贾小俭:甘薯蚁象气味结合蛋白CforOBP8的基因表达谱及配体结合特性分析论文

贾小俭:甘薯蚁象气味结合蛋白CforOBP8的基因表达谱及配体结合特性分析论文

本文主要研究内容

作者贾小俭,高波,马娟,李秀花,陈书龙,王容燕(2019)在《甘薯蚁象气味结合蛋白CforOBP8的基因表达谱及配体结合特性分析》一文中研究指出:【目的】明确甘薯蚁象Cylas formicarius气味结合蛋白(odorant binding protein, OBP) OBP8的基因表达谱及与配体化合物的结合特性。【方法】基于甘薯蚁象成虫转录组数据,利用RT-PCR方法从甘薯蚁象成虫触角中克隆了气味结合蛋白OBP8基因,并进行生物信息学分析;采用qPCR方法测定该基因在甘薯蚁象成虫触角、口器、翅和跗节中的表达谱;构建原核表达载体,进行诱导表达及蛋白纯化。利用荧光竞争结合实验测定纯化的重组蛋白与16种配体化合物(1种性信息素和15种植物挥发物)的结合特性。【结果】获得甘薯蚁象气味结合蛋白基因CforOBP8(GenBank登录号:MH549528)的完整编码序列,其开放阅读框长414 bp,编码138个氨基酸,预测分子量为15.56 kD,等电点为4.71,N末端具有21个氨基酸组成的信号肽序列,蛋白序列具有4个保守的半胱氨酸,CforOBP8属于Minus-C OBPs亚家族。荧光定量PCR结果表明,CforOBP8在甘薯蚁象成虫触角中特异性表达,在其他组织中微量表达。SDS-PAGE结果显示融合蛋白成功表达。CforOBP8与配体化合物的结合力测试表明,CforOBP8与性信息素(E)-2-丁烯酸顺-(Z)-3十二烯基酯结合能力最强,解离常数K_i为4.13μmol/L;其次与5种植物挥发物也有一定的结合能力,依次为乙酸顺-3-己烯酯(K_i=7.54μmol/L)、柠檬烯(K_i=15.23μmol/L)、橙花醇(K_i=16.31μmol/L)、壬醛(K_i=28.71μmol/L)和苯乙醛(K_i=29.54μmol/L)。【结论】CforOBP8可能是甘薯蚁象性信息素结合蛋白,并且在感受性信息素和寄主植物挥发物的过程中都发挥作用。

Abstract

【mu de 】ming que gan shu yi xiang Cylas formicariusqi wei jie ge dan bai (odorant binding protein, OBP) OBP8de ji yin biao da pu ji yu pei ti hua ge wu de jie ge te xing 。【fang fa 】ji yu gan shu yi xiang cheng chong zhuai lu zu shu ju ,li yong RT-PCRfang fa cong gan shu yi xiang cheng chong chu jiao zhong ke long le qi wei jie ge dan bai OBP8ji yin ,bing jin hang sheng wu xin xi xue fen xi ;cai yong qPCRfang fa ce ding gai ji yin zai gan shu yi xiang cheng chong chu jiao 、kou qi 、chi he fu jie zhong de biao da pu ;gou jian yuan he biao da zai ti ,jin hang you dao biao da ji dan bai chun hua 。li yong ying guang jing zheng jie ge shi yan ce ding chun hua de chong zu dan bai yu 16chong pei ti hua ge wu (1chong xing xin xi su he 15chong zhi wu hui fa wu )de jie ge te xing 。【jie guo 】huo de gan shu yi xiang qi wei jie ge dan bai ji yin CforOBP8(GenBankdeng lu hao :MH549528)de wan zheng bian ma xu lie ,ji kai fang yue dou kuang chang 414 bp,bian ma 138ge an ji suan ,yu ce fen zi liang wei 15.56 kD,deng dian dian wei 4.71,Nmo duan ju you 21ge an ji suan zu cheng de xin hao tai xu lie ,dan bai xu lie ju you 4ge bao shou de ban guang an suan ,CforOBP8shu yu Minus-C OBPsya jia zu 。ying guang ding liang PCRjie guo biao ming ,CforOBP8zai gan shu yi xiang cheng chong chu jiao zhong te yi xing biao da ,zai ji ta zu zhi zhong wei liang biao da 。SDS-PAGEjie guo xian shi rong ge dan bai cheng gong biao da 。CforOBP8yu pei ti hua ge wu de jie ge li ce shi biao ming ,CforOBP8yu xing xin xi su (E)-2-ding xi suan shun -(Z)-3shi er xi ji zhi jie ge neng li zui jiang ,jie li chang shu K_iwei 4.13μmol/L;ji ci yu 5chong zhi wu hui fa wu ye you yi ding de jie ge neng li ,yi ci wei yi suan shun -3-ji xi zhi (K_i=7.54μmol/L)、ning meng xi (K_i=15.23μmol/L)、cheng hua chun (K_i=16.31μmol/L)、ren quan (K_i=28.71μmol/L)he ben yi quan (K_i=29.54μmol/L)。【jie lun 】CforOBP8ke neng shi gan shu yi xiang xing xin xi su jie ge dan bai ,bing ju zai gan shou xing xin xi su he ji zhu zhi wu hui fa wu de guo cheng zhong dou fa hui zuo yong 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自昆虫学报的贾小俭,高波,马娟,李秀花,陈书龙,王容燕,发表于刊物昆虫学报2019年03期论文,是一篇关于甘薯蚁象论文,气味结合蛋白论文,性信息素论文,表达谱论文,荧光竞争结合实验论文,昆虫学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自昆虫学报2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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