本文主要研究内容
作者王以欣,王紫微,王丽,姜艳平,崔文,周晗,乔薪瑗,唐丽杰,李一经,徐义刚（2019）在《基于DPO引物检测猪传染性胃肠炎病毒real-time RT-PCR方法的建立及应用》一文中研究指出：为建立快速、特异性检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的方法,以TGEV的N基因为靶基因,利用双启动寡核苷酸引物(dual priming oligonucleotide,DPO),建立了检测TGEV的real-time RT-PCR方法。结果显示,与常规引物相比,DPO引物的特异性强,有3个以上碱基与模板发生错配,将导致扩增效率极大降低或终止扩增反应,同时DPO引物有效退火温度范围较宽,在40～65℃均能高效地扩增靶基因,不需要对退火温度进行优化。本研究建立的方法灵敏度高,对TGEV核酸的最低检测限可达1.52×10~1 copies/μL,同时利用该方法对10种病毒株进行检测,仅TGEV为阳性,显示了良好的检测特异性。该方法的检测重复性好,以质粒标准品为模板的组内、组间重复性检测结果的变异系数均小于1.00%。利用建立的方法对采集的213份仔猪腹泻临床样品进行检测,共检出TGEV阳性样本31份,阳性率为14.55%,与常规RT-PCR方法检测结果的符合率为93.55%,与基于N基因测序结果的符合率为100.00%。本研究基于DPO引物建立的检测TGEV的real-time RT-PCR方法,为TGEV的准确检测和流行病学调查提供技术支持。
Abstract
wei jian li kuai su 、te yi xing jian ce zhu chuan ran xing wei chang yan bing du (TGEV)de fang fa ,yi TGEVde Nji yin wei ba ji yin ,li yong shuang qi dong gua he gan suan yin wu (dual priming oligonucleotide,DPO),jian li le jian ce TGEVde real-time RT-PCRfang fa 。jie guo xian shi ,yu chang gui yin wu xiang bi ,DPOyin wu de te yi xing jiang ,you 3ge yi shang jian ji yu mo ban fa sheng cuo pei ,jiang dao zhi kuo zeng xiao lv ji da jiang di huo zhong zhi kuo zeng fan ying ,tong shi DPOyin wu you xiao tui huo wen du fan wei jiao kuan ,zai 40～65℃jun neng gao xiao de kuo zeng ba ji yin ,bu xu yao dui tui huo wen du jin hang you hua 。ben yan jiu jian li de fang fa ling min du gao ,dui TGEVhe suan de zui di jian ce xian ke da 1.52×10~1 copies/μL,tong shi li yong gai fang fa dui 10chong bing du zhu jin hang jian ce ,jin TGEVwei yang xing ,xian shi le liang hao de jian ce te yi xing 。gai fang fa de jian ce chong fu xing hao ,yi zhi li biao zhun pin wei mo ban de zu nei 、zu jian chong fu xing jian ce jie guo de bian yi ji shu jun xiao yu 1.00%。li yong jian li de fang fa dui cai ji de 213fen zai zhu fu xie lin chuang yang pin jin hang jian ce ,gong jian chu TGEVyang xing yang ben 31fen ,yang xing lv wei 14.55%,yu chang gui RT-PCRfang fa jian ce jie guo de fu ge lv wei 93.55%,yu ji yu Nji yin ce xu jie guo de fu ge lv wei 100.00%。ben yan jiu ji yu DPOyin wu jian li de jian ce TGEVde real-time RT-PCRfang fa ,wei TGEVde zhun que jian ce he liu hang bing xue diao cha di gong ji shu zhi chi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国兽医学报的王以欣,王紫微,王丽,姜艳平,崔文,周晗,乔薪瑗,唐丽杰,李一经,徐义刚，发表于刊物中国兽医学报2019年08期论文，是一篇关于猪传染性胃肠炎病毒论文,基因论文,引物论文,中国兽医学报2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国兽医学报2019年08期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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