本文主要研究内容
作者赵向远,李洋,刘延玲,董焕声,王红军,董晓（2019）在《昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养》一文中研究指出：胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)是来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGC)的多潜能干细胞。本研究旨在优化昆明白小鼠EG细胞的培养条件。以昆明白小鼠10.5dpc胚胎PGC为材料,以丝裂霉素C处理的小鼠成纤维细胞(mouse embryonic germ cells,MEF)为饲养层,培养小鼠EG细胞,以对影响小鼠EG细胞传代的因素进行探讨。用ELISA试剂盒定量检测MEF自身分泌生长因子SCF、bFGF、LIF的浓度;以培养液是否添加生长因子,观察PGC/EG的培养效果;比较了机械分割法、胰酶消化法和胶原酶Ⅳ消化法对EG传代培养的影响;对获得的EG进行多能性鉴定。结果表明,培养3d的饲养层上清液中含75.7ng/L SCF、125.7ng/L bFGF、196.6ng/L LIF,培养5d的饲养层上清液中含76.2ng/L SCF、136.2ng/L bFGF、214.2ng/L LIF;培养液添加生长因子显著提高了EG的克隆数、传代数(P<0.05);机械分割法与酶消化法对EG传代差异显著(P<0.05),而两种酶法对EG传代无显著影响(P>0.05);所分离的EG细胞显示AKP染色强阳性;EG体外培养时会自分化为神经样细胞、上皮样细胞;EG细胞呈Oct4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性。结果提示,饲养层自身能分泌少量生长因子,但培养液中添加生长因子可显著改善昆明白小鼠EG培养效果,酶消化法更适合于昆明白小鼠EG的传代培养。
Abstract
pei tai sheng shi xi bao (embryonic germ cells,EG)shi lai yuan yu yuan shi sheng shi xi bao (primordial germ cells,PGC)de duo qian neng gan xi bao 。ben yan jiu zhi zai you hua kun ming bai xiao shu EGxi bao de pei yang tiao jian 。yi kun ming bai xiao shu 10.5dpcpei tai PGCwei cai liao ,yi si lie mei su Cchu li de xiao shu cheng qian wei xi bao (mouse embryonic germ cells,MEF)wei si yang ceng ,pei yang xiao shu EGxi bao ,yi dui ying xiang xiao shu EGxi bao chuan dai de yin su jin hang tan tao 。yong ELISAshi ji he ding liang jian ce MEFzi shen fen bi sheng chang yin zi SCF、bFGF、LIFde nong du ;yi pei yang ye shi fou tian jia sheng chang yin zi ,guan cha PGC/EGde pei yang xiao guo ;bi jiao le ji xie fen ge fa 、yi mei xiao hua fa he jiao yuan mei Ⅳxiao hua fa dui EGchuan dai pei yang de ying xiang ;dui huo de de EGjin hang duo neng xing jian ding 。jie guo biao ming ,pei yang 3dde si yang ceng shang qing ye zhong han 75.7ng/L SCF、125.7ng/L bFGF、196.6ng/L LIF,pei yang 5dde si yang ceng shang qing ye zhong han 76.2ng/L SCF、136.2ng/L bFGF、214.2ng/L LIF;pei yang ye tian jia sheng chang yin zi xian zhe di gao le EGde ke long shu 、chuan dai shu (P<0.05);ji xie fen ge fa yu mei xiao hua fa dui EGchuan dai cha yi xian zhe (P<0.05),er liang chong mei fa dui EGchuan dai mo xian zhe ying xiang (P>0.05);suo fen li de EGxi bao xian shi AKPran se jiang yang xing ;EGti wai pei yang shi hui zi fen hua wei shen jing yang xi bao 、shang pi yang xi bao ;EGxi bao cheng Oct4、SSEA-1de mian yi ying guang jian ce yang xing 。jie guo di shi ,si yang ceng zi shen neng fen bi shao liang sheng chang yin zi ,dan pei yang ye zhong tian jia sheng chang yin zi ke xian zhe gai shan kun ming bai xiao shu EGpei yang xiao guo ,mei xiao hua fa geng kuo ge yu kun ming bai xiao shu EGde chuan dai pei yang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自青岛农业大学学报(自然科学版)的赵向远,李洋,刘延玲,董焕声,王红军,董晓，发表于刊物青岛农业大学学报(自然科学版)2019年02期论文，是一篇关于胚胎生殖细胞论文,饲养层论文,生长因子论文,传代方法论文,分化论文,青岛农业大学学报(自然科学版)2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自青岛农业大学学报(自然科学版)2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：胚胎生殖细胞论文; 饲养层论文; 生长因子论文; 传代方法论文; 分化论文; 青岛农业大学学报(自然科学版)2019年02期论文;