导读:本文包含了大鼠骨骼肌细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:离心运动,骨骼肌,Omi,Ucf-101
大鼠骨骼肌细胞论文文献综述
赵晓琴,孙君志,白胜超,李俊平,王瑞元[1]（2019）在《Omi的抑制剂Ucf-101对离心运动后大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响》一文中研究指出研究目的:观察丝氨酸蛋白酶(Omi)的特异性抑制剂Ucf-101对离心运动诱导大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响,以及骨骼肌组织Omi和XIAP的表达变化。探讨Omi在离心运动致骨骼肌细胞凋亡中的作用,为调节运动致骨骼肌细胞凋亡、预防运动损伤提供新的实验依据。研究方法:将健康雄性SD大鼠随机分为安静对照组(C)、离心运动组(E)、单纯阻断组(U)、DMSO组(D)和运动阻断组(EU)。除C组外,其余四组又随机分为实验后即刻、12 h、24 h、48 h、72 h组。E组与EU组大鼠在跑台上进行坡度为-16°的一次性离心运动;U组和EU组大鼠腹腔注射Omi特异性抑制剂Ucf-101(1.5 umol/kg);D组大鼠腹腔注射含0.5%DMSO的生理盐水,于实验后不同时间点分批取比目鱼肌待测。使用荧光酶联免疫吸附法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3,-8,-9,-12)的活性;Western Blot法分别检测Omi、凋亡抑制蛋白(XIAP)的蛋白表达。研究结果:(1)与安静对照组相比,单纯阻断组和DMSO组大鼠骨骼肌Caspase-3活性无明显差异。离心运动组和运动阻断组的大鼠不同时程骨骼肌Caspase-3活性均呈先升高后降低趋势,运动阻断后在除72 h的其余时间点Caspase-3活性均低于离心运动组,其中在12 h的最高峰处,运动阻断组比单纯运动组降低了15.6%;而且运动阻断组Caspase-3活性恢复到正常水平的时间较单纯运动组短,运动阻断组在48h即恢复到正常水平,而单纯运动组则在72h。(2)与安静对照组相比,单纯阻断组和DMSO组大鼠不同时程Caspase-9活性均无统计学差异。运动阻断后大鼠Caspase-9活性与离心运动组趋势相近,均呈一过性升高,且均在12 h到达最高峰。二者的不同是,运动阻断后各时间点Caspase-9活性均低于离心运动组,其中在运动阻断后12 h和48 h Caspase-9活性降低了30.8%和47.4%。而且运动阻断组后48 h Caspase-9活性即恢复到安静对照水平,而离心运动组则在72 h才恢复到安静对照水平。(3)与安静对照组相比,单纯阻断组和DMSO组大鼠不同时程Caspase-8活性均无明显差异。而运动阻断组大鼠不同时程骨骼肌组织Caspase-8活性与离心运动组趋势相同,均在实验后即刻明显升至最高,之后呈进行性下降,至48 h明显高于安静对照组,72 h恢复至安静对照组水平。运动阻断组后各时间点Caspase-8活性与离心运动组无明显差异。提示Ucf-101对离心运动后骨骼肌Caspase-8活性没有一定影响。(4)代表内质网途径的Caspase-12活性检测结果显示,与Caspase-8活性结果相同,Ucf-101对离心运动后骨骼肌Caspase-12活性没有一定影响。(5)与安静对照组相比,单纯阻断组和DMSO组大鼠不同时程骨骼肌组织Omi蛋白表达无明显差异。运动阻断组和离心运动组大鼠骨骼肌Omi蛋白表达在不同时程变化趋势相同,均呈先升高后降低的趋势,且均在12 h升至最高。不同的是,运动阻断组骨骼肌Omi蛋白表达在实验后即刻、12h和48h分别低于单纯运动组33.3%、15.4%和25.0%,并且二者恢复到安静对照组水平的时间也有所不同,运动阻断组在48 h恢复至安静对照水平,而离心运动组则在72 h才恢复至安静对照水平。(6)与安静对照组相比,单纯阻断组和DMSO组大鼠不同时程骨骼肌组织XIAP蛋白表达均无明显差异。而运动阻断组和离心运动组大鼠骨骼肌XIAP蛋白表达在不同时程变化趋势相同,均呈先升高后降低的趋势,且全程均明显高于安静对照组。不同的是,二者到达高峰的时间有所不同,运动阻断组在24 h到达最高峰,而离心运动组在48 h到达最高峰;而且运动阻断组XIAP蛋白表达在12h和24h明显高于离心运动组相应时间点,其余时间点均较低于离心运动组相应时间点。研究结论:Omi的特异性抑制剂Ucf-101可能通过抑制Omi的蛋白表达,促进XIAP的蛋白表达,减轻依赖Caspase-9介导的线粒体途径来减少运动后骨骼肌细胞凋亡的发生。(本文来源于《第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编》期刊2019-11-01）
罗维,周越,李显,王博发,艾磊[2]（2019）在《小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型的建立和验证》一文中研究指出研究目的:建立离体胰岛素抵抗模型既有利于在细胞和分子水平深入探讨胰岛素抵抗的发生发展机制,又有利于在体外进行胰岛素抵抗防治药物的研发和筛选,骨骼肌是胰岛素抵抗发生的主要部位,因此建立稳定可重复的骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型至关重要。鉴于目前关于建立骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的研究报道实验条件不一,方法各异,且胰岛素抵抗效果不稳定,本课题组在离体胰岛素抵抗模型建立中进行了较长期的研究。长期高糖是导致胰岛素抵抗和2型糖尿病的直接原因,也是体内胰岛素抵抗和2型糖尿病的主要特征,以高糖干预建立胰岛素抵抗离体模型对于胰岛素抵抗的在体研究具有更好的参考意义,本研究通过采用不同浓度葡萄糖干预C2C12不同时长,实时收集细胞检测其基础和胰岛素刺激下的荧光标记葡萄糖2-NBDG摄取水平和胰岛素信号通路相关蛋白的表达水平,探索高糖刺激与C2C12胰岛素抵抗之间的量效关系,期望构建稳定可重复的骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,促进胰岛素抵抗和相关疾病的病理机制探索及相关药物研发与筛选,进而推进胰岛素抵抗等慢性疾病的防治研究。研究方法:采用小鼠成肌细胞C2C12为研究对象,分别以正常分化液和含40、60mmol/L葡萄糖的分化液诱导分化,1)每天应用相差显微镜观察不同浓度葡萄糖处理对细胞汇聚、融合和形成多核肌管的影响;2)分化1、3、5、7天后应用2-NBDG法检测不同处理对细胞基础糖摄取和胰岛素刺激糖摄取的影响;3)分化5天和7天后应用Western blot方法检测不同干预对葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达的影响;4)分化5天后应用免疫荧光组化方法检测不同干预对GLUT4蛋白分布的影响。研究结果:60mmol/L葡萄糖处理:1)相差显微镜观察结果从形态学上显示高糖处理C2C12细胞3天后明显抑制细胞增殖分化,且存在时间依赖性,随着干预时间延长,对成肌细胞增殖分化的抑制更加明显,这将导致细胞葡萄糖摄取能力减弱,加快胰岛素抵抗和糖尿病的发展进程。2)葡萄糖摄取结果表明高糖处理5和7天后均明显抑制C2C12的基础糖摄取和胰岛素刺激的糖摄取(P<0.01),且处理5天后胰岛素刺激的糖摄取与基础糖摄取无差异(P>0.05),提示高糖干预明显降低C2C12基础和胰岛素刺激的糖摄取能力,且存在时间依赖性,以60mmol/L葡萄糖干预5天出现明显抑制,干预7天抑制效果进一步加强,说明60mmol/L葡萄糖干预5天后导致细胞葡萄糖摄取能力和胰岛素敏感性显着下降,产生胰岛素抵抗。3)Westernblot检测结果表明高糖处理5和7天后,胰岛素刺激的GLUT4表达与基础GLUT4表达无差异(P>0.05),而对照组差异显着(P<0.05),提示高糖干预明显降低C2C12基础和胰岛素刺激的GLUT4蛋白表达,且存在时间依赖性,60mmol/L葡萄糖干预5天明显抑制,干预7天抑制效果进一步加强,说明60mmol/L葡萄糖干预成肌细胞5天后导致胰岛素信号转导通路受损,到第7天后,受损程度进一步加深。4)免疫荧光组化检测结果表明高糖处理5天后明显减少C2C12细胞胞膜上GLUT4蛋白分布水平(P<0.01),提示高糖干预5天明显降低C2C12细胞膜GLUT4表达量,说明60mmol/L葡萄糖干预不仅导致细胞中GLUT4蛋白表达降低,同时抑制葡萄糖刺激的GLUT4蛋白向细胞膜的转运,进而抑制C2C12细胞中胰岛素刺激的葡萄糖摄取,导致胰岛素敏感性降低。40mmol/L葡萄糖也一定程度抑制成肌细胞增殖分化,导致成肌细胞葡萄糖摄取能力和GLUT4激活水平下降,但效果不如60mmol/L葡萄糖明显和稳定。研究结论:本研究通过高糖刺激成功构建较为稳定的小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,以60mmol/L葡萄糖刺激5天效果最好,通过形态学观察并检测基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力和GLUT4蛋白表达与分布能较好评价骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗水平。(本文来源于《第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编》期刊2019-11-01）
邵靖,许慧慧,徐涌[3]（2019）在《组蛋白去甲基酶KDM3A介导小鼠骨骼肌细胞中活性氧诱导的E2F1表达》一文中研究指出目的:研究在小鼠骨骼肌细胞凋亡过程中E2F1表达上调的表观遗传机制。方法:利用H_2O_2处理C2C12细胞,利用干扰RNA和瞬时转染相关因子,用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)与Western blot检测E2F1基因表达水平,染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)检测蛋白质与DNA的结合。结果:E2F1表达水平上调,同时伴随E2F1基因启动子上H3K9甲基化水平的下降。进一步研究发现,活性氧促进H3K9去甲基酶KDM3A结合到E2F1启动子上促进E2F1转录。相反,使用干扰RNA敲减KDM3A显着减弱活性氧引起的E2F1表达上调。KDM3A干扰同时降低了E2F1启动子上乙酰化H3与H3K4甲基化水平并恢复了H3K9甲基化水平。结论:KDM3A可能通过改变组蛋白修饰参与活性氧诱导的E2F1转录激活。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年10期）
杨平,苏若珂,邓璐,杨月瑶,王刚[4]（2019）在《利用小鼠骨骼肌细胞持续表达单链胰岛素类似物进行1型糖尿病模型鼠的长效基因治疗》一文中研究指出目的探讨Pluronic L64-电脉冲(L/E)体系介导的单链胰岛素类似物基因在骨骼肌组织的传递表达对1型糖尿病小鼠的治疗效果和影响。方法将胰岛素基因中的C肽区域换成(GGGGS)_3,克隆到pcDNA3.1(+)质粒中,构建载体pcDNA-INS。使用链脲佐菌素腹腔注射雄性BALB/c小鼠建立1型糖尿病小鼠模型,并分为L/E联合pcDNA3.1(+)空质粒治疗的L/E-pcDNA3.1(+)组、仅使用pcDNA-INS裸质粒治疗的pcDNA-INS组和L/E联合pcDNA-INS裸质粒治疗的L/E-pcDNA-INS组。模型小鼠在胫骨前肌注射相关质粒进行治疗,且根据治疗方案在注射1 h后进行Pluronic L64-电脉冲处理,并以生理盐水处理的正常小鼠(NC)组作为对照。记录各组小鼠的血糖、体质量、血清胰岛素含量、生存率、免疫组化、外形特征及组织病理等指标。结果 (1)pcDNA-INS质粒通过酶切和测序鉴定无误;(2)与NC组相比,模型小鼠血糖显着上升,体质量显着下降(P<0.05),且胰岛遭到严重破坏;(3)L/E-pcDNA-INS组的血糖水平和血清胰岛素含量显着缓解,与NC组较为接近,pcDNA-INS组的血糖缓解和胰岛素补偿远不及L/E-pcDNA-INS组(P<0.05),且与NC组之间的差异一直有统计学意义(P<0.05)。第4周免疫组化结果显示,L/E-pcDNA-INS组的胰腺胰岛素表达较少,但肌肉胰岛素表达量较高,且该组生存率较高,与NC组均为100%(12/12),L/E-pcDNA-INS组的病理结果和外形特征与NC组小鼠最为接近,L/E-pcDNA3.1(+)组与pcDNA-INS组在不同部位均有不同程度的病变发生,且鼠毛疏少粗糙,体形较小。结论 Pluronic L64-电脉冲体系与单链胰岛素类似物基因联合治疗1型糖尿病的效果较好,且无明显不良影响,可为相关研究提供实验依据。(本文来源于《四川动物》期刊2019年06期）
罗维,艾磊,李显,王博发,周越[5]（2019）在《小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型的建立和验证》一文中研究指出目的:建立稳定可重复的骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,促进胰岛素抵抗病理机制的探索及药物的研发与筛选。方法:采用小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12为研究对象,分别以正常分化液及含40和60 mmol/L葡萄糖的分化液诱导分化,每天用相差显微镜观察不同浓度葡萄糖处理对细胞汇聚、融合和形成多核肌管的影响;分别在分化1、3、5和7 d后应用2-NBDG法检测不同处理对细胞基础糖摄取和胰岛素刺激糖摄取的影响;在分化5 d和7 d后应用Western blot法检测不同干预对葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达的影响;分化5 d后应用免疫荧光组化法检测不同干预对GLUT4蛋白分布的影响。结果:形态学结果显示,经60 mmol/L葡萄糖(高糖)处理3 d后明显抑制C2C12细胞的生长分化;葡萄糖摄取结果表明高糖处理5 d和7 d后均明显抑制C2C12的基础糖摄取和胰岛素刺激的糖摄取(P<0.01),且处理5 d后胰岛素刺激的糖摄取与基础糖摄取的差异无统计学显着性(P>0.05); Western blot检测结果表明高糖处理5 d和7 d后,胰岛素刺激的GLUT4表达与基础GLUT4表达的差异无统计学显着性(P>0.05),而对照组差异显着(P<0.05);免疫荧光组化检测结果表明高糖处理5 d后明显减少C2C12细胞胞膜上GLUT4蛋白分布水平(P<0.01)。40 mmol/L葡萄糖处理也在一定程度上发挥作用,但效果不如60 mmol/L葡萄糖明显和稳定。结论:通过高糖刺激可成功构建较为稳定的小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,以60 mmol/L葡萄糖刺激5 d效果最好,通过形态学观察并检测基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力和GLUT4蛋白表达与分布能较好地评价骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗水平。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年09期）
李恩,叶魁,孙君志,苏全生[6]（2019）在《8周游泳运动对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞自噬的影响》一文中研究指出目的:探讨有氧运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞自噬及其相关蛋白表达水平的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为3组:正常饮食组(ND)、高脂饮食组(HFD)和高脂饮食+运动组(HFD+EXE)。HFD和HFD+EXE组大鼠实验全程进行高脂饮食喂养,HFD+EXE组于高脂饮食喂养8周后施以游泳运动干预,60 min/天,6天/周,持续8周。透射电镜观察腓肠肌内自噬溶酶体的数量,Western blot检测骨骼肌自噬蛋白LC3-II、LC3-II/LC3-I和Beclin-1表达情况。结果:HFD组FBG、HOMA-IR较ND组明显升高;运动干预后,HFD+EXE组FBG和HOMA-IR均有下降趋势。超微结构方面,HFD组线粒体出现明显损伤,部分线粒体可见空泡变性,HFD+EXE组线粒体损伤有明显好转,但各组均未发现自噬小体。与ND组比较,HFD组LC3-II、Beclin1自噬蛋白和LC3-II/LC3-I显着降低;运动干预后LC3-II、LC3-II/LC3-I和Beclin1出现升高趋势。结论:有氧运动可明显增加高脂饮食诱导的胰岛素抵抗骨骼肌的细胞自噬水平,进而维持骨骼肌的正常功能。(本文来源于《成都体育学院学报》期刊2019年04期）
姬梦晶[7]（2019）在《离心力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌细胞自噬相关因子的影响》一文中研究指出研究目的:观察离心力竭运动、钝挫伤对大鼠骨骼肌细胞自噬相关因子Beclin1、LC3,线粒体自噬相关因子PINK1在损伤后即刻、24h、48h不同时相的变化,探讨不同损伤方式过程中相关自噬因子的变化趋势与自噬水平的变化。研究方法:将雄性8周龄SD大鼠作为研究对象,共分为7个实验组,分别为安静对照组(C组)、离心力竭运动即刻组(E0组)、离心力竭运动24h组(E24组)、离心力竭运动48h组(E48组)、钝挫伤即刻组(DO组)、钝挫伤24h组(D24组)、钝挫伤48h组(D48组),每组各6只。安静对照组取材:将大鼠腹腔注射麻醉后宰杀,取后肢双侧股四头肌,分为两份,一份待测实时荧光定量PCR,一份待测免疫印迹试验Western Blot。力竭运动组和钝挫伤组取材相似:SD大鼠分别在损伤后即刻、24h、48h进行同样取材。研究结果:(1)Beclin1的RT-PCR实验结果:与C组相比E0组Beclin1 mRNA含量显着减少(P<0.05),E24、E48组BeclinlmRNA含量没有显着变化;另一方面,与C组相比DO组Beclin1 mRNA含量显着升高(P<0.01),D24组、D48组Beclin1 mRNA含量显着降低(P<0.05);(2)PINK1的RT-PCR实验结果:与C组相比,E0组PINK1 mRNA含量显着降低(P<0.05),E24组变化不显着,E48组PINK1 mRNA含量显着升高(P<0.05);另一方面,与C组相比,D0组具有显着性差异(P<0.01),且骨骼肌线粒体PINK mRNA1含量显着升高,D0组、D24组骨骼肌线粒体PINK1 mRNA含量显着升高(P<0.05),D48组骨骼肌线粒体PINK1 mRNA含量无显着性差异。(3)LC3的RT-PCR实验结果:与C组相比,E0组LC3mRNA含量显着降低(P<0.05),E24组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量没有显着变化,E48组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量显着升高(P<0.01);与C组相比,D0组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量显着升高(P<0.01),D24组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量无显着性变化、D48组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量显着降低(P<0.01);另一方面,D0组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量显着高于E0组(P<0.01);与E24组相比,D24组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量无显着性差异,D48组骨骼肌细胞中LC3 mRNA含量则显着低于E48组(P<0.05)。(4)LC3的Western blot实验结果:与C组相比,力竭运动损伤及钝挫伤各组大鼠骨骼肌LC3蛋白含量均显着升高(P<0.05)(P<0.01)。E24组大鼠骨骼肌LC3蛋白含量相较于E0组变化不明显;E48组时,自噬水平达到最高值,即力竭运动模型中自噬水平为逐渐升高的趋势;另一方面,与D0组相比,D24组骨骼肌LC3蛋白含量升高明显(P<0.01),而相较于D24组,D48组又呈现出降低的趋势,即在钝挫伤模型中,自噬水平升高较快,在24h达到峰值,在24h之后又逐渐降低。研究结论:(1)与C组相比,力竭运动即刻组(E0)Beclin1 mRNA、PINK1 mRNA、LC3mRNA含量均显着降低,提示力竭运动恢复早期,细胞自噬水平不高;但力竭后48小时组(E48)骨骼肌细胞中PINK1 mRNA、LC3 mRNA含量及LC3蛋白水平均显着升高,提示细胞自噬在恢复期有增强趋势。(2)另一方面,与C组相比,钝挫伤即刻组(DO)Beclin1 mRNA、PINK1 mRNA、LC3 mRNA含量均显着升高,表明钝挫伤后即刻及恢复早期,细胞自噬水平明显增高,随后有下降趋势,这可能是由于钝挫伤与力竭运动模型不同,钝挫伤比力竭运动损伤更严重,所以其自噬启动较快,而与力竭运动损伤相比,钝挫伤在各个变化时相自噬相关因子表达也存在差异。(本文来源于《扬州大学》期刊2019-06-19）
孙敏[8]（2019）在《不同的运动方式对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌细胞外基质的影响》一文中研究指出研究目的通过高脂膳食诱导建立小鼠胰岛素抵抗模型,研究胰岛素抵抗病理过程中骨骼肌细胞外基质成分变化,然后对胰岛素抵抗小鼠进行不同的运动方式干预,采用有氧和抗阻训练分析运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌细胞外基质重塑的影响。本研究为通过运动改善胰岛素抵抗和肥胖诱发的糖尿病机制提供了新的理论基础和依据。研究方法48只清洁级C57BL/6J小鼠按体重随机分为对照组(C组,n=12只)和高脂组(HF组,n=36只),分别进行普通饲料与高脂饲料喂养。饮食干预12周后进行糖耐量(GTT)与胰岛素耐量试验(ITT)。结果显示,与C组相比,HF组GTT、ITT曲线下面积(AUC)显着性升高(p<0.05),说明模型构建成功。随后将HF组小鼠随机分为高脂对照组(HF组,n=12),高脂有氧训练组(HF+AE组,n=12)和高脂抗阻训练组(HF+RT组,n=12),继续进行高脂饲料喂养,C组仍进行普通饲料喂养。HF+AE组采用有氧训练跑台干预,每周3次,每次持续70分钟;HF+RT组采用负重爬梯训练,每周3次,每次完成15组,共训练12周。干预结束后,检测小鼠空腹血糖水平,进行GTT、ITT实验测定胰岛素敏感性的变化。小鼠麻醉后腹主静脉取血,测定空腹血清胰岛素含量。小鼠腓肠肌细胞外基质胶原ColⅠ、ColⅢ和ColⅣ含量用免疫组织化学技术检测。小鼠肌肉细胞外基质84个基因的表达量用RT2 profiler PCR Arrays技术检测。差异的基因在蛋白水平上的变化用Western blotting技术检测。研究结果1.建模期小鼠体重变化高脂膳食喂养后,小鼠体重持续增加,HF组增长幅度较C组高,且在第2周开始,两组小鼠体重出现显着性差异,HF组体重24.86±1.26g显着性高于C组23.67±0.97g(p<0.05)。2.建模期葡萄糖耐量与胰岛素耐量试验结果葡萄糖耐量与胰岛素耐量试验过程中,HF组血糖浓度始终高于C组,计算AUC:GTT实验AUC,HF组28.45±3.19显着性高于C组21.44±2.29(p<0.05);ITT实验AUC,HF组17.61±5.38显着性高于C组12.64±4.10(p<0.05),表明12周高脂膳食可以诱导小鼠素抵抗。3.干预后小鼠体重变化十二周运动训练后,HF组小鼠体重52.58±2.39g显着性高于C组小鼠体重33.80±2.60g(p<0.05)。HF+AE组小鼠体重48.42±1.98g和HF+RT组小鼠体重45.91±1.80g显着性低于HF组(p<0.05);HF+RT组低于HF+AE组小鼠体重,且在运动干预前五周内具有显着性差异(p<0.05)。4.运动干预后小鼠葡萄糖耐量与胰岛素耐量实验结果葡萄糖耐量与胰岛素耐量试验结果显示,HF血糖浓度始终高于C组、HF+AE和HF+RT组,计算AUC结果显示,GTT实验:HF+AE组32.42±7.47和HF+RT组30.39±6.62较HF组39.73±6.97均显着性下降(p<0.05);ITT实验:HF+AE组13.50±0.74和HF+RT组11.74±1.27较HF组15.78±0.84均显着性下降(p<0.05),且两个运动组之间没有显着性差异(p>0.05)。5.运动干预后小鼠空腹血糖与胰岛素水平运动后空腹血糖和胰岛素结果显示,HF组FBG 7.5±0.33mmol/L显着性高于C组4.03±0.21mmol/L(p<0.05),FINSHF组24.49±1.72mIU/L显着性高于C组13.05±1.47mIU/L(p<0.05);HF+AE组FBG6.5±0.41mmol/L和HF+RT组6.15±0.62mmol/L显着性低于HF组(p<0.05),FINS HF+AE组20.89±0.87mIU/L和HF+RT组19.89±1.76mIU/L显着性低于HF组(p<0.05),且两个运动组之间没有显着差异(p>0.05)。6.胶原蛋白ColⅠ、Col Ⅲ和ColⅣ含量变化与C组相比,HF组胶原蛋白ColⅠ、Col Ⅲ和ColⅣ的含量显着性升高(p<0.05),而与HF组相比,HF+AE和HF+RT组胶原蛋白ColⅠ、Col Ⅲ和ColⅣ的含量显着性下降(p<0.05),且HF+RT组较HF+AE组胶原蛋白ColⅠ、Col Ⅲ和ColⅣ的含量下降,但是没有显着差异(p>0.05)。7.PCR array细胞外基质相关基因的变化情况与C组相比,HF组小鼠腓肠肌中Cd44、Cdh1、Col4a2、Emilin1、Itgal、MMP-3、Sell的mRNA表达水平显着性升高(p<0.05),而Lamb3和TIMP-3显着性下降(p<0.05)。与HF组相比,HF+AE组MMP-3的mRNA表达水平显着性下降(p<0.05),而Lamb3和TIMP-3显着性升高(p<0.05);HF+RT组Cdh1、Itgal、Sell、MMP-3、Thbs1的mRNA表达水平显着性下降(p<0.05),而TIMP-3显着性升高(p<0.05)。与HF+AE组相比,HF+RT组Cdh1、Itgal、Sell、TIMP-3、Thbs1的mRNA表达水平显着性下降(p<0.05),而MMP-3显着性升高(p<0.05)。8.Western blot蛋白表达结果与C组相比,HF组小鼠腓肠肌中MMP-3、Cdh1、Itgal、Sell的蛋白表达显着性升高(p<0.05),而TIMP-3蛋白表达显着性下降(p<0.05);与HF组相比,HF+AE组MMP-3的蛋白表达显着下降(p<0.05),Cdh1、Itgal、Sell的蛋白表达下降,但是没有显着性差异(p>0.05),而TIMP-3蛋白表达显着性升高(p<0.05);与HF组相比,HF+RT组MMP-3、Cdh1、Itgal、Sell的蛋白表达显着性下降(p<0.05),而TIMP-3蛋白表达显着性升高(p<0.05);与HF+AE组相比,TIMP-3、Cdh1、Itgal、Sell蛋白表达显着性下降(p<0.05),而MMP-3蛋白表达显着性升高(p<0.05)。研究结论1.有氧训练和抗阻训练可以改善高脂膳食诱导的小鼠胰岛素抵抗,减轻小鼠ECM胶原沉积增加。2.有氧训练和抗阻训练都可以改善MMP-3和TIMP-3基因的转录和翻译水平;此外抗阻训练还可以使Cdh1、Itgal和Sell基因的转录和翻译水平下降。(本文来源于《上海体育学院》期刊2019-06-18）
吴迎,石丽君,伊木清[9]（2019）在《外源性H_2O_2对小鼠骨骼肌细胞MG53膜修复作用的影响》一文中研究指出目的:研究不同浓度外源性H_2O_2干预对骨骼肌细胞MG53(Mitsugumin 53)膜修复作用的影响,探讨H_2O_2与MG53的关系。方法:培养C2C12细胞,不同浓度外源性H_2O_2干预后检测MG53蛋白表达;培养MG53基因敲除(MG53 KO)小鼠原代骨骼肌细胞,转染绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)-MG53质粒后用不同浓度外源性H_2O_2干预,活细胞成像系统观察细胞膜损伤后MG53的修复过程,用荧光相对改变量ΔF/F0表示MG53修复能力。结果:①外源性H_2O_2能显着促进MG53蛋白表达升高;②高浓度的H_2O_2能显着增强MG53的膜修复作用。结论:H_2O_2能促进MG53蛋白表达并增强其修复作用。(本文来源于《中国康复医学杂志》期刊2019年06期）
黄静[10]（2019）在《TRAIL、IL-10参与损伤大鼠骨骼肌细胞凋亡机制及其与气血变化相关性探索》一文中研究指出目的:本研究从TRAIL、IL-10免疫因子入手,观察它们参与损伤大鼠骨骼肌细胞凋亡的机制,对比凋亡过程中血液与骨骼肌中TRAIL与IL-10表达水平的变化趋势,探寻其中的变化规律,并结合中医的气血理论分析变化原理。通过数据分析和讨论,从新的视野揭示TRAIL和IL-10参与急性闭合性软组织损伤修复过程中细胞凋亡的机制以及在血液和骨骼肌中的对比变化;同时,创新性地运用中医气血理论分析不同时相点细胞凋亡和免疫因子波动变化规律,从变化规律中探寻损伤修复过程中可能存在的新的影响因素,为临床伤科治疗中更加准确地把握治疗的介入时机和中医气血理论的运用提供基础性研究依据。方法:选用80只SPF级SD大鼠,用抽签法对大鼠随机分组,分组包括:空白组、1H组、12H组、24H组、2D组、3D组、7D组、14D组。每10只大鼠编入一组,雌、雄各半。使用定量打击法进行造模,按照相应的时相点处死造模大鼠,最后处死空白组,并取血液和骨骼肌组织,用TUNEL法测试骨骼肌细胞凋亡情况,并作病理切片镜下观察,用ELISA检测血液和骨骼肌组织中TRAIL和IL-10的表达水平。利用统计学手段分析实验数据,结合中医气血理论进行分析讨论。结果:1)损伤后12小时,细胞凋亡的执行阶段未被全面激活,血液中TRAIL剧烈增长出现峰值,同时IL-10水平下降达到谷值;2)损伤后12小时到3天的时相区间,损伤细胞的凋亡剧烈增长,血液和骨骼肌中TRAIL和IL-10的表达平行发展,出现病理情况下的临时稳态;3)损伤后14天时相区间,血液中TRAIL和IL-10水平回到正常值,但骨骼肌的指标水平和细胞凋亡率未接近正常值;4)TRAIL和IL-10比值比均值在多个时相点呈现共轭变化趋势。结论:损伤后12小时,血液中免疫因子出现剧烈的上下波动变化,骨骼肌中的免疫表达不激烈,可能预示着整体气血原有的动态平衡首先遭到破坏;而在细胞凋亡执行程序启动的过程中,血液和骨骼肌中免疫因子的稳态变化,可能受整体和局部气血在病理情况下的临时稳态调控;损伤后14天,病理过程导致的全身免疫反应基本结束,但局部的细胞凋亡和免疫反应还未完全终止,这可能与该时相点整体和局部的气血新平衡建立与否有关;整体与局部气血平衡的破旧立新有可能是免疫因子在不同时相点呈现共轭变化趋势的调控因素。(本文来源于《成都体育学院》期刊2019-05-24）
大鼠骨骼肌细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究目的:建立离体胰岛素抵抗模型既有利于在细胞和分子水平深入探讨胰岛素抵抗的发生发展机制,又有利于在体外进行胰岛素抵抗防治药物的研发和筛选,骨骼肌是胰岛素抵抗发生的主要部位,因此建立稳定可重复的骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型至关重要。鉴于目前关于建立骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的研究报道实验条件不一,方法各异,且胰岛素抵抗效果不稳定,本课题组在离体胰岛素抵抗模型建立中进行了较长期的研究。长期高糖是导致胰岛素抵抗和2型糖尿病的直接原因,也是体内胰岛素抵抗和2型糖尿病的主要特征,以高糖干预建立胰岛素抵抗离体模型对于胰岛素抵抗的在体研究具有更好的参考意义,本研究通过采用不同浓度葡萄糖干预C2C12不同时长,实时收集细胞检测其基础和胰岛素刺激下的荧光标记葡萄糖2-NBDG摄取水平和胰岛素信号通路相关蛋白的表达水平,探索高糖刺激与C2C12胰岛素抵抗之间的量效关系,期望构建稳定可重复的骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,促进胰岛素抵抗和相关疾病的病理机制探索及相关药物研发与筛选,进而推进胰岛素抵抗等慢性疾病的防治研究。研究方法:采用小鼠成肌细胞C2C12为研究对象,分别以正常分化液和含40、60mmol/L葡萄糖的分化液诱导分化,1)每天应用相差显微镜观察不同浓度葡萄糖处理对细胞汇聚、融合和形成多核肌管的影响;2)分化1、3、5、7天后应用2-NBDG法检测不同处理对细胞基础糖摄取和胰岛素刺激糖摄取的影响;3)分化5天和7天后应用Western blot方法检测不同干预对葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达的影响;4)分化5天后应用免疫荧光组化方法检测不同干预对GLUT4蛋白分布的影响。研究结果:60mmol/L葡萄糖处理:1)相差显微镜观察结果从形态学上显示高糖处理C2C12细胞3天后明显抑制细胞增殖分化,且存在时间依赖性,随着干预时间延长,对成肌细胞增殖分化的抑制更加明显,这将导致细胞葡萄糖摄取能力减弱,加快胰岛素抵抗和糖尿病的发展进程。2)葡萄糖摄取结果表明高糖处理5和7天后均明显抑制C2C12的基础糖摄取和胰岛素刺激的糖摄取(P<0.01),且处理5天后胰岛素刺激的糖摄取与基础糖摄取无差异(P>0.05),提示高糖干预明显降低C2C12基础和胰岛素刺激的糖摄取能力,且存在时间依赖性,以60mmol/L葡萄糖干预5天出现明显抑制,干预7天抑制效果进一步加强,说明60mmol/L葡萄糖干预5天后导致细胞葡萄糖摄取能力和胰岛素敏感性显着下降,产生胰岛素抵抗。3)Westernblot检测结果表明高糖处理5和7天后,胰岛素刺激的GLUT4表达与基础GLUT4表达无差异(P>0.05),而对照组差异显着(P<0.05),提示高糖干预明显降低C2C12基础和胰岛素刺激的GLUT4蛋白表达,且存在时间依赖性,60mmol/L葡萄糖干预5天明显抑制,干预7天抑制效果进一步加强,说明60mmol/L葡萄糖干预成肌细胞5天后导致胰岛素信号转导通路受损,到第7天后,受损程度进一步加深。4)免疫荧光组化检测结果表明高糖处理5天后明显减少C2C12细胞胞膜上GLUT4蛋白分布水平(P<0.01),提示高糖干预5天明显降低C2C12细胞膜GLUT4表达量,说明60mmol/L葡萄糖干预不仅导致细胞中GLUT4蛋白表达降低,同时抑制葡萄糖刺激的GLUT4蛋白向细胞膜的转运,进而抑制C2C12细胞中胰岛素刺激的葡萄糖摄取,导致胰岛素敏感性降低。40mmol/L葡萄糖也一定程度抑制成肌细胞增殖分化,导致成肌细胞葡萄糖摄取能力和GLUT4激活水平下降,但效果不如60mmol/L葡萄糖明显和稳定。研究结论:本研究通过高糖刺激成功构建较为稳定的小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,以60mmol/L葡萄糖刺激5天效果最好,通过形态学观察并检测基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力和GLUT4蛋白表达与分布能较好评价骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗水平。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
大鼠骨骼肌细胞论文参考文献
[1].赵晓琴,孙君志,白胜超,李俊平,王瑞元.Omi的抑制剂Ucf-101对离心运动后大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响[C].第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编.2019
[2].罗维,周越,李显,王博发,艾磊.小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型的建立和验证[C].第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编.2019
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[4].杨平,苏若珂,邓璐,杨月瑶,王刚.利用小鼠骨骼肌细胞持续表达单链胰岛素类似物进行1型糖尿病模型鼠的长效基因治疗[J].四川动物.2019
[5].罗维,艾磊,李显,王博发,周越.小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型的建立和验证[J].中国病理生理杂志.2019
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