导读:本文包含了谷氨酸信号通路论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:糖尿病视网膜病变,Mü,ller细胞,JAK,STAT信号通路
谷氨酸信号通路论文文献综述
冯闯,左中夫,刘文强,刘学政[1]（2019）在《抑制JAK/STAT信号通路对糖尿病早期大鼠视网膜Müller细胞的保护作用及对谷氨酸转运蛋白表达的影响》一文中研究指出目的探讨JAK/STAT信号通路对糖尿病早期大鼠视网膜Müller细胞及对谷氨酸转运蛋白(glutamate transporter,GLAST)表达的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分成对照组、糖尿病组、AG490组,每组10只。后两组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 50 mg·kg~(-1)诱导糖尿病模型。模型诱导成功后,AG490组给予AG490 10μL(17 mmol·L~(-1))玻璃体内注射给药。注射1个月后,利用试剂盒检测3组大鼠视网膜中谷氨酸含量变化,免疫荧光检测视网膜GLAST表达,免疫组织化学检测视网膜p-JAK2表达,Western blot检测视网膜GLAST、p-JAK2及p-STAT3蛋白相对表达量。结果与对照组GLAST相对表达量(65. 35±0. 66)%、p-JAK2相对表达量(32. 80±0. 40)%、p-STAT3相对表达量(17. 62±1.09)%、谷氨酸含量(23. 93±0. 67)μmol·g~(-1)相比,糖尿病组视网膜p-JAK2相对表达量(52. 16±0. 62)%、p-STAT3相对表达量(47. 41±0. 95)%及谷氨酸含量(44. 88±0. 27)μmol·g~(-1)均明显增加,GLAST相对表达量(32. 96±0. 64)%明显下降(均为P <0. 01);而与糖尿病组相比,AG490组p-JAK2相对表达量(13. 67±0. 45)%、p-STAT3相对表达量(14. 47±0. 25)%及谷氨酸含量(25. 18±0. 66)μmol·g~(-1)均明显降低,GLAST相对表达量(49. 48±0. 32)%明显增加(均为P <0. 01)。结论糖尿病早期大鼠视网膜GLAST表达明显降低,抑制JAK/STAT通路的活化可上调视网膜GLAST表达,降低视网膜谷氨酸含量,这可能有助于减轻糖尿病状态下视网膜Müller细胞的损伤。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年02期）
胡勇箭[2]（2018）在《代谢型谷氨酸2型受体和γ-氨基丁酸B受体信号通路研究》一文中研究指出G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)是细胞膜表面最大的受体家族,可以感知和传递不同的细胞外信号。根据进化同源性,GPCR可以分为五个大家族。其中,代谢型谷氨酸2型受体(metabotropic glutamate receptor 2,mGluR2)和γ-氨基丁酸B受体(γ-aminobutyric acid receptor type B,GABA_BR)属于C家族GPCR,分别是兴奋性神经递质谷氨酸和抑制性神经递质γ-氨基丁酸的代谢型受体。它们在中枢神经系统中广泛表达,参与学习、记忆和突触信号传递等重要的生理进程。目前,针对这两个受体信号通路的研究还不够充分。mGluR2参与很多精神和神经疾病的病理学过程,是潜在的抗精神病药物靶点。目前,由于缺乏特异性识别mGluR2的激动剂或拮抗剂,导致对其下游信号通路的研究较少,限制了以mGluR2为靶点的药物研发。我们构建了在体外稳定表达mGluR2的中华仓鼠卵巢细胞系,发现mGluR2能够转激活胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)。进一步研究发现mGluR2激活后依次通过下游偶联的Gβγ亚基/磷脂酶C激活黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK),活化的FAK直接结合并激活IGF-1R,继而激活下游细胞外信号调节激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)引起环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的活化。同时,在原代培养的小鼠大脑皮层神经元中,通过特异性的正向变构调节剂增强mGluR2活性证实了神经系统中mGluR2也激活IGF-1R/ERK1/2/CREB信号通路。此外,我们还发现神经细胞中mGluR2的激活会增强β淀粉样蛋白(amyloid-β)诱导和营养剥夺诱导的细胞凋亡。GABA_BR在中枢神经系统中介导缓慢的抑制性神经传导和突触可塑性调控,其活性的失调会导致细胞功能紊乱、损伤甚至细胞凋亡。膜表达的调控是受体活性调控的一种重要方式,经典的β-arrestin信号通路并不参与GABA_BR的膜表达调控。因此,我们在外源表达GABA_BR的HEK293细胞中对其膜表达调控信号通路进行了初步研究。发现,静息状态下,GABA_BR组成型内化与受体组成型活性无关,Ca~(2+)非依赖型蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)参与GABA_BR组成型内化的调控。激活状态下,GABA_BR通过FAK募集和激活PKCα,PKCα促进受体降解,进而减少受体膜表达量。综上,我们对mGluR2和GABA_BR的下游信号通路进行研究,发现mGluR2可以通过转激活IGF-1R介导下游信号通路,以及不同PKC亚型参与GABA_BR膜表达调控。以上工作阐释了两种神经递质GPCR调控的信号机制,将为以mGluR2和GABA_BR为靶点的药物研究提供理论依据。(本文来源于《华中科技大学》期刊2018-05-01）
高润兴,林文静,何万友,黄振兴,仲吉英[3]（2017）在《TRESK介导mTOR信号通路对谷氨酸诱导脊髓神经元细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的观察TRESK介导mTOR信号通路对谷氨酸诱导脊髓神经元细胞凋亡的影响。方法脊髓原代神经元细胞接种于培养孔或培养皿中。采用随机数字表法,将其随机分为4组,每组48孔和18皿:空白对照组(C组)、谷氨酸处理组(G组)、谷氨酸+TRESK siRNA组(Glu+T组)和谷氨酸+TRESK siRNA+mTOR特异性抑制剂组(Glu+T+m组)。C组不予任何处理;G组谷氨酸(100μmol/L)处理24 h;Glu+T组使用TRESK siRNA转染神经元细胞后,谷氨酸(100μmol/L)处理24 h;Glu+T+m组使用TRESK siRNA转染神经元细胞后,终浓度为20 nmol/L的mTOR特异性抑制剂Rapamycin(Rapa)预处理20 min后再用谷氨酸(100μmol/L)处理24 h。各组谷氨酸处理24 h后,测定神经元凋亡率、cleaved Caspase3和Bax蛋白的表达水平,测定mTOR磷酸化水平及TRESK mRNA表达。结果与C组比较,G组大鼠脊髓神经元活力降低,细胞凋亡率升高,cleaved Caspase3和Bax蛋白表达上调(P<0.05);与G组比较,Glu+T组大鼠脊髓神经元活力降低,细胞凋亡率升高,cleaved Caspase3和Bax蛋白表达增加(P<0.05);与Glu+T组比较,Glu+T+m组大鼠脊髓神经元活力升高,细胞凋亡率下降,cleaved Caspase3和Bax蛋白表达减少(P<0.05)。与C组比较,G组脊髓神经元TRESK mRNA表达明显上调(P<0.05);与G组比较,Glu+T组大鼠脊髓神经元TRESK mRNA表达明显下调(P<0.05)。与C组比较,G组脊髓神经元mTOR磷酸化水平表达明显增加(P<0.05);与G组比较,Glu+T组脊髓神经元mTOR磷酸化水平表达明显增加(P<0.05);与Glu+T组比较,Glu+T+m组脊髓神经元mTOR磷酸化水平表达明显减少(P<0.05)。结论 TRESK介导mTOR信号通路抑制谷氨酸诱导脊髓神经元凋亡。(本文来源于《广东医学》期刊2017年24期）
王秀英,吴欢听,朱惠玲,刘玉兰[4]（2016）在《谷氨酸通过TLR4、NOD和mTOR信号通路对LPS诱导的断奶仔猪肠道损伤的调控作用》一文中研究指出本试验旨在研究谷氨酸(Glu)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪肠道损伤的保护作用,并从哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Toll样受体4(TLR4)和核苷酸结合寡聚域受体(NOD)信号通路的角度探讨其作用机制。选择24头断奶仔猪[杜×长×大,平均体重(7.02±0.21)kg],分为4个处理组:1)对照组;2)LPS组;3)LPS+1.0%Glu组;4)LPS+2.0%Glu组。试验期为28天。在正式试验第28天,2、3、4组猪注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水,4 h后屠宰,取肠道样品待测。结果表明:1)Glu提高了空肠和回肠绒毛高度/隐窝深度、RNA/DNA、蛋白质/DNA与及claudin-1蛋白表达量,也提高了回肠乳糖酶、麦芽糖酶和蔗糖酶活性,降低了空肠隐窝深度。2)Glu也降低了空肠TLR4、骨髓分化因子88(MyD88)、白介素受体相关激酶1、肿瘤坏死因子受体相关因子6、NOD1、NOD2、受体互作蛋白激酶2、核因子-κB、Erbb2相互作用蛋白、矢车菊苷β1和回肠MyD88、NOD1、细胞因子信号传导抑制因子1的mRNA表达量,提高了空肠Toll反应蛋白(Tollip)和回肠白细胞分化抗原14、Tollip的mRNA表达量。3)此外,Glu提高了空肠磷酸化mTOR(p-mTOR)/总mTOR(t-mTOR)和回肠p-mTOR/t-mTOR、总真核起始因子4E结合蛋白1(t-4EBP1)蛋白表达量、磷酸化4EBPl(p-4EBP1)蛋白表达量。这些结果表明:Glu可通过激活mTOR信号通路,抑制TLR4和NOD信号通路,促进蛋白质合成,降低肠道炎性细胞因子的产生,从而缓解了LPS诱导的肠道损伤。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集》期刊2016-10-21）
李峥,高项羽,刘喆,梁楠,南征[5]（2016）在《丙泊酚通过MAPK/ERK信号通路对谷氨酸诱导的神经PC12细胞损伤的抑制作用》一文中研究指出目的:研究丙泊酚通过丝裂原激活的蛋白激酶/胞外信号调节的蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路对谷氨酸诱导的神经PC12细胞损伤的抑制作用。方法:取PC12细胞分为正常对照组、模型(10 mmol/L谷氨酸)组和丙泊酚低、中、高浓度(12.5、25、50μmol/L+10 mmol/L谷氨酸)组,分别加入相应药物,培养48 h后,检测各组细胞的光密度、凋亡情况和细胞中ERK1/2磷酸化水平及c-fos、Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组细胞的细胞光密度、磷酸化ERK1/2、Bcl-2表达均降低(P<0.01),凋亡率、c-fos和Bax表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,丙泊酚低、中、高浓度组细胞的光密度、磷酸化ERK1/2、Bcl-2表达均升高(P<0.01),凋亡率、c-fos和Bax表达均降低(P<0.05或P<0.01),且各浓度间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:丙泊酚可抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其可能与上调ERK1/2磷酸化水平有关。(本文来源于《中国药房》期刊2016年01期）
魏磊,丁力,徐评议[6]（2015）在《Wnt/β-catenin信号通路调节帕金森病细胞模型中谷氨酸转运体的表达》一文中研究指出目的脑内谷氨酸能信号的高活性与帕金森病的发病密切相关,研究发现Wnt/β-catenin信号通路在帕金森病模型中具有细胞保护作用,本研究探讨外源性Wnt1蛋(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）》期刊2015-09-18）
杨明[7]（2015）在《谷氨酸/NMDA1、Shh介导的成体NSC增殖分化信号通路的研究》一文中研究指出背景近年来,损伤脑组织的修复一直是国内外研究的重点与难点。研究发现谷氨酸可以促进神经干细胞(NSC:Neural Stem Cells)的增殖与分化,为损伤脑组织的修复提供了新的理论基础和思路。脑梗死及脑组织缺血损伤后会导致细胞凋亡,从而使大量谷氨酸(glutamic acid)外流,引起局部谷氨酸升高。虽然浓度升高的谷氨酸对组织有毒害作用,但是一定浓度的谷氨酸却可以促进NSC的增殖与分化。随着研究的不断深入,我们发现谷氨酸是通过其受体及Shh(sonic hedgehog)信号通路来促进NSC的增殖和分化。和以往的细胞学角度的研究相比,近年来不断进步与完善的分子生物学技术为我们提供新的研究方法和思路。在本文中,我们从分子层面深入地对谷氨酸及其受体及Shh (sonic hedgehog)信号通路介导的NSC的增殖和分化进行了研究。目的体外培养3日龄SD大鼠海马区原代神经干细胞,并使用传代叁代以上神经干细胞来筛选目的基因最适浓度,向叁代神经干细胞中加入目的基因,上调和沉默Shh基因后观察神经干细胞中谷氨酸刺激下Nesting的表达,Shh信号通路对神经干细胞增殖能力的影响,同时阻断上游谷氨酸NMDA受体后,在谷氨酸刺激下,神经干细胞中Shh、Nestin mRNA及蛋白的表达变化情况及其对神经干细胞相关增殖力的影响。方法1、在大鼠神经干细胞中添加5uM的谷氨酸进行刺激,通过荧光定量PCR及Western blot技术检测大鼠神经干细胞中基因Shh的mRNA及蛋白表达量；2、采用Shh-shRNA质粒转染大鼠神经干细胞,将转染后阳性NSC添加5uM谷氨酸刺激,通过荧光定量PCR及Western blot技术检测大鼠神经干细胞中基因Shh和Nestin的mRNA及蛋白表达量；3、在大鼠神经干细胞中通过谷氨酸受体阻断剂Conantokin-R阻断谷氨酸受体NMDAR1,添加5uM谷氨酸刺激,通过荧光定量PCR及Western blot技术检测大鼠神经干细胞中基因Shh和Nestin的mRNA及蛋白表达量；结果1、因Shh-shRNA质粒上具有绿色荧光蛋白(eGFP)基因,细胞转染24小时在荧光显微镜观察,转染后有少量阳性细胞内有绿色荧光蛋白,被激发细胞呈现绿色荧光。嘌呤霉素筛选48小时大部分未转染Shh-shRNA质粒的细胞死亡,大量存活细胞为成共转染的阳性细胞.2、实时荧光定量PCR检测结果显示,Shh、Nestin检测扩增曲线及熔解曲线均良好,无非特异性扩增。正常培养的神经干细胞Shh、Nestin为参照,5uM谷氨酸组Shh、Nestin表达均明显增加(P<0.05)；Conantokin-R组Shh、Nastin mRNA表达均未见明显增加(P>0.05)；Shh-shRNA组Shh mRNA表达明显受到抑制(P<0.05),Nestin表达未受到明显影响(P>0.05)；NC-shRNA组Shh、Nestin表达均明显增加俨<0.05)。3、蛋白印迹结果表明,相对于正常培养的神经干细胞,5uM谷氨酸组Shh、Nestin蛋白表达均明显增加(P<0.05)；Conantokin-R组Shh、Nestin蛋白表达均未见明显增加(P>0.05);Shh-shRNA组Shh蛋白表达明显受到抑制(P<0.05),Nestin蛋白表达未受到明显影响(P>0.05)；NC-shRNA组Shh、Nestin蛋白表达均明显增加(P<0.05)。结论Shh信号通路及NMDA受体在神经干细胞的增值过程中发挥了重要作用,谷氨酸可以通过NMDAR1来激活Shh信号传导途径,从而刺激NSC的增殖.(本文来源于《新乡医学院》期刊2015-03-01）
王洪忠,鹿勇,李莉,谢峰[8]（2014）在《海马的谷氨酸信号通路与精神分裂症》一文中研究指出多项研究表明谷氨酸信号转导系统与精神心理疾病的发生有着密切的关系。谷氨酸通路在中枢神经系统尤其是在海马区对神经元的生长和突触可塑性发挥着重要的作用。本文从海马的结构和功能出发,对海马内的谷氨酸信号转导通路及与精神分裂症的发生进行综述,以更深入地了解海马认知功能及精神分裂症的发生机制。(本文来源于《中国现代医生》期刊2014年26期）
李武雄[9]（2014）在《MK-801在谷氨酸-Shh信号通路中的阻断作用》一文中研究指出背景神经干细胞(neural stem cells)原位激活是指脑组织内的成体NSCs在受到某种活性物质的激活后而出现增殖、迁移、分化的现象,这种内源性NSCs原位激活为干细胞来源以及神经修复开创了新途径。研究发现脑损伤后NSCs原位激活、增殖、迁移和分化与谷氨酸受体NMDA受体的表达有密切相关性。NSCs的增殖和分化受多种因素调控,而非竞争性NMDA受体拮抗剂MK-801(地佐环平/地卓西平)对大鼠内源性NSC的增殖与分化有抑制作用。探索成体NSCs增殖激活信号通路分子机制具有重要意义。本课题分两部分：第一部分神经干细胞培养及鉴定目的将SD (Sprague-Dawley)大鼠神经干细胞进行体外原代培养以及传代培养后,对其增殖的神经干细胞和分化的神经元、星形胶质细胞给予鉴定。为下一步研究神经干细胞增殖分化信号传导通路提供干细胞。方法从出生2天内SD新生大鼠海马中分离出神经干细胞进行体外原代培养,细胞分离液accutase消化后进行传代培养,各代神经干细胞增殖情况用CCK-8试剂检测；取第3代神经干细胞以及诱导分化培养的细胞进行鉴定,采用免疫荧光共聚焦技术检测神经干细胞特异性标记物nestin(巢蛋白),神经元标记物βⅢ-tubulin和星形胶质细胞标记物GFAP,从而对神经干细胞和分化后的神经元、胶质细胞给予鉴定。结果体外培养的神经干细胞分裂生长后形成干细胞球,且传代生长情况良好,选取第3代、5代、7代神经干细胞进行CCK-8细胞活性检测,各代神经干细胞的增殖结果示：24h各代神经干细胞数分别为38675±2480,45105±2405,41259±3419；48h各代细胞数分别为67597±3965,70148+2000,68001±1125；72h各代细胞数分别为139641±3456,140890±3092,140314±2884；96h第各细胞数分别为139164±4497,156602±708,156159±4253。对各代神经干细胞进行免疫荧光检测,结果显示神经干细胞特异性标志物巢蛋白nestin呈阳性表达；利用5%血清诱导分化培养后,免疫荧光共聚焦技术检测到神经干细胞分化为神经元的标志物βⅢ-tubulin和星形胶质细胞的标志物GFAP呈阳性表达。结论经免疫荧光及共聚焦技术鉴定,成功从成体SD大鼠海马齿状回分离并培养出神经干细胞。第二部分MK-801在Shh-谷氨酸信号传导通路中的阻断作用目的利用MK-801对大鼠NSCs谷氨酸受体的阻断作用,观察NSCs中的Shh(sonic hedgehog)及相关标志物的mRNA和蛋白表达的情况,探讨内源性神经干细胞原位激活机制。方法取第3代神经干细胞,消化为单细胞悬液后,随机分成7组,使MK-801的浓度为0μM、5μM、10μM、20μM、40μM、80μM、160μM,各浓度MK-801作用下连续培养7天,采用倒置显微镜下细胞计数和cck-8试剂检测活性细胞数分别检测0-160μM浓度的MK-801作用下神经干细胞增殖情况；将单细胞悬液随机分成空白对照组,谷氨酸组,MK-801组以及谷氨酸、MK-801共同处理组,各组神经干细胞经过相应处理后进行培养,通过western blot、RT-PCR以及实时荧光定量PCR技术分别在蛋白表达水平、基因表达水平了解神经干细胞增殖以及分化过程中信号通路的shh、Nestin、βⅢ-tubulin、GFAP的表达情况。结果神经干细胞在0-160μ M浓度MK-801组中连续悬浮培养7天后,倒置显微镜下进行细胞计数,结果示10μ M以上浓度组细胞数量明显减少,5u M组细胞数量比接种数量多,但比空白对照组细胞数量少；CCK-8连续测量各浓度细胞活性,结果示第2天后各组活性细胞数(单位为105个/ml)分别为1.516±0.084,1.384±0.154,0.937±0.035,0.837±0.020,0.824±0.008,0.866±0.008,0.842±0.008,7.207±0.317,随着时间延长10-160μ M浓度组神经干细胞数量持续减少,5μ M组细胞细胞数量持续增加,生长趋势与空白对照组类似；空白对照组,谷氨酸组,共同处理组以及MK-801组,western blot结果显示：四组Shh/GAPDH灰度值之比分别为空白对照0.115,谷氨酸组0.1239,共同处理组0.047,MK-801组0.03629；Nestin/GAPDH空白对照0.7625,谷氨酸组0.9915,共同处理组0.01871,MK-801组0.29050.115;(FAP/GAPDH灰度值之比分别为空白对照0.7625,谷氨酸组0.9915,共同处理组0.01871,MK-801组0.2905；βⅢ-tubulin/GAPDH灰度值之比分别为空白对照0.598,谷氨酸组0.8834,共同处理组0.0246,MK-801组0.0308。RT-PCR结果示在阻断剂MK-801作用后,MK-801组及联合处理组shh、Nestin、βⅢ-tubulin、 GFAP基因和蛋白表达明显抑制,且两组表达基本一致；谷氨酸组表达明显高于正常对照组。实时荧光相对定量结果显示：四组中ShhmRNA相对于空白对照组的表达水平分别为MK-801处理组0.00381,共同处理组0.00106,谷氨酸组shh基因表达量为空白对照组的5.195倍；基因nestin在谷氨酸组aestin表达量是空白对照组的7.61倍,在共同处理组及MK-801组分别为空白对照组的0.0067、0.0042倍；GFAPmRNA表达量,谷氨酸组是空白对照组的4.6913倍,而共同处理组和MK-801组的表达量分别为于空白对照组；MK-80I组βⅢ-tubulin的基因表达量是空白对照组的0.00165倍。共同处理组是对照组的0.0102374倍。谷氨酸组βⅢ-tubulin的基因表达量是相对于空白对照组的2.615倍。结论MK-801在10μ M及以上浓度可有效抑制神经干细胞增殖；在蛋白表达、基因表达层面上,MK-801能阻断NSCs经谷氨酸/]NMDAR-Shh信号传导的增殖分化通路。(本文来源于《新乡医学院》期刊2014-04-01）
马延超[10]（2014）在《ERK1/2信号通路调控成年大鼠脊髓损伤后谷氨酸转运体GLAST和GLT-1表达的实验研究》一文中研究指出谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统(central nervous system, CNS)最主要的兴奋性神经递质。生理情况下,细胞外谷氨酸浓度必须维持在相对低的水平,以保证正确的信号传递,同时防止发生由于谷氨酸受体过度激活导致的兴奋性神经毒性。谷氨酸转运体尤其是位于星形胶质细胞上的谷氨酸-天冬氨酸转运体(glutamate-aspartate transporter, GLAST)和谷氨酸转运体-1(glutamate transporter-1,GLT-1),在突触间隙谷氨酸浓度的调节过程中发挥着重要作用。它们负责将释放到突触间隙的谷氨酸转运至神经胶质细胞,神经胶质细胞具有谷氨酰胺合成酶,它们能够将转入的谷氨酸转化为谷氨酰胺,后者可被转运至神经元,重新转换为谷氨酸,以实现谷氨酸的循环利用。当谷氨酸转运体功能障碍时,导致谷氨酸在突触间隙蓄积,持续兴奋其受体,引起兴奋性毒性,导致神经元死亡。目前的研究表明,谷氨酸转运体的定位或表达异常和脑外伤及多种神经系统退行性疾病有关,由于GLAST和GLT-1主要分布于星型胶质细胞和小胶质细胞,且在谷氨酸的转运过程中发挥主要作用,本研究主要探讨大鼠脊髓损伤后胶质性转运体GLAST和GLT-1在星型胶质细胞和小胶质细胞上的表达情况及其调控机制。以为进一步利用调控谷氨酸转运体的表达,从而降低细胞外谷氨酸水平,减少兴奋性毒性,减缓脊髓继发性损伤提供理论依据。目的(1)研究成年大鼠脊髓损伤后谷氨酸转运体GLAST和GLT-1表达的变化。(2)研究ERK1/2信号通路对成年大鼠脊髓损伤后谷氨酸转运体GLAST和GLT-1表达的调控作用。方法第一部分健康成年雌性SD大鼠25只,随机取5只作为正常对照组,余20只制作成脊髓挫伤动物模型,并随机分为4组,每组5只大鼠。伤后1d、3d、7d和14d处死取材,应用免疫荧光染色及计算机图像分析系统进行半定量分析,观察GLAST和GLT-1的表达情况。第二部分健康成年雌性SD大鼠55只,随机取5只作为正常对照组,余50只制作成脊髓挫伤动物模型,并随机分为两组：SCI组和实验组,每组25只大鼠。实验组大鼠分别于伤前30min、伤后1h及6h腹腔注射U0126(500μg/kg),SCI组大鼠以等量生理盐水代替。伤后8h、12h、24h、3d和7d处死取材,应用免疫荧光染色及计算机图像分析系统进行半定量分析,观察阻断ERK1/2信号通路对GLAST和GLT-1表达的影响。结果第一部分(1)在正常对照组脊髓,横切面上,GLAST主要表达于脊髓灰质,在白质中表达较少,主要见于白质的边缘部分。脊髓损伤后1d,GLAST表达略有升高,伤后3d和7d呈进行性下降,伤后7d表达最少,伤后14d略有升高,仍低于对照组。在损伤后3d和7d,GLAST的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.∞)；(2)在正常对照组脊髓,横切面上,GLT-1主要表达于脊髓灰质,在白质表达较少,主要见于白质的边缘部分。脊髓损伤后Id,GLT-1的表达略有升高,伤后3d表达最少,伤后7d和14d略有升高,仍低于对照组。在损伤后3d、7d和14d,GLT-1的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)免疫荧光双标结果显示,在正常对照组大鼠,星型胶质细胞上可见明显GLAST表达,脊髓损伤后1d,GLAST表达下降,伤后3d及7d呈进行性下降,伤后7d表达最少,伤后14d开始恢复。在损伤后3d和7d,GLAST与GFAP共表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫荧光双标结果显示,在正常对照组大鼠,星型胶质细胞上可见GLT-1明显表达,脊髓损伤后1d,表达下降,损伤后3d及7d呈进行性下降,伤后7d表达最少,损伤后14d开始恢复。在损伤后1d、3d、7d和14d,GLT-1与GFAP共表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)免疫荧光双标结果显示,在正常对照组大鼠,小胶质细胞上可见少量GLAST表达,脊髓损伤后1d,表达明显上升,损伤后3d-14d呈进行性上升,损伤后14d达到高峰。在损伤后3d、7d和14d,GLAST与OX-42共表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)免疫荧光双标结果显示,在正常对照组大鼠,小胶质细胞上可见少量GLT-1表达,脊髓损伤后1d,表达明显上升,损伤后3d-14d呈进行性上升,损伤后14d达到高峰。在损伤后1d、3d、7d和14d,GLT-1与OX-42共表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。第二部分(1)正常对照组大鼠脊髓可见中等量GLAST表达,灰质明显高于白质。SCI组大鼠脊髓损伤后8h GLAST表达明显升高,自损伤后12h至损伤后7d,GLAST的表达呈进行性下降,至损伤后7d达最低值。脊髓损伤后8h,12h,3d及7d和对照组相比,差别有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠GLAST表达变化趋势和SCI组相同,脊髓损伤后8h、12h及24h和对照组相比,差别有统计学意义(P<0.05)。实验组与SCI组相比,伤后各个时间点GLAST的表达高于SCI组。脊髓损伤后8h、12h及24h实验组GLAST的表达和SCI组相比,差别有统计学意义(P<0.05)。(2)在正常对照组大鼠脊髓可见中等量GLT-1表达,其在灰质的表达明显高于白质。SCI组大鼠脊髓损伤后8h GLT-1表达明显升高,自损伤后12h至损伤后3d,GLT-1的表达呈进行性下降,至损伤后3d达最低值,损伤后7d开始上升。脊髓损伤后8h、12h、3d及7d和对照组相比,差别有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠GLT-1表达变化趋势和SCI组相同,脊髓损伤后8h,12h及24h和对照组相比,差别有统计学意义(P<0.05)。实验组与SCI组相比,伤后8h的表达高于SCI组。脊髓损伤后8h实验组GLT-1的表达和SCI组相比,差别有统计学意义(0.01<P<0.05)。结论(1)大鼠脊髓损伤后,GLAST和GLT-1的表达短暂上升后呈进行性下降,后逐渐恢复。(2)在星型胶质细胞,GLAST和GLT-1的表达呈进行性下降,后逐渐恢复；在小胶质细胞,GLAST和GLT-1的表达在观察时间内呈持续上升。(3)ERK1/2信号通路参与调控成年大鼠脊髓损伤后谷氨酸转运体GLAST的表达。(4)星形胶质细胞和小胶质细胞在脊髓损伤及其修复过程中发挥不同的作用；脊髓损伤后GLAST和GLT-1的表达受不同信号通路的调节。(本文来源于《兰州大学》期刊2014-03-01）
谷氨酸信号通路论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)是细胞膜表面最大的受体家族,可以感知和传递不同的细胞外信号。根据进化同源性,GPCR可以分为五个大家族。其中,代谢型谷氨酸2型受体(metabotropic glutamate receptor 2,mGluR2)和γ-氨基丁酸B受体(γ-aminobutyric acid receptor type B,GABA_BR)属于C家族GPCR,分别是兴奋性神经递质谷氨酸和抑制性神经递质γ-氨基丁酸的代谢型受体。它们在中枢神经系统中广泛表达,参与学习、记忆和突触信号传递等重要的生理进程。目前,针对这两个受体信号通路的研究还不够充分。mGluR2参与很多精神和神经疾病的病理学过程,是潜在的抗精神病药物靶点。目前,由于缺乏特异性识别mGluR2的激动剂或拮抗剂,导致对其下游信号通路的研究较少,限制了以mGluR2为靶点的药物研发。我们构建了在体外稳定表达mGluR2的中华仓鼠卵巢细胞系,发现mGluR2能够转激活胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)。进一步研究发现mGluR2激活后依次通过下游偶联的Gβγ亚基/磷脂酶C激活黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK),活化的FAK直接结合并激活IGF-1R,继而激活下游细胞外信号调节激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)引起环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)的活化。同时,在原代培养的小鼠大脑皮层神经元中,通过特异性的正向变构调节剂增强mGluR2活性证实了神经系统中mGluR2也激活IGF-1R/ERK1/2/CREB信号通路。此外,我们还发现神经细胞中mGluR2的激活会增强β淀粉样蛋白(amyloid-β)诱导和营养剥夺诱导的细胞凋亡。GABA_BR在中枢神经系统中介导缓慢的抑制性神经传导和突触可塑性调控,其活性的失调会导致细胞功能紊乱、损伤甚至细胞凋亡。膜表达的调控是受体活性调控的一种重要方式,经典的β-arrestin信号通路并不参与GABA_BR的膜表达调控。因此,我们在外源表达GABA_BR的HEK293细胞中对其膜表达调控信号通路进行了初步研究。发现,静息状态下,GABA_BR组成型内化与受体组成型活性无关,Ca~(2+)非依赖型蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)参与GABA_BR组成型内化的调控。激活状态下,GABA_BR通过FAK募集和激活PKCα,PKCα促进受体降解,进而减少受体膜表达量。综上,我们对mGluR2和GABA_BR的下游信号通路进行研究,发现mGluR2可以通过转激活IGF-1R介导下游信号通路,以及不同PKC亚型参与GABA_BR膜表达调控。以上工作阐释了两种神经递质GPCR调控的信号机制,将为以mGluR2和GABA_BR为靶点的药物研究提供理论依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
谷氨酸信号通路论文参考文献
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