导读:本文包含了转基因苎麻论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:苎麻,GS2等位基因克隆,超量表达,转基因
转基因苎麻论文文献综述
郑建树,喻春明,陈平,王延周,谭龙涛[1]（2014）在《苎麻谷氨酰胺合成酶BnGS2等位基因的克隆及其转基因烟草特性》一文中研究指出【目的】克隆谷氨酰胺合成酶BnGS2等位基因,分别构建其超量表达载体,并探讨其在转基因烟草中对氮代谢的影响。【方法】依据苎麻转录组unigenes和RT-PCR技术克隆苎麻BnGS2等位基因,利用内切酶TaqⅠ对目的等位基因在中苎1号自交F1和亲本中进行酶切鉴定,并利用生物信息学对基因序列和结构特征进行分析;通过同源重组技术分别构建BnGS2等位基因的超量表达载体,并在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404的介导下,通过叶盘法将超量表达载体转入烟草中,通过Kan筛选、转化植株基因组DNA PCR验证获得转基因T0植株;利用qRT-PCR分析BnGS2等位基因在转基因T1植株中的相对表达水平,并测定植株叶片中的GS活性、株高、鲜重、可溶蛋白及总氮含量。【结果】首次从苎麻中克隆了一对GS2等位基因,命名为BnGS2-1和BnGS2-2,等位基因序列全长1 340 bp,含有一个1 293 bp的ORF区,编码430个氨基酸残基多肽;等位基因核苷酸序列在11个位点上存在差异,导致编码的多肽在195、382位点上的氨基酸残基存在替换现象(BnGS2-1为脯氨酸和天冬酰胺,BnGS2-2为苏氨酸和丝氨酸);NCBI BLASTP分析表明苎麻BnGS2与Pisum sativum、Vigna radiata、Glycine max、Phaseolus vulgaris、Medicago truncatula具有很近的亲缘关系;构建了能分别超量表达BnGS2-1和BnGS2-2的载体,并获得能分别超量表达BnGS2-1和BnGS2-2转基因烟草植株;与野生型烟草植株相比,超量表达BnGS2等位基因(BnGS2-1和BnGS2-2)都能显着性提高转基因植株叶片GS活性、鲜重和可溶性蛋白的含量,株高和总氮含量也有增加,但没有达到显着性水平。另外,超量表达不同BnGS2等位基因(BnGS2-1和BnGS2-2)的转基因烟草植株,在株高、鲜重、叶片可溶性蛋白及总氮含量上并没有显着性差异。【结论】在烟草中分别超量表达来源苎麻的BnGS2等位基因(BnGS2-1或BnGS2-2)均能显着提高转基因植株的生物产量和氮利用效率,并且所克隆的2个等位基因BnGS2-1和BnGS2-2在功能上并无显着差异。(本文来源于《中国农业科学》期刊2014年17期）
蒋杰[2]（2012）在《苎麻纤维素合酶基因的克隆、表达分析及转基因载体构建》一文中研究指出纤维素是自然界最丰富的生物大分子,随着社会的发展,人们对纤维素的需求激增,然而目前人们对纤维素的生物合成机制还知之甚少。苎麻[Boehmeria nivea (Linn.) Gaud.]是我国重要的以纺织为主的农作物,且目前对于提高苎麻纤维产量和质量的研究已经处于一个瓶颈状态。研究苎麻纤维素生物合成的分子机理,将为从分子水平上提高苎麻纤维的产量和质量提供基础。本研究以湘苎叁号苎麻为材料,克隆了两个苎麻纤维素合酶基因的全长cDNA序列,一个包含起始密码的cDNA片段,对3个基因做了表达分析,并构建了BnCesA1和BnCesA3基因的过表达转基因载体和BnCesA6的RNAi载体。主要研究成果如下：1、以已知的苎麻纤维素合酶基因序列(DQ077190)为基础,设计5'RACE引物,以湘苎叁号为材料,得到了BnCesA1的5’端,拼接后得到了延长的BnCesA1基因cDNA序列3891bp,包括完整的5’端非编码区183bp,3’端非编码区462bp,编码区3246bp,共编码1082个氨基酸。并从湘苎叁号的cDNA中成功克隆到包括BnCesA1全部编码区的cDNA序列。2、从苎麻转录组测序结果中找到一条与植物纤维素合酶基因高度同源的序列,2438bp,含有不完整的蛋白编码信息,本研究在此基础上通过5'RACE和3'RACE,分别得到了761bp和740bp的5’端和3’端,与原序列拼接得到了该基因的全长cDNA序列。并克隆得到了该基因的全部编码区。该基因cDNA全长3849bp,其中编码区为3237bp,编码1079个氨基酸,蛋白质序列与AtCesA3相似度为86.5%,远高于与其他拟南芥CesA基因的相似度(69.8%以下),鉴定为苎麻的BnCesA3基因。3、苎麻转录组测序结果中另一条与植物纤维素合酶基因高度同源的序列,1711bp,其5’端包含了起始密码,编码区从326-1711bp,将其核苷酸序列和编码的部分氨基酸序列与拟南芥10个CesA基因比对,与AtCesA6基因的同源性最高,相似性分别是60.7%和75.8%,将其命名为BnCesA6。克隆了其部分序列1539bp。4、对叁个苎麻纤维素合酶基因进行了表达规律的研究,结果表明,叁个基因在4个供试材料的茎皮以及苎麻品种“湘苎叁号”的不同组织茎皮、茎顶、根、叶中都有表达,并且叁个基因在不同组织中有同样的表达规律,及茎皮>叶>茎顶>根。5、构建了BnCesA1和BnCesA3的过表达载体,BnCesA1和BnCesA6的RNAi表达载体,并成功导入了农杆菌EHA105。为之后的功能研究奠定了良好的基础。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2012-06-18）
宫本贺[3]（2010）在《转基因苎麻的分子检测和抗虫性鉴定》一文中研究指出苎麻(Boehmeria nivea L.)是我国麻纺工业重要的纤维原料,也是我国出口创汇的主要纤维原料之一,其纤维质量优良,倍受广大群众的喜爱。在苎麻生长期间,很容易受到多种害虫的侵害,严重影响其生长发育过程中正常的生理生化活动,导致其减产和纤维品质的下降,甚至造成败蔸,给广大农户带来巨大的经济损失。因此培育抗虫的苎麻品种,是解决虫害、提高产量和品质的重点。随着基因工程的发展,遗传转化手段可以将外源的抗虫基因转化到植株的基因组中,使其在植株体内表达产生对害虫有毒性的物质,从而杀死害虫。本研究主要针对本试验室导入苎麻栽培品种“中苎1号”而获得的六批遗传转化株进行了分子水平上的检测和筛选,并对T0代转化株的抗虫性进行了鉴定,为苎麻遗传转化的深入研究提供了数据参考,为今后将要开展的抗虫育种工作奠定了基础。本研究主要获得的研究结果如下:(1)对转基因T0代株系进行了检测和筛选,获得了一系列检测为双阳性的转基因苎麻材料,同时发现外源的CpTI基因比CryIA基因的转化率略高,外源基因在苎麻基因组中的整合情况存在差异,外源转化基因可以进行正常的转录,利用农杆菌介导法获得苎麻遗传转化株的转化率为65.5%。(2)对外源基因在T1代株系中进行的遗传稳定性的初步研究表明,外源目的基因仍然可以保留,同时也发现了转基因T1代植株外源目的基因丢失的现象,检测含有目的基因的T1代株系其目的基因可以正常转录。(3)转基因T0代不同株系进行的抗虫性鉴定,从害虫对转基因不同株系的喜好程度和危害程度以及转基因不同株系对害虫的致死情况叁个方面进行了研究,结果说明害虫对转基因T0代不同株系的喜好程度存在差异;转基因T0代不同株系对害虫的抗性也不同,表现为高感和感虫的占多数,表现为中抗的占少数,没有表现为抗虫和高抗的株系。和对照相比,转基因株系表现一定的抗性,但抗性普遍较低,尚未达到抗虫品种的要求。(4)对叁个抗虫性指标(选择性拒食指数、校正死亡率和叶片被害指数)的聚类分析表明这叁种指标在分析转基因T0代株系抗虫性方面是有效的,可以作为今后深入研究的参考。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2010-06-01）
宫本贺,熊和平,马雄风,喻春明,王延周[4]（2010）在《基因枪介导法转化苎麻获得转基因植株的研究》一文中研究指出以苎麻品种中苎1号子叶愈伤组织为受体材料,利用基因枪法将外源双价抗虫基因(Cry-IA+CpTI)导入苎麻,以期建立基因枪转化苎麻的技术体系。结果表明,基因枪转化苎麻的最佳条件为轰击压力1300psi、金粉+DNA用量500μg+1.0μg/枪、轰击距离9cm、轰击次数2次,共获得4株阳性转基因植株。苎麻子叶愈伤组织的基因枪转化法是苎麻遗传转化的新方法,为建立苎麻基因枪转化体系奠定了基础。(本文来源于《作物杂志》期刊2010年01期）
伍旭东,揭雨成,徐庆国[5]（2007）在《苎麻再生体系的建立及转基因研究进展》一文中研究指出概述了基因型、外植体类型、培养基、激素对苎麻再生体系建立的影响;总结了国内外苎麻遗传转化和苎麻抗病虫转基因育种的研究和进展;并对苎麻转基因研究存在的问题和前景进行了讨论。(本文来源于《作物研究》期刊2007年S1期）
易自力,李祥,蒋建雄,王志成,刘清波[6]（2006）在《苎麻再生体系的建立及抗虫转基因苎麻的获得》一文中研究指出建立了以下胚轴切段为外植体的高效苎麻再生体系,并通过农杆菌介导法将Bt毒蛋白基因导入到苎麻体内,获得了16株独立来源的转化植株。经点杂交分析和PCR-Southern分析,结果表明有12株苎麻转化植株的基因组中整合有外源Bt基因。(本文来源于《中国麻业》期刊2006年02期）
转基因苎麻论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
纤维素是自然界最丰富的生物大分子,随着社会的发展,人们对纤维素的需求激增,然而目前人们对纤维素的生物合成机制还知之甚少。苎麻[Boehmeria nivea (Linn.) Gaud.]是我国重要的以纺织为主的农作物,且目前对于提高苎麻纤维产量和质量的研究已经处于一个瓶颈状态。研究苎麻纤维素生物合成的分子机理,将为从分子水平上提高苎麻纤维的产量和质量提供基础。本研究以湘苎叁号苎麻为材料,克隆了两个苎麻纤维素合酶基因的全长cDNA序列,一个包含起始密码的cDNA片段,对3个基因做了表达分析,并构建了BnCesA1和BnCesA3基因的过表达转基因载体和BnCesA6的RNAi载体。主要研究成果如下：1、以已知的苎麻纤维素合酶基因序列(DQ077190)为基础,设计5'RACE引物,以湘苎叁号为材料,得到了BnCesA1的5’端,拼接后得到了延长的BnCesA1基因cDNA序列3891bp,包括完整的5’端非编码区183bp,3’端非编码区462bp,编码区3246bp,共编码1082个氨基酸。并从湘苎叁号的cDNA中成功克隆到包括BnCesA1全部编码区的cDNA序列。2、从苎麻转录组测序结果中找到一条与植物纤维素合酶基因高度同源的序列,2438bp,含有不完整的蛋白编码信息,本研究在此基础上通过5'RACE和3'RACE,分别得到了761bp和740bp的5’端和3’端,与原序列拼接得到了该基因的全长cDNA序列。并克隆得到了该基因的全部编码区。该基因cDNA全长3849bp,其中编码区为3237bp,编码1079个氨基酸,蛋白质序列与AtCesA3相似度为86.5%,远高于与其他拟南芥CesA基因的相似度(69.8%以下),鉴定为苎麻的BnCesA3基因。3、苎麻转录组测序结果中另一条与植物纤维素合酶基因高度同源的序列,1711bp,其5’端包含了起始密码,编码区从326-1711bp,将其核苷酸序列和编码的部分氨基酸序列与拟南芥10个CesA基因比对,与AtCesA6基因的同源性最高,相似性分别是60.7%和75.8%,将其命名为BnCesA6。克隆了其部分序列1539bp。4、对叁个苎麻纤维素合酶基因进行了表达规律的研究,结果表明,叁个基因在4个供试材料的茎皮以及苎麻品种“湘苎叁号”的不同组织茎皮、茎顶、根、叶中都有表达,并且叁个基因在不同组织中有同样的表达规律,及茎皮>叶>茎顶>根。5、构建了BnCesA1和BnCesA3的过表达载体,BnCesA1和BnCesA6的RNAi表达载体,并成功导入了农杆菌EHA105。为之后的功能研究奠定了良好的基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转基因苎麻论文参考文献
[1].郑建树,喻春明,陈平,王延周,谭龙涛.苎麻谷氨酰胺合成酶BnGS2等位基因的克隆及其转基因烟草特性[J].中国农业科学.2014
[2].蒋杰.苎麻纤维素合酶基因的克隆、表达分析及转基因载体构建[D].湖南农业大学.2012
[3].宫本贺.转基因苎麻的分子检测和抗虫性鉴定[D].中国农业科学院.2010
[4].宫本贺,熊和平,马雄风,喻春明,王延周.基因枪介导法转化苎麻获得转基因植株的研究[J].作物杂志.2010
[5].伍旭东,揭雨成,徐庆国.苎麻再生体系的建立及转基因研究进展[J].作物研究.2007
[6].易自力,李祥,蒋建雄,王志成,刘清波.苎麻再生体系的建立及抗虫转基因苎麻的获得[J].中国麻业.2006