何丹:微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定论文

何丹:微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定论文

本文主要研究内容

作者何丹,刘媛,李先保,龚航,王丽,郝佳,张晓帅,徐重新,张存政,刘贤金(2019)在《微囊藻毒素LR免疫原及包被抗原的合成与鉴定》一文中研究指出:微囊藻毒素LR(MC-LR)分子量小于1 000 u,为半抗原,需要与载体蛋白偶联后才能刺激免疫应答用于抗体制备。本研究利用碳二亚胺法将MC-LR分别与钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,获得免疫抗原(MC-KLH)和包被抗原(MC-BSA)。采用紫外扫描光谱、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)等3种方法对2种人工抗原进行鉴定,并对小鼠进行免疫。用间接非竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)和竞争ELISA测定了抗血清效价和敏感度。结果表明,紫外扫描光谱法可观察到2种人工抗原的紫外吸收谱与载体蛋白相比发生改变。通过SDS-PAGE法可以观察到MC-BSA分子量比BSA增大。另外质谱法测定的MC-BSA的相对分子量为76 515.84,计算得到的MC-LR与BSA的偶联比为10∶1。MC-KLH免疫小鼠后,抗血清效价最高达到1∶32 000倍,MC-LR对鼠多抗血清的抑制中浓度(I50)为0.53μg/mL。成功合成了MC-LR的免疫原和包被原为其单克隆抗体的制备奠定了基础。还比较了3种鉴定方法的适用性和优缺点,为其他人工抗原的鉴定方法提供了有益的参考。

Abstract

wei nang zao du su LR(MC-LR)fen zi liang xiao yu 1 000 u,wei ban kang yuan ,xu yao yu zai ti dan bai ou lian hou cai neng ci ji mian yi ying da yong yu kang ti zhi bei 。ben yan jiu li yong tan er ya an fa jiang MC-LRfen bie yu yao kong xie lan dan bai (KLH)he niu xie qing bai dan bai (BSA)jin hang ou lian ,huo de mian yi kang yuan (MC-KLH)he bao bei kang yuan (MC-BSA)。cai yong zi wai sao miao guang pu 、SDSju bing xi xian an ning jiao dian yong (SDS-PAGE)、ji zhi fu zhu ji guang jie xi dian li fei hang shi jian zhi pu (MALDI-TOF MS)deng 3chong fang fa dui 2chong ren gong kang yuan jin hang jian ding ,bing dui xiao shu jin hang mian yi 。yong jian jie fei jing zheng mei lian mian yi xi fu ce ding fa (ELISA)he jing zheng ELISAce ding le kang xie qing xiao jia he min gan du 。jie guo biao ming ,zi wai sao miao guang pu fa ke guan cha dao 2chong ren gong kang yuan de zi wai xi shou pu yu zai ti dan bai xiang bi fa sheng gai bian 。tong guo SDS-PAGEfa ke yi guan cha dao MC-BSAfen zi liang bi BSAzeng da 。ling wai zhi pu fa ce ding de MC-BSAde xiang dui fen zi liang wei 76 515.84,ji suan de dao de MC-LRyu BSAde ou lian bi wei 10∶1。MC-KLHmian yi xiao shu hou ,kang xie qing xiao jia zui gao da dao 1∶32 000bei ,MC-LRdui shu duo kang xie qing de yi zhi zhong nong du (I50)wei 0.53μg/mL。cheng gong ge cheng le MC-LRde mian yi yuan he bao bei yuan wei ji chan ke long kang ti de zhi bei dian ding le ji chu 。hai bi jiao le 3chong jian ding fang fa de kuo yong xing he you que dian ,wei ji ta ren gong kang yuan de jian ding fang fa di gong le you yi de can kao 。

论文参考文献

  • [1].阿特拉津在金纳米通道中的迁移特性研究[J]. 李平,赵国庆,岳增连,樊定艳,黄杉生.  上海师范大学学报(自然科学版).2012(03)
  • [2].高效毛细管电泳法测定膝沟藻毒素2和3[J]. 陈晓燕,张允奇,张银辉.  中国卫生检验杂志.2007(03)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自江苏农业科学的何丹,刘媛,李先保,龚航,王丽,郝佳,张晓帅,徐重新,张存政,刘贤金,发表于刊物江苏农业科学2019年09期论文,是一篇关于微囊藻毒素论文,抗体论文,免疫原论文,包被原论文,鉴定论文,江苏农业科学2019年09期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自江苏农业科学2019年09期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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