导读:本文包含了非黏附骨髓间充质干细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:非黏附骨髓间充质干细胞,脑缺血,细胞移植,神经功能
非黏附骨髓间充质干细胞论文文献综述
张靖晗,贲晓明[1]（2012）在《非黏附骨髓间充质干细胞移植改善脑缺血小鼠的学习记忆功能》一文中研究指出背景:非黏附骨髓间充质干细胞在体外培养中具有自我更新能力,可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞,表现出多分化潜能,在移植到缺血损伤脑内可存活并且部分可分化为神经细胞或神经胶质细胞。目的:观察小鼠非黏附骨髓间充质干细胞移植到缺血小鼠脑内对神经功能的修复作用。方法:全骨髓法分离β-Gal转基因小鼠总骨髓细胞,采用反复转移非黏附骨髓细胞的培养法收集纯化的第3代非黏附骨髓间充质干细胞。20只C57BL/6J小鼠建立大脑中动脉阻塞模型,随机区组法分为2组,造模后7d,细胞移植组将第3代非黏附骨髓间充质干细胞悬液3μL定向移植到小鼠脑损伤处,对照组注射等量生理盐水。移植28d后进行Morris水迷宫实验,连续8d。结果与结论:在定位航行实验中细胞移植组小鼠的逃避潜伏期及游泳总路程均较对照组明显缩短(P<0.05),空间探索实验中细胞移植组小鼠穿越原平台次数较对照组明显增多(P<0.05)。提示非黏附骨髓干细胞移植能够提高脑缺血模型小鼠的学习记忆能力,改善神经功能。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年45期）
吴玉新,王燕,贲晓明[2]（2010）在《表皮生长因子干预小鼠非黏附骨髓间充质干细胞成纤维细胞集落形成及向神经元样细胞的分化》一文中研究指出背景:非黏附骨髓间充质干细胞在体外可以不断形成成纤维细胞集落形成单位,并且可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞,表现出一定的多分化潜能。目的:探讨表皮生长因子对非黏附骨髓间充质干细胞形成成纤维细胞集落的影响,及其在体外向神经细胞分化的能力。方法:分离小鼠双侧股骨、胫骨,全骨髓法分离总骨髓细胞,采用反复转移非黏附的骨髓细胞培养法纯化非黏附骨髓间充质干细胞。取第5代总骨髓细胞和非黏附骨髓间充质干细胞,加入含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的神经细胞诱导液培养2周。观察非黏附骨髓细胞产生成纤维细胞集落形成单位的能力,表皮生长因子对成纤维细胞集落形成单位的影响,甲苯胺蓝和免疫细胞化学染色鉴定相关蛋白的表达。结果与结论:总骨髓细胞、反复转移的非黏附骨髓间充质干细胞均能够不断产生成纤维细胞集落形成单位。给予表皮生长因子处理后,非黏附骨髓间充质干细胞成纤维细胞集落形成单位的效率明显增高。诱导2周后,免疫细胞化学染色显示,总骨髓细胞和非黏附骨髓间充质干细胞均表达神经细胞特异性蛋白NeuN和NF-200;经甲苯胺蓝染色在部分细胞中可见神经元特异性标记尼氏体。证实表皮生长因子可有效促进小鼠非黏附骨髓间充质干细胞形成成纤维细胞集落形成单位的效率,经反复转移的非黏附骨髓间充质干细胞能够诱导分化为神经细胞。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2010年01期）
吴玉新,王燕,贲晓明[3]（2009）在《小鼠非黏附骨髓间充质干细胞移植到缺血性脑损伤部位向神经元样细胞的分化》一文中研究指出背景:小鼠非黏附骨髓间充质干细胞在体外可以不断形成成纤维细胞集落形成单位,并且可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞,表现出一定的多分化潜能。目的:探讨小鼠非黏附骨髓间充质干细胞移植到缺血损伤脑内后分化为神经细胞的能力。方法:取β-Gal转基因小鼠,分离双侧股骨、胫骨,全骨髓法分离总骨髓细胞,采用反复转移非黏附的骨髓细胞培养法收集纯化后的第5代非黏附骨髓间充质干细胞,调整细胞浓度为1×1012L-1备用。两组C57BL/6J小鼠均建立大脑中动脉阻塞模型,造模后7d,细胞移植组将第5代非黏附骨髓间充质干细胞悬液3μL定向移植到小鼠脑损伤处,模型组注射等量生理盐水。移植8周后观察供体细胞在缺血脑内微环境中的存活、分布及分化能力。结果与结论:LacZ组织化学染色发现,8周后供体细胞仍可以表达β-Gal蛋白,在缺血侧供体细胞能够存活。免疫组织化学单染和双染后发现,在缺血模型的坏死区及坏死边缘区均可检测到β-Gal阳性的供体细胞,部分细胞还同时表达神经细胞特异性蛋白NeuN及神经胶质细胞特异性标记GFAP。提示小鼠非黏附骨髓间充质干细胞在缺血动物模型的脑内能够存活、迁移,部分细胞还能分化为成熟的神经元样细胞或神经胶质细胞,参与脑损伤修复。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2009年49期）
王燕,陈燕玲,贲晓明,苗登顺[4]（2009）在《表皮生长因子对非黏附骨髓间充质干细胞克隆形成效率的影响》一文中研究指出背景:目前普遍认为骨髓间充质干细胞是一类高度黏附的成纤维样细胞,但也有研究显示处于非黏附状态的骨髓间质细胞也具有自我复制及多向分化潜能。目的:探讨表皮生长因子对骨髓中存在的非黏附骨髓间充质干细胞产生成纤维细胞集落形成单位的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-07/12在南京医科大学骨与干细胞研究中心完成。材料:4周龄雄性C57/BL6小鼠6只,由南京医科大学实验动物中心提供。表皮生长因子为美国Sigma公司产品。方法:全骨髓法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,调整细胞浓度为2×109L-1。收集第3代细胞,分别接种于向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞分化的培养液中进行诱导。取30mL骨髓间充质干细胞悬液,平均分到两管中,表皮生长因子处理组加入终浓度为10μg/L表皮生长因子,空白对照组加入普通完全培养基,采用反复转移非黏附骨髓细胞培养法,每天将非黏附骨髓细胞转移到新的培养皿,原来的皿中为总骨髓来源的贴壁细胞,转移第1次定义PO1,第2次为PO2,依次类推,培养12d终止。主要观察指标:骨髓间充质干细胞的鉴定结果,亚甲基蓝染色显示每皿细胞克隆的形成情况,计算克隆形成区域占皿底面积的百分比及克隆数目。结果:非黏附骨髓间充质细胞在第4天转移到新的培养皿后,继续培养仍能够贴壁生长,并逐渐扩增形成克隆;诱导后能够分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞。给予表皮生长因子处理后,无论是总骨髓来源的贴壁细胞,还是反复转移的非黏附骨髓间充质干细胞,均能够不断产生成纤维细胞集落形成单位,且数量明显多于空白对照组(P<0.05)。表皮生长因子处理组总骨髓来源的贴壁细胞、PO1~PO5非黏附骨髓间充质干细胞所形成的贴壁细胞数分别是空白对照组的1.54倍,4.25倍,2.51倍,1.56倍,1.25倍,2.01倍;所产生的克隆数分别是空白对照组的1.2倍,1.8倍,1.4倍,1.4倍,1.1倍。结论:表皮生长因子能有效促进骨髓中的非黏附骨髓间充质干细胞在悬浮状态下增殖,明显提高了骨髓间充质干细胞的富集效率。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2009年23期）
王燕,陈燕玲,贲晓明,喻文亮,周晓玉[5]（2008）在《非黏附骨髓间充质干细胞的体外培养与鉴定》一文中研究指出目的探讨小鼠骨髓中是否存在非黏附间充质干细胞(BM-NA-MSC),体外能否形成成纤维细胞集落形成单位(CFU-F),能否在适当的条件下分化为脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞。方法分离小鼠总骨髓细胞,体外培养,每天转移未贴壁的非黏附骨髓细胞(NA-BMC)到新培养环境中继续培养,每组细胞长满12 d后,亚甲基蓝染色显示形成的克隆,计数克隆个数;在总骨髓细胞培养到第4天时收集未贴壁的NA-BMC到新的培养皿中,待细胞贴壁生长达融合后传代纯化,取第5代细胞接种于向脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞诱导分化的培养液中,2周后分别进行油红染色、抗Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色及茜素红染色检测脂肪滴、Ⅱ型胶原和钙化结节的形成和表达。结果小鼠骨髓细胞体外培养条件下不仅总骨髓细胞可以形成CFU-F,而且反复转移的NA-BMC也能不断形成CFU-F;给予适当的诱导条件,非黏附来源的骨髓细胞体外能够分化为产生油滴的脂肪细胞、表达Ⅱ型胶原的软骨和具有钙化能力的成骨细胞。结论小鼠骨髓中存在一类NA-MSC,体外可以形成CFU-F,还可分化为脂肪、软骨和成骨细胞,表现出一定的多分化潜能,为下一步作为种子细胞用于移植实验的研究提供了前提。(本文来源于《实用儿科临床杂志》期刊2008年07期）
王燕[6]（2008）在《非黏附骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的实验研究》一文中研究指出干细胞移植是近年来医学领域乃至整个生命科学领域的研究热点和前沿,其具有高度的自我更新能力和多向分化潜能,并能在体内外表达多种外源目的基因,因而作为种子细胞被广泛用于细胞疗法和基因疗法的研究中。随着功能基因组学和蛋白质组学的进一步发展,干细胞的基础以及临床应用研究也取得了突破性进展。骨髓来源的间充质干细胞是起步较早研究较深入的成体干细胞,长期以来人们一致认为它是骨髓中一类高度黏附的成纤维细胞样细胞,然而Miao等最近的实验结果显示:大鼠骨髓中存在一种非黏附状态的间充质干细胞,体外培养条件下能够贴壁生长形成克隆,给予以往用于骨髓间充质干细胞的诱导条件也可以分化为叁种间质终末期细胞,注射到亚致死剂量射线照射的小鼠体内可以参与其造血重建,表现出一定的多分化潜能。本文将在此理论基础上通过反复转移的非黏附细胞培养法分离小鼠骨髓中的非黏附间充质干细胞;观察表皮生长因子对非黏附间充质干细胞克隆形成效率的调节作用;并深入探讨非黏附骨髓间充质干细胞在体外、体内尤其是缺血损伤的微环境中分化为神经细胞的潜能,为这些细胞进一步用于细胞移植治疗相关疾病提供技术参数。第一部分小鼠非黏附骨髓间充质干细胞的分离培养、鉴定以及表皮生长因子对其克隆形成效率的影响目的分离培养并鉴定小鼠骨髓中的非黏附间充质干细胞(Non-adherent Bone-Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells,NA-BM-MSC);观察表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)对NA-BM-MSC产生成纤维细胞集落形成单位(colony-formingunits-fibroblast,CFU-F)效率的影响。方法分离小鼠总骨髓细胞,分两组体外培养,一组在总骨髓细胞中加入10ng/mL的EGF,另一组为对照组,每天转移未贴壁的非黏附骨髓细胞(Non-adherent Bone MarrowCells,NA-BMC)到新的培养皿中继续培养,每组中各皿细胞长满12天后,亚甲基蓝染色显示形成的克隆,计数克隆个数;在总骨髓细胞培养到第四天时收集未贴壁的NA-BMC到新的培养皿中,待细胞贴壁生长达融合后传代纯化,取第四代细胞接种于向脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞诱导分化的培养液中,2周后分别进行油红染色、抗Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色以及茜素红染色检测脂肪滴、Ⅱ型胶原和钙化结节的形成和表达情况;流式细胞检测表面标记物的表达。结果反复转移未贴壁NA-BMC到新培养皿继续培养的过程中,不仅总骨髓细胞可以贴壁形成CFU-F,而且反复转移的未贴壁NA-BMC也能不断贴壁并形成CFU-F;总骨髓细胞培养到第四天时收集的NA-BMC经脂肪细胞诱导液诱导后,油红染色可见细胞内产生大量油滴;经软骨细胞诱导液诱导后有软骨细胞特异性Ⅱ型胶原表达;经成骨细胞诱导液诱导后能够形成钙化结节;这些细胞高表达CD105、CD13,而不表达CD34、CD45等造血干细胞的特异性标记。加EGF刺激组每次转移的非黏附细胞贴壁生长后得到的细胞数和克隆数均比对照组多(P＜0.05),是对照组的3倍。结论小鼠骨髓细胞培养过程中,24小时内未贴壁的NA-BMC转移到新培养皿中继续培养能够重新贴壁并形成CFU-F,并且NA-BMC所形成的克隆具有向脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞分化的能力,具备了干细胞自我复制更新和多分化潜能的两大特性,并表达间充质细胞的特异性标记物,因此称其为非黏附骨髓间充质干细胞(NA-BM-MSC)。EGF能有效促进NA-BM-MSC的增殖,进一步提高了该细胞的富集效率。多分化潜能;表皮生长因子;增殖第二部分非黏附骨髓间充质干细胞体外向神经细胞分化的实验研究目的探讨骨髓中存在的NA-BM-MSC在体外向神经细胞分化的能力。方法分离小鼠骨髓总细胞进行培养,于第四天收集未贴壁的NA-BMC到新的培养环境中继续培养,待细胞贴壁融合后传代纯化,取第四代细胞用于诱导实验;细胞按照1X10~3/cm~2的密度接种于预置盖玻片的六孔板中,细胞贴壁后,更换培养液为含20ng/ml的EGF和20ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子-2(b-FGF)的诱导液进行诱导,2周后,甲苯胺蓝染色和抗神经细胞特异性核蛋白、抗神经中间丝蛋白的免疫细胞化学染色检测神经细胞特异性蛋白的表达。结果总骨髓细胞和NA-BM-MSC经过EGF和b-FGF的诱导后都能表达神经特异性蛋白:NeuN/NF-200/尼氏体。结论NA-BM-MSC在适当的条件下能够被诱导分化成神经细胞,为下一步用于体内实验的研究提供了保证。第叁部分非黏附骨髓间充质干细胞在缺血损伤脑内向神经细胞分化的实验研究目的探讨骨髓非黏附间充质干细胞(non-adherent bonemorrow mesenchymal stem cells,NA-BM-MSC)在缺血损伤的脑内存活以及向神经细胞分化的能力。方法从β-Gal转基因小鼠分离总骨髓细胞,培养到第四天时,收集未贴壁的NA-BMC到新的培养环境中继续培养,贴壁增殖,待生长到融合时传代纯化,取第4代NA-BM-MSC定向移植到小鼠大脑中动脉阻塞脑缺血模型脑内,8周后LacZ组织化学染色和免疫组织化学染色法观察供体细胞在缺血脑内微环境中的存活情况以及神经元特异性核蛋白(NeuN)、神经胶质细胞特异性酸性蛋白(GFAP)的表达。结果LacZ组织化学染色发现在缺血侧供体细胞能够存活,免疫组织化学单染和双染后发现在缺血模型的坏死区及坏死边缘区都检测到β-Gal阳性的供体细胞,部分细胞还同时表达神经元和神经胶质细胞特异性蛋白NeuN和GFAP。结论小鼠骨髓内的NA-BM-MSC在缺血损伤的脑内能够存活、迁移,部分细胞还能分化为成熟的神经元或神经胶质细胞参与脑损伤的修复,为下一步作为种子细胞用于移植修复实验提供了保证。(本文来源于《南京医科大学》期刊2008-04-01）
非黏附骨髓间充质干细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:非黏附骨髓间充质干细胞在体外可以不断形成成纤维细胞集落形成单位,并且可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞,表现出一定的多分化潜能。目的:探讨表皮生长因子对非黏附骨髓间充质干细胞形成成纤维细胞集落的影响,及其在体外向神经细胞分化的能力。方法:分离小鼠双侧股骨、胫骨,全骨髓法分离总骨髓细胞,采用反复转移非黏附的骨髓细胞培养法纯化非黏附骨髓间充质干细胞。取第5代总骨髓细胞和非黏附骨髓间充质干细胞,加入含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的神经细胞诱导液培养2周。观察非黏附骨髓细胞产生成纤维细胞集落形成单位的能力,表皮生长因子对成纤维细胞集落形成单位的影响,甲苯胺蓝和免疫细胞化学染色鉴定相关蛋白的表达。结果与结论:总骨髓细胞、反复转移的非黏附骨髓间充质干细胞均能够不断产生成纤维细胞集落形成单位。给予表皮生长因子处理后,非黏附骨髓间充质干细胞成纤维细胞集落形成单位的效率明显增高。诱导2周后,免疫细胞化学染色显示,总骨髓细胞和非黏附骨髓间充质干细胞均表达神经细胞特异性蛋白NeuN和NF-200;经甲苯胺蓝染色在部分细胞中可见神经元特异性标记尼氏体。证实表皮生长因子可有效促进小鼠非黏附骨髓间充质干细胞形成成纤维细胞集落形成单位的效率,经反复转移的非黏附骨髓间充质干细胞能够诱导分化为神经细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非黏附骨髓间充质干细胞论文参考文献
[1].张靖晗,贲晓明.非黏附骨髓间充质干细胞移植改善脑缺血小鼠的学习记忆功能[J].中国组织工程研究.2012
[2].吴玉新,王燕,贲晓明.表皮生长因子干预小鼠非黏附骨髓间充质干细胞成纤维细胞集落形成及向神经元样细胞的分化[J].中国组织工程研究与临床康复.2010
[3].吴玉新,王燕,贲晓明.小鼠非黏附骨髓间充质干细胞移植到缺血性脑损伤部位向神经元样细胞的分化[J].中国组织工程研究与临床康复.2009
[4].王燕,陈燕玲,贲晓明,苗登顺.表皮生长因子对非黏附骨髓间充质干细胞克隆形成效率的影响[J].中国组织工程研究与临床康复.2009
[5].王燕,陈燕玲,贲晓明,喻文亮,周晓玉.非黏附骨髓间充质干细胞的体外培养与鉴定[J].实用儿科临床杂志.2008
[6].王燕.非黏附骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的实验研究[D].南京医科大学.2008
标签：非黏附骨髓间充质干细胞; 脑缺血; 细胞移植; 神经功能;