脱细胞角膜材料论文-张超中

脱细胞角膜材料论文-张超中

导读:本文包含了脱细胞角膜材料论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:脱细胞角膜基质,包裹材料,羟基磷灰石,眼眶植入物

脱细胞角膜材料论文文献综述

张超中[1](2014)在《利用脱细胞角膜基质作为羟基磷灰石义眼座包裹材料的实验研究》一文中研究指出目的:利用反复冻融+电泳法制备脱细胞角膜基质,同时初步观察猪脱细胞角膜基质(APCS)作为羟基磷灰石(HA)义眼台包裹材料的可行性,为其在眼整形方面的临床应用提供理论和实验基础。方法:1、采用反复冻融+电泳法去除猪角膜细胞成分,制备脱细胞角膜基质(APCS),利用病理切片染色方法检查其细胞去除和细胞外基质结构保留情况,同时利用皮下植入法检测其生物相容性;2、将30只新西兰白兔随机分为A、B2组,每组15只,各组均将HA义眼台植入兔左眼眶内。A组为对照组,植入自体巩膜包裹的HA义眼台,B组植入APCS包裹的HA义眼台。术后每天肉眼和裂隙灯显微镜检查术眼,观测眼睑、结膜囊愈合情况及义眼台有无暴露,并分别于术后1周、2周、3周、4周、5周对每组兔均进行双眼增强磁共振扫描,同时两组各随机取出1只义眼台植入物行组织病理学检查,比较植入义眼台纤维血管化程度的差异。结果:1、新鲜猪角膜经过脱细胞进程处理,基质细胞已全部移除,细胞外基质构架保存良好(含前弹力层及前2/3基质层),免疫反应实验结果显示:皮下植入后第2周,APCS组织周边炎性细胞聚集明显,以中性粒细胞为主,植入后4周,实验组与对照组均未发现明显排斥反应, APCS组织中未见中性粒细胞及淋巴细胞浸润,周围包裹纤维结缔组织,与周边形成明显界限。2、术后1周,A、 B组均开始有不同程度的血管化,B组血管化速度缓慢,两组磁共振扫描结果有统计学差异(A、B组间p<0.05)。术后2周,两组血管化程度都提高,但均未完全血管化,B组血管化程度稍低于A组,两组之间血管化差异有统计学意义(A、B组间p<0.05)。术后3周,两组植入物血管化程度加深,较前有明显提高,但未完全血管化,两组之间的血管化无统计学差异(A、B组间p>0.05)。术后4周及以后, A、B两组均达到完全血管化,两组间无统计学差异。结论:1、利用反复冻融+电泳法能完全去除猪角膜基质细胞,同时良好保留细胞外基质,使其结构不受破坏。2、APCS对早期的HA义眼台血管化无显着影响,并未延缓羟基磷灰石义眼台完全血管化进程。3、利用APCS作为HA义眼台植入的包裹材料具有一定可行性。(本文来源于《南昌大学》期刊2014-06-01)

刘先宁,朱秀萍,吴洁,王莉芳,银勇[2](2013)在《干燥脱水保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料的细胞毒性》一文中研究指出背景:陕西省眼科研究所通过前期研究发现鸵鸟角膜具有开发成为人角膜材料替代品的优势。目的:判断鸵鸟角膜基质支架材料对细胞的潜在毒性作用。方法:采用细胞培养方法,将干燥脱水法保存的鸵鸟脱细胞角膜基质载体支架制备成浸提液与 L-929 细胞共同培养,采用 MTT 比色法评价其作用 1,2,3 d,对细胞生长和增殖的影响。结果与结论:干燥脱水法保存的鸵鸟脱细胞角膜基质载体支架浸提液组培养 1,3,5 d,对实验细胞毒性反应级别均为 1 级。参照《中华人民共和国国家标准 GB/T16886.5-2003》进行细胞毒性试验,供试品组见少量细胞呈圆形,疏松贴壁,无胞浆内颗粒,偶见细胞溶解。结合 MTT 法分析结果表明,采用干燥脱水法保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料,细胞毒性为 1 级,为合格材料。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2013年33期)

郭梁,胡丹[3](2009)在《角膜缘上皮细胞与脱细胞角膜材料移植修复碱烧伤角膜的实验研究》一文中研究指出目的探讨应用角膜缘上皮细胞(limbal epithelial cells,LECs)及脱细胞角膜材料(decellularized porcine cornea,DPC)移植修复碱烧伤兔角膜的疗效。方法培养同种异体兔LECs,鉴定其中的角膜缘干细胞(limbal stem cells,LSCs),制备DPC作为支架材料,将LECs和DPC两者复合培养后板层移植到碱烧伤的兔眼角膜,观察移植后4个月内的角膜修复情况。结果免疫细胞化学及RT-PCR检测培养的LECs中有表达ABCG2的LSCs。大体观察LECs-DPC移植后碱烧伤角膜的混浊度减轻,新生血管消退。HE、Masson Trichrome染色显示移植后上皮面的细胞复层化生长,炎性细胞浸润减少,DPC纤维整合于碱烧伤的角膜植床,角膜胶原排列趋于规则。透射电镜检查有桥粒及微绒毛结构形成。结论体外培养的同种异体角膜缘上皮细胞联合脱细胞角膜材料移植能够修复碱烧伤的兔眼角膜。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2009年10期)

吴连胜,陈建苏,徐锦堂,丁勇,郑佩娥[4](2009)在《脱细胞角膜材料的生物相容性研究》一文中研究指出目的研究异种脱细胞猫角膜板层角膜移植术后的组织相容性。方法24只18周龄的健康新西兰白兔随机平均分成3组:A组为脱细胞猫角膜材料→兔板层移植组,B组为猫→兔异种新鲜角膜植片板层移植组,C组为兔→兔同种异体新鲜角膜植片板层移植组。用扫描电镜观察术后不同时期术眼角膜的组织病理学改变,抽取兔血测定CD4+/CD8+T细胞百分比。结果术后1个月3个组间角膜植片炎症反应指数组间比较差异均无统计学意义;2个月A组与B组、A组与C组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3个月A组与B组、A组与C组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3个组间术后同期7、15、30d兔外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞活化率差异均无统计学意义(P>0.05)。组织切片显示术后3个月内,B、C两组角膜植片炎症反应轻,植片内皮细胞吸收,组织结构基本正常。A组角膜植片炎症反应显着,结构较紊乱,新生血管增生。扫描电镜可见B、C2组角膜上皮结构基本正常,细胞连接较好。A组扫描电镜可见有上皮缺损。结论脱细胞处理的异种猫角膜移植后生物相容性较新鲜角膜差,免疫反应无显着差异。(本文来源于《眼科研究》期刊2009年05期)

郭梁[5](2009)在《同种异体骨髓间充质干细胞与脱细胞角膜材料移植治疗兔角膜碱烧伤的实验研究》一文中研究指出1骨髓间充质干细胞与角膜缘上皮细胞的体外培养与鉴定骨髓间充质干细胞在10%FBS的DMEM培养基中培养,角膜缘上皮细胞在EpiLife?培养基、含激素和5%FBS的D/F12培养基、低钙的KSFM培养基中分别培养。将培养的MSCs进行体外成脂和成骨诱导,以鉴定MSCs (这种经过诱导的MSCs不用于体内移植)。RT-PCR和免疫细胞化学染色检测LECs中角膜缘干细胞、角膜上皮瞬时扩增细胞、角膜上皮终末分化细胞的表达:ABCG2、PCNA、CX43、CK3、CK12。体外结果表明,MSCs与LECs原代培养24小时贴壁,7天铺满,MSCs为成纤维样生长,LECs呈上皮样生长。油红和茜素红染色阳性表示MSCs的成脂和成骨分化能力。RT-PCR检测培养的LECs中有角膜缘干细胞ABCG2、瞬时扩增细胞CX43、终末分化细胞CK3/12表达。免疫细胞化学染色同样证实了LECs中有角膜缘干细胞ABCG2表达,以及细胞增殖性标志物PCNA表达。体外培养了移植用的MSCs与LECs。MSCs经过诱导,向成脂和成骨分化。培养的LECs中有具有克隆扩增能力的角膜缘干细胞成分。2脱细胞角膜材料的制备与生物学测量取新鲜角膜,制备DPC:-80oC冻30分钟,解冻后4oC蒸馏水溶胀12-18小时,切取前板层角膜片,室温下0.25%胰酶消化30分钟,1mol/L NaOH浸泡2小时,40U/ml DNA/RNA酶处理30分钟,振荡洗涤,37oC 10%海藻糖浸泡2小时,-80oC预冻1小时,冷冻干燥机冻干16小时,60Co照射消毒。将DPC、人羊膜(HAM)、兔角膜(RC)复水,测量3种材料的光学特性和机械强度。阿贝折射仪测量折射率,PE分光光度计测量透射率,小型英斯特朗仪测量抗拉强度和弹性模量。DPC的折射率是1.3313,HAM是1.3322,RC是1.3340。DPC的透射率是50%, HAM是70%, RC是92%。DPC的抗拉强度是2.4MPa,HAM是3.6MPa,RC是4.5MPa。DPC的弹性模量是3.8MPa,HAM是0.78MPa, RC是5.3MPa。结果表明,脱去了细胞成分的角膜材料有与羊膜相似的光学特性和机械强度。3骨髓间充质干细胞与脱细胞角膜材料移植治疗兔角膜碱烧伤MSCs和LECs标记PKH26后接种于DPC材料表面,体外培养MSCs-DPC植片与LECs-DPC植片。麻醉兔,将浸泡过1mol/L NaOH的滤纸置于角膜表面,诱发新生血管后角膜随机分为4组:MSCs-DPC移植组,LECs-DPC移植组,DPC移植组,碱烧伤组(不做移植)。在碱烧伤角膜上制作板层植床,分别将MSCs-DPC、LECs-DPC、DPC植片缝合于受损植床,术后,细胞移植组的眼表覆盖软性接触镜,LECs移植组给与0.3%地塞米松、1%环孢霉素A滴眼液点眼。连续随访4个月,从角膜透明度、新生血管、存活率方面观察MSCs-DPC移植后碱烧伤角膜的愈合情况并评分。移植后4个月内,对移植组和碱烧伤组角膜进行取材、固定、包埋、切片。做HE染色、Masson叁色染色、PKH26示踪检查,同时检测MSCs移植后是否转分化表达角膜上皮标志物。透射电镜超薄切片染色观察细胞连接。MSCs移植后5周内收集移植组和碱烧伤组的角膜,Real Time PCR测定MIP-2的表达。临床观察表明,在MSCs-DPC移植组和LECs-DPC移植组,角膜能较快恢复透明,而且新生血管较少。在第1个月,未接受移植的碱烧伤角膜呈现广泛的混浊水肿和新生血管;相比之下,MSCs-DPC和LECs-DPC移植后角膜的炎性混浊和新生血管化程度均明显减轻。在第4个月,MSCs移植组的角膜恢复了透明和无血管化;而碱烧伤组的角膜形成了瘢痕和血管翳;在DPC单独移植组,4个月后角膜中央区仍有白斑。统计学分析表明,MSCs移植组和给药的LECs移植组的角膜透明度和无血管化恢复较快,而且更长时间保持角膜透明。在第2个月,MSCs移植组和LECs移植组的角膜表面都检测到了PKH26表达。在MSCs组的PKH26阳性位点,没有检测到CK3/12表达。这表明MSCs移植后存活于角膜表面,但并没有转分化为上皮细胞。为了验证临床结果,我们观察了MSCs-DPC移植到碱烧伤角膜后角膜愈合的组织病理过程。在MSCs移植后第1个月,HE和Masson Trichrome染色能清楚地观察到前板层角膜中的DPC纤维和新生的胶原纤维,炎性细胞浸润和新生血管局限在板层植片周围,植片表面被覆3-4层细胞。同样在第1个月,碱烧伤组的角膜水肿变厚,炎性细胞浸润和新生血管广泛。在MSCs移植到碱烧伤角膜后第2-3个月,DPC大部分降解,有新生组织形成,而且,碱烧伤角膜的炎性细胞浸润和新生血管明显消退,这时仍能在周围的角膜植床中分辨出板层植片。到MSCs移植后第4个月,角膜中没有观察到炎性细胞浸润和新生血管,DPC纤维完全降解,新生的胶原组织在空间排列上更加有序,与周围植床融合,类似于周围角膜基质的胶原构象。在第4个月,透射电镜观察到MSCs-DPC移植处角膜表面的细胞间形成桥粒结构,细胞与基质间形成半桥粒结构。实验初步观察到在MSCs移植后3-5周碱烧伤角膜的MIP-2表达下调。本实验表明同种异体骨髓间充质干细胞与脱细胞角膜材料移植可以修复兔角膜碱烧伤,脱细胞角膜材料可以作为有一定厚度的组织工程支架材料用于角膜损伤修复的研究。4个月的临床观察、统计学分析、组织病理学结果表明,与传统给药的角膜缘上皮细胞移植相比,MSCs移植可以重建碱烧伤角膜的透明度,减少新生血管,延长角膜的透明时间。MSCs移植对兔角膜碱烧伤的治疗作用可能与MSCs减轻炎症的作用有关。(本文来源于《第四军医大学》期刊2009-04-01)

姜河,卿素珠,金岩,孟浩,张锐红[6](2008)在《脱细胞角膜基质支架材料的制备与相容性实验研究》一文中研究指出利用胰酶和胶原酶消化结合液氮冻融的方法对猪角膜基质进行处理,~(60)Co消毒,冻干保存。经组织学观察、细胞培养附和与动物移植检验其生物特性。结果显示,获得的脱细胞角膜基质,组织学观察显示板层结构完整,胶原纤维间组织结构疏松,未见细胞残留,整个基质成网状结构,在上皮面保存有完整连续的基底膜;细胞培养附和实验观察到种子细胞可以在基质上良好生长;动物移植实验未见明显的炎症反应与排斥。提示经该法脱细胞处理后得到的角膜基质无细胞毒性,组织相容性好,可以成为适宜的组织工程支架材料。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会论文集》期刊2008-08-01)

张超,金岩,胡丹,聂鑫,刘源[7](2006)在《重度碱烧伤早期异种去细胞角膜材料移植》一文中研究指出目的观察重度碱烧伤后,早期(伤后1周内)行异种去细胞角膜材料板层移植手术治疗的可行性和疗效,并与同种异体角膜材料进行比较性研究。方法将19只新西兰大白兔制作成角膜重度碱烧伤模型,伤后1周,取16只随机分为2组,每组8只。一组行猪去细胞角膜材料板层移植;另一组行同种异体板层兔角膜移植。其余3只烧伤后不作任何处理,为空白对照组。术后进行大体观察、裂隙灯、病理学、角膜内皮染色观察。结果重度碱烧伤异种去细胞角膜材料移植后2~3周,有新生血管侵入植片边缘,植片为灰白色半透明状,移植区角膜上皮愈合。6周后,角膜植片新生血管开始减退,植片局部变透明。观察至28周,植片存活良好,无免疫排斥反应发生,炎症静止,眼表维持相对正常的结构,与同种异体角膜移植组治疗效果相同,可为以后的增视性手术创造良好的条件。结论用异种去细胞角膜基质材料对重度碱烧伤角膜进行移植手术治疗,可减轻伤后炎症反应,防止严重并发症的发生,维持了眼表结构。疗效与同种异体角膜移植相同。(本文来源于《眼科新进展》期刊2006年09期)

张超,金岩,刘建民,胡丹,聂鑫[8](2005)在《异种脱细胞角膜基质材料的生物相容性研究》一文中研究指出目的:研究脱细胞猪角膜基质材料在角膜组织中的生物相容性,为组织工程角膜的构建寻找一种良好的支架材料。方法:将用去垢剂联合酶的方法脱细胞处理的猪角膜基质材料植入兔角膜基质囊袋中,进行裂隙灯观察并照相。不同时间取材HE染色,进行光镜检查。结果:脱细胞猪角膜基质材料植入兔角膜基质囊袋,观察4mo,生物相容性良好,材料逐渐降解吸收。结论:脱细胞猪角膜基质材料植入兔角膜中无炎症、无免疫排斥反应,生物相容性好,可作为组织工程角膜的支架材料。(本文来源于《国际眼科杂志》期刊2005年02期)

脱细胞角膜材料论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

背景:陕西省眼科研究所通过前期研究发现鸵鸟角膜具有开发成为人角膜材料替代品的优势。目的:判断鸵鸟角膜基质支架材料对细胞的潜在毒性作用。方法:采用细胞培养方法,将干燥脱水法保存的鸵鸟脱细胞角膜基质载体支架制备成浸提液与 L-929 细胞共同培养,采用 MTT 比色法评价其作用 1,2,3 d,对细胞生长和增殖的影响。结果与结论:干燥脱水法保存的鸵鸟脱细胞角膜基质载体支架浸提液组培养 1,3,5 d,对实验细胞毒性反应级别均为 1 级。参照《中华人民共和国国家标准 GB/T16886.5-2003》进行细胞毒性试验,供试品组见少量细胞呈圆形,疏松贴壁,无胞浆内颗粒,偶见细胞溶解。结合 MTT 法分析结果表明,采用干燥脱水法保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料,细胞毒性为 1 级,为合格材料。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

脱细胞角膜材料论文参考文献

[1].张超中.利用脱细胞角膜基质作为羟基磷灰石义眼座包裹材料的实验研究[D].南昌大学.2014

[2].刘先宁,朱秀萍,吴洁,王莉芳,银勇.干燥脱水保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料的细胞毒性[J].中国组织工程研究.2013

[3].郭梁,胡丹.角膜缘上皮细胞与脱细胞角膜材料移植修复碱烧伤角膜的实验研究[J].第叁军医大学学报.2009

[4].吴连胜,陈建苏,徐锦堂,丁勇,郑佩娥.脱细胞角膜材料的生物相容性研究[J].眼科研究.2009

[5].郭梁.同种异体骨髓间充质干细胞与脱细胞角膜材料移植治疗兔角膜碱烧伤的实验研究[D].第四军医大学.2009

[6].姜河,卿素珠,金岩,孟浩,张锐红.脱细胞角膜基质支架材料的制备与相容性实验研究[C].中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会论文集.2008

[7].张超,金岩,胡丹,聂鑫,刘源.重度碱烧伤早期异种去细胞角膜材料移植[J].眼科新进展.2006

[8].张超,金岩,刘建民,胡丹,聂鑫.异种脱细胞角膜基质材料的生物相容性研究[J].国际眼科杂志.2005

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