本文主要研究内容
作者袁紫林,刁波（2019）在《miR-124靶向镁转运蛋白1调控活化后人T细胞功能耗竭》一文中研究指出：目的研究miR-124靶向镁转运蛋白1(MagT1)可否调控活化后T细胞功能耗竭。方法 1)分离外周血单个核细胞,用IFN-γ、IL-2、抗-CD3抗体、抗-CD28抗体和IL-1α活化T细胞;流式细胞仪检测T细胞活化标记分子CD25和CD69所占的比例。2)构建miR-124/miR-124 sponge慢病毒载体;包装慢病毒后感染活化T细胞,用RT-qPCR检测感染后T细胞内miR-124和MagT1基因表达。3)生物信息学分析miR-124与MagT1的靶向位点,并用双荧光素酶报告基因系统鉴定。4)Western blot法检测慢病毒感染前后T细胞MagT1和PD-1蛋白水平。5)CCK8法检测慢病毒感染前后T细胞增殖能力;ELISA法检测细胞T分泌细胞因子TNF-α和TGF-β的能力。结果流式细胞仪检测表明T细胞活化成功。RT-qPCR检测表明慢病毒构建成功,miR-124/miR-124 sponge载体分别显著上调或下调miR-124的表达(P<0.01)。双荧光素酶报告基因系统证实miR-124靶向MagT1 3′UTR并抑制其表达。Western blot表明miR-124过表达组MagT1蛋白水平低于对照组(P<0.05),PD-1蛋白水平高于对照组(P<0.05),抑制miR-124后,MagT1蛋白水平高于对照组(P<0.05),PD-1蛋白水平低于对照组(P<0.05)。miR-124过表达使T细胞增殖能力和分泌TNF-α能力显著降低,而抑制miR-124使T细胞增殖能力和分泌TGF-β能力显著升高(P<0.01)。结论 miR-124可以负向调节靶基因MagT1的表达,并对活化后T细胞功能耗竭具有重要的调节作用。
Abstract
mu de yan jiu miR-124ba xiang mei zhuai yun dan bai 1(MagT1)ke fou diao kong huo hua hou Txi bao gong neng hao jie 。fang fa 1)fen li wai zhou xie chan ge he xi bao ,yong IFN-γ、IL-2、kang -CD3kang ti 、kang -CD28kang ti he IL-1αhuo hua Txi bao ;liu shi xi bao yi jian ce Txi bao huo hua biao ji fen zi CD25he CD69suo zhan de bi li 。2)gou jian miR-124/miR-124 spongeman bing du zai ti ;bao zhuang man bing du hou gan ran huo hua Txi bao ,yong RT-qPCRjian ce gan ran hou Txi bao nei miR-124he MagT1ji yin biao da 。3)sheng wu xin xi xue fen xi miR-124yu MagT1de ba xiang wei dian ,bing yong shuang ying guang su mei bao gao ji yin ji tong jian ding 。4)Western blotfa jian ce man bing du gan ran qian hou Txi bao MagT1he PD-1dan bai shui ping 。5)CCK8fa jian ce man bing du gan ran qian hou Txi bao zeng shi neng li ;ELISAfa jian ce xi bao Tfen bi xi bao yin zi TNF-αhe TGF-βde neng li 。jie guo liu shi xi bao yi jian ce biao ming Txi bao huo hua cheng gong 。RT-qPCRjian ce biao ming man bing du gou jian cheng gong ,miR-124/miR-124 spongezai ti fen bie xian zhe shang diao huo xia diao miR-124de biao da (P<0.01)。shuang ying guang su mei bao gao ji yin ji tong zheng shi miR-124ba xiang MagT1 3′UTRbing yi zhi ji biao da 。Western blotbiao ming miR-124guo biao da zu MagT1dan bai shui ping di yu dui zhao zu (P<0.05),PD-1dan bai shui ping gao yu dui zhao zu (P<0.05),yi zhi miR-124hou ,MagT1dan bai shui ping gao yu dui zhao zu (P<0.05),PD-1dan bai shui ping di yu dui zhao zu (P<0.05)。miR-124guo biao da shi Txi bao zeng shi neng li he fen bi TNF-αneng li xian zhe jiang di ,er yi zhi miR-124shi Txi bao zeng shi neng li he fen bi TGF-βneng li xian zhe sheng gao (P<0.01)。jie lun miR-124ke yi fu xiang diao jie ba ji yin MagT1de biao da ,bing dui huo hua hou Txi bao gong neng hao jie ju you chong yao de diao jie zuo yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自基础医学与临床的袁紫林,刁波，发表于刊物基础医学与临床2019年10期论文，是一篇关于微小论文,镁转运蛋白论文,细胞耗竭论文,基础医学与临床2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自基础医学与临床2019年10期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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