恒温分离论文-马艳君

恒温分离论文-马艳君

导读:本文包含了恒温分离论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:牛,呼吸道疾病,牛支原体,牛眼支原体

恒温分离论文文献综述

马艳君[1](2018)在《牛支原体分离鉴定及恒温隔绝式荧光PCR方法的建立》一文中研究指出支原体(Mycoplasma)是引起牛呼吸道疾病的重要病原,已经证明丝状支原体丝状亚种SC型(Mycoplasma mycoides subsp.Mycoides SC,MmmSC)、牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛眼支原体(Mycoplasma bovoculi)、殊异支原体(Mycoplasma dispar)、牛鼻支原体(Mycoplasma bovirhinis)等多种支原体对牛有致病性。其中,牛支原体在引发牛呼吸道疾病的支原体中感染最为普遍。国内对牛支原体的报道较多,而其他支原体的感染情况尚不清楚。本研究对患呼吸道疾病的病牛进行了牛支原体、牛眼支原体、殊异支原体和牛鼻支原体感染的调查,并建立了牛支原体的恒温隔绝式荧光PCR方法,实现病原精确检测的便捷化、现场化和轻简化。取得成果如下:1.牛呼吸道疾病样本中支原体感染的调查从患有呼吸道疾病的肉牛和牦牛中分别采集54份肉牛鼻腔棉拭子和16份牦牛鼻腔棉拭子,用牛支原体、牛眼支原体、殊异支原体和牛鼻支原体的特异性检测引物对这70份样本进行了检测,调查支原体感染情况;同时采用支原体属的特异性PCR方法扩增长度为1021bp的16S rRNA序列,克隆测序后做进化分析。结果表明:4种支原体特异性检测结果显示,牛支原体在肉牛和牦牛的样本中的感染率分别为57.30%(29/54)和68.75%(11/16),殊异支原体在肉牛和牦牛的样本中的感染率分别为29.63%(16/54)和56.20%(9/16),牛眼支原体在肉牛和牦牛样本中的检出率分别为20.37%(11/54)和37.50%(6/16),牛鼻支原体在肉牛和牦牛中的检出率分别为16.67%(9/54)和25.00%(4/16)。在两种支原体混合感染中,检出率相对较高的是以牛支原体+殊异支原体模式的混合感染,肉牛和牦牛样本中的检出率分别为16.67%(9/54)和50.00%(8/16);叁种支原体混合感染的情况在肉牛和牦牛中都有出现,而四种支原体混合感染的情况只在牦牛样本中被检出。本实验结果表明,国内牛呼吸道疾病样本中支原体感染较为普遍,且种类较多,其中牛支原体检出率最高。首次在国内牛中检出牛眼支原体,丰富了国内牛呼吸道疾病的病原谱。2.牛支原体的分离鉴定及药敏试验采用商品化的支原体基础培养基,对15份牛支原体阳性样本进行了支原体的分离。样本处理后接种液体培养基,于37℃、5%CO_2的条件下培养,培养基变色后转接种于固体培养基,于37℃、5%CO_2培养箱培养。经过3d培养,出现“煎蛋样”菌落。经叁次纯化后得到10株牛支原体纯培养物。药敏试验结果显示,分离的牛支原体对泰乐菌素、氧氟沙星、土霉素、庆大霉素、头孢喹诺、氟苯尼考敏感,而对恩诺沙星和头孢噻呋产生了耐药。本研究结果为牛支原体病的预防和治疗提供了参考。3.检测牛支原体iiPCR方法的建立恒温隔绝式PCR(iiPCR)检测速度快的优势,本研究采用Sachse K等人报道的检测牛支原体的引物与探针,经过反应体系优化,首次建立了牛支原体的恒温隔绝式荧光PCR方法。此方法特异性和稳定性好,对牛支原体参考株(CD-2)以及10株牛支原体分离株均可检出,对溶血性曼氏杆菌、链球菌、无乳支原体、BVDV、BCoV等病原均不检出;最低检测限为44.40copies·μL-1,灵敏性高。配合Pet NAD核酸萃取试剂盒和POCKIT手持核酸分析仪,实现了牛支原体的现场检测,从核酸提取到报告结果仅需1小时,为牛支原体的现场检测提供了可靠的方法。(本文来源于《西南民族大学》期刊2018-03-10)

刘明,邸龙,谭建敏,韩晓坚,林美超[2](2015)在《油气分离的恒温脱气系统设计》一文中研究指出变压器是电力系统中的重要电气设备之一,分析变压器油中溶解性气体对电力系统的故障发现和安全可靠运行具有重要意义。介绍了油气分离技术,并设计了油气分离恒温装置。实验结果表明,恒温的溶解平衡脱气方法具有良好的重现性。恒温装置的设计使油气分离模块温度稳定,保证了油气分离的脱气量和气体检测的准确性。(本文来源于《机电工程技术》期刊2015年04期)

田纯见,王宏,罗琼,林志雄,赵吟[3](2012)在《禽波纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析》一文中研究指出利用腺胃扩张症(PDD)患病鹦鹉腺胃RT-PCR阳性病料,接种猪睾丸(ST)传代细胞,分离禽波纳病毒(ABV),建立实时RT-LAMP检测方法。将阳性病料接种ST细胞单层传代,出现细胞圆缩、脱落,ABV基质蛋白(M)基因扩增产物出现预计大小351bp条带,测序后进化树分析显示为ABV5基因型。针对M基因设计ID37、ID30、ID19、ID6和ID1共5组引物,后3组引物RT-LAMP呈阳性反应。利用钙黄绿素建立实时RT-LAMP,分别在36(ID30)、38(ID37)和49(ID19)min出现扩增反应曲线,60min内扩增达到峰值。对各种临床样品检测与RT-PCR结果一致,新城疫等类症病毒未见阳性反应,显示较高的特异性;对细胞培养物检测10-1~10-5为阳性,比较RT-PCR敏感性提高约100倍。RT-LAMP检测方法的建立为PDD防制提供新的检测方法,也是波纳病公共卫生研究有益的参考。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2012年11期)

田纯见,王宏,罗琼,林志雄,赵吟[4](2012)在《禽博尔纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析》一文中研究指出本研究利用哺乳动物细胞从腺胃扩张症(PDD)患病鹦鹉体内分离一种新的博尔纳病毒(BDV)。将鹦鹉"琉璃363"和"色彩"腺胃病料接种猪睾丸(ST)细胞单层出现圆缩、脱落,RT-PCR检测禽博尔纳病毒(ABV)基质蛋白(M)基因出现预计大小351bp产物条带,产物克隆序列进化树分析显示为ABV5基因型。利用DNAStar和PrimerExplorer V5.0(网络版)软件设计获得ID1,6,19,30和37共5组M基因LAMP引物,进行RT-LAMP反应后叁组引物呈现阳性显色反应,并具有特异电泳条带。以钙黄绿素为荧光指示剂,实时RT-LAMP分别在36min(ID30)、38min(ID37)和49min(ID19)出现扩增反应曲线,60min内扩增达到峰值;浊度测定时叁者出现扩增曲线的时间分别为56min、58min和65min。临床及有关样品检测RT-LAMP与RT-PCR结果一致,腺胃呈ABV阳性,大肠、小肠、十二指肠、心、肝、脾、肺、肾、肌胃、腺胃、腺胃内容物、胰腺、素囊、脑、肌肉等病料中未检出;病毒ST细胞培养物RT-LAMP检测10~(-1)~10~(-5)为阳性,RT-PCR检测10~(-3)以后为阴性。新城疫、禽流感、法氏囊病、白血病J亚群、脑脊髓炎等有关病毒未见阳性反应。研究结果对鹦鹉及其他家禽致死性PDD防制提供新的技术手段,为BDV公共卫生研究提供有益的参考。(本文来源于《中国畜牧兽医学会——第叁届中国兽医临床大会论文集》期刊2012-08-17)

田纯见,王宏,罗琼,林志雄,赵吟[5](2012)在《禽博尔纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析》一文中研究指出本研究利用哺乳动物细胞从腺胃扩张症(PDD)患病鹦鹉体内分离一种新的博尔纳病毒(BDV)。将鹦鹉"琉璃363"和"色彩"腺胃病料接种猪睾丸(ST)细胞单层出现圆缩、脱落,RT-PCR检测禽博尔纳病毒(ABV)基质蛋白(M)基因出现预计大小351bp产物条带,产物克隆序列进化树分析显示为ABV5基因型。利用DNA Star和PrimerExplorer V5.0(网络版)软件设计获得ID1,6,19,30和37共5组M基因LAMP引物,进行RT-LAMP反应后叁组引物呈现阳性显色反应,并具有特异电泳条带。以钙黄绿素为荧光指示剂,实时RT-LAMP分别在36min(ID30)、38min(ID37)和49min(ID19)出现扩增反应曲线,60min内扩增达到峰值;浊度测定时叁者出现扩增曲线的时间分别为56min、58min和65min。临床及有关样品检测RT-LAMP与RT-PCR结果一致,腺胃呈ABV阳性,大肠、小肠、十二指肠、心、肝、脾、肺、肾、肌胃、腺胃、腺胃内容物、胰腺、素囊、脑、肌肉等病料中未检出;病毒ST细胞培养物RT-LAMP检测10-1~10-5为阳性,RT-PCR检测10-3以后为阴性。新城疫、禽流感、法氏囊病、白血病J亚群、脑脊髓炎等有关病毒未见阳性反应。研究结果对鹦鹉及其他家禽致死性PDD防制提供新的技术手段,为BDV公共卫生研究提供有益的参考。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集》期刊2012-08-01)

蔡正千,刘静,沈玉其[6](1994)在《恒温热分离称重法测定火药包覆材料有机玻璃中的硝化甘油》一文中研究指出提出了一种试样无需分离,测定简便快速,称为恒温热分离称重法的测定火药包覆材料中硝化甘油含量的新方法,并应用于有机玻璃中硝化甘油浓度分布的测定。对于5mg的试样,当硝化甘油浓度为40%~1%时,5次测定的标准偏差约为0.4%。不仅可用无DTG的热天平,而且也可用其它常用热分析仪(如DTA、DSC)进行热分离,在与十万分之一的天平配合后,即能直接测定包覆材料中硝化甘油的含量。(本文来源于《火炸药学报》期刊1994年02期)

刘建成,周幼宝,孙国器,王明锁,冯纪辛[7](1987)在《一种改进的羟基磷灰石层析法分离DNA的恒温加热装置》一文中研究指出本文设计了一种控温准确,操作简便的加热装置,提高了羟基磷灰石层析的分辨能力,并研究采用此装置在不同温度条件下的层析效果。实验证明,用羟基磷灰石层析法分离单、双链 DNA,60℃时分离效果最佳,65℃以上则严重影响层析结果,层析温度应控制在60°±5℃。(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊1987年01期)

恒温分离论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

变压器是电力系统中的重要电气设备之一,分析变压器油中溶解性气体对电力系统的故障发现和安全可靠运行具有重要意义。介绍了油气分离技术,并设计了油气分离恒温装置。实验结果表明,恒温的溶解平衡脱气方法具有良好的重现性。恒温装置的设计使油气分离模块温度稳定,保证了油气分离的脱气量和气体检测的准确性。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

恒温分离论文参考文献

[1].马艳君.牛支原体分离鉴定及恒温隔绝式荧光PCR方法的建立[D].西南民族大学.2018

[2].刘明,邸龙,谭建敏,韩晓坚,林美超.油气分离的恒温脱气系统设计[J].机电工程技术.2015

[3].田纯见,王宏,罗琼,林志雄,赵吟.禽波纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析[J].畜牧兽医学报.2012

[4].田纯见,王宏,罗琼,林志雄,赵吟.禽博尔纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析[C].中国畜牧兽医学会——第叁届中国兽医临床大会论文集.2012

[5].田纯见,王宏,罗琼,林志雄,赵吟.禽博尔纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集.2012

[6].蔡正千,刘静,沈玉其.恒温热分离称重法测定火药包覆材料有机玻璃中的硝化甘油[J].火炸药学报.1994

[7].刘建成,周幼宝,孙国器,王明锁,冯纪辛.一种改进的羟基磷灰石层析法分离DNA的恒温加热装置[J].生物化学与生物物理进展.1987

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