导读:本文包含了人工转染论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:MicroRNA-21,猪源,生物人工胰腺,食蟹猴
人工转染论文文献综述
钱滔来,刘芝兰,高玲[1]（2019）在《MicroRNA-21转染猪源生物人工胰腺对食蟹猴糖尿病模型的疗效》一文中研究指出目的研究MicroRNA-21 (miR-21)转染微囊化猪源生物人工胰腺提高胰岛移植后功能的效果。方法在体外miR-21转染微囊化的胰岛,腹腔注射植入4只Ⅰ型食蟹猴糖尿病模型(8～10 kg),另有1只注射未转染miR-21微囊化猪胰岛。每只移植胰岛当量10 000 IEQ/kg。移植后前3天每天测血糖1次,以后每周测血糖1次,直至血糖回升至移植前水平。微囊化胰岛组和空微囊组在移植14天后根据其血糖水平给予长效胰岛素治疗。结果 miR-21转染的微囊化胰岛植入食蟹猴腹腔,血糖维持正常超过6个月,分别为9.7、 10.7、 12.1和13.2个月,移植前食蟹猴血糖浓度为(25.63±2.89) mmol/L,移植后24 h血糖降至(9.3±1.73) mmol/L, 48 h降至正常为(4.35±0.70) mmol/L。未转染的微囊化胰岛的食蟹猴糖尿病模型血糖正常维持了6个月,移植前血糖浓度为23.5 mmol/L,移植后24 h血糖降至6.4 mmol/L, 48 h为4.3 mmol/L,至第8个月血糖回到移植前。结论 miR-21转染微囊化胰岛能提高胰岛移植后的功能。(本文来源于《临床医学工程》期刊2019年11期）
黄甜,曹忠洋,杨耀辉,曹更生[2]（2016）在《绒山羊细菌人工染色体重组及细胞转染系统》一文中研究指出绒山羊(Cashmere goat)是一类以生产山羊绒为主的山羊品种,因其绒毛纤细有光泽、轻盈、保暖而备受青睐。绒山羊角蛋白关联蛋白(Keratin associated protein,KAP)和骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)在羊绒纤维毛囊细胞的增殖和分化过程中起重要作用。为了提高山羊绒的产量和品质,对包含kap6.3,kap8.1和bmp4基因的细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)进行研究。首先采用同源重组的方法对BAC进行修饰,其次将哺乳动物密码子优化过的Tol2转座子加入BAC中,最后采用Amaxa Nucleofector核转染技术将修饰过的BAC转入绒山羊成纤维细胞。结果表明成功构建了含有目的基因的BAC-Tol2载体。载体上包含UBC启动元件的egfp标记基因和真核筛选抗性neo基因,并且载体的两端加有loxp元件,为转染细胞后标记和抗性基因的去除作准备。载体转染细胞效率达到1%-6%,最高可达10%。成功获得了外源整合kap6.3、kap8.1和bmp4基因的细胞株,为以后克隆绒山羊作准备。研究表明,在BAC的修饰中应用Tol2转座子系统增加了电转染后的整合率,提高了BAC无错重组的效率和精确性。(本文来源于《生物工程学报》期刊2016年03期）
胡红岩[3]（2015）在《Wolbachia株系筛选、人工转染及烟粉虱种群控制实验》一文中研究指出烟粉虱Bemisia tabaci是蔬菜和观赏植物的重要害虫之一,在全世界广泛分布。烟粉虱通过多种方式危害植物,给我国的农业生产造成了很大的经济损失。Wolbachia是节肢动物体内广泛存在的一种内共生菌,对宿主的生殖起到调控作用。烟粉虱种群中有很高的Wolbachia感染率,但Wolbachia与烟粉虱之间的互作及其对宿主种群的调控作用还有待澄清。本研究从米蛾中分离出一株Wolbachia,经过MLST和HVR序列分析和分子鉴定,提示该株系可能诱导宿主产生胞质不亲和作用(CI)。因此,本文采用显微注射的方式,将该外源Wolbachia转染到烟粉虱体内,旨在探讨该Wolbachia菌株在烟粉虱中诱导的表型。同时,利用Wolbachia诱导宿主CI的原理,通过释放Wolbachia人工转染的烟粉虱雄虫来进行烟粉虱种群控制研究。本文获得的主要研究结果和结论简括如下：(1)为了筛选到合适的Wolbachia株系用于人工转染,本文对几种常见昆虫进行了检测,结果显示几种昆虫感染的Wolbachia分为A和B两个大组。对米蛾感染的Wolbachia进行了MLST和HVR分析,结果表明米蛾体内的Wolbachia菌株(wCcep)与能够引起CI作用的几种菌株聚在一起,据此推测该菌株可能诱导宿主的胞质不亲和性。因此,本文选取了米蛾作为Wolbachia人工转染的供体昆虫。(2)采用显微注射烟粉虱伪蛹的方式,本文将米蛾中提取出的Wolbachia转染到烟粉虱体内,建立起了人工转染烟粉虱种群。通过对Wolbachia转染烟粉虱种群进行分子检测,结果表明转染烟粉虱体内(G11)能够检测到来自米蛾的Wolbachia株系,说明外源Wolbachia已成功转入烟粉虱体内,并能够稳定地遗传给后代。运用FISH技术对人工感染烟粉虱体内Wolbachia进行定位观察,结果表明,与野生型种群相比,转染烟粉虱的各个虫态均有很强的Wolbachia荧光信号,说明wCcep菌株已经在新宿主-烟粉虱中转染和传播。(3)本研究设置了在个体水平和群体水平上的生物杂交实验,以研究外源Wolbachia菌株wCcep对烟粉虱生殖的调控作用。结果表明,各个处理后代的雌雄比有很大的差异。对照组的杂交没有发现CI现象；野生种群(WT)雌性×转染种群(TI)雄性之间产生了完全的CI,而TI雌性×WT雄性表现出高水平的不完全CI。上述研究结果表明,外源Wolbachia能诱导烟粉虱产生高水平的双向CI。(4)在笼罩条件下,以一定的比例释放WT雌性、WT雄性和TI雄性叁种烟粉虱成虫。研究结果表明,以1：1：10的比例释放并群交时,后代中雄虫的比例相对于对照组有明显的增加,说明转染雄虫影响了野生型烟粉虱之间的生殖。释放转染的烟粉虱雄虫对野生种群有一定的控制效果,但外源Wolbachia菌株控制烟粉虱种群的潜力尚待更严谨的评估。烟粉虱作为世界性重要的农业害虫和我国重要的入侵害虫,对其实施可持续控制尚需多方面的努力。本文的研究结果为Wolbachia-昆虫互作关系提供了直接证据,也为利用昆虫体内普遍携带的Wolbachia菌株控制烟粉虱种群提供了新思路。(本文来源于《中国农业大学》期刊2015-05-01）
裴斐,陈旭,何蕊,李俊彦,张莉[4]（2011）在《转染组织纤溶酶原激活物及内皮型一氧化氮合酶基因的内皮细胞和平滑肌细胞共同种植于人工血管对内膜增生的影响》一文中研究指出背景:前期研究表明,双层细胞种植能有效提高内皮细胞保留率,将组织纤溶酶原激活物基因转染到内皮细胞中能提高其细胞溶解纤维蛋白的能力。目的:采用双细胞种植及修饰内皮的组织纤溶酶原激活物基因提高内皮细胞保留率和抗栓能力,通过内皮型一氧化氮合酶基因调控平滑肌细胞的增殖,观察对小口径人工血管通畅率的影响。方法:以4种不同组合细胞(内皮细胞+平滑肌细胞SMC,内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞,内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶,内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)种植在PTFE管腔面。将新西兰大白兔随机分成4组,4种人工血管经旁路分别移植在4组兔的腹主动脉上。结果与结论:移植后60d,种植内皮细胞+平滑肌细胞组和内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组内膜厚度无明显差异(P>0.05)。与内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶组相比,未转染内皮型一氧化氮合酶组(内皮细胞/组织纤溶酶原激活物+平滑肌细胞)内膜明显增厚(P<0.05);未转染组织纤溶酶原激活物组(内皮细胞+平滑肌细胞/内皮型一氧化氮合酶)内膜较薄(P<0.05)。提示组织纤溶酶原激活物基因转染可以促进血管内膜增生导致血管狭窄,但同时转入内皮型一氧化氮合酶基因可以抑制组织纤溶酶原激活物的促进平滑肌细胞增殖及内膜增生的作用。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2011年38期）
袁建龙,王玮,金永,肖红,梁伟[5]（2010）在《人工合成启动子特异启动IGF-1真核载体的构建与绵羊成纤维细胞转染》一文中研究指出构建了肌肉特异表达IGF-1载体,并转染绵羊成纤维细胞获得了稳定整合外源基因可用于细胞核移植的转基因细胞.通过人工合成骨骼肌特异启动子SP片段,与羊IGF-1相连,最终连接到骨架载体pCDsRed2中构建成骨骼肌特异表达IGF-的真核表达载体pSPICDS.使用脂质体法转染绵羊成纤维细胞,通过红色荧光与G418双重选择,获得了转基因细胞.经PCR检测证实得到的细胞克隆外源基因稳定整合,可以作为供体细胞用于体细胞核移植.(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊2010年06期）
张海燕,王倩,付海滨,丛斌,董辉[6]（2009）在《赤眼蜂种间沃尔巴克氏体水平人工转染供体蜂种的筛选》一文中研究指出实验室条件下以感染沃尔巴克氏体的引进种卷蛾赤眼蜂、食胚赤眼蜂、短管赤眼蜂为材料,比较分析3种赤眼蜂连续3代喂食抗生素后子代雄蜂率、寄生和羽化情况。除卷蛾赤眼蜂F_2代外,取食四环素后3种赤眼蜂各世代寄生率均降低,其中食胚赤眼蜂的寄生率与对照相比明显下降;3种赤眼蜂间寄生率没有明显差异。随着取食抗生素世代的增加,3种赤眼蜂子代雄蜂率逐渐增大,短管赤眼蜂F_1代开始出现雄蜂,F_3代雄蜂率高达54.54%,明显高于卷蛾赤眼蜂(20.58%)和食胚赤眼蜂(13.94%);食胚赤眼蜂3个世代羽化雄蜂率均最低,说明其产雌孤雌生殖方式比较稳定,较适合作为赤眼蜂种间沃尔巴克氏体水平人工转染的供体。(本文来源于《中国生物防治》期刊2009年03期）
葛晓松,薛祝平,李柏青[7]（2009）在《人工合成的siRNA转染外周血活化T淋巴细胞方法学研究》一文中研究指出观察人工合成siRNA与脂质体DMRIE-C Reagent的复合物对人外周血活化T淋巴细胞转染效果。人外周血标本中分离的外周血单个核细胞用抗原和IL-2刺激扩增培养,产生活化的T淋巴细胞,用不同配比浓度的荧光标记的siRNA-FAM与脂质体的复合物转染活化后的T淋巴细胞,分别采用转染一次和连续转染两次的方法,并在转染后4h,分别取样本,通过流式细胞测定技术,比较两种方法的转染效率,并筛选出最佳转染效率剂量配比。活化T细胞用转染一次和两次的方法后,平均转染阳性率分别为(12.5±0.64)%和(50.37±6.77)%。采用连续两次转染的方法进行转染,转染效率要明显高于一次转染法。(本文来源于《生物学杂志》期刊2009年01期）
裴斐,李俊彦,张莉,何蕊[8]（2008）在《内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用(英文)》一文中研究指出背景:平滑肌细胞增殖移行和血小板激活导致血栓形成是移植血管再狭窄的主要原因,一氧化氮可以抑制上述生物反应,但内皮型一氧化氮合酶基因转染是否可以抑制种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生还未得到证实。目的:拟进一步观察内皮型一氧化氮合酶基因转染对种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生的影响。设计、时间及地点:重复观察测量,于2006-04/2007-05在西安交通大学医学院中心实验室及分子生物学实验室完成。材料:1月龄新西兰大白兔1只,用来获取平滑肌细胞。成年新西兰大白兔18只,随机分成3组,正常对照组植入未转染的人工血管,LacZ转染组植入种植转染lacZ的平滑肌细胞的人工血管,内皮型一氧化氮合酶转染组植入种植内皮型一氧化氮合酶的平滑肌细胞的人工血管,6只/组。方法:构建含有报道基因lacZ和内皮型一氧化氮合酶基因的假型反转录病毒载体小鼠白血病病毒/疱疹性口炎病毒G糖蛋白,并转染平滑肌细胞。将转染了基因的细胞种植在人工血管上,并用血管旁路移植的方法植入兔腹主动脉。主要观察指标:瓜氨酸法检测细胞培养上清中一氧化氮含量。移植血管内膜X-gal染色观察,种植的平滑肌细胞为蓝色,而内源性细胞为红色。显微镜下测量血管内膜增生厚度。结果:18只兔均进入结果分析。内皮型一氧化氮合酶转染组一氧化氮含量明显高于正常对照组(P<0.05)。转染lacZ基因的平滑肌细胞经X-gal染色呈蓝色。血管平滑肌细胞植入30d,各组内膜厚度基本相似(P>0.05);植入100d,正常对照组与内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度基本相似(P>0.05),两组明显均低于lacZ转染组(P<0.05)。结论:内皮型一氧化氮合酶基因转染可抑制种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2008年40期）
于威,李建军[9]（2008）在《聚乳酸/聚己内酯生物可降解人工骨复合骨形态发生蛋白2基因转染骨髓基质干细胞修复骨缺损的血管化过程(英文)》一文中研究指出学术背景:组织工程骨植入体内后,再血管化是关系其能否充分发挥成骨作用,有效修复骨缺损的关键环节。目的:评价经骨形成蛋白2基因修饰的骨髓间充质干细胞复合聚乳酸/聚己内酯人工骨修复兔桡骨缺损的血管化过程,观察骨形成蛋白2基因对促进移植骨血管化的影响。设计:随机对照动物实验。单位:实验于2005-01/12在中国医科大学中心实验室完成。材料:聚乳酸/聚己内酯生物可降解材料块由中国科学院长春应用化学研究所提供,孔隙直径150~250μm,孔隙率90%以上;实验动物为3月龄新西兰大耳白兔60只。方法:60只新西兰大耳白兔双侧桡骨中段制成1.5cm骨缺损模型,随机分为4组,每组15只(30侧),植入经不同处理的人工骨。①AD-BMP-2组:转染骨形成蛋白2基因的细胞+聚乳酸/聚己内酯。②对照基因组:转染β-半乳糖酐酶基因的细胞+聚乳酸/聚己内酯。③未转染组:未转染细胞+聚乳酸/聚己内酯。④单纯聚乳酸/聚己内酯组:植入单纯聚乳酸/聚己内酯支架。主要观察指标:于术后4,8和12周行X射线片观察新骨形成情况,立体显微镜观察微血管分布,苏木精-伊红染色观察微血管与骨形成关系,透射电镜观察成骨细胞和血管内皮细胞间的联系,并行血管内皮生长因子表达检测及微血管计数。结果:①AD-BMP-2组术后4周时见移植骨内片状成骨影,有较多新生血管长入,支架孔隙内充满软骨痂,功能活跃的成骨细胞围绕微血管生长,血管内皮生长因子表达及微血管数均明显高于其他各组;术后8周时移植骨内成骨逐渐增多,微血管迂曲扩张并相互连接,软骨痂转变为小梁骨;术后12周时皮质骨连续,髓腔再通,微血管呈规则地纵向排列。②对照基因组和未转染组成骨能力较弱,血管再生缓慢,12周时骨缺损得到初步修复,微血管沿新生骨小梁孔隙分布。③单纯聚乳酸/聚己内酯组各时间点新生血管少见,术后12周时骨端硬化,缺损区被纤维组织填充。结论:骨形成蛋白2基因转染可通过上调血管内皮生长因子表达,间接诱导移植骨血管化,促进种子细胞的成活,加速新骨形成。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2008年19期）
裴斐,李俊彦,张莉,何蕊[10]（2008）在《内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用》一文中研究指出目的:平滑肌细胞增殖移行和血小板激活导致血栓形成是移植血管再狭窄的主要原因,一氧化氮可以抑制上述生物反应,但内皮型一氧化氮合酶基因转染是否抑制种植了平滑肌细胞的人工血管内膜增生还未得到证实。实验拟进一步观察内皮型一氧化氮合酶基因转染对种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生的影响。方法:实验于2006-04/2007-05在西安交通大学医学院中心实验室及分子生物学实验室完成。①实验材料:1月龄新西兰大白兔1只,用来获取平滑肌细胞。成年新西兰大白兔18只,随机数字表法分成3组,每组6只。正常细胞组移植未种植细胞的人工血管;LacZ转染组移植种植转染lacZ的平滑肌细胞的人工血管,内皮型一氧化氮合酶转染组移植种植内皮型一氧化氮合酶的平滑肌细胞的人工血管。②实验方法:构建含有报道基因lacZ和内皮型一氧化氮合酶基因的假型反转录病毒载体小鼠白血病病毒/疱疹性口炎病毒G糖蛋白,并转染平滑肌细胞。将转染了基因的细胞种植在人工血管上,并用血管旁路移植的方法植入兔腹主动脉。③实验评估:测定转染内皮型一氧化氮合酶基因及LacZ基因细胞培养上清中一氧化氮含量。血管植入30,100d后X-gal染色及苏木精-伊红染色观察人工血管上的平滑肌细胞,同时显微镜下测量每段血管内膜增生的厚度。结果:纳入成年新西兰大白兔18只,均进入结果分析。①内皮型一氧化氮合酶转染组一氧化氮含量明显高于未转染的正常细胞组(P<0.05)。平滑肌细胞转染lacZ基因后经X-gal染色,倒置显微镜下可见转染了基因的细胞被染成蓝色。②血管植入30d,与正常细胞组比较,LacZ转染组和内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度差异无显着性(P>0.05);100d后,内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度与正常细胞组无明显差异,与LacZ转染组相比较,差异显着(P<0.05)。结论:内皮型一氧化氮合酶基因转染抑制了种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2008年07期）
人工转染论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
绒山羊(Cashmere goat)是一类以生产山羊绒为主的山羊品种,因其绒毛纤细有光泽、轻盈、保暖而备受青睐。绒山羊角蛋白关联蛋白(Keratin associated protein,KAP)和骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)在羊绒纤维毛囊细胞的增殖和分化过程中起重要作用。为了提高山羊绒的产量和品质,对包含kap6.3,kap8.1和bmp4基因的细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)进行研究。首先采用同源重组的方法对BAC进行修饰,其次将哺乳动物密码子优化过的Tol2转座子加入BAC中,最后采用Amaxa Nucleofector核转染技术将修饰过的BAC转入绒山羊成纤维细胞。结果表明成功构建了含有目的基因的BAC-Tol2载体。载体上包含UBC启动元件的egfp标记基因和真核筛选抗性neo基因,并且载体的两端加有loxp元件,为转染细胞后标记和抗性基因的去除作准备。载体转染细胞效率达到1%-6%,最高可达10%。成功获得了外源整合kap6.3、kap8.1和bmp4基因的细胞株,为以后克隆绒山羊作准备。研究表明,在BAC的修饰中应用Tol2转座子系统增加了电转染后的整合率,提高了BAC无错重组的效率和精确性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人工转染论文参考文献
[1].钱滔来,刘芝兰,高玲.MicroRNA-21转染猪源生物人工胰腺对食蟹猴糖尿病模型的疗效[J].临床医学工程.2019
[2].黄甜,曹忠洋,杨耀辉,曹更生.绒山羊细菌人工染色体重组及细胞转染系统[J].生物工程学报.2016
[3].胡红岩.Wolbachia株系筛选、人工转染及烟粉虱种群控制实验[D].中国农业大学.2015
[4].裴斐,陈旭,何蕊,李俊彦,张莉.转染组织纤溶酶原激活物及内皮型一氧化氮合酶基因的内皮细胞和平滑肌细胞共同种植于人工血管对内膜增生的影响[J].中国组织工程研究与临床康复.2011
[5].袁建龙,王玮,金永,肖红,梁伟.人工合成启动子特异启动IGF-1真核载体的构建与绵羊成纤维细胞转染[J].内蒙古大学学报(自然科学版).2010
[6].张海燕,王倩,付海滨,丛斌,董辉.赤眼蜂种间沃尔巴克氏体水平人工转染供体蜂种的筛选[J].中国生物防治.2009
[7].葛晓松,薛祝平,李柏青.人工合成的siRNA转染外周血活化T淋巴细胞方法学研究[J].生物学杂志.2009
[8].裴斐,李俊彦,张莉,何蕊.内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用(英文)[J].中国组织工程研究与临床康复.2008
[9].于威,李建军.聚乳酸/聚己内酯生物可降解人工骨复合骨形态发生蛋白2基因转染骨髓基质干细胞修复骨缺损的血管化过程(英文)[J].中国组织工程研究与临床康复.2008
[10].裴斐,李俊彦,张莉,何蕊.内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用[J].中国组织工程研究与临床康复.2008
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