导读:本文包含了基因敲除和回补论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:副溶血弧菌,calR,突变株,回补株
基因敲除和回补论文文献综述
侯书宁,孟彦言,朱文君,张凌宇,周冬生[1]（2016）在《副溶血弧菌calR的基因敲除株与回补株构建》一文中研究指出目的构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础。方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒p DS132中。通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重组的方法替换原始calR基因以构建calR无痕突变株(ΔcalR)。PCR扩增calR的基因序列,并将其直接克隆入p BAD33质粒中,构建回补质粒。将回补质粒转入到ΔcalR中,即得回补株(ΔcalR/calR∷p BAD33)。将vop N的启动子区克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒分别转入WT/p BAD33、ΔcalR/p BAD33和ΔcalR/calR∷p BAD33中,通过测定并比较3株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对vop N的调控关系。结果与结论 Lac Z结果表明,CalR负调控vop N的转录,且回补株的回补效果良好,表明成功构建了副溶血弧菌calR基因的突变株和回补株,为后续对CalR的功能研究打下了基础。(本文来源于《军事医学》期刊2016年05期）
张晓静,冯世源,杜崇涛,杨勇军,陈巍[2]（2015）在《金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株的构建》一文中研究指出目的:构建金黄色葡萄球菌(金葡菌)Oat A基因敲除菌株及其回补菌株。方法:以p BT2为载体,构建金葡菌Oat A基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经金葡菌RN4220修饰后电转入金葡菌USA300,利用p BT2载体对温度敏感的特点,在42℃多次传代,筛选出金葡菌Oat A基因敲除菌株。以p LI50为载体,构建p LI50-Oat A全基因回补质粒,电转入金葡菌RN4220,再次抽提后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因回补菌株p Oat A。结果:成功构建基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经RN4220修饰电转入USA300,经PCR及测序鉴定,获得了金葡菌Oat A敲除菌株△Oat A。经PCR及酶切鉴定,确认p LI50-Oat A回补质粒构建成功,通过金葡菌RN4220修饰后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因敲除回补菌株p Oat A。结论:成功构建金黄色葡萄球菌Oat A基因敲除菌株及其回补菌株,为进一步研究金葡菌Oat A的功能及其作用机制奠定基础。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2015年15期）
张旭霞,车南颖,李传友[3]（2014）在《耻垢分枝杆菌esx-3基因敲除与esat-6/cfp10基因回补》一文中研究指出目的敲除耻垢分枝杆菌mc2155的esx-3基因,回补结核分枝杆菌标准毒株H37Rv的rd1区esat-6/cfp10的融合基因,构建重组的耻垢分枝杆菌。方法 (1)从耻垢分枝杆菌基因组中分别扩增出esx-3基因上游5′端非编码区片段和esx-3基因下游3′端非编码区片段。利用重组PCR将以上两个片段拼接在一起,构建esx-3缺失基因突变序列。(2)利用自杀载体系统P1nil/Pgoal质粒与突变序列连接。制备成为线性质粒。电转入至耻垢分枝杆菌细胞内并与esx-3基因同源交换,筛选出esx-3基因被敲除的mc2155突变菌株IKE。(3)以H37Rv基因组为模板PCR扩增esat-6/cfp 10融合基因片断,并连接到PUC-19/PUC-gm-int质粒载体。电转入esx-3基因被敲除的mc2155突变菌株IKE,构建成为最终的回补株IKE-EC。结果通过同源重组技术成功的将esx-3基因从耻垢分枝杆菌mc2155中敲除,并回补了结核分枝杆菌毒株特有的esat-6/cfp 10基因。结论此实验为后续将进行的敲除回补株在结核分枝杆菌感染中的免疫保护性作用的研究提供菌株。(本文来源于《《中国防痨杂志》创刊80周年纪念暨学术会议资料汇编》期刊2014-08-26）
基因敲除和回补论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建金黄色葡萄球菌(金葡菌)Oat A基因敲除菌株及其回补菌株。方法:以p BT2为载体,构建金葡菌Oat A基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经金葡菌RN4220修饰后电转入金葡菌USA300,利用p BT2载体对温度敏感的特点,在42℃多次传代,筛选出金葡菌Oat A基因敲除菌株。以p LI50为载体,构建p LI50-Oat A全基因回补质粒,电转入金葡菌RN4220,再次抽提后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因回补菌株p Oat A。结果:成功构建基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经RN4220修饰电转入USA300,经PCR及测序鉴定,获得了金葡菌Oat A敲除菌株△Oat A。经PCR及酶切鉴定,确认p LI50-Oat A回补质粒构建成功,通过金葡菌RN4220修饰后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因敲除回补菌株p Oat A。结论:成功构建金黄色葡萄球菌Oat A基因敲除菌株及其回补菌株,为进一步研究金葡菌Oat A的功能及其作用机制奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因敲除和回补论文参考文献
[1].侯书宁,孟彦言,朱文君,张凌宇,周冬生.副溶血弧菌calR的基因敲除株与回补株构建[J].军事医学.2016
[2].张晓静,冯世源,杜崇涛,杨勇军,陈巍.金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株的构建[J].现代生物医学进展.2015
[3].张旭霞,车南颖,李传友.耻垢分枝杆菌esx-3基因敲除与esat-6/cfp10基因回补[C].《中国防痨杂志》创刊80周年纪念暨学术会议资料汇编.2014