胞壁蛋白论文-丁玲强,史玉芳,潘阳阳,田莉莉,曾巧英

胞壁蛋白论文-丁玲强,史玉芳,潘阳阳,田莉莉,曾巧英

导读:本文包含了胞壁蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:猪链球菌2型,39ku胞壁蛋白,巨噬细胞,细胞凋亡

胞壁蛋白论文文献综述

丁玲强,史玉芳,潘阳阳,田莉莉,曾巧英[1](2012)在《猪链球菌2型39ku胞壁蛋白诱导巨噬细胞凋亡的研究》一文中研究指出为探讨猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)的39ku胞壁蛋白对巨噬细胞的致病作用,将39ku胞壁蛋白纯化,取小鼠腹腔巨噬细胞(murine peritoneal macrophage,MPM)和39ku胞壁蛋白(4μg/mL和40μg/mL)共孵育,用荧光显微镜观察细胞的形态学变化,以不同浓度(4~50μg/mL)39ku胞壁蛋白腹腔注射小鼠,作用6h,用DNA Ladder法检测MPM凋亡情况,以40μg/mL腹腔注射,分别作用2、4、6、8h,用流式细胞术检测MPM凋亡率,同时用试剂盒比色法检测其Caspase 3的表达动态。结果显示,低浓度(4μg/mL)诱导后MPM未见异常形态改变;而高浓度(40μg/mL)能引起典型的凋亡形态学变化,低浓度(4μg/mL)诱导后,DNA图谱与阴性对照相同;而高浓度(20~50μg/mL)诱导后均出现典型的DNALadder,且随39ku胞壁蛋白浓度增加,梯状条带更加清晰。流式细胞分析表明,MPM的凋亡率随39ku胞壁蛋白作用时间的延长而增加,与对照组之间均差异极显着(P<0.01);Caspase 3的表达量随39ku胞壁蛋白作用时间的延长而上升,各时间点之间均差异显着(P<0.05)。结果表明,39ku胞壁蛋白可以诱导MPM高水平凋亡,凋亡率与39ku胞壁蛋白的作用浓度和时间之间正相关,39ku胞壁蛋白可单独作为SS2的毒力因子。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2012年10期)

丁玲强[2](2012)在《猪链球菌2型39kD胞壁蛋白诱导巨噬细胞凋亡》一文中研究指出猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)是一种重要的人兽共患病病原菌,可致人和猪败血症、脑膜炎、多器官衰竭综合征和突发性死亡等[1],不仅对养猪业造成严重经济损失,也给公共卫生、食品安全和人类的生命安全构成了威胁,引起世界范围内高度重视[2]。39kD胞壁蛋白是SS2的重要毒力因子之一,为探明39kD胞壁蛋白的致病机理,本实验进行了如下研究。第一,猪链球菌2型BALB/c小鼠动物感染模型的建立。选用SPF级BALB/c小鼠(20~25g),用猪链球菌2型HA9801菌株感染小鼠建立动物模型,(1)通过不同途径感染小鼠;(2)以不同菌量腹腔感染小鼠。结果表明,(1)腹腔接种最易感,其次是皮下接种,鼻腔接种最不易感;(2)感染的小鼠表现出SS2感染的典型症状和病理变化,如脑膜炎、关节炎等症状,剖检后从组织中分离出了SS2,模型重复性好。重复试验按Reed-Munch法计算此菌株对BALB/c小鼠的半数致死量为7.2×106CFU。第二,猪链球菌2型诱导巨噬细胞凋亡,(1)纯化39kD胞壁蛋白,SDS-PAGE鉴定至电泳纯。(2)以SPF级BALB/c小鼠(20~25g)为试验动物,取腹腔巨噬细胞(Murine peritoneal macrophage,MPM)和39kD胞壁蛋白(4μg/mL和40μg/mL)共孵育,吖啶橙染色,镜检,结果发现低浓度(4μg/mL)诱导后MPM边界清晰完整,未见异常形态改变;而高浓度(40μg/mL)诱导后,MPM呈现胞膜吐泡、核碎裂和凋亡小体等典型的细胞凋亡特征。(3)分别以不同浓度(4~50μg/mL)腹腔注射,作用6h,提取MPM的DNA进行琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示,低浓度(4μg/mL)诱导后,DNA图谱与阴性对照相同,仅一条高分子条带;而高浓度(20~50μg/mL)诱导后均出现典型的凋亡细胞特征性梯状条带,且随39kD胞壁蛋白浓度增加,梯状条带越清晰。(4)以40μg/mL腹腔注射,分别作用2、4、6、8h,收集MPM,流式细胞分析表明,2h即出现8.7%的凋亡峰,凋亡率随39kD胞壁蛋白作用时间延长而增加,8h达27.1%,和对照组(0.4%)之间均差异极显着(P<0.01);同时检测caspase-3的表达动态,结果显示,其表达量在2h就显着高于对照组(P<0.05),随39kD胞壁蛋白作用时间的延长而上升,各时间点之间均差异显着(P<0.05)。试验结果表明,39kD胞壁蛋白可诱导MPM高水平凋亡,凋亡率与39KD胞壁蛋白的作用浓度和时间之间正相关。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2012-06-01)

陈哲,郑玉玲,郝淮杰,律清宇,姜永强[3](2012)在《猪链球菌胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控》一文中研究指出目的:研究猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。方法:采用免疫荧光、实时定量PCR、Western blot等方法从基因转录和表达水平研究SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。结果:实时定量PCR结果显示SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的表达;免疫荧光和免疫印迹结果也显示,SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的含量。结论:SSU05_0272调控人脑微血管内皮细胞β-catenin的表达。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2012年05期)

王萍萍,骈亚亚,袁媛,郑玉玲,姜永强[4](2012)在《2型猪链球菌胞壁蛋白MRP的截短表达、纯化及抗原保护性评价》一文中研究指出目的:扩增猪链球菌2型(Streptococcus suis 2)05Z33中的mrp基因,并在大肠杆菌BL21中重组表达,以获得高纯度的重组MRP截短蛋白,验证其抗原保护性。方法:以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建表达质粒,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,免疫新西兰大白兔制备抗血清并测其效价。通过抗原保护实验及抗血清调理的全血杀伤实验验证重组MRP蛋白抗原保护性。结果:重组MRP蛋白在大肠杆菌中高浓度表达,纯化获得了高纯度的MRP截短蛋白并制备获得了抗血清。经该蛋白免疫过的CD-1小鼠与阴性对照组相比,存活率显着升高。经抗血清调理后,野生株05ZYH33在全血中的存活率显着降低,突变株ΔMRP无显着变化。结论:MRP蛋白有较高的抗原保护性。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2012年02期)

党源[5](2009)在《2型猪链球菌胞壁蛋白免疫蛋白组学研究》一文中研究指出猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)是一种重要的人畜共患病病原体,能够导致猪和人的脑膜炎、败血病、胸膜炎、关节炎、永久性耳聋及突发性死亡,给生命和财产构成极大威胁。猪链球菌共有35个血清型,其中2型猪链球菌流行最广、致病性最强。人们目前对2型猪链球菌(Streptococcus suis type 2,SS2)有了一定的认识,但其致病机理还不明确,缺少有效的诊断和疫苗靶位,给该病的预防、诊断和治疗带来了困难。本研究首先采用THB培养基培养2型猪链球菌,采用不破碎细菌的方法成功的提取了细胞壁蛋白(Cell wall-associated proteins,CWP);应用免疫蛋白质组学方法,以自制家兔高免血清为一抗,HRP标记的羊抗兔为二抗,对转印到PVDF膜上的细胞壁蛋白进行检测,以筛选具有免疫原性的蛋白点,并将重复胶上的相应的点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS),并进行肽质量指纹图谱(Peptides mass fingerprint, PMF)分析。结果表明606菌株和449菌株中共筛选出44个主要免疫原性蛋白点,用质谱鉴定属于26种蛋白,即:溶菌酶释放蛋白(Muramidase-released protein)、翻译起始因子2(Translation initiation factor 2)、内皮素转换酶1(Endothelin-converting enzyme 1)、hypothetical protein SSU05_2031、3 -酮(酰基载体蛋白)还原酶[3-ketoacyl-(acyl-carrier-protein) reductase]、半胱氨酸合成酶K/M:半胱氨酸合酶A(Cysteine synthase K/M:Cysteine synthase A)、磷酸激酶(Phosphoglycerate kinase)、金属内肽酶(Predicted metalloendopeptidase)、谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase)、烯醇酶(Enolase)、O-乙酰丝氨酸裂解酶(O-acetylserine lyase)、5' -核苷酸酶(Putative 5'-nucleotidase)等,分析了他们的功能和位置,这些蛋白的功能除了免疫功能外,还包括毒力因子、序列加工、运输活动、碳水化合物代谢、脂肪酸代谢、能量代谢、应激蛋白和细胞骨架等,并对KasⅡ进行了表达。以上研究结果为2型猪链球菌病的诊断抗原和新型疫苗研究以及该菌的免疫机理研究提供了科学依据。(本文来源于《吉林大学》期刊2009-06-01)

刘小康,周慧,黄宁,祝秉东,冯云[6](2007)在《卡介苗胞壁蛋白增强肺抗铜绿假单胞菌感染防御功能的研究》一文中研究指出目的观察卡介苗胞壁蛋白组分能否提高大鼠肺组织对铜绿假单胞菌的清除率。方法密度梯度离心和分子筛方法分离卡介苗胞壁蛋白组分。用Northern杂交和RT-PCR检测卡介苗全菌体及其胞壁蛋白组分对肺上皮SPC-A-1细胞β防御素hBD-1 mRNA表达的刺激作用;腹腔注射卡介苗胞壁蛋白组分48h后,经气管滴入铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌,24h后处死大鼠,取肺组织进行菌落计数。结果卡介苗胞壁蛋白经分子筛层析后主要得到两大组分,Tricine-SDS-PAGE鉴定组分2相对分子质量约为18×103~30×103。Northern杂交显示热灭活卡介苗能提高肺上皮细胞β防御素hBD-1 mRNA表达,RT-PCR显示胞壁蛋白组分2刺激作用明显强于全菌体。经胞壁蛋白组分2治疗的大鼠肺组织铜绿假单胞菌数低于阴性对照组(P<0.01),而对金黄色葡萄球菌感染无明显抵抗作用。结论卡介苗胞壁蛋白组分可提高肺组织对铜绿假单胞菌的清除率,增强肺抗感染防御能力。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2007年03期)

王国兴[7](2005)在《双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素-2基因表达及其信号转导机制》一文中研究指出消化道中定植有大量菌群,消化道上皮细胞与这些菌群直接接触,是肠道粘膜免疫的第一道防线,其分泌的抗菌肽分子在维持肠道微生态平衡、抵抗病原菌感染中占有重要地位。人β-防御素-2(hBD-2)是一重要的抗菌肽分子,广泛表达于皮肤、呼吸道、消化道、泌尿生殖道等粘膜上皮细胞中,具有重要的抗感染功能。hBD-2具有诱导表达的特点,通常情况下肠道上皮细胞不表达hBD-2,但在受到致病因子刺激时,hBD-2的表达量迅速提高,进而发挥粘膜保护功能。 以往的研究显示病原菌如肠炎性沙门氏菌,侵袭性大肠杆菌等能够诱导人肠道上皮细胞hBD-2表达,但是益生菌与抗菌肽之间的关系还没有相关研究,而且hBD-2诱导表达的调控及其信号转导机制十分复杂,目前尚不完全清楚。双歧杆菌作为人体主要益生菌之一,参与了宿主的消化、营养、代谢、吸收、免疫及抗感染过程。因此通过探讨双歧杆菌与hBD-2表达之间的关系,寻找诱导hBD-2基因表达的有效刺激因子,不仅能够通过提高粘膜局部hBD-2浓度而达到杀灭病原菌的目的,而且有助于在分子水平上揭示机体抗感染免疫防御机制。 本项研究目的是检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞hBD-2基因的激活作用并分离其活性组分,进一步探讨其受体及其胞内信号传导通路。 首先,我们研究了双歧杆菌对人肠腺上皮细胞hBD-2基因的激活作用并分离其活性组分。厌氧培养长双歧杆菌,采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取方法获得双歧杆菌胞壁蛋白质成份,分别利用活菌,热灭活全菌,全(本文来源于《四川大学》期刊2005-04-28)

张满效,陈拓,安黎哲,王勋陵[8](2005)在《UV-B和NO对胞壁蛋白的影响》一文中研究指出通过对玉米幼苗叶片细胞壁中蛋白组分、质量分数和过氧化物酶活性的分析检测,证明UV-B光胁迫下,内、外源NO作为UV-B辐射光氧化胁迫的信使负责胁迫信号的转导,激活细胞壁过氧化物酶的活性,致使细胞壁共价键结合蛋白积累,从而钝化许多功能蛋白质的活力.而没有UV-B光胁迫时,适量的内、外源NO是抑制细胞壁过氧化物酶活性的有效抗胁迫分子,保证细胞壁中足量离子结合和游离蛋白质量分数,维持细胞壁中活跃的代谢功能.因此,在细胞壁中,一氧化氮能够介导UV-B辐射对细胞壁中结构和功能蛋白质的影响,为转导增强UV-B光胁迫的信号分子.(本文来源于《兰州大学学报》期刊2005年01期)

王国兴,吴琦,黄宁,王伯瑶[9](2004)在《双岐杆菌胞壁蛋白诱导人肠上皮细胞β-防御素-2基因的表达及NF-κB的活化》一文中研究指出本研究应用超声破碎和离心法分离获得双岐杆菌胞壁 ,2 %SDS提取其胞壁蛋白 ,superdex 2 0 0柱层析获得多个蛋白组分。RT PCR和Northern杂交检测到双岐杆菌全菌、胞壁、胞蛋白均可诱导人肠上皮细胞株HT 2 9andCaco 2细胞(本文来源于《四川生理科学杂志》期刊2004年04期)

孔祥丽,唐琼,冯云,吴琦,王伯瑶[10](2004)在《卡介苗胞壁蛋白诱导人单核吞噬细胞IL-12和iNOS mRNA表达》一文中研究指出目的 研究卡介苗 (BCG)胞壁蛋白的活性组分能否诱导人单核吞噬细胞 IL - 12 P4 0和 i NOS基因表达。方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法检测 THP- 1细胞 IL - 12 P4 0和 i NOS m RNA在 BCG胞壁蛋白组分刺激下的表达变化。结果 卡介苗胞壁蛋白 Sephadex G- 15 0层析分子量约 2 1~ 2 9k D的组份可诱导 THP- 1细胞 IL -12 P4 0和 i NOSm RNA的表达增强。结论  BCG胞壁蛋白可刺激人单核吞噬细胞 IL - 12 P4 0和 i NOS基因的增强表达。(本文来源于《西部医学》期刊2004年01期)

胞壁蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)是一种重要的人兽共患病病原菌,可致人和猪败血症、脑膜炎、多器官衰竭综合征和突发性死亡等[1],不仅对养猪业造成严重经济损失,也给公共卫生、食品安全和人类的生命安全构成了威胁,引起世界范围内高度重视[2]。39kD胞壁蛋白是SS2的重要毒力因子之一,为探明39kD胞壁蛋白的致病机理,本实验进行了如下研究。第一,猪链球菌2型BALB/c小鼠动物感染模型的建立。选用SPF级BALB/c小鼠(20~25g),用猪链球菌2型HA9801菌株感染小鼠建立动物模型,(1)通过不同途径感染小鼠;(2)以不同菌量腹腔感染小鼠。结果表明,(1)腹腔接种最易感,其次是皮下接种,鼻腔接种最不易感;(2)感染的小鼠表现出SS2感染的典型症状和病理变化,如脑膜炎、关节炎等症状,剖检后从组织中分离出了SS2,模型重复性好。重复试验按Reed-Munch法计算此菌株对BALB/c小鼠的半数致死量为7.2×106CFU。第二,猪链球菌2型诱导巨噬细胞凋亡,(1)纯化39kD胞壁蛋白,SDS-PAGE鉴定至电泳纯。(2)以SPF级BALB/c小鼠(20~25g)为试验动物,取腹腔巨噬细胞(Murine peritoneal macrophage,MPM)和39kD胞壁蛋白(4μg/mL和40μg/mL)共孵育,吖啶橙染色,镜检,结果发现低浓度(4μg/mL)诱导后MPM边界清晰完整,未见异常形态改变;而高浓度(40μg/mL)诱导后,MPM呈现胞膜吐泡、核碎裂和凋亡小体等典型的细胞凋亡特征。(3)分别以不同浓度(4~50μg/mL)腹腔注射,作用6h,提取MPM的DNA进行琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示,低浓度(4μg/mL)诱导后,DNA图谱与阴性对照相同,仅一条高分子条带;而高浓度(20~50μg/mL)诱导后均出现典型的凋亡细胞特征性梯状条带,且随39kD胞壁蛋白浓度增加,梯状条带越清晰。(4)以40μg/mL腹腔注射,分别作用2、4、6、8h,收集MPM,流式细胞分析表明,2h即出现8.7%的凋亡峰,凋亡率随39kD胞壁蛋白作用时间延长而增加,8h达27.1%,和对照组(0.4%)之间均差异极显着(P<0.01);同时检测caspase-3的表达动态,结果显示,其表达量在2h就显着高于对照组(P<0.05),随39kD胞壁蛋白作用时间的延长而上升,各时间点之间均差异显着(P<0.05)。试验结果表明,39kD胞壁蛋白可诱导MPM高水平凋亡,凋亡率与39KD胞壁蛋白的作用浓度和时间之间正相关。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

胞壁蛋白论文参考文献

[1].丁玲强,史玉芳,潘阳阳,田莉莉,曾巧英.猪链球菌2型39ku胞壁蛋白诱导巨噬细胞凋亡的研究[J].中国兽医科学.2012

[2].丁玲强.猪链球菌2型39kD胞壁蛋白诱导巨噬细胞凋亡[D].甘肃农业大学.2012

[3].陈哲,郑玉玲,郝淮杰,律清宇,姜永强.猪链球菌胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控[J].细胞与分子免疫学杂志.2012

[4].王萍萍,骈亚亚,袁媛,郑玉玲,姜永强.2型猪链球菌胞壁蛋白MRP的截短表达、纯化及抗原保护性评价[J].细胞与分子免疫学杂志.2012

[5].党源.2型猪链球菌胞壁蛋白免疫蛋白组学研究[D].吉林大学.2009

[6].刘小康,周慧,黄宁,祝秉东,冯云.卡介苗胞壁蛋白增强肺抗铜绿假单胞菌感染防御功能的研究[J].四川大学学报(医学版).2007

[7].王国兴.双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素-2基因表达及其信号转导机制[D].四川大学.2005

[8].张满效,陈拓,安黎哲,王勋陵.UV-B和NO对胞壁蛋白的影响[J].兰州大学学报.2005

[9].王国兴,吴琦,黄宁,王伯瑶.双岐杆菌胞壁蛋白诱导人肠上皮细胞β-防御素-2基因的表达及NF-κB的活化[J].四川生理科学杂志.2004

[10].孔祥丽,唐琼,冯云,吴琦,王伯瑶.卡介苗胞壁蛋白诱导人单核吞噬细胞IL-12和iNOSmRNA表达[J].西部医学.2004

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