导读:本文包含了甲鱼虹彩病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:甲鱼虹彩病毒,主衣壳蛋白,荧光定量PCR,环媒恒温扩增技术(LAMP)
甲鱼虹彩病毒论文文献综述
赵增连[1]（2008）在《甲鱼虹彩病毒（STIV）病原学研究及检测方法的建立》一文中研究指出甲鱼是我国重要的水产养殖品种,而“红脖子病”是甲鱼养殖中的常见病症,发病死亡率超过40%,严重时会引起甲鱼大量死亡,给养殖业带来严重损失。本研究对患“红脖子病”的甲鱼进行病毒分离,对分离到的病毒进行了形态学研究和理化特性研究,并建立了分子生物学和免疫学检测方法。详细内容如下:1.病毒的分离及理化特性研究。取典型的“红脖子”症状甲鱼的肝脏,经处理后制备的上清液接种到CO、FHM、CK和GCK细胞上出现CPE,进行空斑实验和理化性质分析。形态学研究发现,该病毒为结果表明直径约120～160 nm,呈二十面体对称有囊膜的球形病毒颗粒,病毒对热(56℃30分钟)、pH3和pH9不稳定,对脂溶剂(氯仿)敏感。该病毒在有DNA抑制剂存在的条件下受到抑制而不能增殖,表明该病毒核酸类型为DNA。病毒能在CO、FHM、CK、GCK等细胞中增殖,但不能在CHSE、R1、PG细胞中产生CPE。在CO细胞中的滴度最高,CPE出现也较快。病毒在15～30℃范围内均能在CO细胞中增殖并产生CPE,但最适增殖温度为25-30℃。通过形态学及理化特性研究,将分离到的病毒确定为虹彩病毒科,并将分离到的病毒命名为甲鱼虹彩病毒(soft-shelled turtle iridovirus,STIV))2.克隆了STIV主要衣壳蛋白基因,对其序列进行分析,结果表明其与蛙病毒属中的FV3、ATV MCP基因同源性最高,因此将分离到的病毒确定为虹彩病毒科蛙病毒属。在体外STIV感染过程中,MCP的时相的表达模式通过Western-blot和实时荧光PCR实验检测,结果表明MCP为晚期基因。将MCP片段插入pQE30表达载体中,在大肠杆菌中表达MCP,并制备兔抗MCP多克隆抗体,间接免疫荧光和病毒中和实表明MCP抗血清对STIV具有中和作用。3.根据MCP基因序列中的保守序列,设计引物和Taqman探针,建立了虹彩病毒蛙病毒属实时荧光PCR检测方法。对荧光定量PCR反应条件进行优化,评估该分析方法的特异性、稳定性和重复性。结果显示,该方法对虹彩病毒蛙病毒属成员(新加坡石斑鱼虹彩病毒除外)的检测有高度的特异性,与淋巴囊肿病毒(Lymphocystis)、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)等其他水生动物病毒之间均无交叉反应,检测总DNA灵敏度为4.5×100~(-3)pg/μL。得到的标准曲线有极好的线性关系,且线性范围宽,相关系数为0.9984;组内和组间试验重复样品的CT值标准偏差分别1.2%和1.6%。4.根据STIV胸肝激酶基因的保守序列,设计了两条内引物和两条外引物,建立了STIV环媒恒温扩增技术(LAMP)检测方法。对LAMP扩增条件优化,结果表明最佳反应条件为63℃反应60min。使用牛蛙病毒(TFV)、狗鱼弹状病毒(PFR)、传染性胰腺坏死病毒(IPNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性脑病和视网膜病病毒(VERV)、淋巴囊肿病毒(Lymphocystis)和真鲷虹彩病毒(RSIV)等主要水生动物病毒作为对照,评价LAMP方法的特异性,在蛙病毒属病毒毒株中均有扩增,检测其它病毒DNA时均为阴性。表明所建立的LAMP具有良好的特异性。灵敏度检测结果表明,LAMP检测比普通PCR扩增的灵敏度高100倍,比实时荧光PCR(real-time PCR)扩增的灵敏度低10倍。5.获得了4株可以稳定分泌STIV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备了兔抗STIV多克隆抗体,建立检测STIV病原的双抗夹心ELISA方法。该方法具有良好的特异性和敏感性。用该ELISA方法对128份临床样品进行检测,同时用PCR作为对照方法,结果表明该ELISA方法的特异性和敏感性分别为98.3%和100%;ELISA和PCR两种方法检测结果的符合率为98.4%。(本文来源于《华中农业大学》期刊2008-06-01）
江育林,陈在贤,郑坚川[2]（1999）在《甲鱼虹彩病毒的分离和鉴定》一文中研究指出从某甲鱼场患红脖子病的甲鱼体内分离到一株病毒。病毒在15-30℃能在CO、FHM、CK、GCK等细胞中增殖,最适复制温度25-30℃。理化鉴定提示该病毒是有囊膜的DNA病毒 病毒提(本文来源于《深圳特区科技》期刊1999年05期）
陈在贤,郑坚川,江育林[3]（1998）在《从患“红脖子病”甲鱼体分离到虹彩病毒》一文中研究指出从深圳某甲鱼场患“红脖子病”的甲鱼体内分离到一株病毒。该病毒于１５～３０℃能在ＣＯ、ＦＨＭ、ＣＫ、ＧＣＫ等细胞中增殖，其中在ＣＯ细胞中的滴度最高。最适复制温度为２５～３０℃，此时２ｄＣＰＥ可在９０％以上。在感染病毒的ＣＯ细胞单层上覆盖琼脂后２～３ｄ能形成直径１～１．５ｍｍ的空斑。病毒对氯仿、ｐＨ３、ｐＨ９敏感，ＤＮＡ抑制剂（ＩＵＤＲ）能抑制其复制过程，提示该病毒为有囊膜的ＤＮＡ病毒。病毒提纯后经负染电镜观察，可见到大量直径１２０～１６０ｎｍ的有囊膜的球形颗粒，放大后呈多面体。在感染病毒的细胞切片中，可见到六角形的病毒颗粒存在于细胞核和细胞质内，并可见到病毒从细胞膜获得囊膜。以上结果提示该病毒属虹彩病毒科，建议命名为甲鱼虹彩病毒（ＳＴＩＶ）。人工感染试验显示，该病毒对甲鱼有中等毒力，与传染性胰坏死症病毒（ＩＰＮＶ）、草鱼出血病病毒（ＧＣＲＶ）、大马哈鱼呼肠孤病毒（ＣＳＶ）在血清学上没有相关性。(本文来源于《中国兽医学报》期刊1998年02期）
甲鱼虹彩病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
从某甲鱼场患红脖子病的甲鱼体内分离到一株病毒。病毒在15-30℃能在CO、FHM、CK、GCK等细胞中增殖,最适复制温度25-30℃。理化鉴定提示该病毒是有囊膜的DNA病毒 病毒提
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲鱼虹彩病毒论文参考文献
[1].赵增连.甲鱼虹彩病毒（STIV）病原学研究及检测方法的建立[D].华中农业大学.2008
[2].江育林,陈在贤,郑坚川.甲鱼虹彩病毒的分离和鉴定[J].深圳特区科技.1999
[3].陈在贤,郑坚川,江育林.从患“红脖子病”甲鱼体分离到虹彩病毒[J].中国兽医学报.1998
标签：甲鱼虹彩病毒; 主衣壳蛋白; 荧光定量PCR; 环媒恒温扩增技术(LAMP);