导读:本文包含了粘附素疫苗论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:左旋咪唑,免疫增强,金黄色葡萄球菌,ClfA重组DNA疫苗
粘附素疫苗论文文献综述
江航,孙鹏,姜慧娇,刘云涛,苏艳[1]（2014）在《左旋咪唑对金黄色葡萄球菌粘附素ClfA重组DNA疫苗免疫效果的影响》一文中研究指出为了探究左旋咪唑(LMS)作为免疫增强剂对金黄色葡萄球菌粘附素ClfA重组DNA疫苗免疫效果的影响。分别用含左旋咪唑的ClfA重组DNA疫苗、ClfA重组DNA疫苗及空载体免疫昆明白小鼠,通过巨噬细胞吞噬试验、MTT实验、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力、酶联免疫吸附试验和攻毒试验验证免疫效果。结果表明,含左旋咪唑DNA疫苗组在巨噬细胞吞噬指数、脾脏淋巴细胞增殖、免疫血清对金黄色葡萄球菌识别能力方面有增强作用,与其他两组相比差异显着(P<0.05),含左旋咪唑DNA疫苗组小鼠抗体水平及攻毒实验保护率高于单独ClfA重组DNA组和空载对照组,LMS能够对ClfA重组DNA疫苗免疫效果起到增强作用。(本文来源于《新疆农业大学学报》期刊2014年05期）
徐灿,李兆申,杜奕奇,屠振兴,龚燕芳[2]（2007）在《以白细胞介素-2为免疫佐剂的幽门螺杆菌粘附素核酸疫苗制备及其免疫预防作用》一文中研究指出目的构建含幽门螺杆菌(Hp)粘附素(HpaA)基因和白细胞介素(IL)-2的核酸疫苗,体外转染COS-7细胞,鉴定其表达蛋白的免疫原性和免疫保护作用。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术从Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA扩增HpaA基因;从重组质粒pCIneo-IL-2扩增小鼠IL-2基因,并通过TA克隆分别克隆入pUCmT载体。检测HpaA及IL-2的核苷酸序列,酶切、连接反应将HpaA和IL-2同时克隆入真核表达载体pIRES,再经PCR法和酶切反应进行鉴定;通过脂质体法将重组载体pIRES-HpaA-IL-2转染COS-7细胞,SDS-PAGE及Western印迹法检测表达蛋白的免疫原性。重组载体转化减毒鼠伤寒沙门菌LB5000,抽提质粒,转化入SL7207,反复传代,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。以该疫苗菌经口接种小鼠,4周后再用Hp攻击,鉴定感染状况。结果测序结果证实扩增的HpaA基因与Hp HpaA序列一致,IL-2序列和小鼠IL-2序列一致。PCR和酶切鉴定结果证实,HpaA和IL-2基因克隆入载体pIRES,成功构建含HpaA和IL-2基因的核酸疫苗质粒pIRES-HpaA-IL-2,Western印迹法检测到相对分子质量分别为30 000和14 000的HpaA和IL-2蛋白条带。小鼠体内实验显示HpaA-IL-2及HpaA组分别有75.0%、58.4%获免疫保护,与PBS组差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了HpaA和IL-2的Hp减毒沙门核酸疫苗菌,其免疫原性和保护性均得到证实,免疫佐剂IL-2可提高免疫保护率。(本文来源于《中华消化杂志》期刊2007年10期）
王宁[3]（2005）在《表达幽门螺杆菌鞭毛粘附素的重组大肠杆菌ghost型疫苗的制备及鉴定》一文中研究指出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp) 是一种定植于胃内的革兰氏染色阴性、螺杆状或S 状的微需氧菌,可引发慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡等上消化道疾病,并与胃癌、胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的发生有关。由于传统的抗生素疗法面临着价格高、耐药性等诸多问题,开发有效的Hp 疫苗成为防治Hp 感染的研究热点。目前研发的Hp 疫苗,多是采用基因工程获得HP 的有效抗原,再辅以佐剂,如福氏佐剂、CT、LT,脂质A,但这些佐剂都只是非特异地加强抗原的免疫效应。而传统的灭活疫苗虽有好的保护作用,但是现用的加热、照射、化学处理等灭活方法,常常引起抗原性的降低和改变。“Bacterial ghost”作为一种新型疫苗或抗原递送系统,是通过控制PhiX174 噬菌体E 裂解基因在细菌中表达得以制备的,其实质是一种无细菌胞浆和核酸的空细菌外膜。据报道,E 裂解基因编码的蛋白在细菌胞壁上可形成穿膜隧道,通过此隧道胞浆成分全部渗出。因为这种形式保留了和活菌一样完整的细菌胞膜结构和相关抗原蛋白,故而能够携带外源抗原靶向黏附于体内黏膜组织并易于被相应抗原提呈细胞捕获。Hp 粘附于胃上皮细胞是其定植进而致病的前提,有效阻断Hp 粘附是防治Hp 感染的途径之一。现在认为幽门螺杆菌黏附素A(Hp adhesion A,HpaA)是Hp 的主要黏附因子,该蛋白为Hp 所特有的抗原成分,其氨基酸序列高度保守,且多数Hp 感染患者血清中能检测到HpaA 抗体,因此可作为理想的Hp 疫苗靶抗原。本课题尝试用“Bacterial ghost”这一新型疫苗递送形式和内佐剂来传输HpaA 抗原,拟构建表达HpaA 的重组大肠杆菌ghost 疫苗,即先把HpaA 锚定表达于大肠杆菌的胞膜,然后诱导细菌裂解以制备表达HpaA 的重组大肠杆菌ghost。本研究中,在成功制备大肠杆菌ghost 的基础上,采用两种技术路线制备表达HpaA 的重组大肠杆菌ghost:一种为双质粒共表达法,即将含裂解基因盒的裂解质粒pHH43 和含hpaA 表达盒的表达质粒pBIOEX-E’-hpaA 同时转入大肠杆菌BL21,先IPTG 诱导HpaA 表达,再热诱导E 裂解蛋白表达以制备重组ghost;二为单质粒双表达法,即将裂解基因盒和hpaA 表达盒构建到同一质粒pET-28a 上,先IPTG 诱导表达HpaA 蛋白,再用热诱导表达E 裂解蛋白而获得重组ghost。主要研究内容简述如下:(本文来源于《第叁军医大学》期刊2005-05-01）
刘正祥,邹全明,洪愉,郭桐生,郭鹰[4]（2004）在《幽门螺杆菌粘附素与大肠杆菌LtB融合疫苗的口服免疫与预防试验》一文中研究指出目的 观察幽门螺杆菌粘附素HpaA与大肠杆菌LtB融合蛋白质经口服免疫BALB/c小鼠后机体产生的免疫应答和蒙古沙鼠免疫预防作用。方法 用PCR方法扩增HpaA和LtB目的基因片段 ,将LtB与 pPIM质粒连接后 ,再与HpaA基因连接 ,转化大肠杆菌DH5α ,经酶切获得含有ltB -hpaA的pPIM -ltB/hpaA融合质粒。将重组质粒转化E coliBL2 1(DE3) ,筛选获得重组工程菌 ,经发酵、包涵体提取 ,复性 ,纯化获得LtB -HpaA。BABL/c小鼠设正常对照组、单独rHpaA对照组、CT +HpaA实验组、融合蛋白LtB -HpaA组和rLtB +rHpaA实验组 ,免疫 4周后检测血清抗原特异性IgG、IgA和胃冲洗液、肠冲洗液中sIgA。蒙古沙鼠分 3个实验组 ,正常对照 (PBS)组 ,单独HpaA免疫组和LtB -HpaA组 ,免疫 4周 ,于末次免疫后 14天灌活力良好的H pyloriSS1活菌 ,1个月处死动物 ,采集标本 ,用细菌培养和病理切片检查评价蒙古沙鼠的免疫保护作用。结果 融合蛋白LtB -HpaA组及将CT和LtB作为外粘膜佐剂的CT +HpaA组和LtB +HpaA组中血清IgA和IgG、胃冲洗液和肠冲洗液中sIgA含量明显高于单独HpaA组和对照组 ,差异非常显着 (P <0 0 0 1)。蒙古沙鼠融合蛋白rLtB-HpaA组比单纯rHpaA组效果明显 (rLtB -HpaA组保护率为 80 % ,单独rHpaA为 2 0 % )。 结论 融合蛋白质LtB(本文来源于《中国人兽共患病杂志》期刊2004年07期）
粘附素疫苗论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建含幽门螺杆菌(Hp)粘附素(HpaA)基因和白细胞介素(IL)-2的核酸疫苗,体外转染COS-7细胞,鉴定其表达蛋白的免疫原性和免疫保护作用。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术从Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA扩增HpaA基因;从重组质粒pCIneo-IL-2扩增小鼠IL-2基因,并通过TA克隆分别克隆入pUCmT载体。检测HpaA及IL-2的核苷酸序列,酶切、连接反应将HpaA和IL-2同时克隆入真核表达载体pIRES,再经PCR法和酶切反应进行鉴定;通过脂质体法将重组载体pIRES-HpaA-IL-2转染COS-7细胞,SDS-PAGE及Western印迹法检测表达蛋白的免疫原性。重组载体转化减毒鼠伤寒沙门菌LB5000,抽提质粒,转化入SL7207,反复传代,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。以该疫苗菌经口接种小鼠,4周后再用Hp攻击,鉴定感染状况。结果测序结果证实扩增的HpaA基因与Hp HpaA序列一致,IL-2序列和小鼠IL-2序列一致。PCR和酶切鉴定结果证实,HpaA和IL-2基因克隆入载体pIRES,成功构建含HpaA和IL-2基因的核酸疫苗质粒pIRES-HpaA-IL-2,Western印迹法检测到相对分子质量分别为30 000和14 000的HpaA和IL-2蛋白条带。小鼠体内实验显示HpaA-IL-2及HpaA组分别有75.0%、58.4%获免疫保护,与PBS组差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了HpaA和IL-2的Hp减毒沙门核酸疫苗菌,其免疫原性和保护性均得到证实,免疫佐剂IL-2可提高免疫保护率。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
粘附素疫苗论文参考文献
[1].江航,孙鹏,姜慧娇,刘云涛,苏艳.左旋咪唑对金黄色葡萄球菌粘附素ClfA重组DNA疫苗免疫效果的影响[J].新疆农业大学学报.2014
[2].徐灿,李兆申,杜奕奇,屠振兴,龚燕芳.以白细胞介素-2为免疫佐剂的幽门螺杆菌粘附素核酸疫苗制备及其免疫预防作用[J].中华消化杂志.2007
[3].王宁.表达幽门螺杆菌鞭毛粘附素的重组大肠杆菌ghost型疫苗的制备及鉴定[D].第叁军医大学.2005
[4].刘正祥,邹全明,洪愉,郭桐生,郭鹰.幽门螺杆菌粘附素与大肠杆菌LtB融合疫苗的口服免疫与预防试验[J].中国人兽共患病杂志.2004
标签：左旋咪唑; 免疫增强; 金黄色葡萄球菌; ClfA重组DNA疫苗;