导读:本文包含了真核转化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:虎杖(Polygonum,cuspidatum,Sieb.et,Zucc.),MYB转录因子,载体构建,拟南芥转化
真核转化论文文献综述
李晓筱,刘婵,徐俊雄,王岩岩,伍翔[1]（2018）在《虎杖基因PcMYB1真核表达载体构建及遗传转化》一文中研究指出在虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)叶片中获得了1个R2R3-MYB转录因子基因,命名为PcMYB1。推测其在苯丙烷代谢中起负调控作用。为了探索PcMYB1的的功能,构建了PcMYB1基因的真核过量表达载体,通过农杆菌介导,利用花絮浸染法转化拟南芥,转化效率为0.11%。经潮霉素筛选和PCR鉴定,结果表明PcMYB1成功转入拟南芥中。(本文来源于《长江大学学报(自科版)》期刊2018年22期）
石晶,张宇飞,刘淑英[2]（2017）在《绵羊肺腺瘤病毒真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env引起体内和体外细胞发生的转化》一文中研究指出本试验旨在进一步全面研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白ENV的功能。使用本试验室已构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env转染NIH3T3细胞,并将此NIH3T3细胞接种到裸鼠体内;重组质粒经尾静脉注射到幼龄BALB/c小鼠体内。结果显示,真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env引起NIH3T3细胞发生转化,转染细胞接触抑制性消失,并形成大量的转化灶;pcDNA3.1(+)/exJSRV-env转染的NIH3T3细胞接种裸鼠使裸鼠致瘤,即引起NIH3T3细胞发生癌变。JSRVenv基因在小鼠体内表达,肝脏细胞出现大面积弥散性坏死,脾脏白髓严重坏死,心肌细胞明显颗粒样变性,肺间质细胞增生,肾小管上皮细胞轻度颗粒样变性。结果表明,绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白可以引起鼠NIH3T3细胞发生转化和癌变,使小鼠各脏器出现不同程度的病变。本试验为进一步探索JSRV ENV的致瘤机制奠定基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2017年05期）
贺梦影,张长江,魏红,段小波,谭文[3]（2015）在《在真核细胞表达制备重组人前蛋白转化酶枯草溶菌素9》一文中研究指出分别优化、合成和构建了在毕赤酵母和哺乳动物细胞表达人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)的PCSK9-p PICZαA和PCSK9-pcDNA4.0重组质粒,将重组质粒转化至GS115细胞和转染至中国仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞,诱导细胞表达包含his标签的PCSK9重组蛋白。通过SDS-PAGE电泳和Western-blot分析两种系统表达重组蛋白的能力,发现GS115表达的重组蛋白相对分子质量大于人天然PCSK9蛋白且容易发生降解,而CHO细胞能够高表达与人天然PCSK9蛋白相对分子质量相同的、稳定的、易于纯化的特异重组蛋白。采用His/Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,获得纯度达90%以上的PCSK9重组蛋白;用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备了高效价特异性PCSK9多克隆抗体。所建立的CHO细胞表达体系PCSK9的平均表达量为5.6 mg/L,为开发PCSK9抑制剂和深入研究PCSK9分子结构和功能奠定了基础。(本文来源于《生命科学研究》期刊2015年06期）
贺梦影[4]（2015）在《重组人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)蛋白在真核细胞的表达及其抗体的制备》一文中研究指出前蛋白转化酶枯草溶菌素9(Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)是一种含692个氨基酸的分泌型丝氨酸蛋白酶。它在肝细胞中表达后分泌至血浆能够与细胞膜表面的低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor,LDLR)家族的成员结合,加速LDLR降解,从而减弱肝脏代谢血浆低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的能力。通过抑制PCSK9可以治疗高胆固醇血症,目前PCSK9完全人源及人源化单克隆抗体已进入叁期临床阶段,但尚无相关的纳米抗体报道。特异性纳米抗体具有结构稳定、易于运输且制备成本低的明显优点。本文旨在制备纯化的人PCSK9蛋白,通过免疫骆驼制备PCSK9特异性重链抗体,为建立纳米抗体库进行高特异性纳米抗体筛选做准备;同时免疫小鼠获得PCSK9多克隆抗体,为制备单克隆抗体并最终生产特异性临床诊断试剂盒奠定基础。主要内容如下:(1)成功优化、合成和构建了在毕赤酵母GS115和中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)-s细胞表达人PCSK9的PCSK9-p PICZαA和PCSK9-pc DNA4.0质粒,实现了PCSK9-his重组蛋白在GS115和CHO细胞的分泌表达。Western Blotting结果显示GS115表达的重组蛋白分子量约为100 KDa,大于人天然PCSK9蛋白而且容易发生降解,上清蛋白纯化后无法定量及用于动物免疫实验;CHO细胞表达的蛋白分子量为60 KDa,与人天然PCSK9蛋白分子量相同,上清蛋白易于纯化,通过优化纯化条件可获得纯度达90%以上的PCSK9重组蛋白,且蛋白平均表达量达到5.6 mg/L以上。(2)用纯化的PCSK9重组蛋白免疫骆驼获得多抗血清,串联使用Protein G和Protein A蛋白纯化柱提取叁次免疫后骆驼血清中的重链抗体,然后采用偶联PCSK9的磁珠进一步纯化,获得高纯度的PCSK9特异性重链抗体。(3)用纯化的PCSK9重组蛋白免疫小鼠获得多抗血清,采用酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定叁次免疫后获得的小鼠多抗血清的效价为1:80000以上。本研究成功建立了实验室快速生产制备毫克量级重组人PCSK9蛋白的方法,对比了两种体系表达PCSK9蛋白的差异,获得了PCSK9特异性重链抗体和小鼠PCSK9多克隆抗体,为后续采用蛋白质组学、高通量测序及噬菌体展示技术建立PCSK9特异性纳米抗体库、最终制备纳米抗体和PCSK9临床检测试剂盒奠定基础。(本文来源于《华南理工大学》期刊2015-05-04）
章晟,张小英,彭薇,韦秀娟,张玉佩[5]（2013）在《转化生长因子β1基因真核表达质粒的构建及其在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达》一文中研究指出目的:构建转化生长因子β1(TGF-β1)表达载体,在骨髓间充质干细胞(BMSC)中表达。方法:以小鼠肺组织cDNA为模板,PCR扩增TGF-β1基因,并将其插入pCDH1-MCS1-EF1-copGFP载体质粒,转化感受态大肠杆菌DH5α,抽提质粒,经PCR和测序鉴定后转染BMSC,利用激光共聚焦显微镜和Western印迹对其表达进行检测。结果:经PCR及测序鉴定,构建入载体质粒的基因为TGF-β1基因,pCDH1-TGFβ1-EF1-copGFP重组质粒能在BMSC中表达。结论:构建了pCDH1-TGFβ1-EF1-copGFP重组质粒,且能表达于BMSC,为进一步研究TGF-β1影响间充质干细胞的生理功能奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2013年06期）
刘小利,郝晓燕,陈勋基,陈果,足木热木[6]（2013）在《玉米ZmPsaH基因真核表达载体的构建及转化》一文中研究指出【目的】PsaH是光合系统Ⅰ(PSI)中的一个亚基,在植物光合系统中起着重要的作用。为研究玉米ZmPsaH基因在抗逆中的作用提供基础。【方法】构建玉米ZmPsaH基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一。利用RT-PCR技术扩增得到大小约为420 bp的玉米ZmPsaH基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒ZmPsaH-5N。【结果】通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmPsaH-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。【结论】成功构建了玉米ZmPsaH基因真核表达载体,并且成功转化了酵母。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2013年07期）
郝晓燕,张毓露,足木热木,刘小利,黄全生[7]（2012）在《盐穗木HcPS_H基因真核表达载体的构建及转化》一文中研究指出【目的】盐穗木(Halostachys caspica)属藜科盐生植物,是广泛分布于新疆干旱或半干旱荒漠盐碱环境中的一种极端耐盐的多年生稀盐多汁半灌木,对盐分适应性极强。PS_H基因是一个参与光合反应光系统的基因,在植物光合作用中起着重要的作用。构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体对于了解该基因在盐穗木耐盐过程中的作用有着重要意义。【方法】利用PCR技术扩增得到大小为441 bp的盐穗木HcPS_H基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒HcPS_H-5N。【结果】通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒HcPS_H-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。【结论】成功构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体,并且能在真核细胞中正常表达。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2012年12期）
马慧群,闫小宁,张彩晴,袁景奕[8]（2012）在《结缔组织生长因子、转化生长因子β1真核表达载体的构建及对硬皮病的FB凋亡的影响》一文中研究指出目的构建结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)真核表达载体,并观察CTGF、TGF-β1基因转染硬皮病患者皮损培养的成纤维细胞凋亡的影响。方法采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000 CTGF、TGF-β1DNA质粒转染至传代培养的硬皮病FB中,用倒置荧光显微镜观察转染后绿色荧光蛋白基因的表达,计算转染率,用流式细胞术检测CTGF、TGF-β1DNA质粒分组转染的各组成纤维细胞的凋亡情况。结果实验成功构建了CTGF、TGF-β1真核表达载体,荧光显微镜下观察到转染后的CTGF、TGF-β1基因发出的稳定的绿色荧光的信号,转染率为(85.7±2.1)%、(66.9±3.3)%,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪法显示正常组细胞凋亡较高(6.52%),而硬皮病和各转染组细胞凋亡率降低,尤以CTGF转染硬皮病组最低(P<0.05)。结论阳离子脂质体LipofectamineTM2000可有效介导真核表达质粒转染CTGF、TGF-β1,且CTGF、TGF-β1能抑制成纤维细胞的凋亡及促进细胞增殖的作用。(本文来源于《中国中西医结合皮肤性病学杂志》期刊2012年06期）
琳·马古利斯,欧志吉[9]（2012）在《连续内共生理论(SET)与混合个体 从细菌染色丝组到真核生物染色体组的转化》一文中研究指出生命世界的最高分类:细菌和真核生物美籍俄裔的果蝇基因学家杜布赞斯基(Theodosius Dobzhan sky)曾经这样说过:"如果没有进化论,生物学的一切现象将无法得到合理解释。"我借用这句话:如果不了解生物在特定古环境下的演化历史,当今分子生物学的研究将毫无意义。正如达尔文所指出的,(本文来源于《生物进化》期刊2012年03期）
张毓露,郝晓燕,足木热木,刘小利,陈果[10]（2012）在《玉米ZmCPK12基因真核表达载体的构建及转化》一文中研究指出[目的]CDPK是一类依赖于Ca~(2+)而不依赖CaM及磷脂的蛋白激酶,或类钙调素结构域的蛋白激酶,是植物和低等动物所特有。研究为玉米CDPK基因家族在抗逆中的作用提供基础。[方法]构建玉米ZmCPK12基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一。实验利用RT-PCR技术扩增得到大小为1 533 bp的玉米ZmCPK12基因,经限制性内切酶SdI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒ZmCPK12-5N。[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmCPK12-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。[结论]成功构建了玉米ZmCPK12基因真核表达载体,并且成功转化了酵母。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2012年07期）
真核转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本试验旨在进一步全面研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白ENV的功能。使用本试验室已构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env转染NIH3T3细胞,并将此NIH3T3细胞接种到裸鼠体内;重组质粒经尾静脉注射到幼龄BALB/c小鼠体内。结果显示,真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env引起NIH3T3细胞发生转化,转染细胞接触抑制性消失,并形成大量的转化灶;pcDNA3.1(+)/exJSRV-env转染的NIH3T3细胞接种裸鼠使裸鼠致瘤,即引起NIH3T3细胞发生癌变。JSRVenv基因在小鼠体内表达,肝脏细胞出现大面积弥散性坏死,脾脏白髓严重坏死,心肌细胞明显颗粒样变性,肺间质细胞增生,肾小管上皮细胞轻度颗粒样变性。结果表明,绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白可以引起鼠NIH3T3细胞发生转化和癌变,使小鼠各脏器出现不同程度的病变。本试验为进一步探索JSRV ENV的致瘤机制奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
真核转化论文参考文献
[1].李晓筱,刘婵,徐俊雄,王岩岩,伍翔.虎杖基因PcMYB1真核表达载体构建及遗传转化[J].长江大学学报(自科版).2018
[2].石晶,张宇飞,刘淑英.绵羊肺腺瘤病毒真核表达质粒pcDNA3.1(+)/exJSRV-env引起体内和体外细胞发生的转化[J].中国兽医学报.2017
[3].贺梦影,张长江,魏红,段小波,谭文.在真核细胞表达制备重组人前蛋白转化酶枯草溶菌素9[J].生命科学研究.2015
[4].贺梦影.重组人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)蛋白在真核细胞的表达及其抗体的制备[D].华南理工大学.2015
[5].章晟,张小英,彭薇,韦秀娟,张玉佩.转化生长因子β1基因真核表达质粒的构建及其在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达[J].生物技术通讯.2013
[6].刘小利,郝晓燕,陈勋基,陈果,足木热木.玉米ZmPsaH基因真核表达载体的构建及转化[J].新疆农业科学.2013
[7].郝晓燕,张毓露,足木热木,刘小利,黄全生.盐穗木HcPS_H基因真核表达载体的构建及转化[J].新疆农业科学.2012
[8].马慧群,闫小宁,张彩晴,袁景奕.结缔组织生长因子、转化生长因子β1真核表达载体的构建及对硬皮病的FB凋亡的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志.2012
[9].琳·马古利斯,欧志吉.连续内共生理论(SET)与混合个体从细菌染色丝组到真核生物染色体组的转化[J].生物进化.2012
[10].张毓露,郝晓燕,足木热木,刘小利,陈果.玉米ZmCPK12基因真核表达载体的构建及转化[J].新疆农业科学.2012
标签：虎杖(Polygonum; cuspidatum; Sieb.et; Zucc.); MYB转录因子; 载体构建; 拟南芥转化;