本文主要研究内容
作者周游,杨文涛,黄科谚,晋玉北,冯博,石春卫,黄海滨,王建忠,姜延龙,康元环,杨桂连,王春凤(2019)在《重组鹅IFN-α在大肠杆菌中的表达及抗血清制备》一文中研究指出:为了研究鹅α干扰素(goIFN-α)基因原核表达产物的反应原性并进行goIFN-α抗血清的制备,试验首先根据大肠杆菌偏爱密码子对goIFN-α基因进行优化,随后采用PCR方法扩增goIFN-α编码序列并进行同源性分析。将goIFN-α片段与表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot检测。通过切胶回收的方法回收目的条带,将碾碎的蛋白胶与PBS混合后注入小鼠体内,15 d后回收血清进行Western-blot检测。结果表明:试验成功扩增出goIFN-α基因;与多种IFN-α基因序列进行比较,goIFN-α基因氨基酸序列的同源性为92.5%~98.1%;随后成功构建出重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,重组蛋白goIFN-α的分子质量约为18 ku,具有良好的反应原性;回收血清进行Western-blot检测,鼠抗goIFN-α血清制备成功。说明重组goIFN-α蛋白能够在大肠杆菌中表达,大小符合预期且具有良好的反应原性,并成功制备出鼠抗goIFN-α血清。
Abstract
wei le yan jiu e αgan rao su (goIFN-α)ji yin yuan he biao da chan wu de fan ying yuan xing bing jin hang goIFN-αkang xie qing de zhi bei ,shi yan shou xian gen ju da chang gan jun pian ai mi ma zi dui goIFN-αji yin jin hang you hua ,sui hou cai yong PCRfang fa kuo zeng goIFN-αbian ma xu lie bing jin hang tong yuan xing fen xi 。jiang goIFN-αpian duan yu biao da zai ti pET-28alian jie ,gou jian chong zu biao da zhi li pET-28a-goIFN-α,ran hou jiang chong zu biao da zhi li zhuai hua zhi da chang gan jun BL21(DE3)gan shou tai xi bao zhong ,jing IPTGyou dao hou jin hang SDS-PAGEhe Western-blotjian ce 。tong guo qie jiao hui shou de fang fa hui shou mu de tiao dai ,jiang nian sui de dan bai jiao yu PBShun ge hou zhu ru xiao shu ti nei ,15 dhou hui shou xie qing jin hang Western-blotjian ce 。jie guo biao ming :shi yan cheng gong kuo zeng chu goIFN-αji yin ;yu duo chong IFN-αji yin xu lie jin hang bi jiao ,goIFN-αji yin an ji suan xu lie de tong yuan xing wei 92.5%~98.1%;sui hou cheng gong gou jian chu chong zu biao da zhi li pET-28a-goIFN-α,bing jiang ji zhuai hua zhi da chang gan jun BL21(DE3)gan shou tai xi bao zhong ,chong zu dan bai goIFN-αde fen zi zhi liang yao wei 18 ku,ju you liang hao de fan ying yuan xing ;hui shou xie qing jin hang Western-blotjian ce ,shu kang goIFN-αxie qing zhi bei cheng gong 。shui ming chong zu goIFN-αdan bai neng gou zai da chang gan jun zhong biao da ,da xiao fu ge yu ji ju ju you liang hao de fan ying yuan xing ,bing cheng gong zhi bei chu shu kang goIFN-αxie qing 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自黑龙江畜牧兽医的周游,杨文涛,黄科谚,晋玉北,冯博,石春卫,黄海滨,王建忠,姜延龙,康元环,杨桂连,王春凤,发表于刊物黑龙江畜牧兽医2019年19期论文,是一篇关于基因工程论文,干扰素论文,基因克隆论文,原核表达论文,多克隆抗体论文,黑龙江畜牧兽医2019年19期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自黑龙江畜牧兽医2019年19期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
标签:基因工程论文; 干扰素论文; 基因克隆论文; 原核表达论文; 多克隆抗体论文; 黑龙江畜牧兽医2019年19期论文;