张康:牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备论文

张康:牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备论文

本文主要研究内容

作者张康,张璇,闫遵祥,王磊,张凯,张景艳,罗永江,仇正英,薛欢,李建喜(2019)在《牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出:为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白。将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1∶512 000。蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性。本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础。

Abstract

wei zhi bei niu bing du xing fu xie bing du (BVDV)de Coredan bai ji ji duo ke long kang ti ,gen ju Coredan bai de bian ma ji yin xu lie ,she ji ge cheng yi dui te yi xing yin wu ,li yong RT-PCRkuo zeng BVDV Coreji yin bing ding xiang cha ru Pet30azai ti zhong ,gou jian chong zu zhi li Pet30a-Core,jing mei qie jian ding hou zhuai hua da chang ai xi jun TOP 10gan shou tai xi bao ,shai shua huo de yang xing chong zu jun ,yi IPTGjin hang you dao hou cheng gong biao da chu fen zi zhi liang wei 20 kude chong zu Coredan bai 。jiang you dao biao da de dan bai chan wu jing rong ge dan bai de Nizhu qin he fa jin hang chun hua ,li yong chun hua de chong zu dan bai mian yi xin xi lan bai tu zhi bei duo ke long kang ti ,bing li yong jian jie ELISAfa ce chu duo ke long kang ti xiao jia da dao 1∶512 000。dan bai zhi yin ji fa (Western blot)he jian jie mian yi ying guang shi yan (IFA)zheng shi ,duo ke long kang ti ke yu xi bao zhong de BVDVkang yuan fa sheng fan ying ,ju you liang hao de mian yi yuan xing he te yi xing 。ben shi yan cheng gong zhi bei le BVDVchong zu Coredan bai de tu yuan duo ke long kang ti ,wei BVDVde jian ce ji ji Coredan bai gong neng yan jiu dian ding le ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自浙江农业学报的张康,张璇,闫遵祥,王磊,张凯,张景艳,罗永江,仇正英,薛欢,李建喜,发表于刊物浙江农业学报2019年11期论文,是一篇关于牛病毒性腹泻病毒论文,蛋白论文,表达论文,多克隆抗体论文,浙江农业学报2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自浙江农业学报2019年11期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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