本文主要研究内容
作者肖冉(2019)在《三种食源性提取物的抗氧化及抑Aβ毒性聚集物形成作用的初步研究》一文中研究指出:阿尔茨海默氏症(Alzheimerdisease,AD)是当今社会老年人群中常见的一种神经退行性疾病。患者主要的临床症状为记忆力缺失、行为能力降低以及性情的改变;主要的病理症状为大脑内海马区神经细胞周围有大量的老年斑块沉淀、大量金属离子的聚集、细胞内神经纤维的缠结以及神经元的大量丧失。AD患者大脑中老年斑块内的主要成分为β-淀粉样多肽(Amyloidpolypeptide,Aβ以及浓度较高的铜离子(Cu2+)。Aβ在脑内聚集形成的寡聚体以及纤维对大脑内的神经细胞具有毒性作用;另外Aβ通过络合铜离子,在脑内催化还原剂(如抗坏血酸)和氧气发生氧化还原反应,生成大量的羟基自由基。Aβ通过上述两种途径损伤大脑内的神经细胞,引起神经细胞的凋亡。由于Aβ引起的氧化损伤和细胞毒性导致脑内神经细胞大面积凋亡时,健存的神经细胞不能完成人体正常功能,大脑处于功能的失代偿期,最终导致AD疾病的发生。本论文以筛选出的三种对AD有效的食源性提取物为研究对象,对其抗氧化损伤及抑制Aβ形成的作用进行初步探究,这三种食源性提取物为:米糠乙醇提取物(Rice Bran Ethanol Extract,RBEE)、蓝莓花青素提取物(Malva chloride pigment-3-O-galactoside,Ma-3-gal-Cl)及姜庚酮提取物(5-hydroxy-7-(4’-hydroxy-3’methoxyphenyl)-1-phenyl-3-heptanone,HPH)。通过噻唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-Tetrazolium bromide,MTT)实验、香豆素-3-羧酸(Coumarin-3-carboxylic acid,CCA)实验、DCFH-DA(2-7-二氯氢化荧光素乙二脂)实验、JC-1实验及免疫蛋白印迹(Western Blot,WB)、硫黄素T(Thioflavin T,ThT)实验及原子力显微镜(Atomic Force Microscopy,AFM)实验探究其抗氧化及抑制Aβ毒性聚集物形成的作用。本论文主要研究结论包括:1.利用超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)分析出了RBEE的主要成分为酚酸类物质,其中阿魏酸所占比率最高,占总物质的11.77%。利用MTT实验及流式细胞术实验证明RBEE能够抑制神经细胞由于氧化损伤导致的细胞凋亡;利用CCA、DCFH-DA、JC-1、ThT、AFM及WB实验证明RBEE抑制细胞凋亡主要是因为其可以通过降低羟基自由基、减少内源性活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)、维持线粒体膜电位的稳定、抑制Aβ毒性聚集物形成以及下调caspase信号通路上的caspase-8(pro)、caspase-3(cleaved)、caspase-9(cleaved)、PARP(cleaved)蛋白酶的表达来抑制细胞的凋亡。此外,利用D-半乳糖致痴呆的小鼠进行的水迷宫定位航行与空间探索试验验证了RBEE能够提高小鼠学习记忆来缓解痴呆的发生。2.利用MTT实验及流式细胞术实验证明Ma-3-gal-Cl可抑制细胞由于氧化损伤导致的细胞凋亡。利用CCA、DCFH-DA、JC-1、ThT、AFM及WB实验证明Ma-3-gal-Cl可以通过降低羟基自由基、减少细胞内源性活性氧物质、维持线粒体膜电位的稳定、抑制Ap毒性聚集物形成以及下调caspase信号通路上的caspase-3(cleaved)及MAPK细胞通路上的P-p38蛋白酶的活化来抑制细胞的凋亡。3.利用MTT实验及流式细胞术实验证明HPH可抑制细胞由于氧化损伤导致的细胞凋亡。利用CCA、DCFH-DA、JC-1、ThT、AFM及WB实验证明HPH可以通过降低羟基自由基、减少细胞内源性活性氧物质、维持线粒体膜电位的稳定、抑制Aβ毒性聚集物形成以及下调caspase信号通路上的caspase-3(cleaved)及MAPK细胞通路上的P-p38蛋白酶的表达来抑制细胞的凋亡。综上所述,食源性提取物来源于食用植物,具有安全性高、来源广泛以及经济效益高等优势。本论文通过不同层面的实验探究了三种特定的食源性提取物在预防及治疗AD过程中可能存在的作用机制。本论文的研究成果将为研究人员探究如何延缓AD疾病病程提供重要理论参考,为如何更好的利用具有生物活性的食源性植物提供新的思路,因而具有重要的研究意义。
Abstract
a er ci hai mo shi zheng (Alzheimerdisease,AD)shi dang jin she hui lao nian ren qun zhong chang jian de yi chong shen jing tui hang xing ji bing 。huan zhe zhu yao de lin chuang zheng zhuang wei ji yi li que shi 、hang wei neng li jiang di yi ji xing qing de gai bian ;zhu yao de bing li zheng zhuang wei da nao nei hai ma ou shen jing xi bao zhou wei you da liang de lao nian ban kuai chen dian 、da liang jin shu li zi de ju ji 、xi bao nei shen jing qian wei de chan jie yi ji shen jing yuan de da liang sang shi 。ADhuan zhe da nao zhong lao nian ban kuai nei de zhu yao cheng fen wei β-dian fen yang duo tai (Amyloidpolypeptide,Aβyi ji nong du jiao gao de tong li zi (Cu2+)。Aβzai nao nei ju ji xing cheng de gua ju ti yi ji qian wei dui da nao nei de shen jing xi bao ju you du xing zuo yong ;ling wai Aβtong guo lao ge tong li zi ,zai nao nei cui hua hai yuan ji (ru kang huai xie suan )he yang qi fa sheng yang hua hai yuan fan ying ,sheng cheng da liang de qiang ji zi you ji 。Aβtong guo shang shu liang chong tu jing sun shang da nao nei de shen jing xi bao ,yin qi shen jing xi bao de diao wang 。you yu Aβyin qi de yang hua sun shang he xi bao du xing dao zhi nao nei shen jing xi bao da mian ji diao wang shi ,jian cun de shen jing xi bao bu neng wan cheng ren ti zheng chang gong neng ,da nao chu yu gong neng de shi dai chang ji ,zui zhong dao zhi ADji bing de fa sheng 。ben lun wen yi shai shua chu de san chong dui ADyou xiao de shi yuan xing di qu wu wei yan jiu dui xiang ,dui ji kang yang hua sun shang ji yi zhi Aβxing cheng de zuo yong jin hang chu bu tan jiu ,zhe san chong shi yuan xing di qu wu wei :mi kang yi chun di qu wu (Rice Bran Ethanol Extract,RBEE)、lan mei hua qing su di qu wu (Malva chloride pigment-3-O-galactoside,Ma-3-gal-Cl)ji jiang geng tong di qu wu (5-hydroxy-7-(4’-hydroxy-3’methoxyphenyl)-1-phenyl-3-heptanone,HPH)。tong guo sai zuo lan (3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-Tetrazolium bromide,MTT)shi yan 、xiang dou su -3-suo suan (Coumarin-3-carboxylic acid,CCA)shi yan 、DCFH-DA(2-7-er lv qing hua ying guang su yi er zhi )shi yan 、JC-1shi yan ji mian yi dan bai yin ji (Western Blot,WB)、liu huang su T(Thioflavin T,ThT)shi yan ji yuan zi li xian wei jing (Atomic Force Microscopy,AFM)shi yan tan jiu ji kang yang hua ji yi zhi Aβdu xing ju ji wu xing cheng de zuo yong 。ben lun wen zhu yao yan jiu jie lun bao gua :1.li yong chao gao xiao ye xiang se pu (Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)fen xi chu le RBEEde zhu yao cheng fen wei fen suan lei wu zhi ,ji zhong a wei suan suo zhan bi lv zui gao ,zhan zong wu zhi de 11.77%。li yong MTTshi yan ji liu shi xi bao shu shi yan zheng ming RBEEneng gou yi zhi shen jing xi bao you yu yang hua sun shang dao zhi de xi bao diao wang ;li yong CCA、DCFH-DA、JC-1、ThT、AFMji WBshi yan zheng ming RBEEyi zhi xi bao diao wang zhu yao shi yin wei ji ke yi tong guo jiang di qiang ji zi you ji 、jian shao nei yuan xing huo xing yang wu zhi (reactive oxygen species,ROS)、wei chi xian li ti mo dian wei de wen ding 、yi zhi Aβdu xing ju ji wu xing cheng yi ji xia diao caspasexin hao tong lu shang de caspase-8(pro)、caspase-3(cleaved)、caspase-9(cleaved)、PARP(cleaved)dan bai mei de biao da lai yi zhi xi bao de diao wang 。ci wai ,li yong D-ban ru tang zhi chi dai de xiao shu jin hang de shui mi gong ding wei hang hang yu kong jian tan suo shi yan yan zheng le RBEEneng gou di gao xiao shu xue xi ji yi lai huan jie chi dai de fa sheng 。2.li yong MTTshi yan ji liu shi xi bao shu shi yan zheng ming Ma-3-gal-Clke yi zhi xi bao you yu yang hua sun shang dao zhi de xi bao diao wang 。li yong CCA、DCFH-DA、JC-1、ThT、AFMji WBshi yan zheng ming Ma-3-gal-Clke yi tong guo jiang di qiang ji zi you ji 、jian shao xi bao nei yuan xing huo xing yang wu zhi 、wei chi xian li ti mo dian wei de wen ding 、yi zhi Apdu xing ju ji wu xing cheng yi ji xia diao caspasexin hao tong lu shang de caspase-3(cleaved)ji MAPKxi bao tong lu shang de P-p38dan bai mei de huo hua lai yi zhi xi bao de diao wang 。3.li yong MTTshi yan ji liu shi xi bao shu shi yan zheng ming HPHke yi zhi xi bao you yu yang hua sun shang dao zhi de xi bao diao wang 。li yong CCA、DCFH-DA、JC-1、ThT、AFMji WBshi yan zheng ming HPHke yi tong guo jiang di qiang ji zi you ji 、jian shao xi bao nei yuan xing huo xing yang wu zhi 、wei chi xian li ti mo dian wei de wen ding 、yi zhi Aβdu xing ju ji wu xing cheng yi ji xia diao caspasexin hao tong lu shang de caspase-3(cleaved)ji MAPKxi bao tong lu shang de P-p38dan bai mei de biao da lai yi zhi xi bao de diao wang 。zeng shang suo shu ,shi yuan xing di qu wu lai yuan yu shi yong zhi wu ,ju you an quan xing gao 、lai yuan an fan yi ji jing ji xiao yi gao deng you shi 。ben lun wen tong guo bu tong ceng mian de shi yan tan jiu le san chong te ding de shi yuan xing di qu wu zai yu fang ji zhi liao ADguo cheng zhong ke neng cun zai de zuo yong ji zhi 。ben lun wen de yan jiu cheng guo jiang wei yan jiu ren yuan tan jiu ru he yan huan ADji bing bing cheng di gong chong yao li lun can kao ,wei ru he geng hao de li yong ju you sheng wu huo xing de shi yuan xing zhi wu di gong xin de sai lu ,yin er ju you chong yao de yan jiu yi yi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中南林业科技大学的肖冉,发表于刊物中南林业科技大学2019-09-29论文,是一篇关于阿尔茨海默氏症论文,米糠乙醇提取物论文,蓝莓花青素提取物论文,姜庚酮提取物论文,铜离子论文,中南林业科技大学2019-09-29论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中南林业科技大学2019-09-29论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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