导读:本文包含了随机插入论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:甘薯蔓割病,尖孢镰刀菌,生物防治,非致病菌株
随机插入论文文献综述
张鸿,林志坚,林赵淼,李国良,许泳清[1]（2016）在《T-DNA随机插入法获得甘薯蔓割病菌非致病生防菌株》一文中研究指出由尖孢镰刀菌甘薯专化型Fusarium oxysporum f.sp.batatas引起的甘薯蔓割病是甘薯生产上一种重要病害。本研究将带有GFP绿色荧光蛋白基因的T-DNA随机插入到蔓割病菌基因组中,获得711个突变体。经过致病力筛选,获得了3株非致病突变体,编号为50-5、55-7和103-4,其中50-5和103-4产孢能力显着下降。平板对峙试验结果表明这3株非致病突变体均可和蔓割病菌发生营养竞争作用。通过提前对感病品种"新种花"接种非致病突变体,再接种蔓割病菌,结果显示当蔓割病菌和非致病突变体孢子浓度同为5×10~5 CFU/m L时,103-4和55-7分别预处理感病品种8 h后,生防效果趋于稳定,分别为86.95%和83.80%;50-5预处理16 h后生防效果趋于稳定,为75.65%。以上结果表明,通过农杆菌转化筛选非致病突变体的方法,成功获得3株蔓割病生防菌株,为深入开展甘薯蔓割病的生物防治提供基础,也为其他尖孢镰刀菌创造非致病生防菌提供借鉴。(本文来源于《中国生物防治学报》期刊2016年05期）
许泽仰,洪愉,冯梦蝶,毛普加,赵继华[2]（2016）在《随机转座子插入构建甲型副伤寒杆菌启动子文库》一文中研究指出目的构建携带氯霉素乙酰转移酶(CAT)的转座子自杀性质粒,通过接合转座获得甲型副伤寒沙门氏菌(副甲)启动子文库。方法 PCR扩增CAT的基因亚克隆至pMD-18T载体,鉴定正确后酶切插入转座子自杀性质粒pSC189,获得新的转座子载体pSC-CAT,将携带pSC-CAT的供体菌与副甲受体菌进行接合转座,涂布氯霉素平板筛选转座的细菌,以随机筛选出来的细菌基因组为模板,热不对称PCR扩增插入位点侧翼序列,并进行测序、比对分析。结果筛选获得约1000个突变菌,随机挑取6个菌,转座子插入位点的上游分别对应6个可疑启动子区域。结论通过自杀性转座子载体pSC-CAT可高效获得副甲菌启动子文库,为进一步研究副甲菌基因表达与调控奠定了基础。(本文来源于《中国医科大学学报》期刊2016年01期）
王应邦[3]（2015）在《基于随机插入策略的Java混淆器设计与实现》一文中研究指出控制流的混淆能够运用在混淆程序的运行流程中,阻止了软件的逆向工程,但在通常情况下,混淆后的程序增大了程序的代码量和执行时间。通过构建随机插入混淆策略,利用分支插入和循环条件插入两种算法的结合,引入随机函数来控制代码的插入,达到防止代码长度增长的目的。采用BCEL的设计并且实现了在以Java为字节码的控制流混淆转换工具的基础上,实现Java字节码一代代的重复混淆,并且使混淆的结果不能再一次显现。通过实验结果表明,这一策略能够有效地防止出现由于控制混淆器的转换操作引起性能的超负荷状态,同时更有效地阻碍逆向工程的攻击。(本文来源于《电子制作》期刊2015年02期）
方卫国,胥川,陈晓璇,曾国红,钱莹[4]（2014）在《利用T-DNA随机插入突变库和RNA-seq技术挖掘罗伯茨绿僵菌致病机理和毒力进化机制》一文中研究指出罗伯茨绿僵菌是一个植物根际真菌,在进化的过程中获得了侵染昆虫的能力,目前对该进化机制知之甚少。本研究组利用T-DNA随机插入突变体库(正向遗传学)和RNA-Seq技术(反向遗传学)深入挖掘罗伯茨绿僵菌的致病机制,并在此基础上阐明它获取这些致病方式的进化机制。从一个含22,000多个转化子的T-DNA插入突变体中,我们获得了与孢子形成、角变和毒力相关的基因103个,其中101个是与上述性状相关的新基因。毒力相关基因共53个,GO enrichment鉴定了oxidoreductase activity(acting on other nitrogenous compounds as donors)功能组显着与侵染相关。此外,毒力相关基因还涉及到转录调控、氨基酸转运、离子平衡和自噬等功能组。通过分析一个毒力突变体,我们发现了仅在活体昆虫血淋巴中表达的甾醇转运蛋白Mr-NPC2a。该蛋白帮助真菌保持细胞膜上甾醇的含量和细胞膜的完整性,从而提高对寄主的抗性。通过系统发育等分析发现,Mr-NPC2a是罗伯茨绿僵菌通过基因水平转移从寄主昆虫中获得的。这一研究说明了基因水平转移这一进化动力推动了该菌的毒力进化。此外,通过分析2个分生孢子颜色突变体,发现了一个合成罗伯茨绿僵菌孢子深绿色素的基因簇。MAPK是一类保守的信号转导途径,调控多种病原真菌的致病过程,但该途径在罗伯茨绿僵菌中的作用还未阐明。为此,我们首先鉴定了罗伯茨绿僵菌MAPK途径上的所有10个成员,并破坏了它们所对应的基因。所有突变体的产孢量均显着下降。FUS3-MAPK途径3个突变体均不能在高渗条件下生长,高渗环境也几乎完全抑制HOG-MAPK途径中3个突变体的生长。Slt2-MAPK途径与细胞壁完整性相关。除Mro-Ime2之外,其它9个突变体侵染昆虫的能力都受损,其中FUS3-MAPK途径的突变体不能产生附着胞,并完全丧失侵染昆虫能力。利用RNA-Seq比较了WT,△Mro-Slt2,△Mro-Hog和△Mr-Fus3在昆虫体壁上和在血淋巴中的基因表达谱,利用GO Enrichment和Reactome analysis等手段解析了这3个MAPK在调控罗伯茨绿僵菌侵染昆虫时各自的作用和它们之间的相互关系。并在此基础上发现了受上述3个MAPK所调控的大量可能与致病相关的基因,为进一步阐明罗伯茨绿僵菌致病机理奠定了基础。(本文来源于《中国菌物学会第六届会员代表大会（2014年学术年会）暨贵州省食用菌产业发展高峰论坛会议摘要》期刊2014-07-14）
王钊[5]（2014）在《禾谷镰刀菌随机插入突变体的构建及其水杨酸代谢途径关键基因鉴定》一文中研究指出赤霉病是小麦的重要病害之一,其主要致病菌是禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schwabe)。目前禾谷镰刀菌诱发赤霉病的机理尚不清楚。对禾谷镰刀菌的功能基因进行研究,有助于科学认识禾谷镰刀菌的致病机理,为赤霉病的防治奠定分子基础。为此本文主要做了以下研究：1.利用农杆菌介导的遗传转化体系构建禾谷镰刀菌的T-DNA随机插入突变体。通过对转化体系进行优化,每转化106个分生孢子得到70-80个T-DNA随机插入突变体。经分离纯化,得到了365个潮霉素抗性为阳性的突变单株。在SNA培养基上鉴定突变单株的生长状况,在含水杨酸的SNA培养基上鉴定其生长状况,在温室接种小麦鉴定其致病力。结果得到6株突变体在普通SNA培养基上生长缓慢；8株在普通SNA培养基上生长产生的色素减少；3株对水杨酸敏感,在含2.0 mM水杨酸的SNA培养基中无法生长；2株在温室接种小麦后致病力明显下降。其中,AMa334在普通SNA培养基上同时表现为生长缓慢和菌落白化,△Ma208同时表现为在普通SNA培养基上生长缓慢和在含2.0 mM水杨酸的SNA培养基中无法生长,AMa39则同时表现为在普通SNA培养基上生长缓慢和接种小麦后致病力明显下降。对以上16株突变体基因组进行PCR,结果表明这16株突变体单株均含有潮霉素抗性基因(HPH)序列。以T-DNA右翼序列设计的3个嵌套引物和2个简并引物对这些突变体基因组进行巢氏PCR (TAIL-PCR),对扩增得到DNA片段进行克隆测序。得到4个突变体的T-DNA侧翼序列。将这些侧翼序列与禾谷镰刀菌的基因组序列进行比对,获得了如下信息：T-DNA在AMa39的插入位点位于禾谷镰刀菌supercontig 3.4的542464 bp处,位于基因FGSG_06605.3的中间。该基因可能编码p-葡萄糖苷酶的前体蛋白,与葡萄糖的分解相关。T-DNA的插入可能使基因FGSG_06605.3无法正常表达,导致△Ma39在普通SNA培养基中生长缓慢,及接种小麦麦穗后致病力明显下降。T-DNA在△Ma247的插入位点位于禾谷镰刀菌supercontig 3.6的1547302 bp处,位于基因FGSG_13581.3的中间。该基因编码一个未知蛋白,T-DNA的插入可能使基因FGSG 13581.3无法正常表达,导致△Ma247在普通SNA培养基中生长时菌落白化。T-DNA在△Ma256的插入位点位于禾谷镰刀菌supercontig 3.3的2133337bp处,位于FGSG_12730.3上游819 bp处和FGSG_05397.3上游1339bp处。这两个基因编码的均为未知蛋白。T-DNA的插入可能使FGSG_12730.3和FGSG_05397.3无法正常表达,导致△Ma256在普通SNA培养基中生长时菌落白化。T-DNA在AMa319的插入位点位于禾谷镰刀菌supercontig 3.6的1360744bp处,位于基因FGSG_09387.3的下游。根据Blastx的结果,该插入位点位于一个非典型蛋白中间,可能使该蛋白不能正常表达,从而导致AMa319在普通SNA培养基上生长缓慢。2.以葡萄糖为唯一碳源的改良SNA培养基为对照,以水杨酸为唯一碳源的改良SNA培养基培养禾谷镰刀菌Fg180378。提取菌丝mRNA,利用转录组测序(RNA-Seq)技术检测基因表达。结果表明,有173个基因的表达存在显着差异。其中86个基因上调表达,87个基因下调表达。与之前的研究比较,进一步验证了FGSG_09063在水杨酸代谢过程中的重要性；发现了一些与芳香烃代谢相关基因的表达存在显着差异,这些基因可能与水杨酸代谢相关。在所有的差异基因中,上调表达倍数最高的几个基因的功能尚不明确。由于目前缺乏水杨酸代谢的深入研究,很多机制还不明确,这些基因可能与之相关,这些将是下一步的研究内容。(本文来源于《四川农业大学》期刊2014-06-01）
方秋水,杨敬锋,李勇,常振廷[6]（2013）在《在线导航模式随机参数插入加密算法应用研究》一文中研究指出为满足在线导航模式下位置信息实时发布的需求,同时满足国家测绘局对坐标信息加密的要求,提出在线导航应用随机参数插入加密算法,并在实际运营中进行应用。运营结果表明,在纯在线模式下,即只预装基础地图并支持在线更新和发布实时信息的模式下,该算法具有计算量小、加密效率高、隐秘性强等优点,适用于数据更新和发布迅速的在线导航服务。(本文来源于《交通信息与安全》期刊2013年04期）
尹会敏[7]（2013）在《禾谷镰刀菌随机插入突变体库的扩建和FgNEM1基因的功能研究》一文中研究指出禾谷镰刀菌是引起禾谷类作物赤霉病(Fusarium Head Blight, FHB)的一种重要病原菌,广泛分布于世界各温暖潮湿地区。赤霉病主要引起小麦穗腐,它不仅导致小麦减产,麦粒中还会存留玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等多种毒素,严重威胁着人畜的健康。目前禾谷镰刀菌的全基因组已经测序完成,对开展禾谷镰刀菌的致病相关基因功能的研究,提供了很大的帮助。建立一个高质量的随机插入突变体库,有助于快速发现和鉴定禾谷镰刀菌致病相关的基因；通过对这些基因的功能研究,为发展更好的控制赤霉病的方法提供依据。在本研究中,在实验室已有的REMI转化体系基础上,通过对原生质体的冷冻时间等条件进行摸索,进一步优化了REMI转化体系,最终构建了一个库容约为6600的随机插入突变体库。通过对突变体库中突变子进行表型、PCR鉴定、Southern分析等方面的筛选,发现了一个和禾谷镰刀菌致病相关的基因FgNEMl。随后,构建了pLH-HygB-FgNEM1同源敲除质粒,原生质体转化后,转化子经潮霉素抗性筛选和PCR、Southern分析鉴定后,最终获得3个ΔFgnem1缺失株。和野生型禾谷镰刀菌5035相比,AFgnem1缺失株在PDA平板上生长速度明显降低,在田间单花接种后14d和21d调查时,菌株对小麦的致病力也都有显着性降低,但在CMC中产孢能力却没有显着性差异。为了进一步确认FgNEM1基因的基因功能,构建了pLH-Neo-Tet-FgNEM1回复验证质粒,并对Δgnem1缺失株进行了回复实验。回复实验表明,一个3.9 kb的包含了FgNEM1基因完整启动子、阅读框和终止子的的DNA片段可以使缺失株△Fgnem1在PDA平板上生长情况、CMC中产孢情况以及对小麦的致病力等方面均回复到了野生型禾谷镰刀菌5035的水平。这些结果证明：缺失株ΔFgnem1的突变是由于FgNEM1基因的缺失而引起的。(本文来源于《华中农业大学》期刊2013-06-01）
刘人杰,周玉洁[8]（2011）在《抗功耗攻击的随机插入式分组密码系统》一文中研究指出近年来涌现出许多抗功耗分析的方法,例如双轨电路法、掩码法和随机操作插入法。仔细分析这些方法可以发现它们都有潜在的缺陷,这些缺陷使得这些方法大都受制于大量的数据统计(包括高阶数据统计)。提出了一种在分组密码加解密过程中加入伪轮函数的方法。伪轮函数的加入使得加解密过程具有不可重复性,从而给功耗分析带来很大的麻烦。用51单片机仿真了这个设计,并进行了相关的功耗分析,结果显示该设计能很好地抵制功耗分析。(本文来源于《信息技术》期刊2011年09期）
J.T.Winterer,P.Blanke,A.Schaefer,G.Pache,M.Langer[9]（2011）在《双手的对比剂增强MR血管成像:使用回波分享随机轨道插入(TWIST)技术的快速MRI的诊断影像质量》一文中研究指出目的使用回波分享随机轨道技术对双手行时间分辨对比剂增强MRA(tr-MRA)扫描,评估其影像质量。方法本研究经委员会的审查批准。将tr-MRA与多期对比剂增强血管成像(mp-MRA)进行比较,后者采用亚收缩期静脉压迫。扫描20个健康志愿者的3.0TMR影像,扫描参数:TR/(本文来源于《国际医学放射学杂志》期刊2011年04期）
陈泰[10]（2011）在《禾谷镰刀菌随机插入突变体库的构建与分析》一文中研究指出禾谷镰刀菌引起的赤霉病(Fusarium head blight, FHB)是禾谷类作物的一种重要病害,广泛分布于世界各温暖潮湿地区,危害小麦、大麦、燕麦、玉米、水稻、黑麦等多种禾谷类作物。赤霉病不仅导致作物减产,其病原菌还会产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮等多种毒素,食用后可引起呕吐、腹痛、头昏等多种中毒症状,严重威胁着人和动物的健康。随着禾谷镰刀菌全基因组测序的完成,研究禾谷镰刀菌的基因功能,了解禾谷镰刀菌的致病机理,成为赤霉病防治的一个有效的途径。而建立一个随机插入突变体库,可以更有利于分离和鉴定禾谷镰刀菌生长、发育、致病相关的基因。限制性内切酶介导整合(REMI)的方法是Schiestl和Petes在研究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)时首先建立起来的。近年来,REMI技术以其转化效率高、单拷贝插入概率大、易于分离突变基因等优点,在突变体库的建立、基因标记等方面得到了广泛的应用。目前,该方法已广泛应用于酵母、丝状真菌以及动物的研究中本研究对禾谷镰刀菌的原生质体制备、纯化和限制酶介导的转化体系进行了摸索和优化,建立了一套有效的REMI转化方法。经过多次实验,构建了禾谷镰刀菌的突变体库,共得到具有潮霉素B抗性的转化子2300多个,并进一步对突变体库进行了PCR鉴定、Southern分析和转化子表型、致病力分析。优化后的转化效率为普通原生质体转化的2-3倍,最高转化效率为每个转化可得到68个转化子；对其中15个转化子进行PCR鉴定,均为带有潮霉素B编码基因的阳性转化子；对部分转化子进行Southern杂交分析发现,得到转化子的单拷贝插入概率为66.7%,比普通原生质体转化的单拷贝概率高23.9%。(本文来源于《华中农业大学》期刊2011-06-01）
随机插入论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建携带氯霉素乙酰转移酶(CAT)的转座子自杀性质粒,通过接合转座获得甲型副伤寒沙门氏菌(副甲)启动子文库。方法 PCR扩增CAT的基因亚克隆至pMD-18T载体,鉴定正确后酶切插入转座子自杀性质粒pSC189,获得新的转座子载体pSC-CAT,将携带pSC-CAT的供体菌与副甲受体菌进行接合转座,涂布氯霉素平板筛选转座的细菌,以随机筛选出来的细菌基因组为模板,热不对称PCR扩增插入位点侧翼序列,并进行测序、比对分析。结果筛选获得约1000个突变菌,随机挑取6个菌,转座子插入位点的上游分别对应6个可疑启动子区域。结论通过自杀性转座子载体pSC-CAT可高效获得副甲菌启动子文库,为进一步研究副甲菌基因表达与调控奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
随机插入论文参考文献
[1].张鸿,林志坚,林赵淼,李国良,许泳清.T-DNA随机插入法获得甘薯蔓割病菌非致病生防菌株[J].中国生物防治学报.2016
[2].许泽仰,洪愉,冯梦蝶,毛普加,赵继华.随机转座子插入构建甲型副伤寒杆菌启动子文库[J].中国医科大学学报.2016
[3].王应邦.基于随机插入策略的Java混淆器设计与实现[J].电子制作.2015
[4].方卫国,胥川,陈晓璇,曾国红,钱莹.利用T-DNA随机插入突变库和RNA-seq技术挖掘罗伯茨绿僵菌致病机理和毒力进化机制[C].中国菌物学会第六届会员代表大会（2014年学术年会）暨贵州省食用菌产业发展高峰论坛会议摘要.2014
[5].王钊.禾谷镰刀菌随机插入突变体的构建及其水杨酸代谢途径关键基因鉴定[D].四川农业大学.2014
[6].方秋水,杨敬锋,李勇,常振廷.在线导航模式随机参数插入加密算法应用研究[J].交通信息与安全.2013
[7].尹会敏.禾谷镰刀菌随机插入突变体库的扩建和FgNEM1基因的功能研究[D].华中农业大学.2013
[8].刘人杰,周玉洁.抗功耗攻击的随机插入式分组密码系统[J].信息技术.2011
[9].J.T.Winterer,P.Blanke,A.Schaefer,G.Pache,M.Langer.双手的对比剂增强MR血管成像:使用回波分享随机轨道插入(TWIST)技术的快速MRI的诊断影像质量[J].国际医学放射学杂志.2011
[10].陈泰.禾谷镰刀菌随机插入突变体库的构建与分析[D].华中农业大学.2011