导读:本文包含了紫藤脉花叶病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:紫藤脉花叶病毒,外壳蛋白,原核表达,抗血清
紫藤脉花叶病毒论文文献综述
梁文星,宋丽敏,黄金光,田国忠,李怀方[1]（2004）在《紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备》一文中研究指出采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b(+)上。获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为34.4kDa。将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清。微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1/1024,酶联法(enzyme-linkedimmunosorbantassay,ELISA)测定的效价为1/8192。(本文来源于《中国病毒学》期刊2004年03期）
梁文星[2]（2004）在《Ⅰ紫藤脉花叶病毒的鉴定及其全序列测定 Ⅱ新疆杨胰蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达与活性测定》一文中研究指出北京地区的紫藤脉花叶病是由马铃薯Y病毒属的一种病毒侵染所致。通过机械接种的方法将此病毒的北京分离物接种到昆诺藜、苋色藜、克利夫兰烟和蚕豆上，分别产生系统褪绿斑、局部褪绿斑、轻微系统褪绿斑和系统褪绿斑等症状。ELISA分析显示此分离物与BCMV和WMV间具有血清学关系。虽然在发病紫藤种子的胚乳中能检测到其外壳蛋白的存在，但此分离物却不能通过种子传播。对提纯的病毒进行SDS-PAGE和Western blot分析，测得其CP亚基的分子量为35.0 kD。在被侵染的蚕豆叶片细胞中观察到了Potyvirus病毒所具有的典型的风轮状内含体。以上生物学特性的研究以及对其CP基因和3′-非翻译区序列的分析证明此病毒为紫藤脉花叶病毒(WVMV)，这是关于此病毒在中国发生的首次报道。 通过7次RT-PCR得到了WVMV北京分离物(WVMV-BJ)基因组的全序列，这是关于此病毒基因组全序列的首次报道。序列分析结果表明：WVMV-BJ全序列共9695个核苷酸，5′-和3′-非翻译区序列分别为164和252个核苷酸，中间为9279个核苷酸的开放读框，编码一个长为3063个氨基酸、分子量约为353.4 kD的多聚蛋白。此病毒基因组及其所编码的多聚蛋白的大小与其它马铃薯Y病毒属病毒较为相近。多聚蛋白含有9个可能的蛋白酶切位点，切割后产生的成熟蛋白产物中具有保守的氨基酸基序，这与其它potyviruses都非常相似。在10个蛋白产物中，CI、NIb和CP相对保守，而P1和P3变异最大。 采用RT-PCR方法自WVMV-BJ的基因组中扩增出其CP基因，连接到原核表达载体pET22b(+)上。获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后，用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明，CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达，融合蛋白分子量约为34.4 kD。将融合蛋白纯化后免疫兔子，获得了特异性较高的抗血清。微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1／1024，酶联法测定效价为1／8192。 蛋白酶抑制剂具有抑制蛋白酶活性的作用，这为通过抑制马铃薯Y病毒属编码的蛋白酶活性从而控制此类病毒提供了新的途径。用RT-PCR方法从新疆杨叶片中分离出一个Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(PTI)基因。序列分析表明；PTI基因翻译起点上游具有‘TATA’和‘CCAAT’等转录控制元件，其包含的最大阅读框架能编码一个213aa的多肽。序列比对证明PTI与克隆自欧美山杨的PtTI2和PtTI1同源性最高，分别为95％和80％。将PTI基因以融合蛋白的形式在大肠杆菌中进行表达，纯化后的融合蛋白对胰蛋白酶的活性有抑制作用。Western blotting分析表明融合蛋白与PtTI2特异的抗体之间有明显的血清学反应。(本文来源于《中国农业大学》期刊2004-05-01）
紫藤脉花叶病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
北京地区的紫藤脉花叶病是由马铃薯Y病毒属的一种病毒侵染所致。通过机械接种的方法将此病毒的北京分离物接种到昆诺藜、苋色藜、克利夫兰烟和蚕豆上，分别产生系统褪绿斑、局部褪绿斑、轻微系统褪绿斑和系统褪绿斑等症状。ELISA分析显示此分离物与BCMV和WMV间具有血清学关系。虽然在发病紫藤种子的胚乳中能检测到其外壳蛋白的存在，但此分离物却不能通过种子传播。对提纯的病毒进行SDS-PAGE和Western blot分析，测得其CP亚基的分子量为35.0 kD。在被侵染的蚕豆叶片细胞中观察到了Potyvirus病毒所具有的典型的风轮状内含体。以上生物学特性的研究以及对其CP基因和3′-非翻译区序列的分析证明此病毒为紫藤脉花叶病毒(WVMV)，这是关于此病毒在中国发生的首次报道。 通过7次RT-PCR得到了WVMV北京分离物(WVMV-BJ)基因组的全序列，这是关于此病毒基因组全序列的首次报道。序列分析结果表明：WVMV-BJ全序列共9695个核苷酸，5′-和3′-非翻译区序列分别为164和252个核苷酸，中间为9279个核苷酸的开放读框，编码一个长为3063个氨基酸、分子量约为353.4 kD的多聚蛋白。此病毒基因组及其所编码的多聚蛋白的大小与其它马铃薯Y病毒属病毒较为相近。多聚蛋白含有9个可能的蛋白酶切位点，切割后产生的成熟蛋白产物中具有保守的氨基酸基序，这与其它potyviruses都非常相似。在10个蛋白产物中，CI、NIb和CP相对保守，而P1和P3变异最大。 采用RT-PCR方法自WVMV-BJ的基因组中扩增出其CP基因，连接到原核表达载体pET22b(+)上。获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后，用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明，CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达，融合蛋白分子量约为34.4 kD。将融合蛋白纯化后免疫兔子，获得了特异性较高的抗血清。微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1／1024，酶联法测定效价为1／8192。 蛋白酶抑制剂具有抑制蛋白酶活性的作用，这为通过抑制马铃薯Y病毒属编码的蛋白酶活性从而控制此类病毒提供了新的途径。用RT-PCR方法从新疆杨叶片中分离出一个Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(PTI)基因。序列分析表明；PTI基因翻译起点上游具有‘TATA’和‘CCAAT’等转录控制元件，其包含的最大阅读框架能编码一个213aa的多肽。序列比对证明PTI与克隆自欧美山杨的PtTI2和PtTI1同源性最高，分别为95％和80％。将PTI基因以融合蛋白的形式在大肠杆菌中进行表达，纯化后的融合蛋白对胰蛋白酶的活性有抑制作用。Western blotting分析表明融合蛋白与PtTI2特异的抗体之间有明显的血清学反应。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
紫藤脉花叶病毒论文参考文献
[1].梁文星,宋丽敏,黄金光,田国忠,李怀方.紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备[J].中国病毒学.2004
[2].梁文星.Ⅰ紫藤脉花叶病毒的鉴定及其全序列测定Ⅱ新疆杨胰蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达与活性测定[D].中国农业大学.2004