导读:本文包含了类胰蛋白酶抑制剂论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:凡纳滨对虾,类胰蛋白酶,大豆胰蛋白酶抑制剂,肌肉特性
类胰蛋白酶抑制剂论文文献综述
郑鸯鸯[1]（2016）在《大豆胰蛋白酶抑制剂对凡纳滨对虾类胰蛋白酶及其冰藏期间蛋白质降解的抑制作用》一文中研究指出凡纳滨对虾是我国主要的对虾品种,深受消费者的欢迎,但是运输销售过程中凡纳滨对虾死后极易发生组织软化、肌肉自溶,这导致其市场价格大大降低,贮藏时间也随之缩短。本课题组前期研究表明,虾头中肝胰脏的内源蛋白酶—类胰蛋白酶的扩散及其对肌肉蛋白的降解作用是贮藏期间肌肉组织软化、品质下降的主要原因。也有文献报道指出大豆提取物中富含胰蛋白酶抑制剂,可以抑制虾肉蛋白降解。因此,为探索大豆胰蛋白酶抑制剂在凡纳滨对虾保鲜中的作用,本论文重点研究了大豆胰蛋白酶抑制剂对凡纳滨对虾类胰蛋白酶的抑制类型、大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物对冰藏凡纳滨对虾生化指标、肌肉流变和热特性的影响,最后利用蛋白组学技术研究了凡纳滨对虾冰藏期间肌肉蛋白的变化,并探究了大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物对冰藏期间蛋白降解的影响。主要研究内容及结论如下:(1)通过30-80%硫酸铵沉淀、Q-Sepharose F.F阴离子交换层析和Sephacryl S-100凝胶过滤层析从凡纳滨对虾中提取到类胰蛋白酶,其分子量为32.6k Da。通过粉碎、脱脂、0.15M Na Cl提取,再进行热变性、超滤、Sephacryl S-100凝胶过滤层析纯化得到大豆胰蛋白酶抑制剂,该抑制剂分子量为16kDa,得率为28.95%,纯化倍数达12.51,为电泳纯。该抑制剂能抑制凡纳滨对虾类胰蛋白酶活性,其抑制类型为不可逆抑制。(2)以注射和未注射大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的凡纳滨对虾分别为实验组和空白组,利用动态流变仪和差示扫描量热仪(DSC)分别探究该粗提物对凡纳滨对虾在冰藏(0℃)期间肌肉特性的影响。动态流变仪测定结果表明,两组凡纳滨对虾肌肉蛋白均能形成热凝胶,凝胶开始形成温度为47℃,最终形成凝胶温度为78℃左右,且降温有利于热诱导凝胶的进一步加固;冰藏2、4、6天时,注射组的弹性模量G’值总体上大于空白组,凝胶弹性比空白组好。DSC结果显示,冰藏0、2天时两组凡纳滨对虾主要有3个热吸收峰,对应变性温度大约为48、68、79℃,随冰藏时间延长,在53℃左右出现了1个新的热吸收峰;不过,注射组4个热吸收峰的变性温度总体上大于空白组,且2、4天的变性温度差异显着(p<0.05),虾肉蛋白的热稳定性得到了提高。因此大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物在凡纳滨对虾冰藏前期(<6天)能提高热凝胶的弹性和蛋白的热稳定性,起到了延缓虾肉软化和蛋白变性的作用。(3)采用蛋白组学技术探索新鲜凡纳滨对虾冰藏期间肌肉蛋白的变化。结果表明,在A0下调的差异蛋白中,肌球蛋白重链1、腺苷酸脱氨酶、生成I135的固有蛋白(未鉴定出)在冰藏期间生成降解产物I19、I14和I135。差异蛋白点I19的灰度值变化与冰藏时间呈良好的线性正相关,决定系数R2为0.920,I135和点I14灰度值与时间用二次多项式回归拟合效果较好,决定系数R2分别达到0.974和0.986。在A0上调的差异蛋白中,肌钙蛋白I、肌球蛋白重链1、肌球蛋白重链2均属于随冰藏时间逐渐降解的蛋白,灰度差异倍数随冰藏时间总体上均呈上升的趋势。因此,肌球蛋白重链1、肌球蛋白重链2、肌钙蛋白I和腺苷酸脱氨酶可以作为凡纳滨对虾冰藏期间新鲜度的指示蛋白。(4)以注射和未注射大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的凡纳滨对虾分别为实验组和空白组,采用蛋白组学技术分析同一冰藏时间下两组凡纳滨对虾样品的差异蛋白点,探索大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物对对虾蛋白降解的影响。结果表明,注射组凡纳滨对虾中肌球蛋白重链1含量大于空白组,说明注射组肌球蛋白降解更慢;相反,精氨酸激酶、烯醇酶和丙酮酸激酶这3种代谢酶在未注射组中的含量大于注射组,表明未注射组对虾体内代谢比注射组快。因此,大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物能减慢凡纳滨对虾死后的蛋白降解进程。(本文来源于《广东海洋大学》期刊2016-06-01）
杭虞杰,李学英,杨宪时,迟海,郭全友[2]（2012）在《大豆胰蛋白酶抑制剂对南极磷虾类胰蛋白酶的抑制动力学》一文中研究指出为了探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对南极磷虾(Euphausia superba)类胰蛋白酶的抑制动力学,采用邹氏不可逆抑制动力学法,测定了STI对该酶的微观速度常数。结果表明:南极磷虾类胰蛋白酶的Km和Vmax分别为0.155 mmol/L,8.44μmol/(L.min)。酶活力随着STI溶液浓度增大而减小,其IC50约为2.8μg/mL;低浓度的STI溶液对酶的抑制作用为竞争性慢可逆抑制。正向微观速度常数k+0为0.184 mmol/(L.min),逆向微观速度常数k-0为0.039 4 min-1,随着STI溶液浓度的逐渐增大,该酶最终将完全失活。本研究旨为该酶的抑制技术研究提供实验数据。(本文来源于《中国水产科学》期刊2012年04期）
林艺娟[3]（2009）在《溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜肥大细胞类胰蛋白酶表达变化及其抑制剂的作用》一文中研究指出背景:葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠的组织学特点与人类溃疡结肠炎(Ulcerative Colitis, UC)类似。实验性溃疡性结肠炎和人溃疡性结肠炎肠粘膜内肥大细胞(Mast Cell,MC)的活性和数量显着增多,其中类胰蛋白酶(tryptase)是其活化和释放颗粒的特异性标志。目的:测定DSS诱导的溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜中MC数量和tryptase表达变化、及IL-6、IL-8的含量变化,并观察类胰蛋白酶抑制剂(tryptase inhibitor, TPI)对他们的影响。方法:40只雄性Wistar大鼠按1:3随机分为A组(空白对照组,10只)和S组(研究组,30只),A组自由饮用无菌蒸馏水7天,后续无菌蒸馏水连续灌肠7天,1次/天;S组自由饮用3%DSS溶液7天,然后再随机分为B组(模型对照组,无菌蒸馏水灌肠)、C组(NM组,10-9mol/L灌肠)、D组(5-ASA组,100mg/kg灌肠),每组10只。实验结束,对疾病活动指数(DAI)、组织学损伤指数(HI)、远端结肠组织肥大细胞(甲苯胺蓝改良染色法)和类胰蛋白酶的表达(免疫组化)进行评价,取血清测IL-6和IL-8(ELISA法)的浓度。结果:⑴治疗第1天,A组(空白对照组)DAI评分与B组(模型对照组)、C组(NM组)、D组(5-ASA组)相比,有显着统计学意义(P<0.01);实验结束后,B组DAI、HI评分(6.50±1.43、5.10±0.74)与C组(3.40±1.26、2.30±0.67)、D组(2.60±0.97、2.00±0.82)相比明显增高(P<0.01);⑵远端结肠粘膜肥大细胞数及类胰蛋白酶表达:B组(15.30±1.89,102.87±3.39)与C组(5.40±1.43,140.27±1.65)、D组(4.40±1.51,142.95±2.62)相比,表达显着增高(P<0.01);⑶血清IL-6、IL-8浓度比较:B组(72.81±12.64,234.29±18.56)比C组(41.39±4.82,140.68±9.38)、D组(37.21±8.29,138.81±15.83)浓度显着增高(P<0.01)。以上各指标C组(NM组)与D组(5-ASA组)比较无统计学差异(P>0.05)。结论:小剂量类胰蛋白酶抑制剂可以下调结肠粘膜肥大细胞数量、抑制肥大细胞类胰蛋白酶表达,对DSS诱导溃疡性结肠炎大鼠有治疗作用。(本文来源于《福建医科大学》期刊2009-05-01）
刘怡[4]（2008）在《植物中的类胰蛋白酶活化抑制剂》一文中研究指出来自植物的类胰蛋白酶活化抑制剂(tryptaseactivation inhibitor)包括:1)以儿茶素、黄酮、黄酮醇类、黄烷酮、鞣质或其糖苷作为活性成分;2)选自植物或其溶媒提取物作为活性成分,如圆穗蓼Polygonum bistorta L.、波鸭蜜属植物、余甘子Phyllanthus emblica L.、白柳(white willow)、姜黄、(本文来源于《国外医药(植物药分册)》期刊2008年06期）
王森,何韶衡,魏继福[5]（2008）在《水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂表达载体的构建与表达》一文中研究指出目的:构建水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂(leech derived tryptase inhibitor,LDTI)原核表达载体,并在大肠埃希菌[BL21(DE3)]中高效表达重组蛋白。方法:以含有目的核酸序列的质粒为模板,通过PCR技术扩增出LDTI蛋白编码序列,构建含目的片段的T克隆载体以及原核表达载体pET28a-LDTI重组质粒亚克隆,进行限制性内切酶双酶切鉴定和核酸序列分析,然后将该质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导,以Tricine-SDS-PAGE和蛋白质印迹方法分析和鉴定重组蛋白的表达。结果:成功构建了水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂原核表达载体pET28a-LDTI,并获得相应的融合蛋白;本实验证明,LDTI在大肠埃希菌工程菌中高效表达,在温度为33℃,IPTG浓度为0.7 mmol,诱导时间为1 h,所表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的15%左右。结论:成功构建了LDTI原核表达载体并使其在原核系统中高效表达,为进一步研究水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂的生化特性和生物学功能奠定了良好的基础。(本文来源于《江苏大学学报(医学版)》期刊2008年05期）
王森[6]（2008）在《水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达》一文中研究指出目的构建水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂(LDTI)原核表达载体,将其转化入大肠杆菌[BL21(DE3)]中优化表达条件,以期获得重组类胰蛋白酶抑制剂的高效表达,并为进一步研究水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂的生化特性,生物学功能及其对于肥大细胞影响和对过敏性疾病的潜在治疗作用奠定基础。方法1.基因克隆①LDTI基因扩增:以含目的基因片段的质粒为模板,运用PCR技术扩增出LDTI基因,通过1.4%琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果。②T克隆载体的构建:将上步所得DNA片段与pMD18-T载体连接,构建含目的片段的T载体克隆,转化入大肠杆菌JM109,扩大培养提取质粒,通过菌落PCR,以及限制性内切酶双酶切和基因测序进行质粒鉴定。③pET28a-LDTI载体的构建:对上述T载体进行双酶切,取目的片段与经过双酶切的pET28a片段连接,构建原核表达载体pET28a-LDTI重组质粒亚克隆,将其转化入大肠杆菌JM109,扩大培养,提取质粒,进行菌落PCR、限制性内切酶双酶切和基因测序鉴定。2.蛋白表达①pET28a-LDTI表达载体转化BL21(DE3)。②IPTG诱导pET28a-LDTI基因表达目的蛋白。经Tricine-SDS-PAGE电泳及抗6×His抗体鉴定融合蛋白。优化诱导表达的时间和IPTG的诱导浓度,诱导重组蛋白快速大量表达。结果1.琼脂糖凝胶电泳图像上在约140bp处可见一条亮带,表明成功扩增了目的基因片段。2.菌落PCR,双酶切以及基因测序结果显示利用基因克隆技术成功构建了T克隆载体。3.菌落PCR,双酶切以及基因测序结果显示利用基因克隆技术成功构建了pET28a-LDTI表达载体。4.pET28a-LDTI重组子可被IPTG诱导表达,并且可以高效表达LDTI,在Tricine-SDS-PAGE电泳图像上约6.8KD处表现为一条粗蛋白带。符合Western-blot鉴定结果。在温度为33℃,IPTG浓度为0.7mM,诱导1h后,所表达的目的蛋白量最大,约占菌体总蛋白的15%左右。结论成功构建LDTI原核表达载体并使其在原核系统中高效表达,为以后进一步研究LDTI蛋白的功能奠定了基础。(本文来源于《汕头大学》期刊2008-05-01）
王森,何韶衡,魏继福[7]（2008）在《类胰蛋白酶及其抑制剂研究进展》一文中研究指出研究人员在利用胰蛋白酶对肥大细胞进行酶组织化学染色时发现,肥大细胞能够被染色,说明其中存在着具有胰蛋白酶活性的物质。人们对该物质纯化后发现,它是由肥大细胞释放的,并且其胰蛋白酶样活性90%以上来自一种酶,因此命名该酶为类胰蛋白酶(tryptase)。由于(本文来源于《江苏大学学报(医学版)》期刊2008年01期）
谢华,何韶衡,程明华,傅意玲[8]（2005）在《类糜蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响》一文中研究指出目的:研究类糜蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响。方法:人大肠组织经酶消化后,细胞成份有全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定。结果:促分泌剂抗IgE抗体和CI在培养15分钟和35分钟时可明显刺激人大肠肥大细胞类胰蛋白酶的释放,在相同实验体系中,类糜蛋白酶抑制剂ZIGPFM、TPCK和α1抗胰蛋白酶无明显刺激人大肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性的方式抑制抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶的释放,最大浓度的ZIGPFM(1μmolml)、TPCK(80μmolml)和α1抗胰蛋白酶(30μmolml)可分别抑制37%、40%和36.6%的类胰蛋白酶释放。在37℃条件下同大肠细胞预培养20分钟与无预培养相比,ZIGPFM和TPCK对抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶释放的抑制作用略增强。Amastatin对抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶的释放无作用。类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性的方式抑制CI诱导的类胰蛋白酶的释放,抑制范围在23%～35.3%。在37℃条件下同大肠细胞预培养20分钟与无预培养相比,ZIGPFM对CI诱导的类胰蛋白酶释放的抑制作用有增强,TPCK则无此特点。结论:类糜蛋白酶抑制剂可抑制人大肠肥大细胞IgE依赖性和非依赖性类胰蛋白酶的释放,提示类糜蛋白酶抑制剂可望成为炎症性肠病或其它肥大细胞相关疾病的一个新的治疗途径。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2005年09期）
王佐,赵战芝,冯大明,孙文清,吕运成[9]（2005）在《水蛭类胰蛋白酶抑制剂对泡沫细胞形成的抑制作用》一文中研究指出目的观察水蛭类胰蛋白酶抑制剂(leech derived tryptase inhibitor,LDTI)对THP-1泡沫细胞形成及细胞内胆固醇含量的影响,评价类胰蛋白酶抑制剂在细胞胆固醇运转中的作用。方法用超速离心、分子筛超虑、高效液相色谱等方法从日本医蛭(Medical himdo)中分离纯化和制备水蛭LDTI,用80 mg/L ox-LDL 处理THP-1细胞24 h 使其形成荷脂泡沫细胞,用不同剂量LDTI 干预,测定类胰蛋白酶抑制剂的活性,油红O 染色显徽镜下观察细胞内脂滴及细胞形态变化,高效液相色谱法分析细胞内胆固醇和胆固醇酯的变化。结果20mg/g(本文来源于《第八次全国动脉硬化性疾病学术会议论文集》期刊2005-08-01）
谢华,何韶衡,程明华,傅意玲[10]（2004）在《类胰蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞组胺释放的影响》一文中研究指出目的 :研究类胰蛋白酶抑制剂 (TPI)对人大肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 :大肠组织经胶原酶和透明质酸酶消化后 ,将细胞成分用全HBSS重新悬浮。肥大细胞在LP4试管中于37℃条件下与各种刺激剂反应 15min而完成激发过程。激发液中的组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果 :4种TPI中 ,高浓度的亮抑酶肽素和鱼精蛋白可刺激人大肠肥大细胞释放组胺 ;而TLCK和乳铁蛋白则无明显的刺激作用。 4种TPI均可以剂量依赖的方式抑制抗IgE抗体诱导的大肠肥大细胞释放组胺。最大浓度的亮抑酶肽素(2 0 0mmol/L)、TLCK(10 0mmol/L)、乳铁蛋白 (30mmol/L)和鱼精蛋白 (10 0mg/L) ,可分别抑制 4 8.7%、36 .7%、4 0 .2 %和 34.1%的组胺释放。在 37℃条件下 ,将 4种TPI同大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,它们对抗IgE抗体诱导的组胺释放无明显改变。 4种TPI还可抑制CI诱导的组胺释放 ,抑制范围在 2 5 %～ 32 %之间。与抗IgE抗体诱导的组胺释放则不同 ,与大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,亮抑酶肽素和TLCK对CI诱导的组胺释放的抑制作用明显增强 ;而鱼精蛋白则无此作用。结论 :我们首次发现TPI可抑制人大肠肥大细胞IgE抗体依赖和非IgE抗体依赖的组胺释放 ,提示TPI可望成为炎症性肠(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2004年06期）
类胰蛋白酶抑制剂论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对南极磷虾(Euphausia superba)类胰蛋白酶的抑制动力学,采用邹氏不可逆抑制动力学法,测定了STI对该酶的微观速度常数。结果表明:南极磷虾类胰蛋白酶的Km和Vmax分别为0.155 mmol/L,8.44μmol/(L.min)。酶活力随着STI溶液浓度增大而减小,其IC50约为2.8μg/mL;低浓度的STI溶液对酶的抑制作用为竞争性慢可逆抑制。正向微观速度常数k+0为0.184 mmol/(L.min),逆向微观速度常数k-0为0.039 4 min-1,随着STI溶液浓度的逐渐增大,该酶最终将完全失活。本研究旨为该酶的抑制技术研究提供实验数据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
类胰蛋白酶抑制剂论文参考文献
[1].郑鸯鸯.大豆胰蛋白酶抑制剂对凡纳滨对虾类胰蛋白酶及其冰藏期间蛋白质降解的抑制作用[D].广东海洋大学.2016
[2].杭虞杰,李学英,杨宪时,迟海,郭全友.大豆胰蛋白酶抑制剂对南极磷虾类胰蛋白酶的抑制动力学[J].中国水产科学.2012
[3].林艺娟.溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜肥大细胞类胰蛋白酶表达变化及其抑制剂的作用[D].福建医科大学.2009
[4].刘怡.植物中的类胰蛋白酶活化抑制剂[J].国外医药(植物药分册).2008
[5].王森,何韶衡,魏继福.水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂表达载体的构建与表达[J].江苏大学学报(医学版).2008
[6].王森.水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达[D].汕头大学.2008
[7].王森,何韶衡,魏继福.类胰蛋白酶及其抑制剂研究进展[J].江苏大学学报(医学版).2008
[8].谢华,何韶衡,程明华,傅意玲.类糜蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响[J].中国免疫学杂志.2005
[9].王佐,赵战芝,冯大明,孙文清,吕运成.水蛭类胰蛋白酶抑制剂对泡沫细胞形成的抑制作用[C].第八次全国动脉硬化性疾病学术会议论文集.2005
[10].谢华,何韶衡,程明华,傅意玲.类胰蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞组胺释放的影响[J].细胞与分子免疫学杂志.2004