导读:本文包含了敏感蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:韭菜迟眼蕈蚊,紫外敏感视蛋白基因(uv),克隆,趋光性
敏感蛋白论文文献综述
安立娜,范凡,杨小凡,李梦瑶,刘小侠[1]（2019）在《韭菜迟眼蕈蚊紫外敏感视蛋白基因的克隆及光强度对其表达量影响》一文中研究指出为明确韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga紫外敏感视蛋白基因Bo-uv的作用及其与趋光性的关系,利用常规PCR方法克隆获得Bo-uv基因的全长cDNA序列,分析了其敏感视蛋白的氨基酸序列与其它12种昆虫同源蛋白氨基酸序列之间的系统进化关系,运用qPCR技术检测了不同发育阶段、不同组织及不同光强度下Bo-uv基因的相对表达量。结果表明,Bo-uv基因cDNA全长2 757 bp,开放阅读框1 542 bp,编码514个氨基酸。韭菜迟眼蕈蚊紫外敏感视蛋白的氨基酸序列与其它12种昆虫同源蛋白的氨基酸序列一致性为21.93%～43.00%,与橘小实蝇Bactrocera dorsalis的氨基酸序列同源性最高。Bo-uv基因在韭菜迟眼蕈蚊蛹末期、成虫期表达,在成虫头部的相对表达量较高。在0～10 000 lx光强范围内雌、雄成虫体内该基因的相对表达量均呈先增高后降低趋势。与对照相比,1 000 lx光强度下其相对表达量显着升高,10 000 lx时相对表达量显着降低。表明光强度能够有效地调控Bo-uv基因的表达,该基因在韭菜迟眼蕈蚊感知外界光刺激过程中具有重要作用。(本文来源于《植物保护学报》期刊2019年05期）
王喻,饶跃峰,杨惠卿,骆红飞,赵子明[2]（2019）在《pH敏感型热休克笼形蛋白纳米载体的构建及其理化性质评价》一文中研究指出目的设计并制备具有靶向肿瘤且pH敏感的热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)笼形蛋白纳米递药系统,并对其理化性质进行表征。方法采用基因全合成与蛋白质重组表达技术纯化HSP为母版,通过表面官能团功能化制备得到修饰穿膜肽Tat、聚乙二醇包衣的热休克笼形蛋白纳米载体(PT-HSP)。通过透射电镜、纳米粒度与Zeta电位测定仪对其形态、粒径及Zeta电位进行表征,并建立HPLC测定其载药量与包封率。考察载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的PT-HSP在生理pH条件(pH7.4)与肿瘤pH条件(pH6.5)下的体外释药行为。结果形态学结果表明,PT-HSP是呈现典型双层结构的均一球体,平均粒径为(154.4±23.6)nm,Zeta电位为(?2.6±0.7)mV。HPLC测得载PTX的PT-HSP的包封率为(75.3±3.6)%,载药量为(7.0±0.2)%。体外释药试验结果表明PT-HSP在pH7.4条件下的释放速率显着慢于pH6.5条件下的释放速率(P<0.01)。结论本研究制备得到的pH敏感的HSP笼形蛋白智能纳米递药系统具有载药量高、稳定性强及智能靶向等优点,有望成为一种安全、有效、智能的抗肿瘤药物载体。(本文来源于《中国现代应用药学》期刊2019年17期）
杨猛,张凌,黄林平,刘军,孙小亮[3]（2019）在《钙敏感受体在继发性和原发性甲状旁腺功能亢进中蛋白表达的特点》一文中研究指出目的研究钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CASR)在继发性甲旁亢中的蛋白表达。方法观察31例继发性甲旁亢、20例原发性甲旁亢、20例正常甲状旁腺组织CASR的蛋白表达情况。结果在CASR蛋白表达方面,继发性甲旁亢组织高于原发性甲旁亢,低于正常甲状旁腺组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论继发性甲旁亢CASR蛋白表达的特点为早期进行干预达到更好的治疗效果提供了思路。(本文来源于《第十二次全国中西医结合内分泌代谢病学术大会暨糖尿病、甲状腺疾病高峰论坛论文资料汇编》期刊2019-09-06）
赵婷婷,夏玉先,金凯[4]（2019）在《蝗绿僵菌高渗透压敏感蛋白MaSho1的功能研究》一文中研究指出杀虫真菌作为重要的生防资源,具有对环境友好、害虫不易产生抗性、持续控制等优点,但其防效不稳定、杀虫速度慢、生产成本高等不足限制了其广泛应用(Thomas and Read, 2007)。分生孢子作为昆虫病原真菌的主要侵染器官,在真菌的生长和繁殖过程中起着关键性的作用,孢子产量会直接影响杀虫真菌农药的防治效果和生产成本(Jenkins and Goettel, 1997)。因此,研究昆虫病原真菌生防相关性状及其分子机制,对充分挖掘其生防潜力具有重要意义。Sho1是HOG-MAPK信号传导途径上游的重要跨膜蛋白,在不同真菌中具有不同的功能(Seet and Pawson, 2004)。HOG-MAPK信号途径参与调节真菌的渗透压响应,在昆虫病原真菌的生长发育、逆境耐受能力及致病过程中发挥着重要的作用(Román et al., 2019)。本研究从蝗绿僵菌中克隆得到Sho1的同源基因MaSho1并对其功能进行研究。序列分析发现该基因编码306个氨基酸,具有四个跨膜结构域和一个SH3功能域。通过构建MaSho1敲除和回复菌株,以及SH3结构域缺失菌株,对MaSho1和SH3结构域在蝗绿僵菌中的功能进行了研究。结果表明,与野生型和回复菌株相比,ΔMaSho1突变体的紫外耐受性显着降低但抗湿热能力无显着影响;细胞壁完整性受到破坏,抗氧化和高渗胁迫能力显着降低,且SH3结构域参与调控氧化耐受性和高渗胁迫。生测分析发现MaSho1缺失后蝗绿僵菌的致病能力显着降低。有趣的是,MaSho1缺失后产孢量显着提高,菌丝隔间距显着缩短,蝗绿僵菌在1/4 SDAY培养基上的产孢方式发生改变,即由正常产孢转换为微循环产孢,但SH3结构域不参与调控产孢方式的转换。利用数字表达谱分析筛选得到产孢时期MaSho1缺失后的差异表达基因103个,在49个已知基因中有23个与菌丝发育、分支、细胞分裂和产孢相关。此外,参与调控产孢相关途径的部分基因也受到MaSho1的调控,推测MaSho1通过调控产孢相关途径以及细胞分裂和分化相关基因的表达来抑制菌丝的生长,调控产孢方式的转换,进而促进分生孢子的产生。上述结果表明,MaSho1不仅参与调控蝗绿僵菌的致病过程,而且通过调控的菌丝生长和产孢方式的转换来影响蝗绿僵菌的产孢量。因此,进一步研究蝗绿僵菌MaSho1在调控产孢方式转换中的分子机制,具有重要的理论意义和实际应用价值。(本文来源于《多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要》期刊2019-08-03）
高家林,朱玉,张魏,鲁雅群,胡永慧[5]（2019）在《尿糖敏感的尿蛋白指数用于糖尿病肾病易感性预测的相关分析》一文中研究指出目的:初步建立和定义尿蛋白发生敏感指数(尿蛋白/尿糖、糖肾指数)方法,并探讨其用于预测糖尿病肾病(DKD)发病的有效性。方法:筛选近3年本院至少2次以上住院糖尿病患者(前后间隔不少于3个月)期间段内第一次住院尿糖阳性患者,并根据尿蛋白是否阳性分为尿蛋白阳性合并尿糖阳性(U~(P+/G+))组和尿蛋白阴性合并尿糖阳性(U~(P-/G+))组,通过相关性分析、分层分析、分组分析等回顾性分析,评估糖肾指数用于DKD早期预测的可行性。结果:一般资料分析表明,U~(P+/G+)组尿糖低于U~(P-/G+)组(P<0.05),而糖肾指数、尿酸、肌酐、尿素氮、血压、病程、体质量等指标高于U~(P-/G+)组(P<0.05或0.01),其余HbA1c、空腹血糖、年龄等指标差异无统计学意义。基于尿糖敏感(尿蛋白阳性)的U~(P+/G+)组患者后期住院尿蛋白阳性率高于U~(P-/G+)组(P<0.01),对糖肾指数进行高低分层后分析表明,随着糖肾指数及分层的危险程度增加,后期尿蛋白出现阳性的比率也随之增高,差异具有统计学意义(P<0.001)。对尿蛋白发生的相关因素及尿糖相关性分层分析表明,除病程、血压、体质量外(P<0.01),尿糖也是尿蛋白发生的密切相关因素(分层条件相关),对尿糖的相关性按糖肾指数进行分层分析发现,糖肾指数在0.1～1之间时(中度～高度),尿蛋白与尿糖的发生高度相关(具有尿糖敏感性),有统计学意义(P<0.01),而在低度及极高度分层时,尿蛋白与尿糖不具有明显相关性(P>0.05)。结论:DKD患者尿蛋白的发生具有尿糖敏感性,与尿糖存在着条件(临床易感)相关性,基于尿糖敏感性的尿蛋白发生敏感指数(糖肾指数)可作为DKD的易感预测指数,指导临床DKD的防治。(本文来源于《皖南医学院学报》期刊2019年04期）
刘凤鸣,覃慧婵,覃先连,谢馥懋,黄贵[6]（2019）在《脓毒症患者外周血α_1-酸性糖蛋白、凝血酶敏感蛋白1的表达水平及意义》一文中研究指出目的探讨脓毒症患者外周血α_1-酸性糖蛋白(AAP)、凝血酶敏感蛋白1(TSP1)表达水平及其临床意义。方法选取2017年6月～2018年6月在南宁市第一人民医院(以下简称"我院")进行健康体检者(30名)或者治疗患者90例。根据研究对象的健康状况分为正常组、非脓毒症的SIRS组(30例)、轻度脓毒症组(30例)、严重脓毒症组(30例),分别获取其清晨空腹血清。比较四组患者C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、AAP、TSP1表达水平差异。结果非脓毒症的SIRS组、轻度脓毒症组、严重脓毒症组的CRP、PCT表达水平均显着高于正常组,差异有统计学意义(P <0.05)。轻度脓毒症组、严重脓毒症组的AAP、TSP1表达水平均显着高于正常组,差异有统计学意义(P <0.05)。轻度脓毒症组、严重脓毒症组的PCT、AAP、TSP1表达水平均高于非脓毒症的SIRS组,差异有统计学意义(P <0.05);严重脓毒症组的AAP表达水平高于轻度脓毒症组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论PCT在诊断脓毒症中具有优势,AAP在脓毒症严重程度分级中具有优势,两者联合可以较好地判断非脓毒症的全身炎症反应综合征及脓毒症患者的严重程度,为临床早期治疗提供参考依据。(本文来源于《中国医药导报》期刊2019年16期）
李翔[7]（2019）在《钙敏感受体对持续性肺动脉高压新生小鼠中小凹蛋白-1、内皮型一氧化氮合酶及一氧化氮的影响》一文中研究指出目的:探讨钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在持续性肺动脉高压(persistent pulmonary hypertension,PPH)新生C57BL/6小鼠模型中对小凹蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达及一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度的影响。方法:60只SPF级C57BL/6小鼠,以雌性和雄性比例为1:2进行合笼配对。称重雌鼠体重超过2g,即为怀孕,将怀孕母鼠单独置于一笼饲养,自由饮水、进食。待雌鼠怀孕产仔后,新生小鼠随机分为对照组(n=20)、PPH组(n=20)、激动剂组(n=20)和抑制剂组(n=20),共80只。对照组新生小鼠暴露于氧浓度为21%的空气中,PPH组、激动剂组和抑制剂组新生小鼠则暴露于12%的低氧浓度中。每日腹腔注射一次分别给予激动剂组和抑制剂组新生小鼠CaSR激动剂(GdCl_3)16 mg/kg、CaSR抑制剂(NPS-2390)1 ml/kg。PPH组和对照组新生小鼠以生理盐水替代,共14天。采用苏木精-伊红(H&E)染色检测肺泡和肺血管变化;采用Western blot、qRT-PCR和免疫组化检测新生小鼠肺组织中Cav-1和eNOS的蛋白、mRNA的表达及定位;采用ELISA法分别检测小鼠肺组织匀浆中脑利钠肽(brain-type natriuretic peptide,BNP)及NO的含量。结果:1)与对照组相比,PPH组和激动剂组小鼠的肺泡平均内衬间隔(mean linear intercept,MLI)、肺小动脉血管壁厚度(wall thickness,WT)、右心室与左心室壁厚度比(RV/LV)及BNP浓度均明显增大,径向肺泡计数(radial alveolar count,RAC)明显减少(P<0.05);除了RV/LV外,上述指标在抑制剂组均较PPH组和激动剂组有所改善(P<0.05);2)与对照组相比,PPH组小鼠Cav-1和eNOS的蛋白、mRNA及免疫组化表达量明显增高,激动剂组表达水平增加显着,而抑制剂组表达减少(P<0.05);3)与对照组相比,NO浓度在PPH组中增高明显,在激动剂组中显着增高,而抑制剂组减少(P<0.05)。结论:CaSR可能通过影响Cav-1和eNOS的表达和NO浓度在新生小鼠PPH发病中发挥重要作用。(本文来源于《石河子大学》期刊2019-06-01）
封洁珠,李恩泽,彭子瀚,裴一飞,朱林燕[8]（2019）在《卵巢癌顺铂敏感与耐药细胞ClC-3蛋白表达及通道功能的差异》一文中研究指出目的:从分子和细胞水平研究卵巢癌顺铂敏感(a2780)及耐药(a2780cp)细胞中ClC-3氯通道蛋白表达及通道功能的差异。方法:MTT法检测人卵巢癌a2780和a2780cp细胞对顺铂敏感性的差异;real-time PCR法检测ClC氯通道家族在a2780和a2780cp细胞中的mRNA表达;Western blot检测ClC-3蛋白的表达;免疫荧光法观察ClC-3蛋白在a2780和a2780cp细胞的分布;全细胞膜片钳技术记录细胞氯电流。结果:(1) a2780和a2780cp细胞对顺铂的敏感性存在差异,其IC_(50)值分别为5μmol/L和20μmol/L(P<0.01);(2)对ClC氯通道家族mRNA表达的检测结果显示,a2780和a2780cp细胞主要表达ClC-3,且在a2780cp细胞中ClC-3 mRNA表达显着减少(P<0.01);(3)在蛋白水平上,与a2780细胞相比,a2780cp细胞的ClC-3蛋白表达量显着降低(P<0.01);(4)免疫荧光显示ClC-3在a2780细胞中主要分布在胞膜上,而在a2780cp细胞中则主要表达在胞质内;(5)顺铂能激活a2780细胞的氯通道,产生ClC-3介导的氯电流,但在a2780cp细胞中则不能;(6)ClC-3 siRNA处理a2780细胞后,顺铂诱导的氯电流则不再出现。结论:ClC-3氯通道在顺铂敏感和耐药的卵巢癌细胞蛋白分布、表达和功能上存在差异,可能是引起顺铂耐药的潜在机制之一。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年05期）
谢军[9]（2019）在《IPO13在RSV NS1蛋白抑制激素受体入核导致激素治疗不敏感的作用机制研究》一文中研究指出第一部分RSV感染后小鼠模型激素治疗的效应分析目的:呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)是引起5岁以下婴幼儿下呼吸道感染最常见的病毒病原,生命早期重症RSV感染住院患儿中约39%在18岁时会出现反复喘息或发生哮喘。糖皮质激素(glucocorticoid,GC)作为一种非特异性抗炎药物,被广泛应用于RSV感染急性期治疗。但荟萃分析发现GC对RSV感染引起的毛细支气管炎治疗效果并不理想,既不能缩短住院时间,也不能减少RSV感染后期反复喘息的发生,其机制并不清楚。方法:BALB/c小鼠生长至6-8周时滴鼻给予RSV 100μl含1.5×10~8PFU/ml病毒液及HEP-2细胞培养上清,RSV感染2h后腹腔注射地塞米松;建立Control组、RSV组和RSV+DEX组。于RSV感染小鼠后不同时间点收取肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织,通过ELISA检测BALF中IL-6、IFN-γ水平;肺组织病理H&E染色及BALF细胞计数和分类计数评价炎症反应;检测小鼠气道阻力评估气道高反应性(Airway hyperresponsiveness,AHR)。结果:RSV感染小鼠气道炎症及气道高反应性均较对照组明显,病理损伤较对照组重,细胞因子IL-6、IFN-γ明显增高。予以大剂量地塞米松治疗后肺组织病理损伤较RSV更加重,气道炎症及气道AHR无明显改变;细胞因子IFN-γ无明显改变,但IL-6水平较RSV组更高,并且呈地塞米松剂量依赖。不同剂量的地塞米松同样对气道炎症、气道高反应以及细胞因子无明显改变。结论:地塞米松不能抑制RSV感染引起的气道炎症及气道高反应性。第二部分RSV感染后对激素受体影响作用研究目的:激素与胞浆中激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合后,进入细胞核,才能进一步通过转录激活或转录抑制发挥抗炎作用。在激素不敏感的哮喘、COPD和银屑病患者体内外研究显示GR核易位减少。在激素抵抗的中性粒细胞性气道炎症性疾病(包括中性粒细胞性哮喘、COPD等)中:GR不能正常进入细胞核而滞留胞浆。研究发现RSV和Poly(I:C)可以抑制上皮细胞GR介导的基因转录。RSV感染后对GR的影响尚未见系统报道。方法:RSV感染患儿以及对照组患儿鼻咽抽吸物(NPA)收集后细胞计数、细胞因子测定以及免疫荧光检测GR表达、PCR检测GRα和GRβ表达。BALB/c小鼠生长至6-8周时滴鼻给予RSV、经紫外灭活的RSV及HEP-2细胞培养上清,建立RSV组、UV-RSV组和Control组。在RSV感染后不同时间点收集肺组织,Western blot检测GR总蛋白以及胞浆胞核水平,PCR检测GRα、GRβ基因表达以及GR介导的抗炎基因FKBP51、GILZ、MKP-1表达情况,免疫荧光检测肺组织中GR入核情况。并建立RSV感染A549上皮细胞,免疫荧光检测GR入核情况以及PCR检测GR介导的抗炎基因FKBP51、GILZ、MKP-1表达情况。结果:RSV感染患儿NPA中GRβ表达下降,GRα无明显下降,GR入核明显减少。RSV感染小鼠肺组织中GRα、GRβ表达以及GR蛋白均下降,胞核中GR蛋白表达明显下降,同时GR介导的抗炎基因FKBP51、GILZ、MKP-1表达下降,免疫荧光显示GR入核明显减少。A549细胞中同样观察到GR入核明显减少,同时伴有GR介导的抗炎基因GILZ、MKP-1表达下降,而UV-RSV感染后对GR表达及入核均无明显影响。结论:RSV感染后下调GR表达,抑制GR入核。第叁部分RSV NS1蛋白通过竞争性结合IPO13导致GR入核障碍的作用机制研究目的:目前RSV感染导致GR入核障碍的机制并不清楚。研究已证实IPOs家族是介导GR入核的关键分子,在气道或肺上皮细胞中研究发现IPO7、IPO13对GR入核起着十分关键的作用。有研究显示RSV NS1蛋白可直接作用于IPO7、IPO8。因此,需探明NS1是否可通过直接作用于IPO家族,干扰了IPO与GR的结合,从而导致GR入核障碍。方法:RSV感染患儿以及对照组患儿NPA收集后PCR检测IPO13、IPO7表达情况。BALB/c小鼠RSV感染后不同时间点收集肺组织,Western blot检测IPO13总蛋白水平,PCR检测IPO13基因表达。建立RSV感染A549上皮细胞,使用siRNA沉默NS1后免疫荧光检测GR入核情况以及PCR检测GR介导的抗炎基因GILZ、MKP-1表达情况,并使用免疫共沉淀检测IPO13、GR以及NS1相互作用情况。体外采用GST pull down明确IPO13与GR,NS1与IPO13是否直接相互作用。结果:RSV感染患儿NPA中IPO13基因表达下降。RSV感染小鼠肺组织中IPO13基因和蛋白均下降。siRNA沉默NS1后A549细胞中观察到GR入核明显增加,同时GR介导的抗炎基因GILZ、MKP-1表达增加。蛋白相互显示GR与IPO13,NS1与IPO13均有直接相互作用,siRNA沉默NS1后GR与IPO13结合增加。结论:RSV NS1可能通过竞争性抑制IPO13与GR的结合,导致GR入核障碍,激素治疗不敏感。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
高磊琼[10]（2019）在《NS1蛋白在呼吸道合胞病毒感染激素治疗不敏感的作用机制研究》一文中研究指出第一部分RSV感染对糖皮质激素受体(GR)的影响目的:RSV是引起全球5岁以下婴幼儿下呼吸道感染最常见的病毒病原体。目前尚无有效疫苗预防与药物防治。RSV感染诱发的炎症对糖皮质激素治疗不敏感,机制尚不完全清楚。糖皮质激素发挥其抗炎效果通过调控糖皮质激素受体(glucocorticoid receptors,GR)的表达转运。GR表达降低是糖皮质激素治疗不敏感的重要机制,RSV感染是否下调GR的表达导致糖皮质激素治疗不敏感尚不清楚。故此,本部分主要研究RSV感染对GR表达的影响。方法:收集RSV感染患儿住院第一天的NPAs标本及正常对照组NPAs标本,检测GR mRNA和蛋白表达水平;运用RSV和UV-RSV感染A549细胞及BEAS-2B细胞模型,检测GR mRNA和蛋白表达水平。结果:1.RSV感染患儿NPA中GR mRNA和蛋白表达水平较对照组均显着降低(P<0.01);2.RSV感染A549细胞及BEAS-2B细胞后,GR mRNA和蛋白表达水平呈一个感染时间依赖性降低(P<0.05);3.UV-RSV对GR mRNA和蛋白表达水平无影响。结论:RSV活病毒感染可降低GR mRNA和蛋白表达水平。第二部分RSV感染后miR-29a的表达及其对GR mRNA表达水平的影响目的:miRNA是一类22nt大小的非编码RNA,可以调控基因的3’UTR,降低其mRNA的稳定性,介导mRNA降解。GR 3’UTR有多个miRNA结合位点,其表达可受miRNA的调控。软件预测发现GR3’UTR 1078-1084位点为miR-29a的靶标序列。miR-29a是一个上皮细胞源性的miRNA,文献报道RSV感染可升高miR-29a表达,也可降低GR mRNA水平,故我们推测RSV通过调控miR-29a表达降低GR mRNA表达水平。方法:检测RSV感染患儿和正常对照组NPAs中miR-29a的表达并分析其与GR mRNA和蛋白表达水平的相关性;建立RSV和UV-RSV感染A549细胞和BEAS-2B细胞感染模型,检测miR-29a的表达;敲减或过表达miR-29a后,检测RSV感染A549细胞和BEAS-2B细胞中GR mRNA和蛋白表达水平;进一步通过双荧光素酶报告系统验证GR是否为miR-29a的靶基因。结果:1.RSV感染患儿NPAs中miR-29a表达增高,且与GR mRNA及蛋白表达有显着相关性(P<0.01);2.RSV感染A549细胞和BEAS-2B细胞后,miR-29a呈一个感染时间与感染剂量依赖性增高(P<0.05);3.敲减或过表达miR-29a的表达显着恢复RSV感染对GR mRNA及蛋白的降低(P<0.05)。4.GR是miR-29a的一个靶基因。结论:RSV感染后上调miR-29a的表达,降低GR mRNA和蛋白表达水平。第叁部分RSV感染后p53的表达及其对GR蛋白表达水平的影响目的:抑制miR-29a的表达只可部分恢复RSV感染对GR蛋白的降低,且使用MG-132蛋白酶抑制剂后可恢复GR蛋白表达,表明RSV对GR蛋白的抑制作用还存在其他机制。在细胞处于低氧状态时,GR蛋白降解主要通过与p53及Mdm2蛋白相互作用,启动Mdm2介导的泛素化途径降解。RSV感染可诱导宿主细胞呈一个低氧状态,故此我们推测RSV通过调控p53-Mdm2下调GR的蛋白表达。方法:检测RSV感染患儿和正常对照组NPAs中p53蛋白的表达并分析其与GR蛋白表达水平的相关性;建立RSV和UV-RSV感染A549细胞感染模型,检测p53蛋白表达水平及GR、p53和Mdm2叁者之间的相互作用;抑制Mdm2的表达水平、磷酸化水平及与p53的相互作用,检测RSV感染的A549细胞中GR蛋白表达水平及GR、p53和Mdm2叁者之间的相互作用。结果:1.RSV感染患儿NPAs中p53蛋白表达降低,且与GR蛋白表达有显着相关性(P<0.01);2.RSV感染A549细胞后,p53呈一个感染时间与感染剂量依赖性降低(P<0.01);3.抑制Mdm2的表达水平、磷酸化水平及与p53的相互作用可部分恢复GR蛋白表达水平(P<0.05)。结论:RSV感染后通过调控p53-Mdm2介导GR蛋白表达水平的下降。第四部分RSV NS1蛋白在调控GR表达的作用机制研究目的:NS1基因位于RSV基因组3’端,是早期表达最多的基因和蛋白,介导着多种与宿主细胞相互作用的生物学功能。RSV NS1蛋白可上调miR-29a介导IFNR1的降低,还可激活PI3K-Akt信号通路。PI3K-Akt信号通路激活后可磷酸化Mdm2降解p53。NS1蛋白是否是RSV感染降低GR表达的最重要蛋白及NS1是否通过调控miR-29a及p53-Mdm2介导GR的降低尚不清楚。故本部分的研究目的为:1.证实NS1是否可降低GR表达;2.进一步证实NS1是否是通过调控miR-29a及p53-Mdm2降低GR表达。方法:建立RSV感染A549细胞感染模型,测定不同时间点RSV编码的10个基因的表达水平;si RNA敲低NS1基因表达后,检测GR mRNA、GR蛋白、miR-29a及p53蛋白表达水平;进一步在NS1基因敲低后:过表达miR-29a,检测GR mRNA、GR蛋白及其转录调控的FKBP51、GILZ mRNA表达水平;过表达Mdm2后,检测p53蛋白、GR蛋白及其转录调控的FKBP51、GILZ mRNA表达水平;进一步检测RSV感染患儿中NS1基因表达并分析其与GR mRNA、GR蛋白、miR-29a、p53蛋白表达水平的相关性。结果:1.在早期RSV感染A549细胞模型中,RSV编码的10个基因中,NS1基因是表达最多的;2.NS1基因敲低后可恢复GR mRNA、GR蛋白、miR-29a、p53蛋白的表达水平(P<0.05);3.NS1基因敲低后:过表达miR-29a可降低GR mRNA、GR蛋白及FKBP51、GILZ mRNA表达水平(P<0.05);过表达Mdm2后,p53蛋白、GR蛋白及FKBP51、GILZ mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:RSV NS1通过上调miR-29a及调控p53-Mdm2介导GR mRNA和蛋白的降解。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
敏感蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的设计并制备具有靶向肿瘤且pH敏感的热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)笼形蛋白纳米递药系统,并对其理化性质进行表征。方法采用基因全合成与蛋白质重组表达技术纯化HSP为母版,通过表面官能团功能化制备得到修饰穿膜肽Tat、聚乙二醇包衣的热休克笼形蛋白纳米载体(PT-HSP)。通过透射电镜、纳米粒度与Zeta电位测定仪对其形态、粒径及Zeta电位进行表征,并建立HPLC测定其载药量与包封率。考察载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的PT-HSP在生理pH条件(pH7.4)与肿瘤pH条件(pH6.5)下的体外释药行为。结果形态学结果表明,PT-HSP是呈现典型双层结构的均一球体,平均粒径为(154.4±23.6)nm,Zeta电位为(?2.6±0.7)mV。HPLC测得载PTX的PT-HSP的包封率为(75.3±3.6)%,载药量为(7.0±0.2)%。体外释药试验结果表明PT-HSP在pH7.4条件下的释放速率显着慢于pH6.5条件下的释放速率(P<0.01)。结论本研究制备得到的pH敏感的HSP笼形蛋白智能纳米递药系统具有载药量高、稳定性强及智能靶向等优点,有望成为一种安全、有效、智能的抗肿瘤药物载体。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
敏感蛋白论文参考文献
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标签：韭菜迟眼蕈蚊; 紫外敏感视蛋白基因(uv); 克隆; 趋光性;