导读:本文包含了内皮细胞分化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:动脉内皮细胞,BMSCs,骨髓间充质干细胞,静脉内皮细胞
内皮细胞分化论文文献综述
黄艳,樊瑜波[1]（2019）在《近动脉生理脉动流对骨髓间充质干细胞向动脉内皮细胞方向分化的影响》一文中研究指出目的开展剪切应力对干细胞内皮向分化的影响研究对于组织工程化血管再生具有重要的意义。前期研究表明,定常层流剪切应力可以促进干细胞内皮向分化,不同的生化因子可以诱导干细胞分化为动脉或静脉内皮细胞,内皮细胞对定常层流和脉动流等不同流动方式非常敏感,因此,本文研究近动脉生理脉动流剪切应力对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)向动脉内皮细胞方向分化的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养BMSCs;利用本实验室自主研制的脉动流细胞力学实验系统对BMSCs加载不同流型和大小的剪切应力;通过免疫组化、RT-PCR、western blotting等检测动脉和静脉内皮细胞相关基因和蛋白的表达等。结果对照组细胞F-actin骨架稀疏、发散、无规律;定常层流剪切应力组沿流动腔方向排列;近动脉生理脉动流剪切应力组在细胞边缘处聚集成束。近动脉生理脉动流剪切应力组比定常层流剪切应力组表达更多的FLK-1、VE-cdherin和t和PA的mRNA;近动脉生理脉动流剪切应力组CD31和vWF蛋白的表达明显多定常层流剪切应力组;剪切应力使BMSCs具有很好的摄取Dil标记乙酰化低密度脂蛋白的能力。另外,近动脉生理脉动流切应力作用后BMSCs表达更多的动脉内皮细胞标志物EprinB2和Cx40,体外更好地形成微管状结构。结论近动脉生理脉动流剪切应力比定常层流剪切应力更好地诱导骨髓间充质干细胞向动脉内皮细胞方向分化,干细胞不仅能感受力学刺激,还能区分刺激的不同形式。因此,在血管组织工程种子细胞研究和生物反应器设计时,流型是需要引起重视的因素。(本文来源于《医用生物力学》期刊2019年S1期）
韩欢欢[2]（2019）在《内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响》一文中研究指出目的:探讨小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对同源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外成管能力及向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法:1.取5周龄左右的C57B/L6小鼠,获取骨髓细胞,利用全骨髓贴壁法和差速贴壁法分别获取MSCs和EPCs;2.使用流式细胞术分别检测MSCs和EPCs表面标记物的表达;3.通过双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定;4.对实验进行分组:0%EPCs-CM组(对照组,采用全LG-DMEM培养)?25%EPCs-CM组(采用25%EPCs-CM+75%LG-DMEM培养)和50%EPCs-CM组(采用50%EPCs-CM+50%LG-DMEM培养),分别在培养1周、2周、3周时采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测上述各组MSCs CD31?vWF?eNOS的mRNA表达情况;5.根据qRT-PCR结果,对实验再次分组,以50%EPCs-CM组为实验组与0%EPCs-CM组为对照组,利用免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34的表达情况;体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;使用NO试剂盒对各组上清液中的NO含量进行检测。结果:1.流式细胞术结果显示,第3代MSCs的Sca-1阳性表达率为93%,CD34和CD11b的阳性表达率分别为18.2%和31.9%;EPCs CD34、CD133和VEGFR2的阳性表达率分别为91.8%、67.4%和98.9%。2.EPCs可吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-AC-LDL),使细胞呈红色荧光,并可以结合凝集素(UEA-1)而使细胞呈绿色。在基质胶上可形成管腔样结构。3.qRT-PCR显示3周时25%EPCs-CM浓度组CD31、vWF、eNOS mRNA的表达(1.45±0.81;1.47±0.92;3.79±0.85),vWF、eNOS mRNA的表达水平均较对照组升高显着,差异具有统计学意义(P<0.05);50%EPCs-CM浓度组CD31、vWF、eNOS mRNA的表达(2.28±0.25,1.76±0.71,8.27±1.65),均较对照组显着升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.免疫荧光结果显示实验组MSCs表面CD31和CD34的表达明显高于对照组;实验组细胞成管能力明显强于对照组;对照组细胞培养上清液中NO的含量为(8.81±3.41)μmol/L,实验组细胞培养上清液中NO的含量为(20.93±9.47)μmol/L,较对照组明显升高,差异显着(P<0.05)。结论:1.EPCs条件培养基能提高MSCs体外成管能力;2.EPCs条件培养基可促进MSCs体外向内皮细胞(ECs)分化。(本文来源于《石河子大学》期刊2019-05-01）
韩欢欢,郭黎姣,杨雄峰,周青,姜慧娇[3]（2019）在《内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响》一文中研究指出目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细胞术检测MSCs和EPCs表面标记物,双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定。将MSCs分为0%EPCs-CM组(对照组)、25%EPCs-CM组和50%EPCs-CM组。qRT-PCR检测各组CD31、v WF、e NOS的mRNA表达水平。体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34表达情况;对各组上清中的NO进行检测。结果流式细胞术结果显示,第3代MSCs高表达Sca-1,低表达CD34、CD11b;EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2,可吞噬Dil-AC-LDL和结合UEA-1。在基质胶上可形成管腔样结构。qRTPCR显示3周时50%EPCs-CM组CD31、v WF、e NOS表达(2. 28±0. 25,1. 76±0. 71,8. 27±1. 65),较对照组显着升高(P<0. 05)。50%EPCs-CM组MSCs可体外形成管腔样结构;免疫荧光显示50%EPCs-CM组MSCs CD31和CD34的表达明显高于对照组。对照组细胞与实验组细胞上清液中NO的含量(8. 81+3. 41,20. 93±9. 47)μmol/L,差异显着(t=3. 96,P<0. 05)。结论 EPCs-CM能提高MSCs体外成管能力,并促进MSCs向ECs分化。(本文来源于《石河子大学学报(自然科学版)》期刊2019年02期）
苗宗宁,孙鸿丽,薛一峰[4]（2019）在《胶原海绵促进人绒毛膜来源间充质干细胞向血管内皮细胞分化的研究》一文中研究指出探索人绒毛膜来源间充质干细胞与胶原海绵的生物相容性及复合培养向血管内皮细胞分化。应用IV型胶原酶消化的方法,从胎盘组织中分离人绒毛膜间充质细胞,培养第2代细胞,进行内皮诱导后,种植于Matrigel基质胶并观察成管情况;细胞与胶原海绵复合培养,通过HE染色以及免疫荧光染色,鉴定CD31和vWF的表达。人绒毛膜间充质干细胞向血管内皮定向诱导2周后,形态由长梭形、旋涡状生长逐步变为圆形、铺路石状,免疫荧光染色结果显示CD31和vWF阳性表达;种植于Matrigel胶12 h后表现出成管功能,与胶原海绵复合培养,经HE染色,可见细胞分布于材料内部,免疫荧光染色可见CD31和vWF阳性表达细胞。人绒毛膜间充质干细胞具有定向诱导分化为血管内皮细胞的潜能,胶原海绵具有良好的生物相容性,可以作为组织工程研究的支架材料。(本文来源于《生物医学工程研究》期刊2019年01期）
张湾[5]（2019）在《激活素A在微血管内皮细胞转分化中作用的实验研究》一文中研究指出目的:明确激活素A(Activin A,ACT A)对微血管内皮细胞转分化(endothelial mesenchymal transition,EndMT)的影响及卵泡抑素(follistatin,FS)的干预作用。方法:体外培养成人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),MTT法检测不同浓度rh-ACT A、rh-FS刺激内皮细胞后的增殖率变化;将细胞分为5组:对照组(C组)、TGF-β组(T组)、ACT A组(A组)、TGF-β+FS组(T+F组)、ACT A+FS组(A+F组),光学显微镜下观察细胞形态学变化,再采用免疫细胞化学染色和Western蛋白印迹技术观察ACT A和TGF-β对HUVEC细胞α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、VE-钙黏蛋白(VE-cad)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响以及FS的干预作用。结果:1.与0ng/mL ACT A组相比,10、30、60、100 ng/mL ACT A组的增殖活性均增加(F=22.768,P<0.001),其中30 ng/mL ACT A组的增殖率最高,单独给予FS对细胞增生无明显影响(F=0.437,P=0.781),但FS能拮抗ACT A对内皮细胞生长的促进作用,呈剂量依赖性(F=15.270,P<0.001)。2.免疫细胞化学染色和Western蛋白印迹结果示:ACT A刺激内皮细胞后,ACT A组与对照组相比,α-SMA和FN的表达增加,而VE-Cad的表达减少(均P<0.05),与TGF-β组相比,α-SMA、FN和VE-Cad的表达差异无统计学意义(均P>0.05);FS可阻断ACT A的上述效应(P<0.05),而对TGF-β的作用无明显影响(P>0.05)。ACT A+FS组与ACT A组相比,α-SMA和FN的表达减少,同时VE-Cad的表达增加(均P<0.05)。TGF-β+FS组与TGF-β组比较,α-SMA、FN和VE-Cad的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:ACT A可诱导微血管内皮细胞转分化及FN的合成,FS可通过阻断ACT A的转分化作用,产生内皮细胞保护作用。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-03-11）
刘琼,文军,吴小明,钱虹[6]（2019）在《体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞定向分化的实验研究》一文中研究指出目的研究体外培养乳牙牙髓干细胞向血管内皮细胞的定向分化。方法选取南方医科大学口腔医院29例健康儿童的滞留乳牙,在4 h内进行乳牙牙髓干细胞的原代提取。采用免疫磁珠分选法进行细胞分选,并对分选出的细胞进行特定的血管内皮细胞定向诱导。对乳牙牙髓干细胞及血管内皮细胞定向诱导后的细胞进行镜下形态观察、血管生成实验,以及免疫表型鉴定。结果镜下形态观察显示,经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞呈典型血管内皮细胞的形态特征;血管生成实验表明,经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞可呈现明显的血管样结构;免疫表型鉴定显示经过血管内皮定向诱导的乳牙牙髓干细胞血管内皮细胞表面抗原呈阳性。结论乳牙牙髓干细胞可定向分化为血管内皮细胞。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2019年01期）
文汉,常聪聪,沈奥林,万圣云,丁洋[7]（2018）在《兔骨髓间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究》一文中研究指出干细胞移植治疗是当今一种极为先进的医疗技术,该治疗方法对于临床中某些疑难杂症的医治带来了希望的曙光,而干细胞移植有着让人体组织细胞修复、重建的作用。MSCs在人体中属于骨髓间充质干细胞,其可以对骨髓中的造血干细胞有促进、支持等作用~([1])。近年来,干细胞移植治疗在临床组织再生各方面应用广泛,但是干细胞是具有多向分化潜能的细胞,移植后有成瘤的风险,其安全性需进一步研究~([2,3])。本课题组前期实验从活体大鼠股骨的骨髓中提取(本文来源于《中国地方病防治杂志》期刊2018年06期）
樊晓婷[8]（2018）在《丁酸钠和血管内皮细胞对间充质干细胞成骨分化的调控及其作用机制》一文中研究指出骨损伤危害人们的健康和生活,骨组织工程的建立为骨损伤治疗带来了新的希望。但研究发现,组织工程骨对骨损伤(特别是极限骨缺损)的修复能力有限。究其原因,其一是种子细胞在体外的成骨分化能力有限,特别是羊膜来源的间充质干细胞(AMSCs),其体外成骨分化能力显着低于骨髓间充质干细胞,且成骨分化的调控及相关机制认识不足。其二是组织工程骨内部细胞活性差,易坏死。虽然以内皮细胞为基础的预血管化策略现已应用,但在预血管化组织工程骨的构建过程中,由于血管内皮细胞(ECs)与间充质干细胞(MSCs)相互作用及其分子机制仍不清楚,因此影响了构建物的成骨和成血管功能,进而影响体内骨损伤的修复效果。针对上述关键问题,本研究采用小分子化合物丁酸钠调控人羊膜来源间充质干细胞(hAMSCs)的成骨分化,进一步探究丁酸钠调控羊膜间充质干细胞成骨分化的作用机制。在血管内皮细胞与间充质干细胞直接混合共培养体系中,考察在2D静态培养和3D动态培养环境下血管内皮细胞对间充质干细胞成骨分化及间充质干细胞对血管内皮细胞血管样结构形成的影响,并探究两种细胞之间的相互作用机制。研究结果为体外调控共培养物的成骨分化、血管发生以及构建预血管化的组织工程骨提供数据支持和策略指导。首先,将丁酸钠(一种去乙酰化酶抑制剂)直接添加到生长培养基和成骨诱导培养基,考察丁酸钠的作用浓度和作用时间对hAMSCs增殖和成骨分化的影响。研究结果表明,低浓度的丁酸钠(≤1.0mM)通过将细胞周期阻断在G0/G1期影响hAMSCs增殖,而高浓度的丁酸钠(5.0mM)则诱导细胞发生凋亡。在丁酸钠低浓度(0.50mM)短时间(3 d)作用下,对hAMSCs成骨分化具有一定的促进作用;而丁酸钠高浓度(1.0 mM)长时间(14 d)作用下,对hAMSCs成骨分化产生一定的抑制作用。进一步研究发现,丁酸钠处于低浓度短时间处理,能够促进ERK信号分子的磷酸化,诱导H3K9超乙酰化(H3K9-Ace),降低组蛋白去乙酰化酶8(HDAC8)的表达水平,促进成骨分化基因ALP、Runx2、OPN 和OCN 的转录以及 Runx2、TAZ、Collagentypel、OPN 及 OCN 的表达,从而促进细胞的成骨分化;而丁酸钠处于高浓度长时间处理,则降低H3K9的乙酰化程度,提高HDAC8的表达量,导致上述成骨分化标志基因和蛋白的表达水平降低,从而抑制hAMSCs成骨分化。其次,通过建立2D细胞共培养模型,初步探究骨髓来源间充质干细胞(BMSCs)与血管内皮细胞(ECs)的相互作用机制。采用全骨髓贴壁法分离大鼠来源的骨髓间充质干细胞,经传代培养,检测细胞表面抗原、细胞生长及叁向分化潜能,确定分离出的BMSCs具正常MSCs的功能。将BMSCs与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)以不同的接种比例直接混合共培养于4种培养基中,考察细胞比例、培养基对共培养物血管样网络结构形成和成骨分化的影响,确定适于共培养的细胞接种比例及培养基,即BMSCs与HUVECs以1:2共培养于OIM+1%ECGS中,建立了 BMSCs与HUVECs直接混合共培养体系。基于不同的2D共培养模型,考察直接接触和间接接触共培养对共培养物成骨分化和血管发生的影响,探究间隙连接、细胞因子及外泌小体在共培养体系中的作用。实验结果表明,在成骨诱导环境中,直接混合共培养对BMSCs的成骨分化具明显的促进作用,而在Transwell和条件培养基中间接共培养均不能促进BMSCs的成骨分化。由此可见,HUVECs对BMSCs成骨分化的促进依赖于两种细胞的直接接触,其中间隙连接蛋白Cx43在共培养初期共培养物中的表达量急剧上升,细胞因子和外泌小体均不是促进BMSCs成骨分化的主要因素。进一步研究发现,HUVECs对BMSCs成骨分化的促进作用涉及多种信号途径,包括BMP信号途径、Hedgehog信号途径及Wnt信号途径等。对共培养物血管发生影响的研究发现,在成骨诱导条件下,无论BMSCs与HUVECs是否直接接触,内皮细胞血管样网络结构的形成均受到严重阻碍。直接混合共培养后,内皮细胞中成血管相关基因的转录及关键受体蛋白的表达均显着降低。此外,BMSCs与HUVECs直接混合共培养对两种细胞表面抗原的表达无显着影响,可将HUVECs细胞表面抗原CD 31作为后续共培养物流式分选的标记。基于上述实验结果,进一步考察间隙连接及由间隙连接通道介导的穿梭分子在直接混合共培养体系中对共培养物成骨分化和血管样结构形成的影响,探究BMSCs与HUVECs相互作用的分子机制。采用免疫荧光染色和染料穿梭实验证实了 BMSCs与HUVECs能够形成由Cx43介导的间隙连接,且该通道具有物质传递的功能。通过采用间隙连接的抑制剂18GA和激活剂PTH,进一步证明了两种细胞间形成的间隙连接能够影响共培养物的成骨分化和血管样网络结构的形成,且发现了 Cxcl9和VEGF的表达水平与间隙连接蛋白Cx43具相关性。通过文献调研及生物信息学软件预测,发现miR-200b可能在共培养体系中发挥调控作用。在间隙连接激活剂PTH、抑制剂18GA和外泌小体抑制剂GW4869作用下检测BMSCs与HUVECs单独培养和共培养时两种细胞中miR-200b的表达,发现miR-200b可通过Cx43介导的间隙连接通道从BMSCs转移到HUVECs。细胞转染实验进一步证实了在BMSCs与HUVECs共培养时,因miR-200b从BMSCs转移到HUVECs,使BMSCs中miR-200b的含量降低,导致BMSCs中vegf-α的转录上调,VEGF-A的表达提高,进而促进BMSCs的成骨分化;而miR-200b进入HUVECs后,降低内皮细胞中成血管相关基因ZEB 2、ETS 1、KDR及GATA 2的转录,从而抑制内皮细胞形成血管样的网络结构。研究还发现,TGF-β是调控miR-200b转移的重要因子,在共培养体系中添加TGF-β的抑制剂SB431542或其中和性抗体,共培养物血管样网络结构的形成得以部分恢复。最后,将BMSCs与HUVECs同时接种在Cultispher S微载体上,并在转瓶培养体系中采取“生长-诱导”两段式培养,考察在3D动态培养环境中共培养物的成骨分化和血管发生,并比较3D动态培养与2D静态培养在关键基因转录水平的异同。研究表明,在3D动态培养环境中经成骨诱导后,共培养物的成骨分化能力显着强于BMSCs单独培养组,但共培养物血管样结构的形成明显受阻,这与2D静态培养的现象一致。通过qRT-PCR检测关键基因的表达发现,在3D动态培养体系中,共培养组中成骨分化标志基因的转录水平均显着高于BMSCs单独培养组,且cxcl9和vegfa呈现与cx43相同的变化趋势,与2D平板静态培养的基因表达结果基本一致,仅在表达差异最显着的时间点上略有不同。基于不同微组织的组合,初步尝试预血管化骨微组织的构建,在生长培养基中将BMSCs和HUVECs直接混合共培养1 d的微组织与成骨诱导14 d后形成的骨微组织以1:1组合,采用该策略制备的构建物可以实现成骨和成血管功能。综上所述,本研究探究了小分子化合物丁酸钠对人羊膜间充质干细胞成骨分化的影响,并在2D静态和3D动态培养环境下认识了骨髓来源间充质干细胞与血管内皮细胞之间的相互作用机制,为体外调控共培养物成骨和成血管功能以及构建预血管化的组织工程骨提供理论依据和策略指导。(本文来源于《华东理工大学》期刊2018-11-15）
郭建新[9]（2018）在《奥美沙坦对原发性高血压病人血清脂联素、内皮细胞分化功能和颈动脉粥样硬化的影响》一文中研究指出目的探讨奥美沙坦对原发性高血压(EH)病人血清脂联素、内皮细胞分化功能和颈动脉粥样硬化的影响。方法选取我校附属医院2014年5月—2016年1月心血管内科治疗的60例EH病人作为研究组,同期选取60名体检健康者作为对照组。比较研究组治疗前和对照组血清脂联素水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)。分析所有病人奥美沙坦治疗前后血清脂联素、内皮细胞分化功能指标及IMT的变化。结果研究组收缩压、舒张压、IMT明显高于健康对照组,血清脂联素水平低于健康对照组,差异均有统计学意义(P <0.001)。奥美沙坦治疗后研究组内皮素、收缩压、舒张压、IMT水平均较治疗前降低,一氧化氮和脂联素水平均较治疗前上升,差异有统计学意义(P <0.001)。相关性分析显示:脂联素和血浆内皮素呈负相关关系(r=-0.475,P <0.05),脂联素和一氧化氮呈正相关关系(r=0.574,P <0.05)。结论奥美沙坦对EH病人降压效果好,且可降低颈动脉粥样硬化斑块的形成,其作用机制可能与改善内皮细胞分化及提高脂联素水平有关。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2018年20期）
王珊珊,Xiaohui,Rausch-Fan,Oleh,Andrukov,林毅,曹裕杰[10]（2018）在《Emdogain对不同共培养条件下成骨细胞及内皮细胞增殖与分化的影响》一文中研究指出目的通过建立不同Emdogain浓度下成骨细胞与内皮细胞直接与间接共培养模型,评价Emdogain对不同共培养条件下成骨细胞和内皮细胞增殖与分化的影响以及它们间的相关性。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和成骨样细胞(MG63)按2:1的比例于12孔板内进行直接及间接共培养,并使用不同浓度(0、0.1、1、10、50ug/ml)的Emdogain作用共培养细胞72小时。采用细胞计数仪结合流式细胞仪评价细胞增殖情况,并通过荧光激活流式细胞分选技术分选共培养细胞。对分选后成骨及内皮细胞采用实时荧光定量PCR分别检测成骨相关基因:碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原蛋白(COL-1)及成血管相关基因:血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF酪氨酸激酶受体1(Flt-1)、VEGF酪氨酸激酶受体2(KDR)、von Willebrand因子(vWF)、内皮细胞C蛋白受体(EPCR)、E选择素(E-Selectin)、促血管生成素-2(Ang-2)的表达水平。结果在直接与间接共培养条件下,Emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖的作用具有药物浓度依赖性。随Emdogain浓度增加,细胞增殖率逐渐下降。50ug/ml浓度Emdogain对MG63及HUVEC细胞增殖抑制作用均最为明显。随Emdogain浓度增加,MG63表面ALP和COL-1表达水平逐渐增加。50ug/ml组ALP表达水平最高且与其他组基因表达水平差别有明显统计学意义(P<0.01)。同一Emdogain浓度条件下,直接共培养MG63表面ALP及COL-1表达水平均明显高于间接共培养,且有统计学意义(P<0.01)。除10ug/ml组外,直接共培养条件下VEGF表达水平均明显高于间接共培养(P<0.01)。50ug/ml组直接共培养的HUVEC表面Flt-1、KDR、vWF、E-selectin基因表达水平明显高于间接共培养,也明显高于直接共培养的其他各组(P<0.01)。间接共培养实验组HUVEC表面EPCR及Ang-2基因表达水平高于直接共培养组(P<0.05)。结论共培养条件下,Emdogain对成骨细胞和内皮细胞增殖的作用具有浓度依赖性。50ug/ml可能是Emdogain作用的关键浓度,在直接共培养条件下50ug/ml Emdogain抑制成骨及内皮细胞增殖,但能同时促进成骨及内皮细胞分化,该作用明显强于间接共培养条件,细胞间直接交联可能在其中发挥重要作用。(本文来源于《第七次全国口腔药学学术会议论文汇编》期刊2018-09-27）
内皮细胞分化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对同源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外成管能力及向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法:1.取5周龄左右的C57B/L6小鼠,获取骨髓细胞,利用全骨髓贴壁法和差速贴壁法分别获取MSCs和EPCs;2.使用流式细胞术分别检测MSCs和EPCs表面标记物的表达;3.通过双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定;4.对实验进行分组:0%EPCs-CM组(对照组,采用全LG-DMEM培养)?25%EPCs-CM组(采用25%EPCs-CM+75%LG-DMEM培养)和50%EPCs-CM组(采用50%EPCs-CM+50%LG-DMEM培养),分别在培养1周、2周、3周时采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测上述各组MSCs CD31?vWF?eNOS的mRNA表达情况;5.根据qRT-PCR结果,对实验再次分组,以50%EPCs-CM组为实验组与0%EPCs-CM组为对照组,利用免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34的表达情况;体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;使用NO试剂盒对各组上清液中的NO含量进行检测。结果:1.流式细胞术结果显示,第3代MSCs的Sca-1阳性表达率为93%,CD34和CD11b的阳性表达率分别为18.2%和31.9%;EPCs CD34、CD133和VEGFR2的阳性表达率分别为91.8%、67.4%和98.9%。2.EPCs可吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-AC-LDL),使细胞呈红色荧光,并可以结合凝集素(UEA-1)而使细胞呈绿色。在基质胶上可形成管腔样结构。3.qRT-PCR显示3周时25%EPCs-CM浓度组CD31、vWF、eNOS mRNA的表达(1.45±0.81;1.47±0.92;3.79±0.85),vWF、eNOS mRNA的表达水平均较对照组升高显着,差异具有统计学意义(P<0.05);50%EPCs-CM浓度组CD31、vWF、eNOS mRNA的表达(2.28±0.25,1.76±0.71,8.27±1.65),均较对照组显着升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.免疫荧光结果显示实验组MSCs表面CD31和CD34的表达明显高于对照组;实验组细胞成管能力明显强于对照组;对照组细胞培养上清液中NO的含量为(8.81±3.41)μmol/L,实验组细胞培养上清液中NO的含量为(20.93±9.47)μmol/L,较对照组明显升高,差异显着(P<0.05)。结论:1.EPCs条件培养基能提高MSCs体外成管能力;2.EPCs条件培养基可促进MSCs体外向内皮细胞(ECs)分化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
内皮细胞分化论文参考文献
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