DNA型烟草质体转化载体的构建》一文中研究指出叶绿体转化具有高丰量表达目的基因、以定点整合方式导入外源基因从而消除了位置效应及基因沉默、能按原核表达方式以多顺反子的形式表达多个基因、母系遗传方式可防止基因扩散、基因产物区域化并能提供适于某些产物发挥功能的小环境等优点。其应用价值越来越受到人们的重视。现在绝大多数的植物质体转基因都采用基因枪法,也有少数实验采用PEG介导的原生质体法。此外,还有采用微注射法成功实现外源基因瞬时表达的报道。但是,这些方法均存在转化效率低、同质化时间长和可能同时将质体基因污染性整合进核基因组等问题,已成为该技术迅速发展与广泛利用中迫切需要解决的难题。本研究克隆了根癌农杆菌的VirD2基因片段mVirD2和拟南芥AtCor15a基因的质体定位信号肽的编码序列pt(plastid-targeted),构成了编码质体定位融合蛋白的核基因pt-mVirD2;同时,构建带有T-DNA结构的烟草质体转化载体;以期为下一步进行叶绿体定向转化、解决当前质体转化难度大和效率低等问题奠定基础。主要实验结果如下:1.构建了分别含有pt-mVirD2-GUS和pt-mVirD2-GFP基因的植物基因双元表达载体以根癌农杆菌C58基因组、pMD-AtCor15a质粒为模板,分别扩增了丧失核定位信号的mVirD2基因片段和质体定位信号序列pt,构建了分别含有pt-mVirD2-GUS嵌合基因和pt-mVirD2-GFP嵌合基因的植物基因双元表达载体pVCT2155和pVCT2210。2.将pt-mVirD2-GUS和pt-mVirD2-GFP目的基因分别导入烟草基因组,获得转基因植株(1)采用叶盘法经农杆菌介导在50mg/l潮霉素的筛选压下筛选,得到潮霉素阳性植株。经PCR扩增证实,目的基因pt-mVirD2-GUS整合进了烟草基因组。(2)采用叶盘法经农杆菌介导在150mg/l卡那霉素的筛选压下筛选,得到卡那霉素阳性植株,将目的基因pt-mVirD2-GFP导入烟草。对抗性植株进行显微观察能够看到绿色荧光。3.构建了T-DNA型烟草质体转化载体构建了带有T-DNA左右边界的烟草质体转化载体pVCT2164。其中,T-DNA内含有两段用于同源重组的烟草叶绿体DNA片段trnI和trnA、由Prrn启动子和TpbsA终止子控制的GFP报告基因和aadA壮观霉素抗性基冈;T-DNA外为nptⅢ卡那霉素抗性基因和大肠杆菌复制子ColE1。(本文来源于《西南大学》期刊2009-05-30）
质体转化载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用Pri mStar HS DNA聚合酶从番茄基因组DNA中扩增出了质体的trnI-trnA基因序列.序列分析结果表明,所克隆的基因与GenBank公布的序列完全相同,与烟草的trnI-trnA基因序列同源性高达94%.将该片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn∷gfp-aadA∷TpsbA表达盒的番茄质体定点转化载体pTom-GFPaadA,酶切鉴定表明,所构建的载体符合预期设计.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
质体转化载体论文参考文献
[1].姚振,沈博然,彭新湘.马铃薯多基因质体转化载体及其在光呼吸支路构建中的应用[J].分子植物育种.2018
[2].夏蓓蓓,翟军鹏,陈吉裕,张香琴,张兴国.番茄质体转化载体pTom-GFPaadA的构建[J].西南大学学报(自然科学版).2010
[3].孙士群.质体定位蛋白Pt-mVirD2的编码基因合成与T-DNA型烟草质体转化载体的构建[D].西南大学.2009