导读:本文包含了补肾壮督论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:椎间盘退变,细胞凋亡,线粒体通路,补肾壮督方
补肾壮督论文文献综述
周文明,林一峰,张震,白荣飞[1]（2019）在《补肾壮督方对大鼠退变椎间盘细胞线粒体凋亡通路的影响》一文中研究指出目的:观察补肾壮督方对大鼠退变椎间盘细胞凋亡的影响,探讨其改善椎间盘退变的机制。方法:100只SD雄性大鼠,采用纤维环全层针刺造模,随机分为空白组,模型组,补肾壮督方低、中、高剂量组(0. 38,0. 77,1. 53 g·kg-1),连续中药灌胃4周后,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠椎间盘组织病理学变化;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测退变椎间盘中髓核细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测椎间盘组织中活化半胱氨酸蛋白酶-3(active Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),细胞色素C(cyt C)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠椎间盘组织病理学评分显着增加,髓核细胞凋亡率明显增加(P <0. 05),active Caspase-3,cyt C和Bax表达量均明显增加(P <0. 05),Bcl-2表达量明显下降(P <0. 05)。与模型组比较,补肾壮督方低、中、高剂量组组织病理学评分明显降低(P <0. 05),髓核细胞凋亡率明显减少(P <0. 05),active Caspase-3,cyt C及Bax表达量均明显下降(P <0. 05),Bcl-2表达量明显增加(P <0. 05)。结论:补肾壮督方可能通过减少active Caspase-3,cyt C和Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,抑制线粒体凋亡通路,并存在一定剂量依赖性,从而改善椎间盘退变。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2019年19期）
白荣飞[2]（2018）在《补肾壮督方干预大鼠退变腰椎间盘中Bcl-2和caspase-3蛋白表达的研究》一文中研究指出目的:通过建立大鼠腰椎间盘退变(Lumbar intervertebral disc degeneration,LIDD)模型,并观察补肾壮督方对大鼠退变腰椎间盘组织中线粒体依赖细胞凋亡通路调节蛋白Bcl-2和caspase-3表达的影响,探讨补肾壮督方延缓LIDD的疗效及作用机制,从而为中医药防治LIDD提供理论和实验依据。方法:1.模型制备实验:取雄性SPF级SD大鼠(体重200-300g)20只,随机分为假手术对照组和纤维环针刺组,每组10只。假手术对照组:全麻后从大鼠的腹部右侧旁正中入路依次切开皮肤、皮下组织,打开腹腔,沿腰大肌肌间隙推开后腹膜和大血管,暴露L5/6椎间盘后即逐层缝合组织。纤维环针刺组:相同手术入路暴露L5/6椎间盘,采用21G穿刺针对L5/6椎间盘纤维环全层穿刺造模。术后4周,通过腰椎X线检查,L5/6椎间盘HE染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色观察退变情况。2.中药干预实验:另取雄性SPF级SD大鼠100只(体重200-300g),随机分为五组,分别为假手术组(A组)、模型组(B组)、低剂量中药组(C组)、中剂量中药组(D组)和高剂量中药组(E组),每组各20只。A组:切开暴露L4到L6椎间盘后即逐层缝合组织。其他组:采用针刺纤维环法造模,造模后第2天,C、D、E叁组分别给予低剂量、中剂量和高剂量的补肾壮督方水煎液灌胃;A组和B组则分别予等容积的生理盐水灌胃。4周后,每组随机抽取10只大鼠处死,取L4到L6椎间盘,用HE染色观察各组椎间盘的退变情况;用TUNEL法检测髓核细胞凋亡情况;采用蛋白质印迹法检测Bcl-2和caspase-3蛋白在大鼠退变椎间盘髓核中的表达,并进行比较分析。结果:1.模型制备实验:术后4周,与假手术对照组相比,纤维环针刺组椎间隙高度明显降低,组织病理学评分显着升高,中央髓核区域Ⅰ型胶原免疫组织化学染色平均灰度值显着降低,差异均有统计学意义(P<0.05)2.中药干预实验:综合HE染色、TUNEL法检测及蛋白质印迹法检测结果,与A组相比,B组的腰椎间盘组织病理学评分和髓核细胞凋亡指数均显着升高,椎间盘组织中Bcl-2表达明显降低,激活的caspase-3表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D、E叁组的腰椎间盘组织病理学评分和髓核细胞凋亡指数均显着降低,椎间盘组织中Bcl-2表达明显升高,激活的caspase-3表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);D、E组的组织病理学评分和髓核细胞凋亡指数较C组均明显降低,椎间盘组织中Bcl-2表达明显升高,激活的caspase-3表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而D、E两组之间比较,各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.全层针刺纤维环法可以成功建立可靠的大鼠LIDD模型,通过选用不同型号的穿刺针及不同的穿刺深度、持续时间,术后选择不同的观察点,可造成不同程度的退变模型,能满足LIDD的各期研究需要。2.大鼠退变腰椎间盘组织中,髓核细胞凋亡增加,退变程度与髓核细胞凋亡程度呈正相关,而凋亡程度又与线粒体介导的凋亡通路主要抗凋亡蛋白Bcl-2表达呈负相关,与促凋亡蛋白caspase-3呈正相关;证实了线粒体介导的髓核细胞凋亡增加在LIDD过程中发挥了重要的作用。3.补肾壮督方可延缓受损椎间盘组织形态学退行性变,减少髓核细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白的表达,下调caspase-3蛋白的表达,从而延缓大鼠腰椎间盘退变,其作用机制与减少线粒体介导的髓核细胞凋亡有关,且作用效果有一定的剂量依赖性。(本文来源于《广州中医药大学》期刊2018-05-01）
张震[3]（2017）在《补肾壮督方水煎液对腰椎间盘退变大鼠的miRNA-125a-5p、TP53INP1表达的影响》一文中研究指出目的：观察补肾壮督方对腰椎间盘退变(Lumbar intervertebral disc degeneration,LIDD)大鼠的miRNA-125a-5p及其靶基因TP53INP1的表达影响。方法：选取60只雄性SD大鼠(3月龄),随机分为假手术组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组，每组各12只。假手术组：从大鼠的腹部右侧旁正中切开，暴露L4到L6椎间盘后即缝合皮肤。其他组：从大鼠的腹部右侧旁正中切开后,暴露L4到L6椎间盘，并采用纤维环的全层穿刺法建立大鼠LIDD模型。造模第2天，低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组分别给予低剂量、中剂量和高剂量的补肾壮督方水煎液灌胃，假手术组和模型组则分别予等容积的生理盐水灌胃。8周后，取大鼠L4到L6的椎间盘。用HE染色观察各组椎间盘的退变情况,并根据其退变程度进行病理评分，通过实时荧光定量RT-PCR检测腰椎间盘中的miRNA-125a-5p的表达，采用蛋白质印迹法和实时荧光定量RT-PCR分析腰椎间盘中TP53INP1、p21、活化的Caspase-3的表达变化。结果：与假手术组比较，模型组的腰椎间盘发生了明显的退变，组织退变评分显着升高，具有统计学意义(P<0.05)，模型组椎间盘组织中的miRNA-125a-5p表达明显降低，具有统计学差异(P<0.05)；模型组的模型组的TP53INP1、p21和活化的Caspase-3(Active Caspase-3)的蛋白及基因表达都明显升高，具有统计学差异(P<0.05)；与模型组相比，低剂量、中剂量、高剂量中药组的腰椎间盘退变均出现了明显改善，组织学退变的评分均显着降低，具有统计学意义(P<0.05)，低、中、高剂量中药组椎间盘组织中的miRNA-125a-5p表达则明显升高，有统计学差异(P<0.05)，低、中、高剂量中药组的TP53INP1、p21和活化的Caspase-3(Active Caspase-3)的蛋白及基因表达都明显降低，有统计学差异(P<0.05)；补肾壮督方叁个中药组之间的组织学退变评分比较亦有统计学差异(P<0.05)。结论：1.补肾壮督方能够有效的延缓大鼠腰椎间盘退变的病理改变，降低椎间盘退变的病理评分，并且疗效具有一定的剂量依赖性。2.补肾壮督方能够上调大鼠退变的椎间盘组织中miRNA-125a-5p的表达，并且下调其TP53INP1、p21、Caspase-3的基因及TP53INP1、p21、活化的Caspase-3的蛋白表达。其延缓椎间盘退变的作用机理与调控miRNA-125a-5p及其靶基因TP53INP1介导的通路活性变化有关，并且作用效果具有一定的剂量依赖性。(本文来源于《2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集（中册）》期刊2017-12-06）
张震[4]（2017）在《血浆miRNA与腰椎间盘退变的相关性及补肾壮督方的干预研究》一文中研究指出目的:1.筛选腰椎间盘退变(Lumbar intervertebral disc degeneration,LIDD)患者血浆中差异性表达的miRNA,探讨差异性血浆miRNA是否在LIDD人群中具有特异性表达,是否对LIDD诊断有价值。2.建立大鼠LIDD的动物模型,进一步验证差异性miRNA的表达与LIDD的关系,并检测椎间盘中差异性miRNA靶基因介导的信号转导通路的表达变化。3.通过补肾壮督方干预LIDD大鼠,探讨补肾壮督方对差异性miRNA及其靶基因介导的信号转导通路的表达影响,进一步揭示补肾壮督方延缓LIDD的作用机制。方法:1.临床研究①选取2015年12月一 2016年4月就诊于广州中医药大学第叁附属医院脊柱科住院部及门诊的3例LIDD患者作为病例组,同期选取3例年龄和性别相匹配且无LIDD的志愿者作为对照组。抽取LIDD患者和无LIDD志愿者的血浆,进行MicroRNA芯片的筛选。②通过实时荧光定量RT-PCR对MicroRNA芯片筛选出差异表达明显的miRNA进行原位验证,选出与LIDD密切相关的差异表达miRNA。③收集2015年12月一 2016年8月就诊于广州中医药大学第叁附属医院脊柱科住院部及门诊的30例LIDD患者作为病例组,同期选取20例年龄和性别相匹配且无LIDD的志愿者作为对照组。根据原位验证的结果,以及文献报道研究,将与LIDD密切相关的miRNA在这50例人群中进行扩大样本验证研究,进一步验证差异miRNA表达与LIDD的特异性。并对有差异性的miRNA进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析,使用ROC曲线下面积(AUC)评估它们的诊断价值。2.实验研究选取60只雄性SD大鼠(3月龄),随机分为假手术组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组,每组各12只。假手术组:从大鼠的腹部右侧旁正中切开,暴露L4到L6椎间盘后即缝合皮肤。其他组:从大鼠的腹部右侧旁正中切开后,暴露L4到L6椎间盘,并采用纤维环的全层穿刺法建立大鼠LIDD模型。造模第2天,低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组分别给予低剂量、中剂量和高剂量的补肾壮督方水煎液灌胃,假手术组和模型组则分别予等容积的生理盐水灌胃。8周后,取大鼠的血浆和L4到L6的椎间盘。用HE染色观察各组椎间盘的退变情况,并根据其退变程度进行病理评分,通过实时荧光定量RT-PCR检测血浆和腰椎间盘中的特异性miRNA的表达,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量RT-PCR分析腰椎间盘中特异性miRNA靶基因及其介导的信号转导通路表达变化。结果:1.临床研究①miRNA芯片筛选出LIDD人群中存在23个差异表达的miRNA,其中7个miRNA表达下调,16个miRNA表达上调。②根据MicroRNA芯片结果,对17个差异表达稳定的miRNA进行了原位验证,只有miRNA-4763-3p和miRNA-4767的下调表达差异显着,具有统计学意义(P<0.05)。③结合文献报道研究,将miRNA-4763-3p、miRNA-4767和miRNA-125a-5p进行了扩大样本验证研究。miRNA-4767和miRNA-125a-5p的表达显着下调,具有统计学意义(P<0.05),miRNA-4763-3p的表达下调则不明显,无统计学差异(P>0.05)。④ROC曲线分析显示,miRNA-4767和miRNA-125a-5p是对LIDD诊断有价值的生物标记物(P<0.05)。其中 miRNA-4767 AUC值为 0.735,95%置信区间 CI 为:0.591-0.850;miRNA-125a-5p 的 AUC 值为 0.863,95%置信区间 CI 为:0.759-0.967。2.实验研究①各组腰椎间盘HE染色的形态学改变与假手术组比较,模型组的腰椎间盘发生了明显的退变,组织退变评分显着升高,具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,低剂量、中剂量、高剂量中药组的腰椎间盘退变均出现了明显改善,组织学退变的评分均显着降低,具有统计学意义(P<0.05);补肾壮督方叁个中药组之间的组织学退变评分比较亦有统计学差异(P<0.05)。②各组血浆中miRNA-125a-5p的表达变化与假手术组比较,模型组血浆中miRNA-125a-5p的表达降低,具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量中药组血浆中miRNA-125a-5p的表达明显升高,有统计学差异(P<0.05);补肾壮督方的叁个中药组血浆中miRNA-125a-5p之间的表达比较亦有统计学差异(P<0.05)。③各组腰椎间盘组织中miRNA-125a-5p的表达变化与假手术组比较,模型组椎间盘组织中的miRNA-125a-5p表达明显降低,具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量中药组椎间盘组织中的miRNA-125a-5p表达则明显升高,有统计学差异(P<0.05);补肾壮督方的叁个中药组椎间盘组织中的miRNA-125a-5p表达之间比较亦有统计学差异(P<0.05)。④各组miRNA-125a-5p靶基因TP53INP1及p21、Caspase-3的基因表达变化与假手术组比较,模型组的TP53INP1、p21和caspase-3基因表达都明显升高,具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量中药组的TP53INP1、p21和caspase-3基因表达都明显降低,有统计学差异(P<0.05);补肾壮督方的叁个中药组之间比较亦有统计学差异(P<0.05)。⑤各组miRNA-125a-5p靶基因TP53INP1及p21、活化的Caspase-3的蛋白表达变化与假手术组比较,模型组的TP53INP1、p21和活化的Caspase-3(Active Caspase-3)蛋白表达都明显升高,具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量中药组的TP53INP1、p21和caspase-3的基因表达都明显减低,有统计学差异(P<0.05);补肾壮督方的叁个中药组之间比较亦有统计学差异(P<0.05)。结论:1.腰椎间盘退变患者外周循环血浆中存在差异表达的miRNA,血浆miRNA-4767和miRNA-125a-5p在LIDD患者中的表达显着降低。2.血浆miRNA-4767和miRNA-125a-5p对LIDD的诊断具有较好的诊断效能,有望成为腰椎间盘退变精准诊断的新型生物标志物。3.补肾壮督方能够有效的延缓大鼠腰椎间盘退变的病理改变,降低椎间盘退变的病理评分,并且疗效具有一定的剂量依赖性。4.miRNA-125a-5p在腰椎间盘退变的大鼠血浆及退变的椎间盘组织中表达明显降低,而在其靶基因TP53INP1及p21、Caspase-3的表达则明显升高。这表明在LIDD的过程中miRNA-125a-5p及其靶基因TP53INP1介导的通路被激活,miRNA-125a-5p是腰椎间盘退变的一个潜在治疗靶点。5.补肾壮督方能够上调大鼠退变的椎间盘组织及血浆中miRNA-125a-5p的表达,并且下调其 TP53INP1、p21、Caspase-3 的基因及 TP53INP1、p21、活化的 Caspase-3的蛋白表达。其延缓椎间盘退变的作用机理与调控miRNA-125a-5p及其靶基因TP53INP1介导的通路活性变化有关,并且作用效果具有一定的剂量依赖性。(本文来源于《广州中医药大学》期刊2017-04-01）
林一峰,张震,刘海全,原超,唐汉武[5]（2016）在《补肾壮督方预防腰椎间盘退变的实验研究》一文中研究指出目的:观察补肾壮督方对大鼠腰椎间盘退变的病理及对椎间盘叁磷酸腺苷(ATP)酶和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:利用针刺纤维环的方法建立大鼠椎间盘退变模型,造模成功后,随机分为空白组、模型组、补肾壮督方组、塞来昔布组,在模型建立8周后检测椎间盘组织超微量ATP酶活性和TNF-α含量,电镜扫描椎间盘胶原纤维及成纤维细胞超微结构的变化。结果:1与空白组相比,补肾壮督方组、塞来昔布组、模型组均出现明显的病理退变;与模型组相比,补肾壮督方组的病理退变较轻。2与空白组相比,模型组腰椎间盘的ATP酶活性降低,TNF-α含量升高,差异有显着的统计学意义(P<0.01);与模型组相比,补肾壮督方组腰椎间盘的ATP酶活性升高,差异有统计学意义(P<0.05),补肾壮督方组椎间盘的TNF-α含量降低,有显着的统计学差异(P<0.01)。结论:补肾壮督方具有抑制椎间盘退变作用,其机制可能与提高椎间盘组织ATP酶活性和降低TNF-α表达有关。(本文来源于《中医临床研究》期刊2016年13期）
黄健,张文财[6]（2015）在《补肾壮督中药对老年退变性腰椎管狭窄症患者术后椎间融合率的影响》一文中研究指出【目的】探讨补肾壮督中药对老年退变性腰椎管狭窄症(DLSS)患者术后椎间融合率的影响。【方法】回顾分析2012年10月至2013年10月72例经改良经椎间孔腰椎间融合术(TLIF)治疗的老年DLSS患者的临床资料,根据术后是否接受补肾壮督中药治疗分为治疗组39例和对照组33例。采用日本骨科学会腰背痛手术评分标准(JOA)比较2组手术疗效,采用Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)评分评估术后功能改善情况,采用改良Brantigan评分评估椎间融合情况。【结果】(1)随访期间,2组患者均无断钉断棒、螺钉松动、cage移位、终板塌陷等并发症。(2)术前及术后3 d,2组JOA评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)组内术后12个月与术后6个月及术后6个月与术前ODI评分比较,差异均有统计学意义(P<0.01),治疗组术后6个月及术后12个月的ODI评分均显着低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(4)根据改良Brantigan评分,术后6个月,治疗组融合率为71.79%,高于对照组的48.48%(P<0.05);术后12个月,治疗组融合率为87.18%,依然高于对照组的66.67%(P<0.05)。【结论】补肾壮督中药能提高老年退变性腰椎管狭窄症患者改良TLIF术后椎间融合率,从而有助于改善患者的生活质量。(本文来源于《广州中医药大学学报》期刊2015年03期）
庞学丰,雷宗尚,廖键侥,吴燕红,刘欢[7]（2014）在《补肾壮督法联合柳氮磺吡啶及双氯芬酸钠治疗强直性脊柱炎56例》一文中研究指出目的:观察补肾壮督法联合柳氮磺吡啶及双氯芬酸钠治疗强直性脊柱炎的临床疗效。方法:将112例强直性脊柱炎患者随机分为治疗组和对照组,每组56例。对照组给予柳氮磺吡啶和双氯芬酸钠治疗,治疗组在对照组基础上加用补肾壮督中药治疗。疗程均为3个月。观察两组治疗前后的Bath AS疾病活动指数(BASDAI)、Bath AS测量指数(BASMI)、Bath AS功能指数(BASFI)、脊柱痛、夜间痛、患者总体评价(PGA)评分及红细胞沉降率、C-反应蛋白等指标的改变情况。结果:治疗组显效9例,有效43例,无效4例,有效率占92.86%;对照组显效4例,有效38例,无效14例,有效率占75%。两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组BASDAI、BASMI、BASFI、脊柱痛、夜间痛、PGA及红细胞沉降率、C-反应蛋白均有改善(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:补肾壮督法联合柳氮磺吡啶及双氯芬酸钠治疗强直性脊柱炎患者,具有很好的抗炎止痛效果,可明显缓解患者的临床症状及控制病情活动。(本文来源于《风湿病与关节炎》期刊2014年07期）
潘树和,高云[8]（2010）在《补肾壮督通络法对腰椎间盘突出症引起的自身免疫性炎症的作用》一文中研究指出目的观察补肾壮督通络对腰椎间盘突出症引起自身免疫性炎症的作用。方法病人随机分为两组,治疗组采用补肾壮督通络法加虫类药治疗72例,对照组采用传统手术治疗52例。结果治疗组临床治愈62例,好转9例,未愈1例,总有效率98.6%;对照组临床治愈28例,好转17例,未愈7例,总有效率86.5%;两组总有效率比较差异有显着意义(P<0.05)。结论补肾壮督通络对腰椎间盘突出症引起自身免疫性炎症疗效显着。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2010年12期）
徐立山[9]（2010）在《活血化瘀、补肾壮督法治疗腰椎间盘脱出症》一文中研究指出笔者从2003～2009年共治疗腰间盘脱出症患者48例,其中男性27例,女性21例,年龄33～70岁,同时伴有骨质增生症37例,病史3个月～5年,现总结如下。诊断依据:国家中医药管理局1994年颁布的《中医病证诊断疗效标准》。基本方药:熟地黄15g,当归10g,赤芍、白芍各10g,丹参15g,红花9g,巴戟天10g,杜仲15g,川续断10g,狗脊25g,鹿衔草30g,骨碎补30g,菟丝子20g,淫羊藿15g,蜈蚣2条(研末冲服)。加减:寒邪偏重者加制川乌、麻黄、桂枝、附片;湿邪偏重者去当归、熟地黄,加苍术、防己、木瓜、薏苡仁;湿热重者去巴戟天、淫羊藿、骨碎补,加炒黄柏、知母;血瘀重者加制乳香、没药、叁七、五灵脂。疗效评定标准:痊愈:腰腿痛消失,直腿抬高70°以上,能恢复正常工作;好转:腰腿痛减轻,腰部活动功能改(本文来源于《中医杂志》期刊2010年S2期）
潘树和,陈艳红,高云[10]（2010）在《补肾壮督通络法加足浴治疗腰椎间盘突出症临床观察》一文中研究指出The kidney Zhuangdu Collaterals plus Foot treatment of lumbar disc herniation(LOH) of clinical observation,under the guidance of Chinese medicine theory,and understand that "difficult by the" "Governor of the disease,ridge strong anti-Jue",because it is the Governor's lumbar spine pulse through the line of site,so kidney in charge of the Governor,one of Yang Du Channel."Yi Zong Jin Jian" "Long Ridge tendon,the suture must be wrong",pointing out that LOH pathogenesis.214 cases were randomly divided into treatment group were cured 187 cases(87.3%),improvement in 24 cases(11.2%),healed in 2 cases(0.4%), the total effective rate 98.9%.Control group,151 cases were cured 67 cases(44.4%),improvement in 39 cases(25.8%),healed 45 cases(29.8%),the total effective rate 70.2%.Two groups of cure rate,the total efficiency,the difference was statistically significant(P<0.01).(本文来源于《中国中医基础医学杂志》期刊2010年02期）
补肾壮督论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:通过建立大鼠腰椎间盘退变(Lumbar intervertebral disc degeneration,LIDD)模型,并观察补肾壮督方对大鼠退变腰椎间盘组织中线粒体依赖细胞凋亡通路调节蛋白Bcl-2和caspase-3表达的影响,探讨补肾壮督方延缓LIDD的疗效及作用机制,从而为中医药防治LIDD提供理论和实验依据。方法:1.模型制备实验:取雄性SPF级SD大鼠(体重200-300g)20只,随机分为假手术对照组和纤维环针刺组,每组10只。假手术对照组:全麻后从大鼠的腹部右侧旁正中入路依次切开皮肤、皮下组织,打开腹腔,沿腰大肌肌间隙推开后腹膜和大血管,暴露L5/6椎间盘后即逐层缝合组织。纤维环针刺组:相同手术入路暴露L5/6椎间盘,采用21G穿刺针对L5/6椎间盘纤维环全层穿刺造模。术后4周,通过腰椎X线检查,L5/6椎间盘HE染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色观察退变情况。2.中药干预实验:另取雄性SPF级SD大鼠100只(体重200-300g),随机分为五组,分别为假手术组(A组)、模型组(B组)、低剂量中药组(C组)、中剂量中药组(D组)和高剂量中药组(E组),每组各20只。A组:切开暴露L4到L6椎间盘后即逐层缝合组织。其他组:采用针刺纤维环法造模,造模后第2天,C、D、E叁组分别给予低剂量、中剂量和高剂量的补肾壮督方水煎液灌胃;A组和B组则分别予等容积的生理盐水灌胃。4周后,每组随机抽取10只大鼠处死,取L4到L6椎间盘,用HE染色观察各组椎间盘的退变情况;用TUNEL法检测髓核细胞凋亡情况;采用蛋白质印迹法检测Bcl-2和caspase-3蛋白在大鼠退变椎间盘髓核中的表达,并进行比较分析。结果:1.模型制备实验:术后4周,与假手术对照组相比,纤维环针刺组椎间隙高度明显降低,组织病理学评分显着升高,中央髓核区域Ⅰ型胶原免疫组织化学染色平均灰度值显着降低,差异均有统计学意义(P<0.05)2.中药干预实验:综合HE染色、TUNEL法检测及蛋白质印迹法检测结果,与A组相比,B组的腰椎间盘组织病理学评分和髓核细胞凋亡指数均显着升高,椎间盘组织中Bcl-2表达明显降低,激活的caspase-3表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D、E叁组的腰椎间盘组织病理学评分和髓核细胞凋亡指数均显着降低,椎间盘组织中Bcl-2表达明显升高,激活的caspase-3表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);D、E组的组织病理学评分和髓核细胞凋亡指数较C组均明显降低,椎间盘组织中Bcl-2表达明显升高,激活的caspase-3表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而D、E两组之间比较,各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.全层针刺纤维环法可以成功建立可靠的大鼠LIDD模型,通过选用不同型号的穿刺针及不同的穿刺深度、持续时间,术后选择不同的观察点,可造成不同程度的退变模型,能满足LIDD的各期研究需要。2.大鼠退变腰椎间盘组织中,髓核细胞凋亡增加,退变程度与髓核细胞凋亡程度呈正相关,而凋亡程度又与线粒体介导的凋亡通路主要抗凋亡蛋白Bcl-2表达呈负相关,与促凋亡蛋白caspase-3呈正相关;证实了线粒体介导的髓核细胞凋亡增加在LIDD过程中发挥了重要的作用。3.补肾壮督方可延缓受损椎间盘组织形态学退行性变,减少髓核细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白的表达,下调caspase-3蛋白的表达,从而延缓大鼠腰椎间盘退变,其作用机制与减少线粒体介导的髓核细胞凋亡有关,且作用效果有一定的剂量依赖性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
补肾壮督论文参考文献
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