导读:本文包含了肌肉特异表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:体细胞核移植,卵泡抑制素,骨骼肌特异表达载体,肌肉
肌肉特异表达论文文献综述
张驹,王玮,王珂,杨楠,马建飞[1]（2019）在《组织特异过表达FST基因促进阿尔巴斯绒山羊肌肉生长》一文中研究指出高产优质肉用家畜新品种的培育是家畜育种的工作目标之一,体细胞核移植技术和基因编辑技术的发展为新品种家畜的培育提供了快速便捷的新方式.本研究将骨骼肌特异表达卵泡抑制素(Follistatin,FST)的pCDsRed2-SP-FST重组质粒转染山羊胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的阳性供体细胞系,将供体细胞注入去核成熟卵母细胞获得FST基因编辑重构胚胎425个,胚胎移植到59个受体母羊,出生羔羊4只,其中1只羔羊存活至今.利用PCR、Southern Blot、Western Blot和qPCR等技术在分子生物学水平鉴定该羊羔,发现FST基因被成功插入到山羊基因组中并可在肌肉组织中过表达,而且FST基因的过表达可使肌肉标志基因MSTN和BMP4的表达增强.羔羊健康分析表明转FST基因绒山羊各项生理指标与野生型相比并无明显差异,但FST基因的过表达增加了肌纤维的直径和密度.该FST基因过表达绒山羊的成功获得为高产优质肉用家畜新品种的培育奠定了研究基础.(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
李昊,陈胜男,李松美,朴善花,安铁洙[2]（2019）在《利用CRISPR/Cas9技术产生肌肉特异表达Cas9的小鼠胚胎》一文中研究指出目的通过CRISPR/Cas9技术获得肌肉特异性表达Cas9蛋白小鼠胚胎,为建立肌肉特异表达Cas9小鼠动物模型奠定基础。方法设计小鼠Rosa26位点sgRNA并通过体外酶切验证活性,同时使用同源重组构建肌肉特异性同源打靶载体;通过显微注射将Rosa26 sgRNA与Cas9蛋白注射到小鼠胚胎,通过PCR及测序检测胚胎的编辑情况,同时移植到假孕母鼠体内,待其生产;将同源打靶载体与Rosa26 sgRNA和Cas9一起注射到小鼠胚胎,通过PCR检测整合情况。结果体外酶切实验表明,体外转录的sgRNA与Cas9蛋白联合可对靶位点产生编辑作用;成功构建了肌肉特异性同源打靶载体Donor-SP-px459;通过原核注射获得Rosa26基因编辑胚胎,经移植获得Rosa26基因编辑小鼠;注射同源打靶载体后,成功获得肌肉特异表达Cas9蛋白的基因打靶小鼠胚胎。结论利用CRISPR/Cas9技术,成功获得Rosa26基因编辑胚胎和小鼠,并获得了肌肉特异性表达Cas9蛋白小鼠胚胎,为利用基因打靶构建肌肉特异表达Cas9的小鼠动物模型奠定基础。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2019年03期）
石军,褚武英,张建社[3]（2015）在《肌肉特异表达microRNA的功能研究》一文中研究指出Micro RNA作为非编码小RNA分子在转录和后转录水平调控基因表达过程中扮演重要角色,已成为当前分子生物学的研究热点之一。近期已有研究证实,一些在肌肉细胞中特异表达micro RNA包括mi R-1、mi R-206和mi R-133可能对肌肉生长和发育很关键。众所周知,肌肉不仅是机体重要结构组织和运动器官,而且还是水产畜牧产品的重要蛋白源。聚焦这些肌肉特异myomi Rs在肌肉生长和发育中的功能机理研究,不仅有助于揭示某些疾病的分子机制和解决医学上基因治疗难题;同时也为畜牧水产养殖提供科学应用理论依据。综述我们概括了mi R-1,mi R-206和mi R-133最新研究进展,这将有助于深入了解其作用于肌肉生长和发育的功能和分子机制。(本文来源于《水生生物学报》期刊2015年06期）
罗娜,王琨,吴坚,李发祥,黄婷[4]（2011）在《心脏和肌肉组织特异表达基因HDGC通过HDGC-TP2-GATA4信号途径调控心脏的发育》一文中研究指出我们利用斑马鱼模型深入研究了心脏发育候选基因HDGC的功能。自制了人和斑马鱼HDGC抗体,通过Western blotting、免疫组化及整胚原位杂交结果表明,HDGC在斑马鱼胚胎发育的各时期均有表达,其中在心脏的心室和心房有强烈表达,在小鼠和斑马鱼的成体心脏和肌肉组织中特异性高表达。HDGC基因在大鼠原代心肌细胞、H9C2和C2C12细胞系中大量表达于细胞质中,部分表达于细胞核内,在细胞膜上也有表达。敲低斑马鱼HDGC导致78%的胚胎畸形率,其心脏不能环化。进一步分析表明,环化异常是由于心房和心室细胞数目减少导致心室和心房变小导致的。基因过表达时其腔室增大,并且其敲低表型能被拯救。当用人HDGC抗体免疫沉淀和质谱分析从人胚胎心脏组织全蛋白得到与HDGC的相互作用蛋白TP2。免疫共沉淀和pull-down证明HDGC与TP2相互作用,相互作用区域位于HDGC的193-240AA和TP2的96-351AA。哺乳动物细胞双杂交表明HDGC与TP2及其互作区域在细胞内相互作用。敲低TP2具有与HDGC相类似的畸形率,其表型与HDGC的相同。敲低、过表达和拯救的免疫印记实验表明HDGC或TP2都能得到相同的差异变化,敲低HDGC和TP2的表达都能导致Nkx2.5、Gata4和ANF等的表达明显下调。在稳定细胞系中进行siRNA干扰能敲减HDGC和TP2的表达,过表达增加HDGC和TP2的表达。敲低HDGC的表达能导致TP2表达的降低,反之亦然,说明两者相互维持对方表达蛋白的稳定性。敲低或增加HDGC或TP2都能使GATA4、ANF和α-Cardiac actin表达下调或增多,说明GATA4、ANF和α-Cardiacactin是由HDGC和TP2表达调控的下游蛋白。干扰HDGC和TP2后P53的表达下调,过表达HDGC和TP2后P53的表达量增高。凝胶阻滞EMSA实验表明HDGC结合到CRE位点。CRE-luc荧光报告检测表明HDGC和TP2共同对CRE位点起明显的激活作用。GATA4启动子转录起始位点-2000bp左右有保守的CRE位点。HDGC和TP2相互作用激活GATA4启动子上保守的CRE位点,而不能激活其它的AP-1或NF-kB位点。由上述的实验结果表明,HDGC是一个在心脏和肌肉组织特异表达的心脏发育基因,通过HDGC-TP2-GATA4信号途径调控心脏的发育。(本文来源于《中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编》期刊2011-08-09）
谢岁岁,王跃群,万永奇,邓云,莫小阳[5]（2009）在《人类心脏和肌肉组织特异表达基因Smyd1的表达与抗体制备》一文中研究指出Smyd1基因是人类心脏和肌肉特异表达基因,制备该基因的多克隆抗体可以为进一步深入研究Smyd1在心脏发育过程中与其他因子相互作用提供检测工具.通过PCR方法扩增smyd1基因的编码区片段,并将其克隆至PGEX-4T-1上,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,再通过5052法和IPTG法分别诱导表达GST-Smyd1融合蛋白.经比较,5052法诱导的蛋白表达量明显高于IPTG法.采用5052法大量诱导表达,通过割胶回收纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western blot检测抗体活性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.(本文来源于《生命科学研究》期刊2009年05期）
戴建威,章倩倩,刘松财,丁景华,张永亮[6]（2008）在《CMV、SP双启动子肌肉组织特异表达系统的建立》一文中研究指出提高目的基因在真核细胞中的表达效率是目前国内外基因工程研究的热点和难点。随着人们对体内基因转移安全性的日益重视,除了提高基因工程载体的表达效率,提高载体的靶向性也成为近年来研究的重点。据报道,增加启动子数目能提高外源基因的表达效率。(本文来源于《全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编》期刊2008-07-01）
李大力[7]（2007）在《心脏与肌肉组织特异表达基因Smyd1及其它发育相关基因的转录调控研究》一文中研究指出转录因子识别结合目的基因的调控序列是转录过程的第一步，也是基因表达调控的关键环节，受到顺式、反式作用元件严谨而有序的调节与控制。虽然基因转录产物都是由RNA聚合酶复合体直接合成的，但是每个基因的表达时间和空间模式都不尽相同。这种表达的特异性就是由于众多转录因子协调控制的结果。因此对于基因转录调控的研究一直是分子生物学的一个热点，同时也是研究的难点之一。本人在读博期间，研究了心脏肌肉发育相关基因Smyd1和性成熟相关基因KiSS1的转录调控机制，从分子水平揭示了它们的表达是如何被上游基因或细胞外信号所控制的，为体内研究提供了直接的分子证据；同时研究了与细胞周期蛋白结合的螺旋—环—螺旋转录因子GCIP在肌肉细胞分化中的功能，并参与了其它课题的研究工作，具体体现在以下几个方面：1．Smyd1基因促进肌肉发育并受SRF和Myogenin的直接调控Smyd1是一个包含有SET和MYND结构域并在心脏和肌肉特异性表达的基因，同时它作为一个修饰H3-K4残基甲基化的甲基转移酶激括下游基因转录。人类Smyd1基因在成体的心脏和骨骼肌表达。在C2C12细胞中过表达Smyd1基因促进肌肉分化和肌管形成，这是由于肌肉特异性转录因子的上调所致。在肌母细胞中过表达血清应答因子(SRF)和肌细胞生成素(Myogenin)会促使Smyd1的表达量升高。我们克隆了Smyd1基因的启动子并分析了在肌生成中可能控制Smyd1表达的DNA调控元件。Smyd1基因近端的启动子包含有一些参与肌母细胞分化的转录因子结合位点，这些因子包括Myogenin、SRF和myocyte enhancer factor 2(MEF2)等。EMSA和ChIP分析表明SRF和Myogenin分别结合Smyd1启动子区域的CArG和E-box元件，共转染实验表明SRF和Myogenin的结合位点对于激活启动子是必须的。综合以上研究表明Smyd1基因被肌肉分化的核心调节因子直接调控，并且具有促进肌肉分化的功能。2．GCIP／CCNDBP1与E47和MyoD形成功能性复合物调节肌肉分化骨骼肌的分化是一个高度有序的多步骤的过程，也被称为肌肉发生。这一过程包括肌肉特异性基因的表达、肌细胞脱离分裂周期进入分化程序以及最后融合形成多核的肌管直至形成成熟的肌纤维。肌肉发生由一类肌肉特异性的碱性螺旋—环—螺旋转录因子家族基因(如MyoD)以及广泛表达的E—box基因共同协同调控。我们的研究表明，最近发现的螺旋—环—螺旋亮氨酸富急蛋白GCIP／CCNDBP1调节肌肉特异性基因表达以及E47／MyoD异源二聚物的形成。在C2C12成肌肉细胞分化过程中，GCIP的mRNA和蛋白表达水平都有所提高。在C2C12中过表达GCIP能促进E47／MyoD蛋白复合物的形成，激活肌肉特异性下游基因表达并能促进肌管形成，而过表达GCIP的突变体则减弱E47／MyoD复合物形成。这些结果表明GCIP蛋白能够通过与E47／MyoD形成异源多聚物而促进肌肉分化。3．雌激素同受体α和Sp蛋白复合物调节KiSS1基因表达Kisspeptins是KiSS1基因编码的分泌型神经肽，后来被证明是G蛋白偶联受体-54(GPR54)的天然配体。刺激KiSS1／GPR54信号途径会激活下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴并启动青春期发育。最近的证据表明在雌鼠中，雌激素(E_2)在前腹室旁核(AVPV)(一个重要的生殖内分泌下丘脑核区)激活KiSS1的表达，但是在弓状核(Arc)的作用却相反。虽然目前对KiSS1基因有了一些初步研究，但是对于E_2调控KiSS1表达的分子机制还知之甚少。我们证明在雌激素受体(ERα)阳性下丘脑GT1-7细胞中，加雌激素处理，KiSS1基因的表达水平增强。将KiSS1基因启动子偶联荧光素酶瞬时转染，在ERα存在时E_2增强启动子的活性。KiSS1启动子的缺失分析证明E_2调节启动子活性的作用依赖于启动子近端的Sp1位点。我们用凝胶阻滞(EMSA)实验证明Sp1和Sp3蛋白与启动子中多个保守的Sp1识别位点结合。有趣的是，Sp1转录激活KiSS1启动子活性，而Sp3则起转录抑制作用。Sp蛋白和ERα形成一个复合物，而E_2诱导的对KiSS1启动子的激活作用并不依赖于ERα的DNA结合结构域。染色质免疫沉淀(ChIP)分析证明Sp1和Sp3两者都结合KiSS1启动子上的GC富集序列，而ERα与KiSS1启动子的结合是依赖于E_2的激活，并随时间推移而结合增强。总之，这些结果证明了E_2通过ERα激活KiSS1基因的表达，而ERα则通过结合Sp1／Sp3蛋白并利用Sp1／Sp3识别结合KiSS1基因启动子上的GC富集区来刺激KiSS1基因转录。这有助于我们在分子水平理解类固醇激素对KiSS1的反馈调节作用。4．其它基因的研究证明在高转移性黑色素瘤细胞中，转移抑制基因KiSS1的表达受Sp1／DRIP130蛋白复合物的调控；证明GCIP基因在结肠癌中具有抑癌基因的特性，抑制结肠癌细胞系的生长；参与人类ZNF394、ZNF480、ZNF411、WDR26以及SNX-L等基因的克隆、表达和功能研究，这些基因多数在心脏中表达，将是心脏发育相关候选基因；通过对基因剔除小鼠的研究，证明GPR48／LGR4对小鼠骨骼以及眼睛发育有非常关键的作用。该基因的缺失将导致胚胎软骨终末发育迟缓、成骨细胞分化和矿化下降，成体骨密度，骨体积，骨形成率和类骨质都下降；导致眼前段发育不全，包括小眼、虹膜发育不全、角膜发育异常和白内障，在老年小鼠中还能检测到神经节细胞丧失、内核层变薄和早发型青光眼。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2007-06-01）
王秀利,吴克亮,李宁,李长绿,仇雪梅[8]（2006）在《中国地方品种香猪的肌肉特异组织表达序列标签(ESTs)的分析(英文)》一文中研究指出通过构建香猪肌肉组织cDNA文库,并在文库中随机挑选克隆进行测序的方法,获得了131个香猪肌肉EST序列。在这131个EST序列所代表的109个单一克隆中,有99个为人类及其他物种的同源序列,3个为已知的猪的ESTs,7个为未知ESTs。对这10个已知、未知ESTs进行开放阅读框预测并进行BlastX分析,没有找到高度同源的氨基酸序列。对上述EST所对应的基因功能分析结果表明,除去27.27%的EST未能分类外,克隆到的EST大多来自与基因/蛋白的表达调控相关的基因(占45.46%)。来自具有其他功能的基因的EST依次是细胞代谢占10.10%、细胞结构/迁移占10.10%、细胞/机体防御占5.05%和细胞信号/传导占2.02%。没有发现和细胞分裂相关的已知功能基因。本研究结果为中国地方品种香猪提供了第一个骨骼肌的基因表达谱,为今后寻找猪肌肉生长和肉用品质的候选基因奠定了基础。(本文来源于《遗传学报》期刊2006年11期）
肌肉特异表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的通过CRISPR/Cas9技术获得肌肉特异性表达Cas9蛋白小鼠胚胎,为建立肌肉特异表达Cas9小鼠动物模型奠定基础。方法设计小鼠Rosa26位点sgRNA并通过体外酶切验证活性,同时使用同源重组构建肌肉特异性同源打靶载体;通过显微注射将Rosa26 sgRNA与Cas9蛋白注射到小鼠胚胎,通过PCR及测序检测胚胎的编辑情况,同时移植到假孕母鼠体内,待其生产;将同源打靶载体与Rosa26 sgRNA和Cas9一起注射到小鼠胚胎,通过PCR检测整合情况。结果体外酶切实验表明,体外转录的sgRNA与Cas9蛋白联合可对靶位点产生编辑作用;成功构建了肌肉特异性同源打靶载体Donor-SP-px459;通过原核注射获得Rosa26基因编辑胚胎,经移植获得Rosa26基因编辑小鼠;注射同源打靶载体后,成功获得肌肉特异表达Cas9蛋白的基因打靶小鼠胚胎。结论利用CRISPR/Cas9技术,成功获得Rosa26基因编辑胚胎和小鼠,并获得了肌肉特异性表达Cas9蛋白小鼠胚胎,为利用基因打靶构建肌肉特异表达Cas9的小鼠动物模型奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肌肉特异表达论文参考文献
[1].张驹,王玮,王珂,杨楠,马建飞.组织特异过表达FST基因促进阿尔巴斯绒山羊肌肉生长[J].内蒙古大学学报(自然科学版).2019
[2].李昊,陈胜男,李松美,朴善花,安铁洙.利用CRISPR/Cas9技术产生肌肉特异表达Cas9的小鼠胚胎[J].中国实验动物学报.2019
[3].石军,褚武英,张建社.肌肉特异表达microRNA的功能研究[J].水生生物学报.2015
[4].罗娜,王琨,吴坚,李发祥,黄婷.心脏和肌肉组织特异表达基因HDGC通过HDGC-TP2-GATA4信号途径调控心脏的发育[C].中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编.2011
[5].谢岁岁,王跃群,万永奇,邓云,莫小阳.人类心脏和肌肉组织特异表达基因Smyd1的表达与抗体制备[J].生命科学研究.2009
[6].戴建威,章倩倩,刘松财,丁景华,张永亮.CMV、SP双启动子肌肉组织特异表达系统的建立[C].全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编.2008
[7].李大力.心脏与肌肉组织特异表达基因Smyd1及其它发育相关基因的转录调控研究[D].湖南师范大学.2007
[8].王秀利,吴克亮,李宁,李长绿,仇雪梅.中国地方品种香猪的肌肉特异组织表达序列标签(ESTs)的分析(英文)[J].遗传学报.2006