导读:本文包含了指示细胞系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:内皮细胞,胚胎干细胞,TALEN,特异性
指示细胞系论文文献综述
胡志青,吴涌,王晓琳,周妙金,李卓[1](2016)在《联合TALEN构建特异性指示内皮细胞分化的报告细胞系》一文中研究指出目的联合TALEN技术在人胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)H9中针对内皮细胞特异性标志CD144基因位点靶向添加EGFP报告基因,构建可以特异性指示胚胎干细胞向内皮细胞分化的报告细胞系。方法 (1)构建针对H9 CD144位点的TALENs并检测其效率;(2)构建载体CD144N-EGFP;(3)联合TALENs与CD144N-EGFP核转H9,通过PCR、Southern blot对抗性克隆进行鉴定;(4)利用自主优化的方法进行内皮细胞分化,进行Western blot检测,CD31免疫荧光检测及流式分析。(5)T7E1检测脱靶情况。结果 1)测序法显示TALENs切割活性为16.67%;(2)基因打靶获得了EGFP基因定点整合的克隆;(3)内皮细胞分化后,可见EGFP绿色荧光,western blot证实EGFP蛋白表达,免疫荧光检测显示GFP与CD31共表达在同一细胞中,流式检测显示双阳性效率为29.87%。结论联合TALEN在ESCs的内皮特异性标志基因CD144位点定点靶入EGFP基因,构建出了可以特异性指示胚胎干细胞向内皮细胞分化的报告细胞系。(本文来源于《中华医学会第十五次全国医学遗传学学术会议暨中国医师协会医学遗传医师分会第一届全国学术会议暨2016年浙江省医学遗传学年会论文汇编》期刊2016-11-05)
许丰雯,徐丹,李森,王明晓,乔文涛[2](2011)在《以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立》一文中研究指出原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科.为了在细胞水平定量检测PFV的感染,建立了以萤火虫荧光素酶为报告基因的指示细胞系.在幼小仓鼠肾细胞BHK-21中转染含有PFV LTR启动子及其控制下的荧光素酶报告基因的质粒,经过G418筛选得到稳定整合的细胞系.当PFV感染指示细胞系时,其反式激活因子Tas激活LTR启动子,诱导下游报告基因的表达,通过检测荧光素酶的活性即可对PFV的感染进行定量检测.结果表明,该细胞系可特异指示PFV的感染,相比于传统观察细胞病变的方法,该指示细胞系更为灵敏,是PFV相关研究的有力工具,具有潜在的应用价值.(本文来源于《南开大学学报(自然科学版)》期刊2011年03期)
许丰雯,徐丹,王明晓,陈启民,耿运琪[3](2010)在《以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立》一文中研究指出原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科,它拥有复杂的基因组和与传统反转录病毒不同的特殊的基因表达调控机制。PFV自身可以编码反式激活因子Tas蛋白,它能够激活病毒的内部启动子(IP)和长末端重复序列(LTR)两类启动子起始的转录。(本文来源于《2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集》期刊2010-09-18)
马喆,郝鹏,姚雪,乔文涛,耿运琪[4](2006)在《牛泡沫病毒感染指示细胞系的建立》一文中研究指出泡沫病毒属反转录病毒科,具有广泛的宿主范围却至今未发现其致病性,是良好的基因转移载体骨架。在泡沫病毒感染的细胞中,许多并不发生形态上的变化,小能通过细胞病变效应(CPE)方法检测其感染状态。为此建立了一套可以简便、准确、敏感并快速的检测感染的方法。(本文来源于《第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集》期刊2006-10-01)
蒋一得[5](1989)在《指示细胞系结合腺苷磷酸化酶筛选试验检测隐性支原体污染》一文中研究指出支原体是细胞培养污染的一个主要原因。目前虽有若干种检测细胞污染支原体的方法,但大多耗时且复杂。腺苷磷酸化酶(adoP)存在于所有的支原体中,测定adoP活性可确定细胞培养是否受到支原体污染。然而,实验发现各种哺乳动物细胞具有不同的adoP活性,有些细胞自身具有较高的adoP活性,这可能导致假阳性结果。作者观察到一个口腔支原体变异株,用adoP筛选试验在细胞培养上清中不能检出,仅在细胞溶解产物中可检出低水平adoP活性。此外,发酵支原体污染的Jurkatt细胞培养提取物中只能检测到低adoP活性。为避免上述假阳性和假阴性结果,作者选择了具有低adoP活性的细胞系Ag8.653作为指示细胞系。将(本文来源于《国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册》期刊1989年06期)
指示细胞系论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科.为了在细胞水平定量检测PFV的感染,建立了以萤火虫荧光素酶为报告基因的指示细胞系.在幼小仓鼠肾细胞BHK-21中转染含有PFV LTR启动子及其控制下的荧光素酶报告基因的质粒,经过G418筛选得到稳定整合的细胞系.当PFV感染指示细胞系时,其反式激活因子Tas激活LTR启动子,诱导下游报告基因的表达,通过检测荧光素酶的活性即可对PFV的感染进行定量检测.结果表明,该细胞系可特异指示PFV的感染,相比于传统观察细胞病变的方法,该指示细胞系更为灵敏,是PFV相关研究的有力工具,具有潜在的应用价值.
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
指示细胞系论文参考文献
[1].胡志青,吴涌,王晓琳,周妙金,李卓.联合TALEN构建特异性指示内皮细胞分化的报告细胞系[C].中华医学会第十五次全国医学遗传学学术会议暨中国医师协会医学遗传医师分会第一届全国学术会议暨2016年浙江省医学遗传学年会论文汇编.2016
[2].许丰雯,徐丹,李森,王明晓,乔文涛.以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立[J].南开大学学报(自然科学版).2011
[3].许丰雯,徐丹,王明晓,陈启民,耿运琪.以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立[C].2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集.2010
[4].马喆,郝鹏,姚雪,乔文涛,耿运琪.牛泡沫病毒感染指示细胞系的建立[C].第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集.2006
[5].蒋一得.指示细胞系结合腺苷磷酸化酶筛选试验检测隐性支原体污染[J].国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册.1989