导读:本文包含了血管平滑肌细胞迁移论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:血管平滑肌细胞,microRNA-30b,E-Cadherin,细胞迁移
血管平滑肌细胞迁移论文文献综述
俞启遥,王丹琳[1]（2019）在《miR-30b对血管平滑肌细胞迁移能力的影响》一文中研究指出目的探究microRNA-30b(miR-30b)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移能力的影响。方法体外分离培养大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组(未进行转染)、miR-对照组(转染miR-NC,浓度为50 nmol/L)、miR-30b mimics组(转染miR-30b mimics,浓度为50 nmol/L)。采用实时荧光定量PCR实验检测miR-30b及钙黏附蛋白E-Cadherin的表达情况;采用划痕愈合实验检测VSMC的迁移率;采用Transwell实验检测VSMC的迁移能力;采用Western blot技术检测E-Cadherin蛋白的表达。结果①miR-30b mimics组与正常对照组和miR-对照组比较,miR-30b表达水平升高(P<0.05)。②划痕愈合实验结果显示,与正常对照组和miR-对照组相比,miR-30b mimics组VSMC的划痕修复率明显降低(P<0.05)。③Transwell实验可见,miR-30b mimics组VSMC的迁移能力较正常对照组和miR-对照组明显减弱(P<0.05)。④miR-30b mimics组E-Cadherin mRNA和蛋白的表达较正常对照组和miR-对照组明显增强(P<0.05)。结论 miR-30b上调E-Cadherin的表达,从而抑制大鼠VSMC的迁移。(本文来源于《中国动脉硬化杂志》期刊2019年05期）
郑佞波[2]（2019）在《肺炎衣原体感染通过c-Fos/IL-17C通路促进血管平滑肌细胞迁移》一文中研究指出目的:动脉粥样硬化是一种慢性炎症性病变。肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,C.pneumoniae)感染作为一种新的危险因素与动脉粥样硬化发生发展关系密切,但其导致动脉粥样硬化的发病机制并不完全清楚。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)从血管中膜向内膜迁移是动脉粥样硬化发病的关键环节之一。本课题组前期研究发现,C.pneumoniae感染可促进VSMC的迁移,但具体分子机制尚未解明。近年研究显示,病原体感染可上调白细胞介素(interleukin,IL)-17C的表达,且与细胞迁移有关。本研究拟建立C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型和体外C.pneumoniae感染大鼠原代VSMC模型,旨在探讨IL-17C在C.pneumoniae感染促进VSMC迁移中的作用及其分子机制。方法和结果:第一部分:C.pneumoniae感染通过诱导IL-17C的表达促进VSMC迁移首先利用C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型以及体外C.pneumoniae感染VSMC模型,探讨C.pneumoniae感染对IL-17C表达的影响。分别采用免疫荧光、实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)以及Western blot实验检测C.pneumoniae感染的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC以及大鼠VSMC中IL-17C的表达。随后,分别利用重组IL-17C(recombinant IL-17C,rIL-17C)蛋白与VSMC共培养和RNA干扰技术改变VSMC中IL-17C的表达水平,采用Transwell实验观察C.pneumoniae感染对VSMC迁移能力的影响,以明确IL-17C在C.pneumoniae感染促进VSMC迁移中的作用。研究结果显示,C.pneumoniae感染能够上调ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC以及大鼠VSMC中IL-17C的表达。rIL-17C刺激可促进VSMC迁移,而沉默IL-17C的表达可抑制C.pneumoniae感染诱导的VSMC迁移。以上结果表明,C.pneumoniae感染可通过诱导IL-17C的表达促进VSMC迁移。第二部分:C.pneumoniae感染VSMC通过激活c-Fos/ERK通路促进IL-17C的表达利用C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型以及体外C.pneumoniae感染大鼠原代VSMC模型,确认C.pneumoniae感染对c-Fos表达及活化的影响。分别利用免疫荧光和Western blot实验检测C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC和大鼠VSMC中c-Fos表达及活化水平。为进一步证实c-Fos在C.pneumoniae感染VSMC促进IL-17C表达中的作用,应用细胞核转染技术使VSMC中c-Fos过表达,同时利用c-Fos siRNA以及细胞核转染技术转染c-Fos Ser32和Thr325位点的突变质粒分别抑制c-Fos的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化,采用Western blot实验检测VSMC中IL-17C的表达。随后,利用(Chromatin immunoprecipitation,CHIP)实验检测C.pneumoniae感染VSMC后c-Fos与IL-17C启动子区域的结合情况,Western blot实验检测C.pneumoniae感染和过表达c-Fos后ERK的磷酸化水平;给予ERK磷酸化抑制剂PD98059预处理后,Western blot实验检测过表达c-Fos后VSMC中IL-17C的表达。实验结果显示,C.pneumoniae感染可促进ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC以及大鼠VSMC中c-Fos表达及活化。过表达c-Fos可上调VSMC中IL-17C的表达,分别抑制c-Fos的表达及Ser32和Thr325位点的磷酸化后,C.pneumoniae感染促进IL-17C表达的作用被显着抑制,表明C.pneumoniae感染VSMC通过诱导c-Fos的表达及活化促进IL-17C的表达。但C.pneumoniae感染未能增强c-Fos与IL-17C启动子区域的结合;C.pneumoniae感染和过表达c-Fos均可促进VSMC中ERK的磷酸化;而给予PD98059预处理后,过表达c-Fos所诱导的IL-17C高表达则被显着抑制。以上结果表明,C.pneumoniae感染VSMC通过激活c-Fos/ERK通路促进IL-17C的表达。第叁部分:C.pneumoniae感染VSMC通过IL-17C激活ERK而促进c-Fos的表达及活化分别利用rIL-17C蛋白与VSMC共培养,采用Western blot实验检测VSMC总蛋白和核蛋白中c-Fos蛋白的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化水平,以明确IL-17C对c-Fos表达及活化的影响;随后,采用Western blot实验检测VSMC中ERK的磷酸化水平,并在给予PD98059预处理后,采用Western blot实验检测rIL-17C刺激后VSMC总蛋白和核蛋白中c-Fos蛋白的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化水平。最后,利用IL-17C siRNA沉默IL-17C的表达,Western blot实验检测C.pneumoniae感染VSMC后c-Fos的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化水平,以观察C.pneumoniae感染VSMC后,IL-17C对c-Fos的表达及活化的影响。实验结果显示,rIL-17C可促进VSMC中c-Fos表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化;且rIL-17C可促进ERK活化,而抑制ERK的活性后,rIL-17C促进c-Fos表达及c-Fos Ser32和Thr325位点磷酸化的作用被明显抑制,表明IL-17C可通过激活ERK促进c-Fos的表达及活化。而沉默IL-17C的表达后,C.pneumoniae感染促进c-Fos表达及活化的作用被显着抑制。以上结果表明,C.pneumoniae感染VSMC后通过IL-17C激活ERK而促进c-Fos表达及活化。结论:C.pneumoniae感染可能通过c-Fos/IL-17C通路促进VSMC迁移。(本文来源于《天津医科大学》期刊2019-05-01）
朱慧娟[3]（2019）在《长链非编码RNA ENST00000444488.1调控血管平滑肌细胞迁移的作用机制研究》一文中研究指出背景与目的:长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)参与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)及冠心病(coronary artery disease,CAD)的诸多病理进程,但其具体作用机制尚不清楚。本课题组前期研究工作在93个CAD患者和48个健康对照的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)样本中进行了 lncRNA/mRNA表达谱分析,并在412例冠心病病例、295例健康对照中重复验证,最终鉴定出7个差异表达lncRNAs。lncRNA ENST00000444488.1就是其中一个冠心病差异表达lncRNA,可以作为诊断CAD的新的生物标志物。但ENST00000444488.1在AS及CAD发生中的作用尚不清楚,因此本研究的目的是探索其在AS及CAD发生中的作用机制。方法:1.应用 3'和 5'-RACE(rapid amplification of cDNA ends,RACE)实验及 Sanger sequencing 获得 ENST00000444488.1 转录本全长序列,Northern blot 实验验证ENST00000444488.1 转录本的大小;应用 RNA FISH(fluorescence in situ hybridization,FISH)确定 ENST00000444488.1 在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中的亚细胞定位;应用PhyloCSF软件分析ENST00000444488.1 的保守性;应用 BLAST 软件预测 ENST00000444488.1 的蛋白编码能力,并应用体外转录-翻译实验证明其蛋白质编码能力。2.在VSMCs中,采用gain-of-function和loss-of-function策略,进行细胞增殖实验(CCK-8)和 Transwell 实验,分别研究 ENST00000444488.1 对 VSMCs 增殖、迁移表型的调控作用。3.运用RNA pull down及质谱分析筛选与ENST00000444488.1相互作用的结合蛋白,并应用Western blot进行验证;应用RNA结合蛋白免疫沉淀(RNAbinding protein immunoprecipitation)实验验证细胞内 ENST00000444488.1 与结合蛋白的相互作用;应用免疫荧光技术确定ENST00000444488.1与其结合蛋白在VSMCs中的亚细胞共定位。4.应用Western blot、Transwell实验及F-actin荧光染色技术分别探究ENST00000444488.1与MYH9蛋白的相互作用对MHY9蛋白水平、VSMCs迁移、VSMCs F-actin骨架重排的影响。5.应用 CRISPR/Cas9 技术建立 VSMCs 特异性 lncRNA ENST00000444488.1 转基因小鼠。结果:1.ENST00000444488.1的基本生物学特征分析1)5'和 3'-RACE 实验及 Sanger sequencing 确定了 ENST00000444488.1 全长序列为 1279nt;Northern blot 实验结果显示 ENST00000444488.1 在 VSMCs 和人脐静脉内皮细胞(human umbical vein endothelial cells,HUVECs)中的转录本大小约为1200nt,与RACE获得的全长序列大小基本一致,ENST00000444488.1 在 VSMCs 中的表达水平高于 HUVECs;RNAFISH 结果表明ENST00000444488.1定位于VSMCs细胞质、细胞核,但主要定位于细胞质中。2)PhyloCSF软件分析结果表明ENST00000444488.1在100多种脊椎动物种属间具有较低的保守性,且不具有编码蛋白质的能力;BLAST软件比对结果表明不存在与ENST00000444488.1同源性多肽,不具有氨基酸编码的能力;体外转录-翻译实验结果表明,ENST00000444488.1在体外翻译的产物不存在蛋白编码产物。以上结果表明ENST00000444488.1不具有蛋白质编码能力,是一个真正的长链非编码RNA。2.ENST00000444488.1 调控 VSMCs 迁移1)CCK-8增殖实验结果表明,在VSMCs中过表达和敲低ENST00000444488.1基因表达均不影响细胞的增殖。2)Transwell实验结果表明,在VSMCs中过表达ENST00000444488.1显着地抑制细胞的迁移;而敲低ENST00000444488.1则显着地促进细胞的迁移。3)应用血小板起源性生长因子 BB(platelet derived growth factor BB,PDGFBB)处理VSMCs,ENST00000444488.1表达水平显着下降;过表达ENST00000444488.1可显着抑制PDGFBB诱导的VSMCs迁移,表明ENST00000444488.1 参与 PDGFBB 诱导的 VSMCs 迁移。3.ENST00000444488.1调控VSMCs迁移的分子机制研究1)ENST00000444488.1与MYH9蛋白相互作用:RNA pulldown、质谱分析及Western blot实验筛选、验证结果表明ENST00000444488.1与MYH9蛋白结合;RNA RIP实验进一步证实细胞内ENST00000444488.1与MYH9蛋白的相互作用;免疫荧光染色结果表明ENST00000444488.1与MYH9蛋白在VSMCs内的共定位。这些结果均表明ENST00000444488.1可与MYH9蛋白相互作用。2)ENST00000444488.1与MYH9蛋白相互作用影响MYH9蛋白水平:在VSMCs中过表达或敲低ENST00000444488.1不影响MYH9基因的mRNA表达水平;在VSMCs中过表达ENST00000444488.1显着地降低MYH9蛋白水平,而敲低ENST00000444488.1则显着上调MYH9蛋白水平,结果表明ENST00000444488.1通过与MYH9相互作用影响了 MYH9蛋白水平。后续实验正在探究ENST00000444488.1与MYH9的结合影响MYH9蛋白水平变化的分子机制。3)ENST00000444488.1与MYH9蛋白相互作用影响PDGFBB诱导的VSMCs迁移:在VSMCs中过表达MYH9基因显着促进细胞的迁移,而敲低内源MYH9基因表达水平可以显着抑制细胞的迁移,且敲低内源MYH9基因表达显着抑制PDGFBB所诱导的VSMCs迁移。细胞迁移回复实验结果表明,敲低MYH9基因显着地抑制敲低内源ENST00000444488.1表达所诱导的VSMCs迁移。4)ENST00000444488.1与MYH9蛋白的相互作用影响PDGFBB诱导的F-actin骨架重排:与迁移表型一致,VSMCs中敲低内源ENST00000444488.1基因表达显着增强F-actin骨架重排;而过表达ENST00000444488.1则显着抑制PDGFBB所诱导的F-actin骨架重排。骨架重排回复实验结果表明,敲低MYH9则显着抑制敲低ENST00000444488.1所诱导的VSMCs F-actin骨架重排。4.建立VSMCs特异性ENST00000444488.1转基因小鼠应用CRISPR/Cas9技术建立ENST00000444488.1转基因小鼠:已获得F1代fl/+小鼠。结论:1.冠心病差异表达lncRNA ENST00000444488.1的全长序列为1279nt,主要定位于细胞质;该基因在100种脊椎动物物种间保守性较低,不编码蛋白质,是一个真正意义的长链非编码RNA。2.ENST00000444488.1 调控 VSMCs 迁移而不影响其增殖,且 ENST00000444488.1参与调控PDGFBB诱导的VSMCs迁移。3.ENST00000444488.1可与MYH9蛋白相互作用,二者的相互作用影响MYH9蛋白水平、VSMCs F-actin骨架重排,进而影响VSMCs的迁移。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2019-05-01）
方紫岑[4]（2019）在《藁本内酯对血管紧张素-Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞迁移的作用及机制研究》一文中研究指出目的:1、明确藁本内酯(Z-ligustilide,LIG)对大鼠血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells,VSMCs)迁移的作用。2、研究LIG抑制VSMCs迁移的分子机制:探讨LIG对c-Myc、MMP2表达的影响以及c-Myc与MMP2的关系。探讨LIG对ROCK、JNK表达的影响以及ROCK与JNK的关系。方法:1、利用CCK-8实验测定血管紧张素-II(Angiotensin-II,Ang-II)以及LIG对VSMCs的毒性。2、利用Ang-II诱导VSMCs迁移,构建细胞迁移模型。3、运用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验测定LIG对Ang-II诱导的VSMCs迁移的影响。4、荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测LIG对Ang-II诱导的VSMCs迁移时c-Myc、MMP2、ROCK及JNK表达的变化。5、Transwell细胞迁移实验和蛋白免疫印迹法评估c-Myc抑制剂、ROCK抑制剂对VSMCs的迁移能力的影响,及c-Myc、MMP2、ROCK、JNK表达的变化。结果:1、构建了Ang-II诱导VSMCs过度迁移的模型,在浓度为2μg/mL作用时间24 h以内诱导细胞过度迁移的效果最明显(过度迁移率为38%~45.4%,P<0.05),细胞状态良好,无细胞毒性且稳定,可以作为构建VSMCs迁移模型。2、LIG能有效抑制Ang-II诱导的VSMCs迁移,在2.5~10μg/mL时呈浓度依赖关系。当浓度为10μg/mL作用12 h,抑制细胞迁移率达到49%(P<0.05)。3、LIG能使Ang-II诱导细胞迁移时细胞内c-Myc、MMP2高表达的下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。抑制剂10058-F4抑制c-Myc表达后,Ang-II诱导的VSMCs中MMP2的表达下降,且细胞迁移率下降(P<0.05)。提示LIG可能通过调控c-Myc/MMP2信号通路来抑制Ang-II诱导的VSMCs迁移。4、LIG能使Ang-II诱导VSMCs迁移时细胞内ROCK、JNK高表达的下调。抑制剂Y-27632抑制ROCK后,Ang II诱导的VSMCs中JNK的表达下降,且细胞迁移率下降(P<0.05)。提示LIG可能通过调控ROCK/JNK信号通路来抑制Ang II诱导的VSMCs迁移。结论:LIG能有效抑制Ang-II诱导的大鼠VSMCs的迁移,在2.5~10μg/mL时抑制效果成剂量依赖性,10μg/mL LIG作用12 h时抑制率为49%(P<0.05)。其机制是LIG可能通过c-Myc/MMP2、ROCK/JNK信号通路来抑制Ang-II诱导的VSMCs迁移。(本文来源于《广东药科大学》期刊2019-03-16）
张音,陆平,盛净[5]（2018）在《桔梗皂甙D对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响》一文中研究指出目的探讨桔梗皂甙D对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs(A7r5细胞株),通过划痕实验和Transwell小室评估桔梗皂甙D以及MAPKs抑制剂(U0126/SB203580/SP600125)对血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导的VSMCs迁移和侵袭的影响。明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9在PDGF-BB诱导的VSMCs中的蛋白水解活性;RT-qPCR检测MMP-2和MMP-9的mRNA表达水平。各组细胞反应48h。结果桔梗皂甙D在4μg/mL时即能抑制PDGF-BB刺激VSMCs的迁移及侵袭能力,抑制MMP-9的蛋白水解活性,下调其mRNA表达(P<0.05)。MAPKs抑制剂20μM能抑制PDGFBB刺激的VSMCs迁移及侵袭及MMP-9的mRNA表达(P<0.01),与MAPKs抑制剂20μM+桔梗皂甙D4μg/mL组比较,2组抑制PDGF-BB促细胞迁移及侵袭的能力、下调MMP-9mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论桔梗皂甙D抑制了MMP-9的活性并下调其mRNA表达,对PDGF-BB诱导的VSMCs迁移与侵袭有抑制作用,其机制可能与部分抑制MAPKs的活性有关。(本文来源于《老年医学与保健》期刊2018年04期）
高爽,李姗姗,齐颖新[6]（2018）在《血小板源性微囊在血管平滑肌细胞迁移中的作用》一文中研究指出目的经皮冠状动脉介入治疗等会引起血管内膜损伤进而导致内膜新生,其中血管平滑肌细胞(VSMCs)是新生内膜的主要成分,血管中膜层VSMCs向内膜下层迁移在这一病理过程中起到重要作用。研究发现内膜损伤后暴露的Ⅰ型胶原蛋白可以促进血小板释放血小板源性微囊(PMVs),但其对VSMCs迁移的作用目前尚不清楚。因此,通过体外模拟体内Ⅰ型胶原蛋白暴露的条件,探究血管VSMCs迁移中PMVs的作用及其机制。方法 应用差速离心以及高速离心法进行PMVs的提取和富集。采用划痕法对细胞迁移功能进行表征。应用生物信息学方法(本文来源于《第十二届全国生物力学学术会议暨第十四届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编》期刊2018-08-17）
殷佩,王颖,沈振亚[7]（2018）在《SMAD4低表达促进人血管平滑肌细胞迁移和凋亡》一文中研究指出目的:观察SMAD4表达下调对人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cell,HASMC)迁移及凋亡的影响。方法:以siRNA-SMAD4转染HASMC,抑制SMAD4表达,以细胞迁移实验(Transwell)和流式细胞术检测平滑肌细胞的迁移和凋亡率;蛋白质印迹法检测各凋亡相关蛋白的表达。结果:与阴性对照组相比,转染siRNA-SMAD4后HASMCs早期和晚期细胞凋亡率均明显升高(P均<0.05)。Transwell实验结果显示,siRNASMAD4组平均每视野迁移细胞数为114±21,明显多于空白组和阴性对照组(分别为19±6,25±7,P均<0.01)。蛋白质印迹结果显示SMAD4低表达引起Cleaved Caspase-3表达上调、Bal-2表达下调。结论:SMAD4低表达明显促进HASMC迁移和凋亡,有可能与主动脉瘤发生发展的病理机制相关。(本文来源于《江苏大学学报(医学版)》期刊2018年03期）
吴校林,朱锐,李彬,刘文卫,周青[8]（2017）在《Wnt3a通过整合素连接激酶调节血管平滑肌细胞迁移和黏附》一文中研究指出目的探讨重组Wnt3a蛋白对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移和黏附的影响及相关机制。方法原代培养大鼠VSMCs,实验分为Wnt3a组和对照组,通过Transwell实验检测VSMCs的迁移能力,细胞基质黏附实验检测VSMCs黏附细胞外基质的能力,Western blot检测VSMCs中β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化β-catenin(Ser675)、糖原合成激酶3β(GSK-3β),磷酸化GSK-3β(Ser9)、整合素连接激酶(ILK)的蛋白表达水平。结果Wnt3a组中VSMCs迁移的数量明显高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,Wnt3a组中VSMCs黏附于胶原Ⅰ的数量和光密度值均显着增加(P<0.05),且Wnt3a组中磷酸化β-catenin(Ser675)、磷酸化GSK-3β(Ser9)和ILK蛋白的表达水平均显着上调(P<0.05)。结论 Wnt3a可以通过ILK调节VSMCs迁移和黏附。(本文来源于《重庆医学》期刊2017年36期）
杨晓琨,马晓伟,王萌,肖学凤[9]（2017）在《辛通畅络中药复方对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响》一文中研究指出[目的]观察辛通畅络中药复方对血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响。[方法]以含辛通畅络中药处方不同浓度(10%、20%、30%)的大鼠血清培养VSMCs,以正常大鼠空白血清为对照,采用Boyden小室法及划痕实验观察辛通畅络中药血清对VSMCs迁移的影响;采用Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达情况。[结果]辛通畅络中药复方含药血清可以抑制VSMCs的迁移及MMP-2、MMP-9蛋白的表达,并且这种抑制效应呈浓度依赖性。[结论]辛通畅络中药复方具有抑制VSMCs迁移的作用,其作用机制可能与影响MMP-2和MMP-9的表达有关。(本文来源于《天津中医药》期刊2017年10期）
何灿粲,计晓娟,余更生,毕杨,朱旭[10]（2017）在《过表达趋化因子受体4的内皮祖细胞影响血管平滑肌细胞迁移、增殖》一文中研究指出目的研究过表达趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移、增殖的影响。方法分离培养并鉴定大鼠骨髓来源EPCs。CXCR4的重组腺病毒感染EPCs后,流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测细胞膜CXCR4受体及mRNA表达,CCK-8法、Transwell法分别检测EPCs增殖活性、迁移能力。建立过表达CXCR4的EPCs与VSMCs非接触共培养模型,Transwell法、CCK-8法检测EPCs对VSMCs的迁移、细胞存活的影响。结果 CXCR4重组腺病毒感染EPCs 48 h后,EPCs细胞膜CXCR4受体和mRNA表达明显增高(P<0.01),过表达CXCR4对EPCs增殖活性无明显影响,但可增强EPCs定向迁移能力(P<0.01)。共培养模型中,SDF-1α诱导下,CXCR4组VSMCs迁移、细胞存活率明显降低(P<0.05),无SDF-1α诱导下空白对照组、GFP组及CXCR4组VSMCs的迁移、细胞存活率整体高于SDF-1α诱导下各组(P<0.05)。结论过表达CXCR4可增强EPCs的迁移能力,在SDF-1/CXCR4调控轴中加强EPCs对VSMCs迁移和增殖的抑制作用,可用于防治血管再狭窄的细胞治疗。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2017年15期）
血管平滑肌细胞迁移论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:动脉粥样硬化是一种慢性炎症性病变。肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,C.pneumoniae)感染作为一种新的危险因素与动脉粥样硬化发生发展关系密切,但其导致动脉粥样硬化的发病机制并不完全清楚。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)从血管中膜向内膜迁移是动脉粥样硬化发病的关键环节之一。本课题组前期研究发现,C.pneumoniae感染可促进VSMC的迁移,但具体分子机制尚未解明。近年研究显示,病原体感染可上调白细胞介素(interleukin,IL)-17C的表达,且与细胞迁移有关。本研究拟建立C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型和体外C.pneumoniae感染大鼠原代VSMC模型,旨在探讨IL-17C在C.pneumoniae感染促进VSMC迁移中的作用及其分子机制。方法和结果:第一部分:C.pneumoniae感染通过诱导IL-17C的表达促进VSMC迁移首先利用C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型以及体外C.pneumoniae感染VSMC模型,探讨C.pneumoniae感染对IL-17C表达的影响。分别采用免疫荧光、实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)以及Western blot实验检测C.pneumoniae感染的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC以及大鼠VSMC中IL-17C的表达。随后,分别利用重组IL-17C(recombinant IL-17C,rIL-17C)蛋白与VSMC共培养和RNA干扰技术改变VSMC中IL-17C的表达水平,采用Transwell实验观察C.pneumoniae感染对VSMC迁移能力的影响,以明确IL-17C在C.pneumoniae感染促进VSMC迁移中的作用。研究结果显示,C.pneumoniae感染能够上调ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC以及大鼠VSMC中IL-17C的表达。rIL-17C刺激可促进VSMC迁移,而沉默IL-17C的表达可抑制C.pneumoniae感染诱导的VSMC迁移。以上结果表明,C.pneumoniae感染可通过诱导IL-17C的表达促进VSMC迁移。第二部分:C.pneumoniae感染VSMC通过激活c-Fos/ERK通路促进IL-17C的表达利用C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型以及体外C.pneumoniae感染大鼠原代VSMC模型,确认C.pneumoniae感染对c-Fos表达及活化的影响。分别利用免疫荧光和Western blot实验检测C.pneumoniae感染ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC和大鼠VSMC中c-Fos表达及活化水平。为进一步证实c-Fos在C.pneumoniae感染VSMC促进IL-17C表达中的作用,应用细胞核转染技术使VSMC中c-Fos过表达,同时利用c-Fos siRNA以及细胞核转染技术转染c-Fos Ser32和Thr325位点的突变质粒分别抑制c-Fos的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化,采用Western blot实验检测VSMC中IL-17C的表达。随后,利用(Chromatin immunoprecipitation,CHIP)实验检测C.pneumoniae感染VSMC后c-Fos与IL-17C启动子区域的结合情况,Western blot实验检测C.pneumoniae感染和过表达c-Fos后ERK的磷酸化水平;给予ERK磷酸化抑制剂PD98059预处理后,Western blot实验检测过表达c-Fos后VSMC中IL-17C的表达。实验结果显示,C.pneumoniae感染可促进ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化病变内VSMC以及大鼠VSMC中c-Fos表达及活化。过表达c-Fos可上调VSMC中IL-17C的表达,分别抑制c-Fos的表达及Ser32和Thr325位点的磷酸化后,C.pneumoniae感染促进IL-17C表达的作用被显着抑制,表明C.pneumoniae感染VSMC通过诱导c-Fos的表达及活化促进IL-17C的表达。但C.pneumoniae感染未能增强c-Fos与IL-17C启动子区域的结合;C.pneumoniae感染和过表达c-Fos均可促进VSMC中ERK的磷酸化;而给予PD98059预处理后,过表达c-Fos所诱导的IL-17C高表达则被显着抑制。以上结果表明,C.pneumoniae感染VSMC通过激活c-Fos/ERK通路促进IL-17C的表达。第叁部分:C.pneumoniae感染VSMC通过IL-17C激活ERK而促进c-Fos的表达及活化分别利用rIL-17C蛋白与VSMC共培养,采用Western blot实验检测VSMC总蛋白和核蛋白中c-Fos蛋白的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化水平,以明确IL-17C对c-Fos表达及活化的影响;随后,采用Western blot实验检测VSMC中ERK的磷酸化水平,并在给予PD98059预处理后,采用Western blot实验检测rIL-17C刺激后VSMC总蛋白和核蛋白中c-Fos蛋白的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化水平。最后,利用IL-17C siRNA沉默IL-17C的表达,Western blot实验检测C.pneumoniae感染VSMC后c-Fos的表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化水平,以观察C.pneumoniae感染VSMC后,IL-17C对c-Fos的表达及活化的影响。实验结果显示,rIL-17C可促进VSMC中c-Fos表达及其Ser32和Thr325位点的磷酸化;且rIL-17C可促进ERK活化,而抑制ERK的活性后,rIL-17C促进c-Fos表达及c-Fos Ser32和Thr325位点磷酸化的作用被明显抑制,表明IL-17C可通过激活ERK促进c-Fos的表达及活化。而沉默IL-17C的表达后,C.pneumoniae感染促进c-Fos表达及活化的作用被显着抑制。以上结果表明,C.pneumoniae感染VSMC后通过IL-17C激活ERK而促进c-Fos表达及活化。结论:C.pneumoniae感染可能通过c-Fos/IL-17C通路促进VSMC迁移。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
血管平滑肌细胞迁移论文参考文献
[1].俞启遥,王丹琳.miR-30b对血管平滑肌细胞迁移能力的影响[J].中国动脉硬化杂志.2019
[2].郑佞波.肺炎衣原体感染通过c-Fos/IL-17C通路促进血管平滑肌细胞迁移[D].天津医科大学.2019
[3].朱慧娟.长链非编码RNAENST00000444488.1调控血管平滑肌细胞迁移的作用机制研究[D].北京协和医学院.2019
[4].方紫岑.藁本内酯对血管紧张素-Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞迁移的作用及机制研究[D].广东药科大学.2019
[5].张音,陆平,盛净.桔梗皂甙D对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响[J].老年医学与保健.2018
[6].高爽,李姗姗,齐颖新.血小板源性微囊在血管平滑肌细胞迁移中的作用[C].第十二届全国生物力学学术会议暨第十四届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编.2018
[7].殷佩,王颖,沈振亚.SMAD4低表达促进人血管平滑肌细胞迁移和凋亡[J].江苏大学学报(医学版).2018
[8].吴校林,朱锐,李彬,刘文卫,周青.Wnt3a通过整合素连接激酶调节血管平滑肌细胞迁移和黏附[J].重庆医学.2017
[9].杨晓琨,马晓伟,王萌,肖学凤.辛通畅络中药复方对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响[J].天津中医药.2017
[10].何灿粲,计晓娟,余更生,毕杨,朱旭.过表达趋化因子受体4的内皮祖细胞影响血管平滑肌细胞迁移、增殖[J].第叁军医大学学报.2017
标签：血管平滑肌细胞; microRNA-30b; E-Cadherin; 细胞迁移;