导读:本文包含了大分子底物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:羰基还原酶,大分子酮,催化性能,立体选择性
大分子底物论文文献综述
梁晨[1](2018)在《大分子底物适用性立体选择性羰基还原酶的挖掘及其催化特性表征》一文中研究指出光学活性手性醇已被公认为合成精细化学品和药物的关键手性中间体,羰基还原酶催化还原潜手性羰基化合物具有高化学选择性、对映体选择性和区域选择性,是制备手性醇的单一对映异构体的有效方法。然而,工业中使用的大部分潜手性酮在结构上是复杂的,比如芳香酮、酮酯和杂环酮,底物分子大小引起的酶活性缺陷仍然是酶促还原酮的一个挑战。因此,有必要开发可催化还原具有庞大基团的底物的酶,用于生产高光学纯度的手性醇。本研究开发和构建了大分子酮还原酶工具箱,尝试以多种芳香酮、酮酯、杂环酮为底物,考察各酶的催化性能和立体选择性,实现了多种医药中间体的高立体选择性制备,并探究了 2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)和1-苄基-3-吡咯烷酮不对称转化反应的影响因素,具体研究内容如下:(1)通过基因挖掘获得新型醛酮还原酶,包括来源于Candida albicans的CaCR、来源于Saccharomyces cerevisiae ScCR 以及来源于Kluyveramyces marianus的 KmCR,同时挖掘到来源于C.parapsilosis的醛酮还原酶CPR-C1和CPR-C2。构建重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-CaCR、E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-ScCR、E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)-KmCR,通过IPTG诱导使目的蛋白活性表达,构建大分子酮还原酶工具箱。除此之外,羰基还原酶RCR的两种突变体F285A/W286A和W116A,也作为本研究的大分子酮还原酶工具箱中的成员。通过对各羰基还原酶进行Ni亲和层析柱纯化,获得SDS-PAGE显示单一条带的纯酶。(2)以芳香酮、酮酯和杂环酮类化合物作为底物,考察大分子酮还原酶工具箱的催化性能。结果显示,各羰基还原酶均对一到几种大分子底物具有活性,与其他酶相比,ScCR显示出更广泛的底物特异性。大部分酶都具有潜在催化还原苯甲酰甲酸乙酯的能力。对与底物亲和力相关的Kn值分析,发现酶作用大分子底物的催化规律。(3)探究重组羰基还原酶的立体选择性,结果显示酶促反应生成的手性醇构型与其在工业应用上的需求相一致,以大于99%的对映体过量值生成(R)-扁桃酸甲酯、(R)-扁桃酸乙酯、(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯((R)-HPBE)、(5)-3-羟基-3-苯基丙酸乙酯以及(5)-1-苄基-3-吡咯烷醇。(4)分别探究反应体系组成和条件对OPBE、1-苄基-3-吡咯烷酮不对称转化反应的影响。结果显示以F285A/W286A催化还原OPBE时,当pH 7.0,反应温度30℃,3.5%(v.v-1)异丙醇作助溶剂,加入1 g.L-1底物,反应12h时,产率为80.3%,对映体过量值大于99%。而以W116A催化还原1-苄基-3-吡咯烷酮时,当加入60%(v·v-1)异丙醇、0.5 g.L-1底物时,产率为75.2%,对映体过量值大于99%。(本文来源于《江南大学》期刊2018-06-01)
邓健,林金萍,魏东芝[2](2015)在《羰基还原酶的定制:基于大分子底物催化的活性口袋改造》一文中研究指出羰基还原酶能够将前手性酮不对称还原为手性醇,是一类具有重要应用价值的工业生物催化剂。我们基于对氧化葡萄糖酸杆菌基因组数据的挖掘,报道了一种新的羰基还原酶(GoCR)。该酶属于短链醇脱氢酶超家族,严格依赖NAD~+/NADH。GoCR对仲醇和2,3-二醇表(本文来源于《2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集》期刊2015-08-21)
庞广昌,潘葳,陈庆森[3](2004)在《不同蛋白酶水解酪蛋白类大分子底物的规律研究》一文中研究指出近年来,已有大量具有重要生物活性的短肽通过适当的蛋白酶水解营养或贮藏蛋白释放和辨认出来。这些蛋白资源十分丰富和廉价,通过水解这些蛋白质所获得的生物活性肽不仅价格便宜、安全性好、工艺简单,而且容易进行工业化生产。为了能够获得更高的生物活性肽得率,为生产和研究提供理论依据,本文开展了酶促蛋白水解制备生物活性肽的水解条件、底物浓度和水解度之间的关系研究。结果表明:当底物达到一定的浓度时,不仅其酶促反应速度会迅速下降,酶切位点和酶解产物也有明显不同。这些结果不符合米氏方程,显然酶解蛋白类大分子底物时酶和底物之间的作用比其他底物要复杂得多。(本文来源于《食品科学》期刊2004年03期)
大分子底物论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
羰基还原酶能够将前手性酮不对称还原为手性醇,是一类具有重要应用价值的工业生物催化剂。我们基于对氧化葡萄糖酸杆菌基因组数据的挖掘,报道了一种新的羰基还原酶(GoCR)。该酶属于短链醇脱氢酶超家族,严格依赖NAD~+/NADH。GoCR对仲醇和2,3-二醇表
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
大分子底物论文参考文献
[1].梁晨.大分子底物适用性立体选择性羰基还原酶的挖掘及其催化特性表征[D].江南大学.2018
[2].邓健,林金萍,魏东芝.羰基还原酶的定制:基于大分子底物催化的活性口袋改造[C].2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集.2015
[3].庞广昌,潘葳,陈庆森.不同蛋白酶水解酪蛋白类大分子底物的规律研究[J].食品科学.2004