本文主要研究内容
作者郭亚蓉（2019）在《拟南芥MAC1基因的克隆与功能分析》一文中研究指出：隐花色素(CRYPTOCHROME,简称CRY)是一类在植物和动物体内普遍存在的蛋白,具有感受蓝光和调节重力感应等功能。在植物中,CRYs作为蓝光受体,能够影响蓝光诱导的花发育、生物钟、昼夜节律调控和幼苗形态建成等过程。在模式植物拟南芥中,CRY1主要介导蓝光抑制下胚轴的伸长,CRY2则主要介导蓝光促进光周期控制的开花,为了进一步研究隐花色素CYR2的调控功能,通过筛选带有CRY2-LUC转基因的EMS诱变突变体库,分离鉴定出一个SUS2/PRP8基因的等位基因突变体,我们将突变体命名为mac1(more abundant of cry2 1),并对MAC1基因的功能进行初步的探索。主要的实验结果如下:1、筛选EMS诱变库并获得一个具有早花表型,并且CRY2表达量上调的突变体植株,将其命名为mac1。通过多态性分子标记对mac1突变体进行图位克隆,确定突变位点位于MAC1基因第六个外显子发生了碱基突变,一个鸟嘌呤核苷酸(G)突变成了腺嘌呤核苷酸(A),导致甘氨基酸变成了精氨基酸。2、构建MAC1基因的CRISPR/Cas9敲除载体并转化拟南芥,获得mac-cr突变体材料,对获得的突变体植株进行表型观察发现,mac-cr具有与mac1突变体一样的表型。该结果表明CRISPR/Cas9杂合突变体(mac-cr)的表型是由于MAC1基因突变造成的。3、利用Western Blot实验以及qRT-PCR检测CRY2基因在mac1突变体中的表达情况,发现在转录水平上MAC1对于CRY2基因的表达没有影响,而是发生在转录后水平影响了CRY2蛋白的降解过程。4、通过对mac1纯合突变体开花时间统计,确定mac1在长日照下表现出早花表型。通过对不同光照下下胚轴的测量发现,mac1在蓝光、红光以及远红光下均表现出下胚轴变短的表型。以上结果表明MAC1在调控CRY2蛋白降解,调控拟南芥开花及下胚轴伸长等方面发挥功能。该研究为进一步了解MAC1基因的功能及其在光信号网络系统中的作用提供了依据。
Abstract
yin hua se su (CRYPTOCHROME,jian chen CRY)shi yi lei zai zhi wu he dong wu ti nei pu bian cun zai de dan bai ,ju you gan shou lan guang he diao jie chong li gan ying deng gong neng 。zai zhi wu zhong ,CRYszuo wei lan guang shou ti ,neng gou ying xiang lan guang you dao de hua fa yo 、sheng wu zhong 、zhou ye jie lv diao kong he you miao xing tai jian cheng deng guo cheng 。zai mo shi zhi wu ni na gai zhong ,CRY1zhu yao jie dao lan guang yi zhi xia pei zhou de shen chang ,CRY2ze zhu yao jie dao lan guang cu jin guang zhou ji kong zhi de kai hua ,wei le jin yi bu yan jiu yin hua se su CYR2de diao kong gong neng ,tong guo shai shua dai you CRY2-LUCzhuai ji yin de EMSyou bian tu bian ti ku ,fen li jian ding chu yi ge SUS2/PRP8ji yin de deng wei ji yin tu bian ti ,wo men jiang tu bian ti ming ming wei mac1(more abundant of cry2 1),bing dui MAC1ji yin de gong neng jin hang chu bu de tan suo 。zhu yao de shi yan jie guo ru xia :1、shai shua EMSyou bian ku bing huo de yi ge ju you zao hua biao xing ,bing ju CRY2biao da liang shang diao de tu bian ti zhi zhu ,jiang ji ming ming wei mac1。tong guo duo tai xing fen zi biao ji dui mac1tu bian ti jin hang tu wei ke long ,que ding tu bian wei dian wei yu MAC1ji yin di liu ge wai xian zi fa sheng le jian ji tu bian ,yi ge diao piao ling he gan suan (G)tu bian cheng le xian piao ling he gan suan (A),dao zhi gan an ji suan bian cheng le jing an ji suan 。2、gou jian MAC1ji yin de CRISPR/Cas9qiao chu zai ti bing zhuai hua ni na gai ,huo de mac-crtu bian ti cai liao ,dui huo de de tu bian ti zhi zhu jin hang biao xing guan cha fa xian ,mac-crju you yu mac1tu bian ti yi yang de biao xing 。gai jie guo biao ming CRISPR/Cas9za ge tu bian ti (mac-cr)de biao xing shi you yu MAC1ji yin tu bian zao cheng de 。3、li yong Western Blotshi yan yi ji qRT-PCRjian ce CRY2ji yin zai mac1tu bian ti zhong de biao da qing kuang ,fa xian zai zhuai lu shui ping shang MAC1dui yu CRY2ji yin de biao da mei you ying xiang ,er shi fa sheng zai zhuai lu hou shui ping ying xiang le CRY2dan bai de jiang jie guo cheng 。4、tong guo dui mac1chun ge tu bian ti kai hua shi jian tong ji ,que ding mac1zai chang ri zhao xia biao xian chu zao hua biao xing 。tong guo dui bu tong guang zhao xia xia pei zhou de ce liang fa xian ,mac1zai lan guang 、gong guang yi ji yuan gong guang xia jun biao xian chu xia pei zhou bian duan de biao xing 。yi shang jie guo biao ming MAC1zai diao kong CRY2dan bai jiang jie ,diao kong ni na gai kai hua ji xia pei zhou shen chang deng fang mian fa hui gong neng 。gai yan jiu wei jin yi bu le jie MAC1ji yin de gong neng ji ji zai guang xin hao wang lao ji tong zhong de zuo yong di gong le yi ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山西大学的郭亚蓉，发表于刊物山西大学2019-11-12论文，是一篇关于隐花色素论文,蛋白质降解论文,开花时间论文,下胚轴论文,山西大学2019-11-12论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自山西大学2019-11-12论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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