导读:本文包含了固相时间分辨荧光免疫分析论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:磁珠,时间分辨,乙肝表面抗原,乙肝e抗原
固相时间分辨荧光免疫分析论文文献综述
任志奇[1](2016)在《基于磁珠固相载体的时间分辨荧光免疫分析技术平台的建立及临床应用》一文中研究指出标记免疫分析,顾名思义,就是将标记技术和免疫分析技术相结合进行生化物质的分析测定。标记免疫分析技术的核心在于结合标记示踪技术的高敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高特异性。标记免疫分析作为一大类超灵敏、高特异性检测技术的总称,因其具有众多独特优点,已广泛应用于食品环境痕量物质的检测、基础医学研究、临床疾病的治疗及监测等领域。现代标记免疫分析技术最早始于1959年由美国学者Berson和Yallow等人首次以放射性同位素为标记物并成功应用于血浆胰岛素测定的放射免疫分析技术。自60年代开始得益于放射免疫分析技术的发展和完善,免疫学指标的检测灵敏度得到了极大提高。这种传统的分析方法特异性强,灵敏度高,但是由于标记的放射性同位素存在衰减周期和对生物及实验室环境的潜在危害等因素,大大限制了该试剂的使用寿命,使得该技术的发展受到了一定程度的制约。到了70年代,瑞典科学家首先采用酶取代同位素建立了酶标记免疫分析技术,酶标记物避免了对环境污染和人身危害,同时试剂有效期较长,使得标记免疫分析在非放射性标记免疫分析技术的道路上得到了长足的发展。至今为止,随着标记物的不断拓展和标记技术的进步,又研发出以胶体金为标记物的胶体金免疫分析技术,以荧光素为标记物的荧光免疫分析技术,以酶学、化学发光底物为基础的化学发光免疫分析技术、以电化学为基础的电化学发光免疫分析技术和以镧系稀土元素为标记物的时间分辨荧光免疫分析技术等等。它们检测的反应模式基本相同,依据标记物的不同而采用的测量模式及所收集的信号有所差别。标记免疫分析技术的发展革新离不开新标记物的不断发现,同时得益于单克隆抗体和基因工程抗体技术的应用,极大地促进了免疫放大技术的发展,显着提高了免疫检测的敏感性和特异性。正是有赖于新技术和新方法不断涌现,标记免疫分析至今已成为一类检测微量和超微量生物活性物质和外环境无机物的生物化学免疫分析技术,广泛应用于食品安全和环境卫生领域的细菌、病毒、真菌、毒素、寄生虫、药物及农药残留的检测,更是在临床医学诊断领域的肿瘤标记物、传染病、糖尿病、激素、产前筛查、药物及药物代谢物的辅助诊断和治疗过程的监测发挥着不可替代的作用。时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)是20世纪80年代初发展起来的最具发展前途的非放射免疫分析技术,是继放射免疫分析之后标记物发展的一个新的里程碑,已成为生物医学研究和临床超微量生化检验中最有发展前景的分析手段。TRFIA采用叁价稀土离子铕(Eu3+)、钐(Sm3+)、铽(Tb3+)和镝 (Dy3+)及其鳌合剂作为示踪物,替代传统的酶、同位素、荧光素、化学发光和生物发光等物质来标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞,待反应体系包括抗原抗体免疫反应、生物素亲和素的亲和反应、核酸探针杂交反应等发生后,利用时间分辨荧光测量法和光谱分离技术排除样品中非特异性干扰,测定最后产物中的荧光强度,从而有效地提高了检测的灵敏度,它的检测限可超过10-8mol。TRFIA以稀土元素作为标记物,具有激发光谱带宽、发射光谱带窄、Stokes位移大、荧光衰变时间长、荧光强度高、标记物制备简便及理化性质稳定、储存时间长、无放射性污染、不受样品自然荧光干扰和可重复激发测量等优越性,并可实现多标记对同一样品的多个待测物的同时检测和自动化,因而倍受生物医学工作者的青睐。我国是稀土元素大国,对TRFIA开展深入研究和大力推广其科研成果的产业化发展,有利于提高我国生物医学检测技术的发展和竞争力。至今为止微孔板仍是国内外免疫分析技术中免疫分析发生反应和信号检测的主要载体。抗原、抗体和其它生化物质通过多种机制吸附至载体表面,包括依靠疏水键、流水/离子键的被动吸附和引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合,以及通过表面改性后的亲水键结合。随着临床诊断对免疫分析技术要求的不断提高,以聚苯乙烯板为固相载体的缺点日益显着:(1)抗原抗体通过物理吸附包被在微孔板上,结合效率低且浪费原料;(2)微孔板表面积一定,抗原抗体包被量有限,从而限制检测灵敏度和检测上限;(3)微孔板内固液相反应接触面积小,反应时间长;(4)对于整条的微孔板,临床样品检测不能随到随做,须积累到一定的样本量后统一测量。磁性纳米颗粒是纳米粒子的一种,是20世纪50年代研制出的一种新型功能材料。磁性纳米颗粒在外加磁场的作用下,能够快速地与底液相分离,具有操作简便、分离效率高、较大的比表面积及良好的物理稳定性等优点,是一种性能优良的磁性分离载体。目前,将磁性纳米颗粒高效的分离和富集作用与免疫学反应的高度特异性相结合,成为了近年来发展迅速的一项新的免疫学技术——免疫磁珠,在细胞分选、免疫检测和疾病诊断、癌症治疗、食品及环境中微生物检测等领域得到越来越广泛的应用。磁珠表面通过外部修饰的功能基团,可结合活性蛋白质而作为抗原抗体反应的载体。当偶联在磁珠上的抗体与特异性抗原物质结合后,则形成“磁珠-抗体-抗原免疫复合物”,该复合物具有强磁响应性,在磁力的作用下定向移动,使复合物与液体中其他物质分离,而达到分离、浓缩、纯化特异性蛋白物质的目的。作为整个免疫反应和信号收集的载体,磁珠相比传统的微孔板具有显着优越性:(1)纳米磁珠比表面积大,能结合更多的蛋白分子,依据磁珠用量可大大提高检测范围;(2)通过磁珠表面的化学基团与蛋白形成共价偶联,相对以聚苯乙烯为材料的微孔板的物理吸附作用更牢固,稳定性更高,同时节省试剂原料;(3)免疫磁珠均匀悬浮于反应溶液中,大大增加与样本中的待测物反应接触面积,可减少反应所需的样本量,同时能更快达到反应动态平衡,从而加快反应速度和节省反应时间;(4)将连有多种捕获蛋白的磁珠与镧系元素示踪物的多标记技术联合应用,实现同一样本中多个待测物的同时检测,并且易实现全自动个体化检测,实验样本随到随做。近年来在免疫检测行业内开发出的磁珠与传统的酶联免疫分析及化学发光免疫分析相结合形成的磁珠酶联免疫分析技术、磁珠化学发光免疫分析技术,该技术已广泛开展并应用至临床疾病检测。据文献报道和市场调研,目前市面上基于时间分辨荧光免疫分析技术的试剂依旧基于传统的微孔板式免疫分析,并且在结合免疫磁珠和时间分辨荧光免疫分析技术应用于临床疾病标志物分子检测方面缺少全面而准确的系统性研究。鉴于此,本研究对基于磁珠新型载体的免疫分析平台进行全面而准确的临床应用评估。对血清中不同类型的蛋白分子(包括大分子抗原抗体、半抗原及小分子单价抗原)而采用不同的反应模式进行研究,根据待测物的性状及检测的具体条件而设计不同的检测模式,包括双抗体夹心法、双抗原夹心法、竞争法等。本实验采用乙型肝炎病毒表面抗原(Hepatitis B surface antigen, HBsAg)及e抗原(Hepatitis Be antigen, HBeAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(Antibody to hepatitis B surface antigen, anti-HBs)、游离甲状腺素(Free Thyroxine, FT4)叁种在方法学上具有代表性的血清标志物,分别对双抗体夹心法、双抗原夹心法以及竞争法叁种不同的反应模式进行可行性分析。本课题实验内容主要分为叁大部分:(1)采用双抗体夹心反应模式,研制HBsAg和HBeAg磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂;(2)采用双抗原夹心反应模式,研制抗-HBs磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂;(3)采用直接竞争反应模式,研制FT4磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂。实验设计上涵盖:(1)摸索不同粒径、不同化学基团修饰的磁珠连接蛋白,选取合适的磁珠作为固相载体并且优化连接工艺和镧系稀土元素螯合物标记蛋白;(2)反应体系的建立和优化,并通过优化的反应体系对试剂的各项性能指标作出全面而整体的评价,包括准确度、分析灵敏度、检测范围、剂量-反应曲线、特异性、精密度、抗干扰性和稳定性分析;(3)用自制试剂与国外同类进口诊断试剂进行平行比对,评价其初步应用于临床诊断的可行性。利用磁珠作为固相载体建立的时间分辨反应体系所具有的快速、小样品量、检测范围宽、高灵敏度、小型化等特点极大满足临床随诊检测的需要,将使其具有更广阔的临床应用前景。实验一研究结果:(1)自制HBsAg磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂在最优条件下,分析灵敏度为0.02 IU/mL,线性范围达0.2~700 IU/mL。检测国家参考品的实测浓度与期望浓度的比值在0.925~1.067之间,分析内和分析间变异系数分别在为4.7%~8.7%和3.8%~7.5%之间,符合试剂鉴定要求。将高浓度的HBeAg、 HBcAg、HCV、HIV、TP、RF阳性样品用本试剂测定,无明显交叉反应。检测质控样本时不受血红蛋白、甘油叁酯、胆红素的干扰。将自制HBsAg试剂与雅培公司化学发光试剂对399份血清样本进行平行比对实验,临床特异性和敏感性符合率均100%,经配对计数资料卡方检验:McNemar检验结果P=1(双侧);K系数检验结果,K=1,P=0.000,说明两种方法吻合度有统计学意义且较强。再将231份双阳性血样测定结果分别设为横坐标和纵坐标做线性相关分析,相关方程为:Y=1.182X-0.017,相关系数r=0.989,P<0.001。经上述统计学处理结果表明,两种检测方法吻合度有统计学意义,临床血样测值均具有显着相关性。(2)自制HBeAg磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂在最优条件下,分析灵敏度为0.021PEI U/mL,线性范围达0.4-160 PEI U/mL。检测国际参考品不同稀释比例样品的实测浓度与期望浓度的比值在0.942~0.978之间,分析内和分析间变异系数分别在为2.8%~4.3%和4.2%~6.0%之间,符合试剂鉴定要求。将高浓度的HBsAg、HBcAg当作样品用本试剂测定,无明显交叉反应。检测质控样本时不受血红蛋白、甘油叁酯、胆红素的干扰。将自制试剂与雅培公司的化学发光试剂对257份血清样本进行平行比对实验,临床特异性和敏感性符合率均分别为95.8%和98.9%,经配对计数资料卡方检验:McNemar检验结果P=1(双侧);K系数检验结果,K=0.951,P=0.000,说明两种方法吻合度有统计学意义且较强。再将184份双阳性血样测定结果分别设为横坐标和纵坐标做线性相关分析,相关方程为:Y=1.002X-0.333,相关系数r=0.974,P<0.001。经上述统计学处理结果表明,两种检测方法吻合度有统计学意义,临床血样测值均具有显着相关性。实验二研究结果:自制抗-HBs磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂在最优条件下,分析灵敏度为0.45 mIU/mL,线性范围达2~600 mIU/mL。检测自制参考品的实测浓度与期望浓度的比值在0.964~1.018之间,分析内和分析间变异系数分别在为2.4%~4.3%和3.5%~5.0%之间,符合试剂鉴定要求。将高浓度的HBeAb、 HBcAb当作样品用本试剂测定,无明显交叉反应。检测质控样本时不受血红蛋白、甘油叁酯、胆红素的干扰。将自制试剂与雅培公司的化学发光试剂对269份血清样本进行平行比对实验,临床特异性和敏感性符合率均分别为96.3%和98.1%,经配对计数资料卡方检验:McNemar检验结果P=0.687(双侧);K系数检验结果,K=0.932,P=0.000,说明两种方法吻合度有统计学意义且较强。再将210份双阳性血样测定结果分别设为横坐标和纵坐标做线性相关分析,相关方程为:Y=0.934X+2.511,相关系数r=0.988,P<0.001。经上述统计学处理结果表明,两种检测方法吻合度有统计学意义,临床血样测值均具有显着相关性。实验叁研究结果:自制FT4磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂在最优条件下,分析灵敏度为0.47 pmol/L,线性范围达2~200 pmol/L。检测自制参考品的实测浓度与期望浓度的比值在0.934~0.973之间,分析内和分析间变异系数分别在为2.7%~4.3%和4.0%~7.0%之间,符合试剂鉴定要求。将高浓度的T3、FT3、rT3当作样品用本试剂测定,无明显交叉反应。检测质控样本时不受血红蛋白、甘油叁酯、胆红素的干扰。自制试剂通过对240份健康查体者血清FT4进行分析,确定正常人参考值范围为11.0~25.0ng/mL。将自制试剂与雅培公司的化学发光试剂对202份血清样本进行平行比对实验,经配对卡方检验,符合率达到99.0%,血样测定结果分别设为为横坐标和纵坐标做线性相关分析,相关方程为:Y=0.986X+0.037,相关系数r=0.980,P<0.001。经上述统计学处理结果表明,两种检测方法吻合度有统计学意义,临床血样测值均具有显着相关性。综上所述,本研究利用磁珠作为固相载体结合时间分辨免疫分析技术,成功研发出基于双抗体夹心、双抗原夹心及竞争法反应模式的试剂,用于检测人血清中HBsAg、HBeAg、抗-HBs及FT4四种不同血清分析物。经评价,磁珠时间分辨荧光免疫分析试剂的各项指标(准确度、灵敏度、精密度、特异性、抗干扰性等)均满足临床检测试剂要求,与同类进口试剂比较,其临床特异性和敏感性均无显着差异,线性相关分析具有显着相关性。本文全面而准确地系统性阐述了磁珠作为固相载体能够提高检测灵敏度,扩大线性范围,缩短分析时间,提高检测效率等优点,表明了基于磁珠的时间分辨荧光免疫分析平台应用于临床疾病标志物检测的可行性,有望通过进一步优化应用于生产,开发出符合临床分子诊断和食品环境微量物质检测等需求的免疫分析试剂,对标记免疫分析技术的开拓与发展具有非常重要的意义。(本文来源于《南方医科大学》期刊2016-05-01)
党丹丹[2](2013)在《新型固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂中间体的合成》一文中研究指出时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术主要存在两个系统:解离增强系统和直接固相镧系系统。直接固相镧系系统比解离增强系统具有更多的优势,它能够进行直接检测,其中新型结构螯合剂的合成是关键。本文是在已合成的时间分辨荧光免疫分析螯合剂及其它多种中间体的基础上合成了两种联吡啶类新型化合物,并对其结构进行了表征。主要工作如下:1、从双功能螯合剂的功能需求出发合成出了新的化合物4,4’-二溴-6,6’-二(N,N-二(叔丁酯基亚甲基)氨甲基)-2,2’-联吡啶,简化了处理纯化产物的过程也避免了使用毒性较大的甲醇。2、合成出了新型中间体化合物4,4’-二(对氨基苯乙炔基)-6,6’-二(N,N-二(叔丁氧基羰甲基)氨甲基)-2,2’-联吡啶,克服了酯基水解不易完全,荧光强度效果不理想,产率极低等因素。3、对新合成出来的化合物依次利用红外光谱、核磁共振、高分辨质谱等对其结构进行了表征,进而确定了上述化合物的结构。同时研究反应的温度、时间、投料比等因素对产率的影响,提高了产率,为最终合成出固相时间分辨荧光免疫分析的螯合剂提供了重要的中间体参考。(本文来源于《长春理工大学》期刊2013-03-01)
曹熙杰[3](2012)在《固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂中间体的合成》一文中研究指出时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)是20世纪80年代迅速发展起来的一种超高灵敏度的分析方法,在临床检测、生命科学、医学等研究领域中得到了广泛的应用,已成为一项极具发展前景的分析手段。固相时间分辨荧光免疫分析法(DSLFIA)是TRFIA的一种新的体系。其主要原理为利用稀土铕离子的特殊荧光性,通过化合物与铕离子螯合后,在外部光源激发下发射出不受其它背景光源干扰的荧光信号。因其操作简便、测量准确、不易受检测环境影响的特点拥有极佳的发展前景。本论文叙述了一种新型固相TRFIA螯合剂中间体4,4’-二(对氨基苯乙炔基)-6,6’-二(N,N—二(乙氧基羰甲基)氨甲基)-2,2’-联吡啶的合成过程,研究了反应温度、反应时间、投料比、加料方式等因素对产率的影响,改进了实验方法,提高了产率。通过红外光谱、核磁共振、等手段对各步产物进行了表征,证明了该化合物结构的正确性及其合成方法的可靠性,为时间分辨荧光免疫分析螯合剂的研制提供了基本保证。(本文来源于《长春工业大学》期刊2012-03-01)
宋克非,张佩杰[4](2011)在《多功能灵敏固相时间分辨荧光免疫分析仪设计》一文中研究指出针对固相时间分辨荧光光谱的测量,设计出一种全新的固相时间分辨荧光免疫分析系统。使用氮分子激光器作为激发光源,采用积分球和单色仪相结合的荧光收集结构,使杂散光对样品荧光的影响降到最低;用光电倍增管进行光电转换,在500~700 nm范围实现了高分辨荧光光谱测量;利用数字方式实现取样积分功能,提高了系统的信噪比。系统可实现荧光寿命、时间分辨荧光光谱、物质浓度的自动测量,仪器的检测灵敏度可达10-12 mol/L,线性范围为10-12~10-9 mol/L,稳定性相对误差小于3%,荧光光谱分辨为0.5 nm。(本文来源于《仪器仪表学报》期刊2011年11期)
高素芹,杜凌云,王术皓[5](2010)在《基于固相抗体模式时间分辨荧光免疫分析测定雌叁醇》一文中研究指出采用二步标记法,借助二乙烯叁胺五乙酸酐,将Eu3+标记到雌叁醇完全抗原上,基于固相抗体竞争反应模式,建立了时间分辨荧光免疫分析测定雌叁醇的新方法。在优化的条件下,方法的线性范围为0.005—1000ng·mL-1,检出限为4pg·mL-1。该方法用于检测血清中雌叁醇的含量,结果令人满意。(本文来源于《光谱实验室》期刊2010年03期)
高素芹,包玉红,孙梅梅,杜凌云,王术皓[6](2009)在《基于固相抗体竞争模式时间分辨荧光免疫分析测定雌叁醇》一文中研究指出基于固相包被抗体模式进行免疫反应,将E3抗体包被在微孔板上,加入的E_3完全抗原和E_3将竞争结合板上有限的抗体后,进行荧光测定,建立了时间分辨荧光免疫检测雌叁醇(E_3)的方法。在此优化条件下,方法的线性范围0.005~1000 ng/mL,最低检出限4 pg/mL。所建立的方法用于检测血清中雌叁醇的含量。(本文来源于《中国化学会第十五届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文集》期刊2009-11-01)
张未来,宋克非,王云磊,潘利华,马庆军[7](2009)在《固相时间分辨荧光免疫分析仪数据采集系统的设计》一文中研究指出设计了一种基于复杂可编程逻辑器件(CPLD)的固相时间分辨荧光免疫分析仪的高速数据采集系统。采用将荧光寿命(从几百纳秒到十几个毫秒)分成13个区间,在不同的区间选用不同的采样频率的方法解决了采用统一采样频率不能满足精度要求的问题。使用VHDL硬件描述语言设计了CPLD内部逻辑电路,实现了采样时间、延迟时间、采样频率在线设置,具有操作方便,实时性能好等优点。实验结果表明:该系统具有荧光寿命测量和时间分辨荧光谱测量两个功能,采样个数可在1~8192内任意设置,延迟时间可在1~65535μs内调节,分辨率为1μs,能够很好地适应大范围荧光寿命的精细检测。(本文来源于《中国光学与应用光学》期刊2009年04期)
刘婷婷,宁志刚,赫文龙,李俊玲,张树恒[8](2009)在《固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中的蛋白质测定》一文中研究指出利用新型双功能螯合剂—4,7-二氯磺酰基苯基-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸(BCPDA)进行固相时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)标记技术研究,结合标记牛血清白蛋白(BSA)实验,研究测定蛋白质方法,监测标记过程,计算回收率、标记比。确定考马斯亮蓝染色法为该体系标记研究中测定蛋白质含量方法。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2009年02期)
刘云霞[9](2009)在《新型固相时间分辨荧光免疫分析用铽(Ⅲ)螯合物的合成研究》一文中研究指出时间分辨荧光免疫分析是20世纪80年代以来发展起来的一项新的免疫分析技术,它使用具有荧光寿命长、Stokes位移大、特征峰尖锐等特点的稀土配合物作为标记物,通过延迟测量时间的方法,有效地消除背景荧光的干扰。因此,时间分辨荧光免疫分析法具有比其它免疫分析方法更高的灵敏度。时间分辨荧光免疫分析法中重要的是双功能螯合剂的合成,其中杂环母体、蛋白质连接基团和稀土离子螯合配位基团的合成是实现双功能的关键所在。本研究从直接固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂合成需要出发,以2,6-二溴吡啶为起始原料,经过氧化、硝化、还原、亲核取代等反应合成了2,6-二(3'-乙酯基-1'-吡唑基)-4-氨基吡啶及3-甲基吡唑、3-吡唑甲酸、3-吡唑甲酸乙酯几种重要的中间体。利用差热分析、红外光谱、~1H核磁、元素分析等测试手段对各步产物进行了表征。此外,还对部分中间体的合成条件、反应机理进行了研究。本实验中合成的化合物2,6-二(3'-乙酯基-1'-吡唑基)-4-氨基吡啶分子中羧基上的氧原子可通过穴状螯合物结构实现与镧系金属的配位;环上4-氨基则可通过取代反应引入其他基团实现与蛋白质的连接。(本文来源于《长春理工大学》期刊2009-03-01)
刘晓利[10](2009)在《固相时间分辨荧光免疫分析仪样品池的研制和应用》一文中研究指出固相时间分辨荧光免疫分析是一种超高灵敏度的分析方法,作为取代放射性免疫分析法的一种手段,该方法已经在临床和基础医学与生命科学中得到了较广泛的应用。为满足固相时间分辨荧光免疫分析研究需要,本研究根据自己设计着眼于DSLFIA体系关键技术之一设计研制不透明固相反射免疫反应池和增大样品池S/V比的固相载体制备方法研究.聚苯乙烯微孔板用吡啶:丙酮溶液(1:29)处理后,加入用22mL乙酸和10mL间甲酚溶解的尼龙-6,之后再加入吡啶0.4mL,室温转动0.5h时,聚苯乙烯微孔板涂层均匀,微孔板表面经过烷基化处理后,先加戊二醛溶液后,再加1,6-己二胺溶液接手臂后与抗体的标记率很好。显示出比常规物理吸附高3倍以上的灵敏度、CV<10%的高均一性及有效期大于叁个月的高稳定性。具有操作简便、成本低廉,可适用于时间分辨免疫分析、放射免疫分析、酶联免疫分析等,具有普遍的实用价值本研究对蛋白质连接技术发展具有重要意义,对多苯环螫合物、配位体与蛋白质连接研究具有实用价值。(本文来源于《长春理工大学》期刊2009-03-01)
固相时间分辨荧光免疫分析论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术主要存在两个系统:解离增强系统和直接固相镧系系统。直接固相镧系系统比解离增强系统具有更多的优势,它能够进行直接检测,其中新型结构螯合剂的合成是关键。本文是在已合成的时间分辨荧光免疫分析螯合剂及其它多种中间体的基础上合成了两种联吡啶类新型化合物,并对其结构进行了表征。主要工作如下:1、从双功能螯合剂的功能需求出发合成出了新的化合物4,4’-二溴-6,6’-二(N,N-二(叔丁酯基亚甲基)氨甲基)-2,2’-联吡啶,简化了处理纯化产物的过程也避免了使用毒性较大的甲醇。2、合成出了新型中间体化合物4,4’-二(对氨基苯乙炔基)-6,6’-二(N,N-二(叔丁氧基羰甲基)氨甲基)-2,2’-联吡啶,克服了酯基水解不易完全,荧光强度效果不理想,产率极低等因素。3、对新合成出来的化合物依次利用红外光谱、核磁共振、高分辨质谱等对其结构进行了表征,进而确定了上述化合物的结构。同时研究反应的温度、时间、投料比等因素对产率的影响,提高了产率,为最终合成出固相时间分辨荧光免疫分析的螯合剂提供了重要的中间体参考。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
固相时间分辨荧光免疫分析论文参考文献
[1].任志奇.基于磁珠固相载体的时间分辨荧光免疫分析技术平台的建立及临床应用[D].南方医科大学.2016
[2].党丹丹.新型固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂中间体的合成[D].长春理工大学.2013
[3].曹熙杰.固相时间分辨荧光免疫分析螯合剂中间体的合成[D].长春工业大学.2012
[4].宋克非,张佩杰.多功能灵敏固相时间分辨荧光免疫分析仪设计[J].仪器仪表学报.2011
[5].高素芹,杜凌云,王术皓.基于固相抗体模式时间分辨荧光免疫分析测定雌叁醇[J].光谱实验室.2010
[6].高素芹,包玉红,孙梅梅,杜凌云,王术皓.基于固相抗体竞争模式时间分辨荧光免疫分析测定雌叁醇[C].中国化学会第十五届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文集.2009
[7].张未来,宋克非,王云磊,潘利华,马庆军.固相时间分辨荧光免疫分析仪数据采集系统的设计[J].中国光学与应用光学.2009
[8].刘婷婷,宁志刚,赫文龙,李俊玲,张树恒.固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中的蛋白质测定[J].标记免疫分析与临床.2009
[9].刘云霞.新型固相时间分辨荧光免疫分析用铽(Ⅲ)螯合物的合成研究[D].长春理工大学.2009
[10].刘晓利.固相时间分辨荧光免疫分析仪样品池的研制和应用[D].长春理工大学.2009