本文主要研究内容
作者闫碧莹,徐维祯,钟照华（2019）在《靶向3D基因shRNA慢病毒载体的构建及功能鉴定》一文中研究指出：本研究旨在筛选抑制B组柯萨奇病毒（coxsackievirus B,CVB）3D聚合酶表达的短发卡RNA（short hairpin RNA,shRNA）并构建其慢病毒表达载体,以抑制CVB的3D聚合酶表达。设计并合成3对针对3D基因的RNA干扰序列及相应的对照组序列,通过定量反转录-聚合酶链反应（quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-qPCR）和蛋白免疫印迹法筛选出干扰效率最高的一对,合成shRNA序列。退火后,应用基因重组技术构建pLVTHM-3DshRNA重组质粒,经酶切鉴定及DNA测序后,将重组正确的pLVTHM-3DshRNA与psPAX2、pMD2.G共转染293T细胞,包装慢病毒并鉴定其对CVB3 3D基因表达的干扰效果。测序结果显示,成功构建了pLVTHM-3DshRNA重组慢病毒载体,并收获了包装后的慢病毒,病毒滴度为5×107TU。感染HeLa细胞和BALB/c小鼠后,3D聚合酶表达量下降。本研究成功构建了慢病毒Lenti-sh3D,其能有效下调CVB 3D聚合酶的表达,为进一步抗CVB致病机制的研究奠定了基础。
Abstract
ben yan jiu zhi zai shai shua yi zhi Bzu ke sa ji bing du （coxsackievirus B,CVB）3Dju ge mei biao da de duan fa ka RNA（short hairpin RNA,shRNA）bing gou jian ji man bing du biao da zai ti ,yi yi zhi CVBde 3Dju ge mei biao da 。she ji bing ge cheng 3dui zhen dui 3Dji yin de RNAgan rao xu lie ji xiang ying de dui zhao zu xu lie ,tong guo ding liang fan zhuai lu -ju ge mei lian fan ying （quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-qPCR）he dan bai mian yi yin ji fa shai shua chu gan rao xiao lv zui gao de yi dui ,ge cheng shRNAxu lie 。tui huo hou ,ying yong ji yin chong zu ji shu gou jian pLVTHM-3DshRNAchong zu zhi li ,jing mei qie jian ding ji DNAce xu hou ,jiang chong zu zheng que de pLVTHM-3DshRNAyu psPAX2、pMD2.Ggong zhuai ran 293Txi bao ,bao zhuang man bing du bing jian ding ji dui CVB3 3Dji yin biao da de gan rao xiao guo 。ce xu jie guo xian shi ,cheng gong gou jian le pLVTHM-3DshRNAchong zu man bing du zai ti ,bing shou huo le bao zhuang hou de man bing du ,bing du di du wei 5×107TU。gan ran HeLaxi bao he BALB/cxiao shu hou ,3Dju ge mei biao da liang xia jiang 。ben yan jiu cheng gong gou jian le man bing du Lenti-sh3D,ji neng you xiao xia diao CVB 3Dju ge mei de biao da ,wei jin yi bu kang CVBzhi bing ji zhi de yan jiu dian ding le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自微生物与感染的闫碧莹,徐维祯,钟照华，发表于刊物微生物与感染2019年02期论文，是一篇关于组柯萨奇病毒论文,聚合酶论文,短发卡论文,慢病毒论文,微生物与感染2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自微生物与感染2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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