导读:本文包含了钠氢交换体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肿瘤微环境,钠氢交换体1,细胞增殖,细胞迁移
钠氢交换体论文文献综述
黄柯,刘王波,刘涛[1]（2019）在《钠氢交换体1调节肿瘤微环境对肿瘤细胞的影响》一文中研究指出肿瘤细胞微环境呈酸性,主要由肿瘤细胞无限增殖及高代谢所致。它们主要是通过外排H~+或向胞内转运HCO_3~-来维持其微环境的稳态。研究发现钠氢交换体1(sodium hydrogen exchanger isoform 1,NHE1)是一种广泛表达的跨膜泌酸转运蛋白,其表达上调或激活通常与肿瘤的恶性程度相关。我们对目前关于NHE1的相关研究进行综述,探讨肿瘤细胞是如何改变微环境pH值的平衡,及微环境pH值对肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和生长的影响,并讨论酸性微环境是如何协助肿瘤细胞逃避化疗药物的杀伤。(本文来源于《临床外科杂志》期刊2019年09期）
孙雅[2]（2018）在《钠氢交换体及其阻断剂在高盐诱导乳鼠心肌成纤维细胞增殖、胶原分泌和钙离子调控中的作用》一文中研究指出目的:研究钠氢交换体-1(sodium/hydrogen exchanger1,NHE-1)及其阻断剂在高盐诱导乳鼠心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs)增殖、胶原分泌及钙离子调控中的作用。方法:采用组织块贴壁法培养乳鼠CFs,传至3-4代于镜下观察CFs的形态,免疫荧光法行CFs标志蛋白波形蛋白鉴定。分组:对照组(Na~+139mmol/L),高盐组(Na~+161mmol/L),高盐+Cariporide组(Na~+161mmol/L+Cariporide 5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L、25μmol/L),培养48h后,MTT法和EdU检测CFs的增殖状况并确定Cariporide浓度。ELISA法检测CFs培养上清液中胶原I(collagenI,COL1)、胶原III(collagenIII,COL3)含量;酶学比色法检测Ca~(2+)-ATPase和Na~+/K~+-ATPase活性;比率荧光法检测各组CFs内Ca~(2+)浓度及pH;Western Blot检测CFs中COL1、COL3、NHE-1、NCX-1蛋白表达。结果:MTT法显示,NHE-1受体阻断剂Cariporide在10μmol/L时开始对细胞增殖有抑制作用;EdU结果表明,与对照组相比,高盐组CFs增殖明显,Cariporide阻断后细胞增殖明显抑制(P<0.05)。高盐组COL1、COL3含量增高(P<0.05),细胞内pH及钙离子浓度升高(P<0.05),细胞Ca~(2+)-ATPase和Na~+/K~+-ATPase活性均降低;Cariporide阻断后CFs细胞增殖受抑制,COL1、COL3含量降低(P<0.05),细胞内pH及钙离子浓度有所降低(P<0.05),Ca~(2+)-ATPase和Na~+/K~+-ATPase活性升高(P<0.05)。与对照组相比,高盐组COL1、COL3、NHE-1和NCX-1蛋白表达上调(P<0.05),阻断了NHE-1后,COL1、COL3、NHE-1及NCX-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:(1)NHE-1阻断剂Cariporide可抑制高盐诱导的CFs增殖及COL1、COL3分泌与表达;(2)阻断NHE-1可降低高盐诱导的CFs内pH和钙离子浓度升高。(3)阻断NHE-1可逆转高盐诱导的CFs钠泵和钙泵活性降低以及NHE-1和NCX-1蛋白表达增高。(本文来源于《遵义医学院》期刊2018-05-01）
李政道[3]（2018）在《钠氢交换体和碳酸酐酶在中国对虾响应pH胁迫中的功能研究》一文中研究指出近年来集约化养殖模式不断推广,水产养殖业得以迅速发展,同时也面临着许多因养殖密度过高、饲料投喂频繁、药物滥用等带来的环境问题,养殖水产动物也面临多种环境因子的胁迫。而作为水环境中一项重要的影响因子,pH突变会对虾体的酸碱平衡和渗透调节等功能造成胁迫,降低虾体的免疫能力,继而抑制其生长。为研究钠氢交换体(Na~+/H~+-exchanger,NHE)和碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase,CA)在中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)响应pH胁迫过程中发挥的作用,首先采用静水毒性实验方法确定了中国对虾72 h酸碱半致死pH,然后利用RACE技术克隆了中国对虾钠氢交换体(Na~+/H~+-exchanger isoform 3)、细胞质碳酸酐酶(cytoplasmic Carbonic Anydrase)和糖基磷脂酰肌醇碳酸酐酶(glycosyl-phosphatidylinositol-linked Carbonic Anhydrase),并通过荧光定量PCR及RNA干扰技术分析了其在pH胁迫下的表达特征及功能,通过原位杂交观察胁迫前后叁种基因在对虾鳃组织中的分布差异,以期了解NHE3和CA在中国对虾适应pH胁迫中的作用机制,并为研究甲壳动物酸碱水环境适应机制提供理论依据。1.实验对中国对虾在不同pH梯度胁迫下的死亡率进行了统计分析,发现pH为4.6和9.7时,72 h累计死亡率达到100%,pH为6.6和8.1时近乎没有出现死亡个体,通过寇氏法分别计算出中国对虾酸性半致死pH值及碱性半致死pH分别为5.2和9.1;取不同pH胁迫下的对虾鳃组织,做HE染色处理,结果显示碱性半致死pH(pH 9.1)胁迫下对虾鳃组织损伤较对照组和酸性半致死pH(pH 5.2)胁迫组严重,出现明显的鳃丝肿大,血细胞肿胀等现象。2.克隆获得中国对虾钠氢离子交换体(Na~+/H~+-exchanger isoform 3)基因,命名为FcNHE3,该基因cDNA序列全长3508 bp,开放阅读框2805 bp,编码934个氨基酸,具有信号肽和12个跨膜结构域;蛋白同源分析发现,FcNHE3与青蟹(Carcinus maenas)同源性最高,达到74%;系统进化分析显示,FcNHE3与叁疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)和青蟹(Carcinus maenas)亲缘关系最近。荧光定量PCR分析表明,FcNHE3基因在鳃组织中表达量显着高于其他组织(P<0.05);酸性半致死pH(pH 5.2)胁迫下,FcNHE3基因在整个胁迫过程中显着上调表达(P<0.05);碱性半致死pH(pH 9.1)胁迫下,FcNHE3基因在前48 h显着下调表达(P<0.05),12 h表达量最低,仅在72 h出现上调表达。原位杂交结果显示,酸性半致死pH(pH 5.2)胁迫组杂交信号较碱性半致死pH胁迫(pH 9.1)组和对照组都强,说明了在酸性半致死pH胁迫下FcNHE3基因表达较高,与pH胁迫24 h后qPCR实验结果一致。RNA干扰结果显示,注射siRNA后,FcNHE3基因表达受到抑制,pH 5.2胁迫下对虾存活率相比对照组显着下降。当FcNHE3基因被干扰3h后si-3组干扰效率最高,该时间点FcCAc、FcCAg、V-H~+-ATPase(VHA)和Na~+/HCO_3~-cotransporter(NBC)与对照组相比表达均下调,HCO_3~-cotransporter(AE)、Na~+/K~+/Cl~-cotransporter(NKCC)基因表达相对上调。研究表明FcNHE3在中国对虾响应pH胁迫过程中尤其在酸性水环境中可能发挥重要的调节作用。3.克隆获得中国对虾两种碳酸酐酶基因,分别为细胞质碳酸酐酶(cytoplasmic Carbonic Anydrase),命名为FcCAc和中国对虾糖基磷脂酰肌醇碳酸酐酶(glycosyl-phosphatidylinositol-linked Carbonic Anhydrase),命名为FcCAg,系统进化分析显示,两种基因均与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)亲缘关系最近。组织表达分布结果显示,两种基因表达量均在鳃组织中最高;在酸性半致死pH(pH5.2)胁迫下,FcCAc基因表达呈波浪式变化,先升高后降低,72 h基本恢复至对照组水平(P<0.05);在碱性半致死pH(pH 9.1)胁迫下,0-24 h一直处于下调表达,且24 h处表达量最低,而后表达量回升,72 h上调表达(P<0.05);对于FcCAg基因,在酸性半致死pH(pH 5.2)胁迫下,基因在整个过程中大致处于显着上调表达,在12 h处表达量最高(P<0.05);在在碱性半致死pH(pH 9.1)胁迫下,前24 h基因一直处于显着下调表达,而24 h后表达水平回升,到72 h达到上调表达。对酸碱胁迫24h的样品进行原位杂交检测,结果显示相较于对照组,FcCAc在酸性半致死pH(pH 5.2)和碱性半致死pH胁迫(pH 9.1)组杂交信号均较弱,说明了在pH胁迫下24 h FcCAc基因表达有所降低;FcCAg在酸性半致死pH胁迫组杂交信号较碱性半致死pH胁迫组和对照组都强,而碱性半致死pH胁迫组杂交信号最弱,说明了在低pH胁迫下FcCAg基因表达较高;与胁迫实验中24 h基因表达量情况相符合。RNA干扰后,FcCAc和FcCAg均受到抑制,pH 5.2胁迫下对虾存活率相比对照组显着下降。当FcCAc被干扰3 h后si-3组干扰效率最高,该时间点离子转运相关基因FcNHE3、FcCAg、FcVHA和FcAE基因表达相对下调,而FcNBC和FcNKCC基因表达相对上调;当FcCAg基因被干扰3 h后si-1组干扰效率最高,该时间点,所选取离子转运相关基因均表达下调。说明该两种基因可能通过与其他离子转运相关基因相互作用共同在中国对虾响应pH胁迫中发挥重要功能。(本文来源于《上海海洋大学》期刊2018-04-20）
李彩蓉[4]（2017）在《钠氢交换体1对糖尿病db/db小鼠心脏钙蛋白酶和糖原合成酶激酶-3β的调节作用》一文中研究指出第一部分 钠氢交换体1对糖尿病db/db小鼠心脏钙蛋白酶和糖原合成酶激酶-3β的调节作用目的探讨钠氢交换体1(NHE1)抑制剂卡立泊来德(CAR)对db/db糖尿病小鼠心脏钙蛋白酶(Calpain)、骨桥蛋白(OPN)和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白的影响。方法选取7周龄雄性C57BL/KS db/db小鼠和C57BL/KS野生型(WT)小鼠各16只,采用随机数字表法分为4组:对照组(WT)、CAR组(WT+CAR)、模型组(db/db)和CAR干预组(db/db+CAR)。10周后行血流动力学检查并处死取血和心脏标本,生化法测定血糖(FPG)、甘油叁酯(TG)和胆固醇(TC);酶联免疫吸附法测定胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色观察心肌病理改变,测定心肌组织辅酶Ⅱ/还原型辅酶Ⅱ(NADP+/NADPH)比率、硝基酪氨酸(NT)、3-硝基酪氨酸(3-NT)和4-羟基壬烯酸(4-HNE)的含量;荧光定量PCR测定心肌组织NADPH氧化酶p22phox、p91phox亚基、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和骨桥蛋白(OPN)的mRNA水平。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)测定心肌组织肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素IL-1β(IL-1β)的含量。采用Western blot检测心肌组织OPN、Calpain-1、Calpain-2、钙调磷酸酶(CaN)、蛋白激酶B(AKT)和GSK-3β蛋白的表达;采用试剂盒检测心肌Calpain和CaN酶的活性。两两比较采用t检验,组间比较采用单因素方差分析。结果(1)与WT组比较,db/db组FPG、TC、TG和HOMA-IR明显升高,均有统计学差异(分别为 5.78± 1.14 比21.21 ±4.12,2.29±0.52 比4.28±0.74,0.86±0.36比 1.65±0.19,0.65±0.18 比 23.75±9.39,t=10.35,6.228,5.428,6.957,均 P<0.05);与db/db组比较,CAR+db/db组小鼠FPG、TC、TG和HOMA-IR有下降趋势(t=2.111,2.112,1.213,1.651,P>0.05)。(2)光镜下WT组小鼠心肌细胞排列整齐,db/db组小鼠心肌组织出现明显的心肌纤维排列不规则和心肌细胞肥大,CAR+db/db组小鼠心肌损伤情况明显改善。(3)与WT组小鼠相比,db/db组小鼠LVEDP升高,±dp/dtmax的绝对值减少(t=9.973,8.929,7.174,P<0.05)。与db/db组比较,CAR+db/db组小鼠±dp/dtmax绝对值增大,LVEDP下降,两组比较有统计学差异(t=6.404,2.865,4.531,P<0.05)。提示CAR明显减轻心肌组织病理损伤及明显改善小鼠心脏血流动力学。(4)与WT组比较,db/db小鼠心肌组织中NADP+/NADPH的比值、p22phox、gp91phox 的 mRNA 水平及 NT、3-NT、4-HNE 的含量均明显上升(t=6.988,3.953,3.901,8.088,10.89,5.375,P<0.05);与 db/db 组比较,CAR 干预能明显改善db/db小鼠心脏组织中氧化/硝化应激,两组间比较有统计学差异(t=4.845,2.519,2.565,2.803,4.131,2.581,P<0.05)。(5)与WT组小鼠比较,CAR对WT小鼠心脏组织中TNF-α和IL-1β的含量无明显影响(t=0.345,0.409,P>0.05);而db/db小鼠心肌组织中TNF-α和IL-1β 的含量均明显上升(t=8.608,9.950,P<0.05);与 db/db 组比较,CAR+db/db组明显改善db/db小鼠心脏组织中TNF-α和IL-1 β水平,两组相比较有统计学差异(t=2.682,2.804,P<0.05)。(6)与WT组比较,db/db组心肌胶原含量、TGF-β 1和MMP-2 mRNA水平明显增加,MMP-9 mRNA水平明显下降,与db/db组比较,CAR+db/db组小鼠心肌组织胶原含量、TGF-β 1、MMP-2和MMP-9mRNA水平(t=2.914,2.925,2.491,2.732,P<0.05)。(7)与WT组比较,db/db糖尿病小鼠心肌组织OPN蛋白和mRNA表达明显上调,但NHE1抑制剂CAR能明显抑制心脏组织OPN蛋白和mRNA表达。NHE1抑制剂CAR对WT小鼠心肌组织中NHE1抑制剂CAR无明显影响。(8)与WT组比较,db/db小鼠心肌组织中Calpain、CaN酶活性明显增加(t=3.70,9.738,P<0.05),Calpain-1、Calpain-2、CaN 蛋白含量明显增加(t=3.492,3.353,3.871,P<0.05)。与 db/db 组比较,CAR 能降低 db/db 小鼠心肌 Calpain、CaN 酶活性和其蛋白含量(t=2.935,2.792,2.634,3.253,2.887,P<0.05)。(9)与WT组比较,db/db小鼠心肌组织中AKT和GSK-3β蛋白无明显变化,但是p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达明显下降(t=6.183,6.400,P<0.05)。与db/db组比较,CAR还能上调p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达(t=2.827,4.090,P<0.05)。结论CAR能改善db/db小鼠心脏损伤,其机制可能与CAR改善高糖高脂和胰岛素抵抗,抗氧化应激能力及调节Calpain和AKT/GSK-3β蛋白有关。第二部分 钠氢交换体1在高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤中的作用研究目的本研究通过建立Sprague-Dawley(S-D)大鼠乳鼠心肌细胞高糖损伤模型,观察钠氢交换体1(NHE1)抑制剂卡立泊来德(CAR)对高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤是否具有保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法通过体外原代培养0-3d乳鼠心肌细胞,不同浓度CAR(0-1000μmol/L)干预心肌细胞,确立CAR安全范围浓度,然后选择安全范围浓度CAR(5-80μmol/L)干预高糖环境下心肌细胞,运用CCK8法测定细胞活力,确立CAR最佳治疗浓度。采用生化试剂盒检测心肌细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)测定心肌组织肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素IL-1β(IL-1β)的含量。采用试剂盒检测心肌Calpain和CaN酶的活性。流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测心肌细胞凋亡;Western blot方法测定Bcl-2、Bax、Caspase-33和GSK-3β蛋白表达的变化。结果(1)对CAR进行浓度梯度筛选,发现20μmol/L的CAR可以有效保护心肌细胞对抗高糖损伤。(2)与Control比较,高糖环境培养心肌细胞培养液中SOD活性降低,MDA、TNF-α、IL-6 含量明显升高(t=3.931,3.928,4.069,6.148,P<0.05);CAR对正常糖环境下培养心肌细胞SOD活性、MDA、TNF-α、IL-1β含量无明显影响(t=0.579,0.496,0.686,0.411,P>0.05)。与 HG 组比较,CAR 能明显升高高糖环境培养心肌细胞培养液中SOD活性,降低MDA、TNF-α、IL-6含量两者比较有统计学差异(t=2.268,2.435,2.561,3.257,P<0.05)。(3)正常培养液培养的心肌细胞凋亡率很低,高糖诱导24h后的心肌细胞凋亡率明显上升(P<0.05)。给予20μmol/LCAR后,细胞凋亡率明显降低,与HG组比较,统计学有显着性差异(P<0.05)。提示,20μmol/LCAR可以有效对抗高糖损伤,减少高糖诱导心肌细胞的凋亡。(4)Western bolt结果显示,高糖损伤可以诱导心肌细胞内促凋亡蛋白Bax表达增多,同时抗凋亡蛋白Bcl-2的表达减少。20μmol/LCAR可以有效上调Bcl-2、下调Bax,从而对抗高糖损伤,抑制心肌细胞的凋亡。(5)高糖损伤可以诱导心肌细胞内Cleaved-Caspase-3蛋白表达增多,Caspase-3活性明显升高(t=8.735,P<0.05)。20μmol/LCAR可以有效减少Cleaved-Caspase-3 蛋白表达和 Caspase-3 活性(t=2.326,P<0.05)。(6)与Control组比较,HG组心肌细胞GSK-3β蛋白无明显变化,但是p-GSK-3β蛋白表达明显下降(P<0.05):与HG组相比,CAR能明显升高高糖环境培养心肌细胞pGSK-3β蛋白表达(P<0.05)。(7)与Control比较,高糖环境培养心肌细胞Calpain和CaN酶活性明显增加(t=10.13,9.126,P<0.05),CAR对正常糖环境下培养心肌细胞无明显影响(t=1.087,0.489,P>0.05)。与HG组比较,CAR能明显降低高糖环境培养心肌细胞Calpain和CaN酶活性,两者比较有统计学差异(t=2.588,2.675,P<0.05)。结论:高糖损伤可以增加心肌细胞上清液中LDH的水平,增加氧化应激和炎症因子的释放,促进细胞凋亡。CAR可以有效拮抗高糖损伤,减少受损细胞内LDH的释放,同时拮抗氧化应激和炎症因子的释放,减少凋亡。其机制可能与CAR上调Bcl-2与下调Bax的表达有关,GSK-3β和Calpain在其中也发挥重要的作用。(本文来源于《武汉大学》期刊2017-09-01）
王伟[5]（2017）在《钠氢交换体1对胶质瘤细胞侵袭迁移作用的研究》一文中研究指出胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤[1],具有细胞高度增殖、血管形成异常、向周围侵袭迁移等生物学特点[2,3]。随着新的影像学辅助技术的不断发展和微创手术理念的不断完善[4,5],肿瘤的影像学切除率得到极大程度的提高,患者的中位生存期获得延长,生存质量得以改善,然而由于胶质母细胞侵袭浸润性生长的生物学特性,导致肿瘤极易发生侵袭迁移,引起肿瘤的复发播散,严重制约了治疗效果的提高,也导致了患者不良的预后[6]。肿瘤微环境是一个复杂的动态局部环境,包括肿瘤细胞、肿瘤基质细胞(免疫细胞、成纤维细胞等)、细胞外基质以及微环境内细胞通过旁分泌或自分泌产生的多种细胞外因子,在肿瘤的发生发展、增殖以及侵袭迁移中发挥着重要作用[7,8]。由于肿瘤组织内细胞增殖迅速、血管形成异常、能量代谢异常的特点,导致了肿瘤细胞营养缺乏以及肿瘤微环境中肿瘤细胞外酸内碱的状态[9,10],肿瘤细胞可能为了破解这种生存环境的压力而向远处转移,侵袭到营养相对丰富更适宜的区域,造成肿瘤的播散。钠氢交换体1(sodium hydrogen exchanger 1,NHE1)是钠氢交换体家族中的一员,是广泛分布于各类细胞细胞膜的一离子通道种,生理状态下,NHE1的主要功能在于维持细胞内外酸碱平衡以及细胞体积的调节[11]。研究表明,NHE1是肿瘤细胞微环境酸化的主要调节因子[12],在多种肿瘤如肝癌[13,14]、宫颈癌[15,16]、乳腺癌[17,18]等中表达上调或激活,增加了肿瘤细胞侵袭迁移的能力。而在胶质瘤研究中其发挥怎样的作用尚不明确。本课题研究胶质瘤组织NHE1的表达及其与预后的关系,并通过体外实验在高表达NHE1的人恶性胶质瘤细胞系中探究其在胶质瘤细胞侵袭迁移运动的作用及其可能机制。课题研究分为以下两个部分:1、NHE1在不同级别胶质瘤组织中的表达情况及其与临床预后的关系。首先应用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中GBM及较低级别胶质瘤(lower grade glioma,LGG)患者的样本数据及其对应的临床数据,分析NHE1在GBM及LGG患者中的差异性表达,并依据NHE1表达情况的差异,分析GBM患者的临床预后;然后应用免疫组织化学染色的方法对我院手术采集的40例不同病理级别的胶质瘤组织样本及10例正常对照脑组织样本进行检测,分析样本中NHE1表达情况的差异;同时对不同病理级别的胶质瘤组织样本及对照脑组织中NHE1 mRNA水平和蛋白的表达量应用Real-time PCR和western blot的方法进行定量分析。然后采用western blot的方法筛选出表达NHE1蛋白较高的恶性胶质瘤细胞系进行后续体外实验。结果显示,TCGA数据库中172例GBM患者样本中NHE1的表达水平明显高于350例LGG患者样本中NEH1的表达水平,NHE1的表达水平与GBM患者的预后存在显着相关性,表达水平越高,患者预后越差,生存期越短。本院采集的手术组织样本中,NHE1在对照脑组织样本中不表达或弱阳性表达,在高级别胶质瘤组织样本中表达增高,并且阳性率随着肿瘤病理级别的增高而增高。Real-time PCR和western blot的检测结果显示与TCGA数据库分析结果及免疫组化染色结果相符合。在U87和SNB19两个胶质瘤细胞系中western blot检测显示NHE1蛋白表达量较高,用于后续体外实验研究。2、研究NHE1在胶质瘤细胞迁移和侵袭中的作用。应用含有0.2%胎牛血清的DMEM培养基培养细胞,在U87和SNB19两种细胞系中,应用干扰NHE1表达的siRNA对细胞进行转染,分别分为siRNA-NHE1组、siRNA-NC组(转入无义序列)和control组,在不同的处理组中,NHE1 mRNA及蛋白表达水平分别采用Real-time PCR和western blot检测,细胞免疫荧光技术检测NHE1的表达情况与细胞伪足形成情况,Transwell实验和划痕实验分别检测胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力,荧光基质胶降解实验观察NHE1对于胶质瘤细胞侵袭性伪足形成和荧光基质胶降解的影响,western blot技术检测胶质瘤细胞MMP-9、MMP-2、cortactin、p-cortactin的蛋白表达量。结果显示:应用siRNA敲低NHE1的表达,抑制了胶质瘤细胞的侵袭迁移的能力;NHE1蛋白在细胞的侵袭性伪足前端富集;敲低NHE1的表达后其侵袭性伪足形成和基质胶降解能力显着下降(P<0.05);相较于control组和siRNA-NC组,si RNA-NHE1组胶质瘤细胞MMP-9、MMP-2、p-cortactin表达明显降低(P<0.05),cortactin无明显变化(P>0.05)。结论:1、胶质瘤组织样本中NHE1表达增高,高级别胶质瘤组织样本中表达明显高于正常对照脑组织样本与低级别胶质瘤组织样本,并且在GBM患者中NHE1的表达水平与患者预后相关,表达越高,预后越差。2、抑制NHE1蛋白的表达,可抑制胶质瘤细胞MMP-2和MMP-9的表达以及侵袭性伪足的形成,进而影响胶质瘤细胞侵袭和迁移的能力。3、NHE1富集于侵袭性伪足前端,可能通过改变侵袭伪足局部pH值影响cortactin的磷酸化,从而影响侵袭性伪足的形成。4、针对NHE1的靶向药物有望抑制胶质瘤细胞的侵袭迁移。(本文来源于《天津医科大学》期刊2017-05-01）
胡从智[6]（2016）在《钠氢交换体NHE1在高盐诱导血管平滑肌细胞增殖和钙离子调控中的作用》一文中研究指出目的:本课题旨在观察钠氢交换体(Na+/H+exchanger,NHE1)在高盐诱导的血管平滑肌细胞增殖中的表达,并初步探讨其在高盐诱导的血管平滑肌细胞增殖中作用。方法:(1)盐浓度、NHE1阻断剂(Amiloride)浓度及作用时间的确定:取大鼠腹主动脉采用组织块贴壁法培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),实验分为对照组(Na+浓度139mmol/L),高盐组(Na+浓度159mmol/L),高盐+阻断剂组(Na+浓度159mmol/l+Amiloride浓度10μM、20μM、30μM、40μM)。利用MTT比色法检测不同浓度的Amiloride对高盐干预的VSMC增殖的影响,以确定Amiloride的最佳干预浓度。(2)效应和机制分析:VSMC无血清同步化24h后,实验分为对照组(Na+浓度139mmol/L),对照+阻断剂组(Na+浓度139mmol/L+Amiloride浓度30μM),高盐组(Na+浓度159mmol/L),高盐+阻断剂组(Na+浓度159mmol/l+Amiloride浓度30μM)继续培养72h后进行以下实验:超微量Ca~(2+)-ATPase测试试剂盒测定细胞膜钙泵活性;细胞免疫荧光、real-time PCR及Western Blot检测大鼠VSMC中NHE1、NCX-1、PMCA4基因与蛋白表达,应用比率荧光法检测各组VSMC内钙离子的浓度及细胞内p H值。结果:MTT法显示高盐+阻断剂组(Amiloride浓度为30μM)增殖能力较高盐组明显减弱。与对照组比较,高盐组NHE1、NCX-1、PCNA蛋白表达增加,PMCA4蛋白表达降低,细胞内钙离子浓度及p H值明显增加,(P﹤0.05)。同时,NHE1、NCX-1 m RNA表达增加(P﹤0.05),PMCA4 m RNA表达无明显差别(P﹥0.05);与高盐组相比,高盐+阻断剂组NHE1、NCX-1、PCNA蛋白以及NHE1、NCX-1 m RNA表达下调(P﹤0.05),PMCA4蛋白和m RNA表达无明显差别(P﹥0.05),细胞内钙离子浓度及细胞内p H值明显降低(P﹤0.05)。结论:(1)高盐能诱导大鼠血管平滑肌细胞发生增殖,并且细胞内游离钙离子浓度和p H值升高;(2)高盐上调了NHE1的表达,阻断细胞NHE1的表达能够部分抑制高盐诱导VSMC的增殖,降低细胞内NCX-1的表达及细胞内游离钙离子浓度和p H值。(本文来源于《遵义医学院》期刊2016-06-01）
邱晓媚,余柳婷,詹彦俐,肖斌,郝文波[7]（2014）在《钠氢交换体的结构、功能及其在疾病中的作用》一文中研究指出细胞内pH维持在一定的生理范围内,对细胞的生长分化、细胞内酶的活性、细胞骨架的装配与解聚等生理过程至关重要。细胞主要依赖于一系列离子转运蛋白来调控细胞内pH的动态平衡,钠氢交换体(Na+/H+exchanger,NHE)是其中重要的成员之一。NHE家族共有9个亚型,根据发现顺序依次命名为NHE1~NHE9,具有不同的组织分布和功能特性。近年来研究表明,NHE除能调节细胞内的pH值外,还参与了上皮细胞的盐运输和细胞(本文来源于《成都医学院学报》期刊2014年04期）
李惠,王照春,齐洁,张钧[8]（2014）在《钠氢交换体1与高血压关系的研究进展》一文中研究指出钠氢交换体-1(sodium hydrogen exchanger,NHE-1)是细胞膜上离子转运泵蛋白家族中最具特征性结构的一类,它能够将细胞内H+与细胞外Na+按照1∶1的比例进行交换,从而调控细胞内pH值的动态平衡,进而影响细胞的容积、分化、凋亡以及生长增殖等复杂的生理和病理过程。在高血压患者中已发现,NHE-1亚型的mRNA在心肌细胞和血管平滑肌细胞中表达水平显着增高,因此,研究高血压发病中NHE-1的表达及相关调节机制,可为高血压的诊治提供新的理论依据。(本文来源于《现代医学》期刊2014年02期）
王春晓[9]（2013）在《血流剪切力对大鼠肺微血管内皮细胞钠氢交换体1表达的影响》一文中研究指出研究背景：钠氢交换体(NHE)是真核细胞内pH值的重要调节剂,到目前为止共发现了10种NHE亚型。其中NHE1主要表达在哺乳动物的心肌细胞、血管和肺,参与多种细胞功能,包括调节细胞内的pH值,稳定细胞容量,影响细胞的增殖和凋亡,调节细胞行为以及离子转运等。近年来,有大量文献表明,NHE1参与心肌损伤、重构、心肌肥厚及肺动脉高压的形成过程；更为重要的是,在动物实验中发现NHE1有促进细胞增殖的作用。左向右分流型先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)的病理生理变化主要表现为肺循环血流量的显着增多。血管内皮细胞附着于血管管腔的内壁,因此,高肺血流可直接造成肺动脉内皮细胞(pulmonary arterial endothelial cells, PAECs)所受剪切力(shear stress, SS)的增加,由于内皮细胞的异质性,远端肺微血管内皮细胞更容易受到损伤,肺微血管内皮细胞损伤后激活、合成的多种细胞因子激发或是参与了肺动脉高压过程中肺血管的收缩和结构的重构。由于NHE1在慢性心衰及心肌肥厚等方面的研究较多,而在高肺血流所致肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)过程中的作用目前鲜有报道；同时关于肺动脉高压的发病机制中,当前研究的焦点更多的是有关肺动脉平滑肌的改变,从肺微血管内皮细胞(PMVECs)层次上的研究甚少。且多数实验研究局限于肺动脉高压慢性或中晚期的分子病理事件,因此本实验立项研究肺动脉高压发生的早期生物学效应。研究目的：研究流体剪切力对大鼠PMVECs NHE1表达的影响,探讨血流剪切力损伤肺微血管内皮细胞的早期作用机制。研究方法：培养大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs),而后应用多层流动腔装置对PMVECs进行流体冲击。依据剪切力作用的不同时间实验分为5组：正常对照组；剪切力作用15分钟组；剪切力作用30分钟组；剪切力作用45分钟组；剪切力作用60分钟组。实时荧光定量PCR检测NHE1的基因表达水平,Western-blot免疫印迹检测NHE1的蛋白表达。结果：在1.5*10-5N/cm2的剪切力作用下,实验组同对照组相比,NHE1的基因和蛋白水平表达明显上升(P<0.05),在升高的实验组中尤其以15分钟组最为明显,而后随着剪切力作用时间的延长,在作用30分钟和45分钟时NHE1基因和蛋白的表达出现了一个下降期,而在作用时间延长至60分钟时,NHE1的表达又显着增高。结论：血流剪切力上调NHE1在大鼠PMVECs中的表达,提示NHE1的表达上调可能损伤肺微血管内皮细胞,进而可触发肺动脉高压的发生。(本文来源于《山东大学》期刊2013-05-10）
宋俊燕,孔涛,吴娜,宁阳根[10]（2011）在《钠氢交换体1在病理性心肌肥厚大鼠心肌组织及血浆中的表达》一文中研究指出目的:研究异丙肾上腺素诱导的病理性心肌肥厚大鼠心肌组织及血浆中钠氢交换体1(sodium-hydrogen exchanger 1,NHE-1)的表达,探讨NHE1在心肌肥厚发生和发展中的作用。方法:30只雄性SD大鼠随机并平均分为2组:病理性心肌肥厚组和对照组,每组15只,病理性心肌肥厚组(以下简称ISO组)予以ISO(异丙肾上腺素)连续每日以20、10和5mg/kg的剂量递减皮下注射,再以3mg/kg的剂量维持皮下注射7d,对照组予相同剂量生理盐水皮下注射。给药结束后进行心脏超声检测左室舒张末径(LVEDD)、左室收缩末径(LVESD)、室间隔厚度(IVST)、短轴缩短率(FS)、左室射血分数(LVEF)。分别测定各组大鼠体重(BW)、心室重量(VW)、左心室重量(LVW),计算心室重量指数VWI(VW/BW)、左心室重量指数LVW(ILVW/BW)。取血检测血浆中NHE-1的浓度,并取心肌组织观察病理形态学特征,用免疫组化法检测心肌组织中NHE-1的表达量。结果:与对照组相比,ISO组大鼠LVEF、IVST显着增加(P<0.05),LVESD明显降低(P<0.05),VWI、LVWI明显增加(P<0.01),血浆NHE-1浓度明显升高(P<0.01),心肌组织NHE-1表达增多(P<0.01)。结论:NHE-1可能在病理性心肌肥厚的发生和发展过程中起着重要作用。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2011年11期）
钠氢交换体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究钠氢交换体-1(sodium/hydrogen exchanger1,NHE-1)及其阻断剂在高盐诱导乳鼠心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs)增殖、胶原分泌及钙离子调控中的作用。方法:采用组织块贴壁法培养乳鼠CFs,传至3-4代于镜下观察CFs的形态,免疫荧光法行CFs标志蛋白波形蛋白鉴定。分组:对照组(Na~+139mmol/L),高盐组(Na~+161mmol/L),高盐+Cariporide组(Na~+161mmol/L+Cariporide 5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L、25μmol/L),培养48h后,MTT法和EdU检测CFs的增殖状况并确定Cariporide浓度。ELISA法检测CFs培养上清液中胶原I(collagenI,COL1)、胶原III(collagenIII,COL3)含量;酶学比色法检测Ca~(2+)-ATPase和Na~+/K~+-ATPase活性;比率荧光法检测各组CFs内Ca~(2+)浓度及pH;Western Blot检测CFs中COL1、COL3、NHE-1、NCX-1蛋白表达。结果:MTT法显示,NHE-1受体阻断剂Cariporide在10μmol/L时开始对细胞增殖有抑制作用;EdU结果表明,与对照组相比,高盐组CFs增殖明显,Cariporide阻断后细胞增殖明显抑制(P<0.05)。高盐组COL1、COL3含量增高(P<0.05),细胞内pH及钙离子浓度升高(P<0.05),细胞Ca~(2+)-ATPase和Na~+/K~+-ATPase活性均降低;Cariporide阻断后CFs细胞增殖受抑制,COL1、COL3含量降低(P<0.05),细胞内pH及钙离子浓度有所降低(P<0.05),Ca~(2+)-ATPase和Na~+/K~+-ATPase活性升高(P<0.05)。与对照组相比,高盐组COL1、COL3、NHE-1和NCX-1蛋白表达上调(P<0.05),阻断了NHE-1后,COL1、COL3、NHE-1及NCX-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:(1)NHE-1阻断剂Cariporide可抑制高盐诱导的CFs增殖及COL1、COL3分泌与表达;(2)阻断NHE-1可降低高盐诱导的CFs内pH和钙离子浓度升高。(3)阻断NHE-1可逆转高盐诱导的CFs钠泵和钙泵活性降低以及NHE-1和NCX-1蛋白表达增高。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钠氢交换体论文参考文献
[1].黄柯,刘王波,刘涛.钠氢交换体1调节肿瘤微环境对肿瘤细胞的影响[J].临床外科杂志.2019
[2].孙雅.钠氢交换体及其阻断剂在高盐诱导乳鼠心肌成纤维细胞增殖、胶原分泌和钙离子调控中的作用[D].遵义医学院.2018
[3].李政道.钠氢交换体和碳酸酐酶在中国对虾响应pH胁迫中的功能研究[D].上海海洋大学.2018
[4].李彩蓉.钠氢交换体1对糖尿病db/db小鼠心脏钙蛋白酶和糖原合成酶激酶-3β的调节作用[D].武汉大学.2017
[5].王伟.钠氢交换体1对胶质瘤细胞侵袭迁移作用的研究[D].天津医科大学.2017
[6].胡从智.钠氢交换体NHE1在高盐诱导血管平滑肌细胞增殖和钙离子调控中的作用[D].遵义医学院.2016
[7].邱晓媚,余柳婷,詹彦俐,肖斌,郝文波.钠氢交换体的结构、功能及其在疾病中的作用[J].成都医学院学报.2014
[8].李惠,王照春,齐洁,张钧.钠氢交换体1与高血压关系的研究进展[J].现代医学.2014
[9].王春晓.血流剪切力对大鼠肺微血管内皮细胞钠氢交换体1表达的影响[D].山东大学.2013
[10].宋俊燕,孔涛,吴娜,宁阳根.钠氢交换体1在病理性心肌肥厚大鼠心肌组织及血浆中的表达[J].现代生物医学进展.2011