导读:本文包含了晶状体蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:晶状体蛋白,结直肠癌细胞,细胞增殖,细胞凋亡
晶状体蛋白论文文献综述
董华承,范丽昕[1]（2019）在《晶状体蛋白αβ对结直肠癌细胞生物学行为的影响》一文中研究指出目的探讨晶状体蛋白αβ(Crytallinαβs)对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法选取5种结肠癌细胞:HCT116、HT29、LoVo、SW-480、SW620,测量Crytallinαβs在五种癌细胞中表达情况,其中SW-480中可以呈现高表达,故本研究选取SW480在多种结直肠癌细胞为靶细胞,培养该结直肠癌细胞并转染,转染成功后使用实时定量PCR方法检测在结直肠癌组织中的蛋白表达水平,使用MTT法检测该结直肠癌细胞增殖能力,并染色观察结直肠癌细胞凋亡情况,使用Transwell实验检测结直肠癌细胞侵袭能力,使用划痕实验检测结直肠癌细胞迁移能力,使用Western blot检测AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果与NC组和空白对照组比较,Crystallin-shRNA组结直肠癌细胞的蛋白表达显着降低(P<0.05);与NC组比较,Crytallinαβ-shRNA组结直肠癌细胞的细胞增殖能力显着减弱(P<0.01);与NC组比较,Crytallinαβ-shRNA组有效促进了结直肠癌细胞的凋亡(P<0.01);与空白组和NC组比较,Crytallinαβ-shRNA组Bcl-2蛋白表达显着下降(P<0.01),Bax蛋白表达上升(P<0.01)。结论 Crytallinαβ可以抑制结直肠癌细胞的增殖和转移,同时可以通过调控AMPK/mTRO信号通路促进结直肠癌细胞的凋亡。(本文来源于《中国煤炭工业医学杂志》期刊2019年03期）
曹娟,马波,吕伯昌[2]（2018）在《α-硫辛酸对果糖诱导的实验性白内障大鼠的氧化应激、晶状体蛋白以及Ca~(2+) ATPase活性的影响》一文中研究指出目的探讨α-硫辛酸对果糖诱导的实验性白内障的氧化应激、晶状体蛋白以及Ca~(2+) ATPase活性的影响。方法选择健康SD大鼠30只,20只大鼠通过果糖诱导建立实验性白内障模型(模型组);另外10只大鼠为空白组,不建立白内障模型。模型组中分为治疗组10只大鼠与对照组10只大鼠,治疗组在粉末状的饲料中添加0. 3%α-硫辛酸进行饲养,对照组进行常规饲养。TUNEL法检测晶体上皮细胞凋亡,酶联免疫法检测氧化应激指标,分光光度法测定晶状体蛋白活性,荧光法测定Ca~(2+) ATPase活性。结果模型组泪液中的SOD值高于空白组,MDA值低于空白组;治疗组的泪液中的SOD值低于对照组,MDA值高于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。模型组的晶体上皮细胞凋亡率、晶状体蛋白活性、Ca~(2+) ATPase活性高于空白组,治疗组晶体上皮细胞凋亡率、晶状体蛋白活性、Ca~(2+) ATPase活性低于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论α-硫辛酸在果糖诱导的实验性白内障大鼠中能调节机体氧化应激平衡,降低晶状体蛋白以及Ca~(2+) ATPase活性,可维持晶状体透明性,从而发挥治疗效果。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2018年21期）
曹雨娟,邵珺,虞瑛青,姚勇,朱靖[3]（2018）在《双特异探针技术早期检测先天性白内障晶状体蛋白突变基因的研究》一文中研究指出目的:利用DNA探针杂交技术,结合显色探针技术建立一种新型、高灵敏的免疫检测体系,用于早期先天性白内障的筛查。方法:选取3个常染色体显性遗传的先天性白内障家系中患者14例,取静脉血并提取mR NA,建立CRYAB的捕获探针及显色探针。利用DNA探针,通过碱基配对原则形成叁明治结构(捕获探针-DNA探针-显色探针)检测入选者的血样。1家系6例患者静脉血利用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测αB-晶状体蛋白。结果:最佳条件下,双特异探针技术可检测到最低浓度的先天性白内障晶状体蛋白的突变基因,各突变位点检测率为99.5%～99.7%;ELISA法检测样本αB-晶状体蛋白上调,阳性率为85.9%。双特异探针技术敏感性更高,检测位点更多,ELISA法仅局限于蛋白检测水平,精确性不高。结论:双特异探针检测技术操作简单,灵敏度高,可重复性高,经济实惠,在临床上用于产前诊断、优生优育具有重要的应用价值。(本文来源于《国际眼科杂志》期刊2018年06期）
刘欢[4]（2018）在《氧化应激对RPE细胞αB-晶状体蛋白表达的影响》一文中研究指出目的探讨氧化应激对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞αB-晶状体蛋白(CRYAB)表达的影响。方法(1)用不同浓度的H_2O_2处理RPE细胞,用MTT方法检测细胞活性,选出对细胞存活率影响无统计学差异的H_2O_2处理条件,将RPE细胞按照H_2O_2处理时间分组:1h组、3h组、6h组;每组各用不同浓度H_2O_2(空白对照、100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L)处理。用Western Blot、RT-PCR法分别检测RPE细胞CRYAB的蛋白及基因表达。(2)用荧光标记的阴性siRNA和lipofectamin2000试剂按照不同浓度比例转染RPE细胞,选出最优转染条件进行后续实验。设计3条CRYAB的干扰RNA,选出沉默效果最佳者。(3)设置siRNA组、siRNA+H_2O_2组、阴性siRNA对照组(NC组)、H_2O_2组、空白对照组;转染时间为24h,200μmol/L的H_2O_2处理6h;用RT-PCR、Western Blot法分别检测RPE细胞CRYAB的基因及蛋白表达。结果(1)1h组H_2O_2浓度在100μmol/L时CRYAB的基因表达增加趋势明显(P<0.05),但CRYAB的蛋白增加并不明显(P>0.05);在1h组(H_2O_2浓度为200μmol/L、300μmol/L时)、3h组和6h组,随着H_2O_2浓度增加CRYAB的基因与蛋白表达都有明显增加,且差异有统计学意义(P<0.05);在相同浓度H_2O_2刺激下CRYAB的基因和蛋白表达量随时间延长而增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。(2)siRNA与Lipofectamine2000的比例在1:0.019,且siRNA浓度在105nM时转染效果最佳。(3)H_2O_2组与空白对照组、siRNA+H_2O_2组相比CRYAB的基因与蛋白表达均增高,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA组与siRNA+H_2O_2组、空白对照组相比CRYAB的基因与蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)RPE细胞CRYAB的表达呈H_2O_2剂量依赖性和时间依赖性;(2)设计的SiRNA-CRYAB-464能有效沉默RPE细胞CRYAB基因;(3)RPE细胞CRYAB基因沉默后,有效减少低剂量短时间(200μmol/L H_2O_2,6h)的氧化刺激后RPE细胞CRYAB的基因和蛋白的高表达。(本文来源于《东南大学》期刊2018-06-04）
朱莎[5]（2018）在《γS-晶状体蛋白突变致先天性白内障的机制研究》一文中研究指出研究目的:先天性白内障是造成儿童视力损害的主要原因之一,其中有约四分之一的患者发病与遗传相关。晶状体蛋白是晶状体最主要的结构蛋白,比重大约占晶状体中水溶性蛋白的90%,其中γS-晶状体蛋白又是重要的晶状体结构蛋白之一,对长期维持晶状体的屈光性和透明性有着重要作用。研究先天性白内障发生的具体机制有助于从根源上透彻了解相关突变基因的具体功能和致病途径,从而使得从基因或者蛋白质层面彻底预防先天性白内障的发生成为可能。目前关于γS-晶状体蛋白突变致先天性白内障的报道相对较少,对γS-晶状体蛋白致先天性白内障的具体机制研究也不够深入,所以本研究选取浙二眼科中心最近发现的两个已报道的γS-晶状体蛋白突变(G75V和G18D),研究突变对γS-晶状体蛋白结构和稳定性的影响,从而更加深入了解γS-晶状体蛋白突变致先天性白内障的具体分子机制。研究方法:通过聚合酶链反应技术和定点突变技术构建.γS-晶状体蛋白野生型和突变体的原核表达质粒pET-28a,转化至Rosetta大肠杆菌中大量诱导表达野生型及突变体蛋白并纯化;利用生物物理学方法,如圆二色光谱、荧光光谱等技术研究突变对蛋白质结构和稳定性的影响。同时构建γS-晶状体蛋白野生型和突变体的真核表达质粒pEGFP-N1,转染至人胚肾上皮细胞Hek293T中进行过表达,在共聚焦激光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的定位。研究结果:体外蛋白实验发现两个突变均降低了 γS-晶状体蛋白的稳定性,在高温或者高浓度盐酸胍环境下会促进蛋白的聚集。但是两个蛋白对γS-晶状体蛋白结构的影响不同:G75V突变一定程度上改变了γS-晶状体蛋白的二级结构和叁级结构,明显增加了蛋白的疏水面积,但在细胞实验中未引起细胞内的蛋白积聚;而G18D突变体并没有明显改变γS-晶状体蛋白的二级结构或者叁级结构,却引起了细胞内的蛋白聚集。研究结论:我们目前的研究表明G75V突变体改变了蛋白的二级和叁级结构,并显着增加了蛋白的疏水面积,同时确定了野生型γS-野生型晶状体蛋白的高稳定性,发现G75V和G18D突变体蛋白在热变性以及胍变性下出现稳定性的下降可能是先天性白内障发生的主要原因。这两个突变家系先证者表型主要为皮质型白内障,呈渐进性,突变患者白内障在外界环境的压力下出现逐渐加重的趋势,与实验结果相符。(本文来源于《浙江大学》期刊2018-04-01）
吴永娜,任程晖,张磊,李汛[6]（2017）在《αβ-晶状体蛋白在肿瘤中的研究进展》一文中研究指出αβ-晶状体蛋白(Cryab)是热休克蛋白家族中最重要的基因之一。Cryab在体内广泛表达,具有独特的生物学特性,主要作为分子伴侣参与蛋白质的合成、折迭、积聚、装配、运输和降解。最新研究证实Cryab在肿瘤中高表达,可作为癌基因在恶性肿瘤发生、发展中发挥重要作用。与肿瘤患者的预后有着密切关系,预示其存在潜在的应用价值。本文就Cryab基因的结构和功能,及其在恶性肿瘤中的研究进展和作用机制做一综述,以期为深入研究Cryab在肿瘤中的功能提供科学依据。(本文来源于《兰州大学学报(医学版)》期刊2017年05期）
高瑾,李丽,赵娟,朱骏,朱江[7]（2017）在《慢病毒介导的αB-晶状体蛋白基因沉默对子宫内膜癌ISK细胞增殖和迁移能力的影响》一文中研究指出目的:研究αB-晶状体蛋白(CRYAB)基因在子宫内膜癌增殖和迁移中发挥的作用。方法:利用慢病毒介导的RNA干扰技术,沉默子宫内膜癌ISK细胞系CRYAB基因。通过CCK-8、Transwell和细胞划痕实验分别检测CRYAB基因沉默后细胞增殖和迁移能力的变化。结果:Real-time PCR和Western blot结果均表明成功构建稳定转染的细胞株。CCK-8实验结果显示CRYAB病毒转染组与对照组相比,细胞的增殖能力显着降低(P<0.05);Transwell迁移实验和细胞划痕实验结果显示,病毒转染组的细胞迁移率明显低于对照组(P<0.01)。结论:慢病毒干扰载体能有效抑制CRYAB基因在子宫内膜癌细胞系ISK中的表达,进而抑制细胞增殖和迁移。证实CRYAB在子宫内膜癌侵袭和转移中发挥重要作用。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2017年18期）
冯雪,高香,牛纯青,刘堰[8]（2017）在《密码子优化后的αB-晶状体蛋白基因毕赤酵母重组质粒的构建及表达的初步研究》一文中研究指出αB-晶状体蛋白属于小热休克蛋白家族,具有分子伴侣活性。在阿尔茨海默病大脑中,星形胶质细胞表达的αB-晶状体蛋白明显上调,并且这些上调的αB-晶状体蛋白紧密地分布在β-淀粉样蛋白沉积周围。为了在分子水平上研究胞外αB-晶状体蛋白在阿尔茨海默病中的作用机制,需要获得大量具有生物学活性的αB-晶状体蛋白。根据毕赤酵母密码子偏好性对人αB-晶状体蛋白基因进行优化,并在目的基因3'端加上6个组氨酸标签,优化后的基因克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体p PIC9K上;电转入毕赤酵母GS115中;优化确定最佳表达条件为:BMGY与BMMY的转接比为2∶1,表达时间为72h,甲醇补加终浓度为0.5%;经Western blotting鉴定,获得20kDa的目的蛋白,以及18.6kDa和13.1kDa两个蛋白质片段,重组目的蛋白出现了部分降解,纯化获得20kDa目的蛋白;利用胰岛素还原法测定该片段具有分子伴侣活性,为进一步研究外源αB-晶状体蛋白在阿尔茨海默病中对星形胶质细胞的保护机制奠定基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2017年07期）
沈志伟[9]（2017）在《硅油对晶状体蛋白体外积聚性影响研究》一文中研究指出硅油具有低密度和高表面张力的理化特性,可以作为一种重要的玻璃体眼内压填充材料,用于治疗复杂性视网膜脱落症。但在使用过程中,也带来了一系列的眼科并发症,包括角膜病、前房硅油乳化、青光眼和白内障等。在硅油填充手术六个月后,白内障的发病率高达百分之百,但具体的致病分子机制仍不明确,有报导认为可能是硅油眼内填充手术结合多种因素诱发了白内障等疾病。然而在这些分析中都没有谈及硅油分子本身是否会对晶状体蛋白有直接的影响。早期有文献报道称硅油能够诱导某些蛋白的积聚,形成较大的蛋白积聚体,具体表现为蛋白类生物医药存储于残留硅油的容器内会导致蛋白发生积聚,如胰岛素、抗体等。为探讨硅油导致白内障的分子机制,本论文研究了硅油对晶状体蛋白积聚特性的影响。形成白内障最重要的因素是晶状体蛋白积聚形成淀粉样纤维,改变了原本透明的晶状体,使得晶状体白化。晶状体蛋白有多种组分,在晶状体内高度有序地组织以维持晶状体的高度透明,其成分在生命周期内基本不会变化。但随着个体年龄的增长,晶状体蛋白会越发不稳定,更容易形成淀粉样纤维,故白内障的发病与个体年龄成正相关性。晶状体蛋白分为α、β、γ叁个家族。β和γ家族蛋白在晶状体内功能尚不十分明确。在所有晶体蛋白中,α晶体蛋白占有50%,其组织中浓度可以达到几百毫克每毫升。α晶体蛋白分为αA-和αB-晶体蛋白,其功能是作为分子伴侣预防β和γ晶状体蛋白的积聚,维持晶状体的透明度,其中,αA和αB晶体蛋白在其它组织中均存在,αB更为存在更为普遍。因此,我们推测硅油填充手术后白内障的发病,可能是由于硅油直接与晶状体蛋白相互作用,使晶状体蛋白发生积聚导致的。我们以关键的晶状体蛋白αB(CRYAB)作为研究对象,在体外研究硅油对晶状体蛋白积聚性的影响。在本文中,我们使用了多种手段来研究CRYAB溶液在加入硅油后的积聚特性的变化。检测蛋白溶液在硅油存在条件下OD值的变化,发现硅油存在时蛋白溶液的OD值明显高于未含有硅油的对照组,且在一定的时间范围内,随着时间的延长,OD值也随之增加,说明硅油促进积聚的效果愈加明显。我们还使用纳米颗粒分析仪分析了蛋白积聚颗粒大小的变化,进一步证实了在一定时间范围内,硅油的存在能使蛋白积聚颗粒的粒度更大以及颗粒物浓度更高。对蛋白形成积聚物还使用了刚果红染色鉴定法,发现积聚物能被刚果红染成红色,且在偏振光显微镜下观察程苹果绿色,鉴定蛋白积聚物可能为淀粉样积聚。此外,使用硫磺素(ThT)测定蛋白质β片层结构含量随积聚过程的变化,结果发现随孵育时间延长ThT荧光值升高,也说明晶状体蛋白可能发生了淀粉样性质的积聚。使用圆二色谱仪测量晶状体蛋白的二级结构变化,发现α螺旋含量下降,β片层含量升高,说明α螺旋结构向β片层结构转变。此外,使用荧光分子ANS结合蛋白质分子的疏水区域,结果表明蛋白质表面的的疏水性增强,且加入硅油组的疏水性强于对照组,而且有随时间增长的趋势。使用了原子力显微镜和透射电镜对蛋白积聚物微观形貌进行表征,发现晶状体蛋白积聚后以寡聚颗粒、短纤维的形态存在。结合以上结果,我们推测硅油分子通过结合蛋白表面的疏水区域,使得内部疏水区域进一步暴露于水中,破坏蛋白结构的原有稳定性,使得晶状体蛋白分子加速向淀粉样纤维化积聚。这可能是硅油导致白内障的分子机制。(本文来源于《中国科学院研究生院(上海应用物理研究所)》期刊2017-05-01）
张峰,赵达,侯小明,袁得峰,张彦军[10]（2017）在《慢病毒介导的αB-晶状体蛋白基因沉默对胃癌细胞SGC-7901增殖和迁移能力的影响》一文中研究指出目的应用慢病毒转染技术研究αB-晶状体蛋白(CRYAB)基因沉默对人胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移能力的影响。方法构建CRYAB慢病毒载体转染人胃癌细胞株SGC-7901,获得稳定转染的细胞株,制备空载体作为阴性对照组(sh-ctrl组),实验组为CRYAB病毒转染组(sh-CRYAB组)。提取总RNA和蛋白,应用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测CRYAB的表达,应用CCK-8、Transwell和细胞划痕实验分别检测CRYAB基因沉默后细胞增殖和迁移能力的变化。结果慢病毒转染SGC-7901细胞后,CRYAB mRNA及蛋白水平显着降低(P<0.01,P<0.001),表明成功构建了稳定转染的CRYAB-shRNA胃癌细胞株。与sh-ctrl组比较,sh-CRYAB组细胞的增殖能力在第4天、第5天显着降低(P<0.05,P<0.01),sh-CRYAB组细胞迁移率显着降低(P<0.01)。结论 CRYAB表达沉默可降低胃癌细胞的增殖和迁移能力,CRYAB有望成为胃癌基因治疗的新靶点。(本文来源于《兰州大学学报(医学版)》期刊2017年02期）
晶状体蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨α-硫辛酸对果糖诱导的实验性白内障的氧化应激、晶状体蛋白以及Ca~(2+) ATPase活性的影响。方法选择健康SD大鼠30只,20只大鼠通过果糖诱导建立实验性白内障模型(模型组);另外10只大鼠为空白组,不建立白内障模型。模型组中分为治疗组10只大鼠与对照组10只大鼠,治疗组在粉末状的饲料中添加0. 3%α-硫辛酸进行饲养,对照组进行常规饲养。TUNEL法检测晶体上皮细胞凋亡,酶联免疫法检测氧化应激指标,分光光度法测定晶状体蛋白活性,荧光法测定Ca~(2+) ATPase活性。结果模型组泪液中的SOD值高于空白组,MDA值低于空白组;治疗组的泪液中的SOD值低于对照组,MDA值高于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。模型组的晶体上皮细胞凋亡率、晶状体蛋白活性、Ca~(2+) ATPase活性高于空白组,治疗组晶体上皮细胞凋亡率、晶状体蛋白活性、Ca~(2+) ATPase活性低于对照组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论α-硫辛酸在果糖诱导的实验性白内障大鼠中能调节机体氧化应激平衡,降低晶状体蛋白以及Ca~(2+) ATPase活性,可维持晶状体透明性,从而发挥治疗效果。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
晶状体蛋白论文参考文献
[1].董华承,范丽昕.晶状体蛋白αβ对结直肠癌细胞生物学行为的影响[J].中国煤炭工业医学杂志.2019
[2].曹娟,马波,吕伯昌.α-硫辛酸对果糖诱导的实验性白内障大鼠的氧化应激、晶状体蛋白以及Ca~(2+)ATPase活性的影响[J].临床和实验医学杂志.2018
[3].曹雨娟,邵珺,虞瑛青,姚勇,朱靖.双特异探针技术早期检测先天性白内障晶状体蛋白突变基因的研究[J].国际眼科杂志.2018
[4].刘欢.氧化应激对RPE细胞αB-晶状体蛋白表达的影响[D].东南大学.2018
[5].朱莎.γS-晶状体蛋白突变致先天性白内障的机制研究[D].浙江大学.2018
[6].吴永娜,任程晖,张磊,李汛.αβ-晶状体蛋白在肿瘤中的研究进展[J].兰州大学学报(医学版).2017
[7].高瑾,李丽,赵娟,朱骏,朱江.慢病毒介导的αB-晶状体蛋白基因沉默对子宫内膜癌ISK细胞增殖和迁移能力的影响[J].现代肿瘤医学.2017
[8].冯雪,高香,牛纯青,刘堰.密码子优化后的αB-晶状体蛋白基因毕赤酵母重组质粒的构建及表达的初步研究[J].中国生物工程杂志.2017
[9].沈志伟.硅油对晶状体蛋白体外积聚性影响研究[D].中国科学院研究生院(上海应用物理研究所).2017
[10].张峰,赵达,侯小明,袁得峰,张彦军.慢病毒介导的αB-晶状体蛋白基因沉默对胃癌细胞SGC-7901增殖和迁移能力的影响[J].兰州大学学报(医学版).2017