导读:本文包含了变异细胞系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:强直性脊柱炎,内质网内氨基肽酶,B淋巴母细胞,单核苷酸多态性
变异细胞系论文文献综述
林丽[1]（2016）在《建立强直性脊柱炎患者ERAP变异基因功能体外研究细胞系》一文中研究指出强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的系统性自身免疫性关节炎,与银屑病关节炎、炎性肠病性关节炎、反应性关节炎等同属于血清阴性脊柱关节病(seronegative spondyloarthritis,SpA),有共同的疾病特点。AS好发于青壮年男性,起病隐匿,虽然诊断方法和手段的改进提高了早期诊断率,但还是有很多患者由于延误诊断和治疗而导致关节功能丧失、残疾,严重影响患者的生活质量,造成其家庭和社会的沉重的经济负担。AS是一种慢性炎症性关节炎,以脊柱和骶髂关节为着,表现为关节疼痛、晨僵,并导致关节融合和脊柱强直。因此,炎症是疾病发病机制中的重要因素,但对其发生的原因和过程的认知有限。目前尚无方法治愈AS,现有的治疗措施只能缓解疼痛、抑制炎症发展的进程,且只对部分病人有效。目的:强直性脊柱炎发病机制不明。40余年前发现其与HLA-B27强相关,但其在AS发病机制中的作用尚不清楚。全基因组关联研究(genome-wide association studies,GWAS)的发展发掘出越来越多与AS相关的基因位点。研究发现内质网内氨基肽酶(endoplasmic reticulum resident aminopeptidases,ERAP)也与疾病显着相关,且与HLA-B27存在基因间的相互作用。两者均位于内源性抗原递呈途径中,功能上也存在交互作用。本研究拟建立该交互作用的体外研究体系。方法:HLA-B27中与AS相关且常见的亚型为HLA-B27:04(汉族人群)和B27:05(高加索人种)。选择HLA-B27:04/B27:05+的AS患者和健康对照,用EBV将其B细胞转化为B淋巴母细胞(B lymphoblastoid cell line,B-LCL)。为将自然存在的ERAP基因变异与其抗原肽段的剪切功能相联系,将mRNA逆转录成cDNA后进行Sanger测序。通过CRISPR/Cas9技术分别或同时敲除这ERAP1和ERAP2基因,以下一步将野生型和测序获得的变异基因序列转染至上述细胞,比较其对HLA-B27限制性的自然抗原肽剪切功能的不同。为尽量体现其剪切功能的差异,需建立多种不同特异性的T细胞,其中包括HLA-B27:04/B27:05限制性异体特异性T细胞,故克隆HLA-B27:04/B27:05分子,建立C1R-B27:04/B27:05细胞系,予以刺激上述T细胞。结果:我们成功地将健康对照和AS患者来源的B细胞转化为B-LCL,用CRISPR/Cas9技术敲除了B-LCL的ERAP2基因。测序患者和对照外周血样本mRNA获得自然存在的ERAP1和ERAP2基因序列,ERAP1的5个AS相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的组成在患者和对照样本中未见明显差异,但ERAP2在AS患者中的变异较明显,且可能存在新的可变剪切。我们从患者B-LCL中克隆了HLA-B27:04基因,以建立C1R-B27:04细胞系,用于刺激HLA-B27:04限制性异体抗原特异性的T细胞。结论:本研究建立ERAP变异基因功能的体外研究体系的方法可行,待下一步建立HLA-B27:04/B27:05限制性的肽段特异性的T细胞,即可比较ERAP1基因变异所导致的肽段剪切功能变化,并可进一步按原计划敲除ERAP1基因。(本文来源于《第二军医大学》期刊2016-05-01）
雷喜梅,陈静,杨盼盼,赵永祥,王晓梦[2]（2016）在《分泌抗猪流行性腹泻病毒中国变异株S蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立》一文中研究指出以纯化的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)中国变异株(CH/ZMDZY/11)S蛋白N端高变区(22-380aa)重组蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,以纯化CH/ZMDZY/11全病毒及带His标签的重组蛋白分别为筛选抗原,利用淋巴瘤杂交技术获得了一株稳定分泌抗S蛋白特异性单克隆抗体细胞株,命名为2D1。该株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价为1∶3 200,免疫球蛋白类型为IgM。ELISA检测该单抗与PEDV流行株及PEDV CV777疫苗株全病毒的反应显着差异,可区分流行毒株和疫苗毒株;但该单抗用于Western blot不能区分PEDV流行株和疫苗株。ELISA及Western blot试验结果显示,该单抗有较好的PEDV特异性,可用于检测PEDV。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年02期）
张轶俊,张继明[3]（2013）在《稳定高表达耐核苷酸类似物HBV变异株肝癌细胞系的建立》一文中研究指出核苷类似物耐药是慢性乙型肝炎抗病毒治疗中的主要问题,除了病毒反弹导致临床肝病进展,发生耐药变异的HBV毒株表现出对其他核苷类药物的交叉耐药性以及挽救治疗中继发多重耐药的可能性增高。为建立适合HBV耐药以及筛选针对耐药HBV毒株抗病毒药物的体外细胞模型,我们构建了可用于转染的多种耐药基因型HBV表达载体。该表达载体包含1.2倍HBV复制体以及可促进目的基因表达的(本文来源于《中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编》期刊2013-06-20）
王俊峰,郎耀国,杨英男,徐世东[4]（2013）在《微阵列技术对两种人类肺腺癌细胞系基因组变异的实验研究》一文中研究指出目的对Anip973和AGZY83-a两个细胞系的基因组加以分析,以明确它们中导致肿瘤形成、演进及转移的基因。方法通过全基因高分辨率微阵列对照基因组杂交(aCGH)技术对这两种细胞系进行评估绘制完整的CNV图谱。结果对从这两个细胞系获得的基因组DNA进行染料交叉杂交,并未得到可测得的任何遗传物质的获得或缺失;但当细胞系的DNA与正常对照DNA分别进行联合杂交,发现他们具有相同的拷贝变异数的基因图谱,包括39个获得的和60个缺失。共获取9个纯合子缺失片段,其中5个含有重要的肿瘤相关基因。结论细胞系中的这些纯合子缺失基因可能与肿瘤形成机制相关。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2013年01期）
路丹,曹邦荣,冯林,郭素平,程书钧[5]（2012）在《永生化上皮细胞系及肺鳞癌细胞系基因组DNA拷贝数变异的比较研究》一文中研究指出目的:通过分析比较支气管上皮永生化细胞系与肺鳞癌细胞系的拷贝数变异探讨肿瘤早期发展的分子机制。方法:用人类比较基因组杂交芯片(aCGH)分别测定支气管上皮细胞系Y-BE和肺鳞癌细胞系NCI-H2170的拷贝数,经数据校正,对拷贝数变异基因进行GO(Gene Ontology)富集分析。结果:永生化上皮细胞系早代Yp21仅出现了少量的DNA拷贝数变异,而在染色体20 q11～12区段Yp21细胞与HCI-H2170细胞出现了相似的拷贝数变异结果;永生化上皮细胞系晚代Yp113具有类神经细胞黏附基因的拷贝数增加现象;整体来看,从永生化上皮细胞早代到晚代,再与肿瘤细胞比较,DNA拷贝数变异频率不断升高,基因组稳定性逐渐下降结论:通过对永生化上皮细胞拷贝数变异的研究,成功建立了肺癌癌前模型的拷贝数变异谱,部分拷贝数变异可能代表了肿瘤发生发展早期的分子事件,预示了细胞的潜在恶性,这些发现可能为阐明肿瘤发生发展的分子机制提供了条件。(本文来源于《中国肿瘤临床》期刊2012年20期）
杨凌,张弛,田延鑫,孔北华,黄淑红[6]（2011）在《人类肿瘤组织及肿瘤细胞系中Smoothened第十外显子基因序列变异的检测》一文中研究指出目的研究Hedgehog(Hh)信号通路中的重要作用分子Smoothened(SMO)第10外显子基因序列变异在人类肝、肺、胃、卵巢肿瘤及5种肿瘤细胞系中存在的状况。方法提取人类肝、肺、胃、卵巢肿瘤组织及5种肿瘤细胞系的基因组DNA,对基因组DNA中SMO第10外显子进行PCR体外扩增,然后进行DNA测序,对测序结果进行序列比对分析。结果测序结果显示,在2例胃肿瘤组织中存在SMO第10外显子序列的变异,分别为1958C→T,1971A→G,胃肿瘤细胞系AGS中也存在SMO第10外显子序列的变异2002T→C(rs2016607)。结论在胃肿瘤中存在SMO基因序列的变异,而其基因的改变与SMO构象和活性存在一定关系,从而为进一步研究人类胃肿瘤的发生与SMO基因序列变化之间的相关性提供依据。(本文来源于《山东大学学报(医学版)》期刊2011年10期）
张清国,梁国鲁,韩素英,胡钠梅,齐力旺[7]（2010）在《落叶松胚性细胞系分化能力及染色体变异的研究》一文中研究指出以落叶松未成熟合子胚诱导的16个胚性细胞系为材料,对继代培养的细胞系间及不同世代间染色体数目和体细胞胚胎发生率进行对比研究,结果表明:落叶松胚性细胞系随继代培养时间的增加,总体体细胞胚分化能力逐渐下降,平均体细胞胚分化率从继代培养第7次后的335.6个.g-1降低到第22次后的268.2个.g-1,细胞染色体数目变异率逐步增加,从5.4%上升到40.0%;不同细胞系间体细胞胚分化能力及稳定性差异明显,分化能力较高的细胞系染色体数目变异几率相应较小,在继代培养第25次后,细胞系a214染色体数目变异率为0%,体细胞胚分化率为416.1个.g-1。(本文来源于《林业科学研究》期刊2010年06期）
丁晓麟,温海,秦海斌,陈杨,张汇东[8]（2010）在《猫肾细胞系F81传代细胞染色体遗传变异率分析》一文中研究指出运用空气干燥法制备猫肾细胞系F81传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,计数F81细胞基础细胞库细胞(10代)、工作细胞库细胞(20代)、最高限制代次细胞(40代)及高于最高代次10代细胞(50代)中期分裂相染色体数目,计算染色体数目变异率,并进行核型分析。结果表明,F81为亚二倍体细胞系,染色体众数为30,染色体各代次结构畸变率为0。F81细胞系遗传学特性相对稳定,在基础细胞库中存在的染色体标志,在最高代次细胞中也存在,并且核型相同,可候选为制苗用细胞。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2010年06期）
吴文娟[9]（2009）在《红豆杉细胞系种质保存及遗传变异研究》一文中研究指出红豆杉细胞系在继代培养过程存在不稳定现象,表现在随着继代次数的增加,细胞合成紫杉醇的能力逐渐下降,这严重制约着红豆杉细胞进行大规模培养生产紫醇的的工业化进程,对于其不稳定性机理已经有了一些研究,但尚不明确。因而建立一种稳定保存红豆杉种质的方法,可缓解红豆杉细胞常温继代过程中的变异。本研究对红豆杉细胞低温缓慢生长保存及其遗传变异,以及超低温保存进行了研究,获得如下结果：1)首先建立了系列抗前体筛选红豆杉细胞系。通过在培养基中添加苯丙氨酸,苯甲酸钠和乙酸钠,经半年时间筛选获得了产量提高了1.35倍的细胞系。2)对低温缓慢生长法保存红豆杉细胞进行了较为系统的研究,发现：(1)低温缓慢生长法保存前后,红豆杉细胞细胞表观形态和紫杉醇产量与对照相比没有显着差异,但在恢复培养2个周期后,细胞系发生了变异,表现在紫杉醇含量下降,且保存时间越长,含量下降越快。(2)利用反相高效液相检测技术(HPLC)对低温保存后恢复培养过程中红豆杉细胞基因组甲基化水平分析,发现低温保存后恢复培养的细胞系的DNA甲基化水平升高,表明细胞培养过程中紫杉醇含量的下降可能与某些基因的甲基化有关。3)研究了玻璃化法、预培养干燥法、干燥／玻璃化法叁种方法对红豆杉细胞系进行超低温保存的可行性,初步建立了红豆杉细胞超低温保存体系。(1)对影响玻璃化超低温保存的因素进行了系统研究,发现预培养方式,冰冻保护剂种类,脱水时间对红豆杉细胞超低温保存的存活率有比较大的影响,但在最优条件下,保存后细胞恢复生长需45 d；(2)预培养干燥法成功用于中国红豆杉细胞的保存,干燥／玻璃化法成功实现了中国红豆杉和曼地亚红豆杉的保存,进一步研究发现其原因可能是曼地亚红豆杉比中国红豆杉临界含水量高,需要冰冻保护剂的保护才能在进入液氮时顺利越过冰点。(本文来源于《华中科技大学》期刊2009-05-01）
王旭波,张全启,齐洁,王志刚,王兴莲[10]（2008）在《牙鲆鳃细胞系染色体组型的变异分析》一文中研究指出对传代296次的牙鲆(Paralichthys olivaceus)鳃细胞系(FG)进行染色体制备和组型分析,并与牙鲆活体鳃细胞组型进行比较。牙鲆活体鳃细胞染色体数目为48,且均为端部着丝粒染色体,染色体组型公式为2n=48,48t,NF=48。而鳃细胞系的染色体数目出现较大变化,有两个分布区间,一个区间是53~79;另一个是119~139。其模式染色体数为68,在模式细胞分裂相中,有30对端部着丝粒染色体和4对中部着丝粒染色体;染色体条数在119以上的分裂相中,除了有很多中部着丝粒染色体以外,小染色体也以很高的频率出现。通过上述研究分析表明,牙鲆鳃细胞系经多次传代后,其染色体与活体鳃细胞染色体相比存在着明显的差别,已经发生了变异,不适合用于牙鲆染色体核型、组型等方面的研究。(本文来源于《中国水产科学》期刊2008年03期）
变异细胞系论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以纯化的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)中国变异株(CH/ZMDZY/11)S蛋白N端高变区(22-380aa)重组蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,以纯化CH/ZMDZY/11全病毒及带His标签的重组蛋白分别为筛选抗原,利用淋巴瘤杂交技术获得了一株稳定分泌抗S蛋白特异性单克隆抗体细胞株,命名为2D1。该株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价为1∶3 200,免疫球蛋白类型为IgM。ELISA检测该单抗与PEDV流行株及PEDV CV777疫苗株全病毒的反应显着差异,可区分流行毒株和疫苗毒株;但该单抗用于Western blot不能区分PEDV流行株和疫苗株。ELISA及Western blot试验结果显示,该单抗有较好的PEDV特异性,可用于检测PEDV。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
变异细胞系论文参考文献
[1].林丽.建立强直性脊柱炎患者ERAP变异基因功能体外研究细胞系[D].第二军医大学.2016
[2].雷喜梅,陈静,杨盼盼,赵永祥,王晓梦.分泌抗猪流行性腹泻病毒中国变异株S蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立[J].中国兽医学报.2016
[3].张轶俊,张继明.稳定高表达耐核苷酸类似物HBV变异株肝癌细胞系的建立[C].中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编.2013
[4].王俊峰,郎耀国,杨英男,徐世东.微阵列技术对两种人类肺腺癌细胞系基因组变异的实验研究[J].哈尔滨医科大学学报.2013
[5].路丹,曹邦荣,冯林,郭素平,程书钧.永生化上皮细胞系及肺鳞癌细胞系基因组DNA拷贝数变异的比较研究[J].中国肿瘤临床.2012
[6].杨凌,张弛,田延鑫,孔北华,黄淑红.人类肿瘤组织及肿瘤细胞系中Smoothened第十外显子基因序列变异的检测[J].山东大学学报(医学版).2011
[7].张清国,梁国鲁,韩素英,胡钠梅,齐力旺.落叶松胚性细胞系分化能力及染色体变异的研究[J].林业科学研究.2010
[8].丁晓麟,温海,秦海斌,陈杨,张汇东.猫肾细胞系F81传代细胞染色体遗传变异率分析[J].江苏农业科学.2010
[9].吴文娟.红豆杉细胞系种质保存及遗传变异研究[D].华中科技大学.2009
[10].王旭波,张全启,齐洁,王志刚,王兴莲.牙鲆鳃细胞系染色体组型的变异分析[J].中国水产科学.2008