导读:本文包含了羧基转移酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:水杨酸羧基甲基转移酶,功能验证,白茶,萎凋
羧基转移酶论文文献综述
王荣秀[1]（2018）在《茶树水杨酸羧基甲基转移酶（CsSAMT）基因的克隆及功能特性》一文中研究指出水杨酸甲酯(MeSA)是广泛存在于食物、饮料和药剂中的一种特殊香料,它是一种有机酯类,可以释放花香类挥发性有机化合物(VOCs)。这些有机化合物存在于许多植物中,尤其是在冬青植物,在植物防御机制中饰演着重要的角色。茶是世界上最受欢迎的饮品之一,由于不同的茶树品种、萎凋时间和揉捻程度,不同茶类的香气有很大的区别。这些VOCs在茶叶中的含量虽然很少,但是对茶叶的香气和品质起着至关重要的作用。MeSA是赋予茶叶高品质的茶叶香气和滋味重要的化合物之一。前期研究表明,相对于其他茶类,白茶含有较高含量的MeSA。本文以白茶萎凋过程中香气化合物水杨酸甲酯的变化作为启发点,研究鉴定了茶树中催化MeSA合成的一个新的SAMT(水杨酸羧基甲基转移酶)基因CsSAMT。从茶树叶片cDNA中成功克隆、并使用大肠杆菌和酿酒酵母对CsSAMT酶活力进行验证,同时通过生物信息学分析、亚细胞定位、启动子克隆、DNA全长分析、荧光实时定量等对CsSAMT功能和表达特征进行研究。研究结果对茶叶香气的形成、优化和调控赋予了新的认识,对提高白茶的香气品质具有积极意义。主要研究结果如下:(1)通过SDE和GC-MS方法对白茶萎凋过程中MeSA含量进行检测,实验表明MeSA在白茶萎凋过程中随萎凋时间的延长呈现线性增长趋势。其中萎凋时间为6 h、12h、24 h和36 h时MeSA的含量逐步稳定上升,在72 h时,样品中MeSA的含量突然急剧增加是36 h茶叶样品的2.5倍。(2)通过RT-PCR方法从茶树叶片cDNA中克隆得到一段开放阅读框长度为1104 bp的序列,通过生物信息学比对后,命名为CsSAMT(GenBank:No.MG459470),该序列编码367个氨基酸,理论蛋白分子量和等电点为41297.38Da和5.224,GC含量为43.03%;系统发育树分析显示CsSAMT与其他植物SAMTs同源性在42%–100%之间,与山茶的SAMT同源性最高。经原核表达及真核表达后,对重组蛋白CsSAMT进行酶促反应,通过GC-MS进行产物检测表明CsSAMT能够催化水杨酸(SA)生成MeSA,且该蛋白具有较强的底物特异性。(3)运用Gateway方法构建含有加强型荧光报告基因(EGFP)重组载体CsSAMT,导入农杆菌,将其注射入烟草叶片中进行瞬时表达,通过激光共聚焦显微镜观察表明CsSAMT定位于叶绿体。(4)从茶树叶片基因组中克隆得到6342 bp的CsSAMT的DNA序列,经过分析发现该基因全长含有四个外显子区和叁个内含子区,与已知的N-甲基转移酶基因家族的DNA序列结构相似。通过Genome walking方法克隆得到2012 bp的CsSAMT的启动子片段,通过PlantCARE在线软件分析后表明该DNA序列具有启动子的基本转录元件并含有一些特殊的顺式元件,影响并调节CsSAMT基因的转录。(5)CsSAMT荧光定量PCR分析表明该基因在幼嫩叶片中表达量较高,芽和第一叶的表达量大致相同,第二叶表达量最高,而茎和根中表达量较低(以老叶的表达量为对照)。第二叶的表达量约是芽和第一叶的1.5倍,约是茎和根的4倍和8倍。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2018-06-01）
白晓晶,许兰珍,贾瑞瑞,周鹏飞,陈敏[2]（2017）在《柑橘黄龙病相关水杨酸羧基甲基转移酶基因CsSAMT-1的克隆与表达分析》一文中研究指出为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT~(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病锦橙中CsSAMT~(-1)在感染HLB后上调表达,且在叶脉中的表达量显着高于叶肉;而耐病酸柚中CsSAMT~(-1)呈组成型表达。外源水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理锦橙和酸柚,均可诱导CsSAMT~(-1)上调表达。HLB侵染前,耐病酸柚叶脉中SA和水杨酸甲酯(MeSA)含量分别为11.85和18.18 ng·g~(-1),显着高于锦橙(0.82和0.01 ng·g~(-1));HLB侵染后,锦橙中SA和MeSA含量明显上升,酸柚中SA含量明显下降,MeSA含量基本保持原有水平。研究表明,Cs SAMT~(-1)可能通过调节SA和Me SA信号分子转换来增强对柑橘黄龙病的抗性。(本文来源于《园艺学报》期刊2017年12期）
杨艺,张富春[3]（2015）在《棉花茉莉酸羧基甲基转移酶基因克隆及其表达分析》一文中研究指出根据亚洲棉石系亚1号的转录组测序结果,克隆获得陆地棉品种"新陆早17号"的茉莉酸羧基甲基转移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT)全长cDNA,命名为GhJMT(GenBank登录号KJ856913)。序列分析表明,GhJMT基因开放阅读框为1 116bp,编码371个氨基酸。保守结构域分析显示,该基因编码的蛋白具有甲基转移酶-7保守结构域。系统进化树分析显示,GhJMT与可可的茉莉酸甲基转移酶在同一分支,可能定位于细胞质,为不稳定亲水性蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,2.5%PEG6000胁迫处理12h时,根中GhJMT基因的表达迅速上调并达到最大值,约为对照的2.6倍,在茎中GhJMT的表达量在9h达到最高,约为对照的2.3倍,而在叶中GhJMT表达量在3h达到最高,约为对照组的2.1倍,说明GhJMT基因表达受干旱胁迫的诱导。研究结果有助于阐明GhJMT基因表达与植物抗旱的相关性。(本文来源于《西北农业学报》期刊2015年08期）
羡明杰,翟磊,仲乃琴,马祎玮,薛燕芬[4]（2013）在《嗜碱单胞菌的新型羧基转移酶α亚基基因Aa-accA及其抗盐碱性能》一文中研究指出【目的】探讨解淀粉嗜碱单胞菌(Alkalimonas amylolytica)N10来源的羧基转移酶α亚基(Acetyl-coenzyme A carboxylase subunit alpha,AccA)基因Aa-accA对细菌及植物细胞耐盐碱性的作用。【方法】通过PCR方法从嗜碱菌N10基因组中扩增基因Aa-accA,并在大肠杆菌(Escherichia coli)K12中表达,通过测定工程菌及对照菌在不同盐浓度[0%,2%,4%,6%(W/V)NaCl]及不同碱性pH(8.0,8.5,9.0,9.5)的LB中生长12 h后的OD600值,以及二者在分别含6%(W/V)NaCl及pH 9的LB中的生长曲线,评价Aa-accA对大肠杆菌耐盐碱性的影响。同时以pPZP111为载体,构建了植物细胞重组表达载体,通过农杆菌介导方法将该基因转入烟草BY-2悬浮细胞表达,利用FDA染色方法测定经盐碱溶液处理后残存的活细胞数量评价该基因对植物细胞耐盐碱性的影响。【结果】PCR扩增得到基因Aa-accA,其ORF含957 bp,编码318个氨基酸的多肽,BLAST比对显示该基因为羧基转移酶α亚基(AccA)家族中的成员,其氨基酸序列与E.coli的AccA具有76%同源性;含有Aa-accA的E.coli K12相较于对照组在不同NaCl浓度及不同碱性pH的LB中表现出了明显的生长优势,特别是在6%(W/V)NaCl及pH 9的LB中培养12 h后,终OD600分别是对照菌的2.6倍和3.5倍;缺失体实验结果显示基因缺失的突变体E.coli K12ΔaccA在6%(W/V)NaCl及pH 9的LB中不能正常生长,而含有Aa-accA基因的重组质粒使得E.coli K12ΔaccA在同样条件下OD600值达到0.5和0.2;转入此基因的烟草BY-2细胞,经盐碱溶液处理后,其存活细胞比例高于野生型。【结论】本研究首次发现了Aa-accA基因与盐碱性的相关性,可提高大肠杆菌及烟草BY-2细胞的耐盐碱能力。(本文来源于《微生物学报》期刊2013年08期）
M.R.KARIM,F.HASHINAGA[5]（2010）在《羧基和咪唑基团在柚柠檬苦素类化合物糖基转移酶催化反应中的作用(英文)》一文中研究指出Limonoid bitterness is a serious problem in the citrus industry worldwide. Limonoid glucosyltransferase is an enzyme that catalyzes the conversion of bitter limonoid into non-bitter limonoid glucoside while retaining the health benefit of limonoids in the juice. The immobilization of this enzyme in a column can solve the juice bitterness problem. More information about the catalytic residues of the enzyme is needed in this immobilization process. Glutamate/aspartate,histidine,lysine,tryptophan,serine,and cysteine residues were chemi-cally modified to investigate their roles in the catalytic function of limonoid glucosyltransferase. Inactivation of the enzyme following modi-fication of carboxyl and imidazole moieties was a consequence of a loss in substrate binding and catalysis in the glucosyltransfer reaction. The modification of a single histidine residue completely destroyed the ability of limonoid glucosyltransferase to transfer the D-glucopyranosyl unit. Tryptophan seemed to have some role in maintaining the active conformation of the catalytic site. Lysine also seemed to have some direct or indirect role in this catalysis but the modification of serine and cysteine did not have any effect on catalysis. Therefore,we conclude that the carboxyl and imidazole groups containing amino acids are responsible for the catalytic action of the enzyme.(本文来源于《催化学报》期刊2010年12期）
陶进[6]（2010）在《乙酰辅酶A羧化酶的羧基转移酶功能域的理论计算研究》一文中研究指出乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)是一类与脂肪酸代谢有关的重要的酶。其羧基转移酶(CT)功能域作为有效的除草剂抑制靶标和潜在的疾病治疗靶标近年来一直是人们研究的热点。本论文以禾本科植物叶绿体中ACCase酶的CT功能域为研究对象,通过理论计算在能量和分子水平上就CT功能域对芳氧苯氧丙酸类(APPs)除草剂的对映体选择性以及CT功能域天然突变体的除草剂抗性进行了深入的研究,并建立了研究CT功能域与抑制剂作用的新模型。我们首先针对因活性CT二聚体分子过大而造成分子动力学模拟计算量巨大、计算极其耗时的特点,结合文献以及分子动力学模拟对CT二聚体的分子体系以及分子动力学模拟的参数条件进行了优化,确定了一个高时间效率的截短型CT二聚体模型和最佳分子动力学模拟参数条件,并将其应用到随后展开的研究工作中。我们通过同源模建的方法分别成功地构建出黑草(Alopecurus myosurodies) CT二聚体的叁维结构,其与haloxyfop(一类APPs类除草剂)的R型或S型对映体的复合物的叁维结构;并通过分子动力学模拟和MM-PBSA自由能计算的方法计算出两种对映体的结合自由能并对其组成进行讨论,随后更进一步分析了结合自由能差值的组成,以及活性中心部位的各个氨基酸残基对其的贡献;在能量和结构的观点上解释了为什么以haloxyfop为代表的APPs类除草剂的R型对映体的抑制活性高于其S型对映体,并对已报道的其它解释进行了分析。我们还分别构建出黑草和黑麦草(Lolium rigidum)的野生型及Ile/Leu天然突变型的CT与(R)-haloxyfop的复合物叁维结构,用类似的方法计算并分析了R型haloxyfop与野生型和突变型CT的结合自由能的差值,同样在能量和分子水平上解释了为什么多种不同的禾本科植物CT的Ile/Leu型突变体均会对以haloxyfop为代表的APPs类除草剂产生抗性。(本文来源于《吉林大学》期刊2010-06-01）
张婷婷,杨春贤,王宏哲,廖志华[7]（2009）在《茉莉酸羧基甲基转移酶基因的克隆及其高效表达载体的构建》一文中研究指出以拟南芥花为材料,应用RT-PCR方法克隆拟南芥茉莉酸甲酯合成途径中重要的限速酶——茉莉酸羧基甲基转移酶基因,并进行生物信息学分析,以pCAMBIA1304+为基本载体构建其植物高效表达载体pCAM-BIA1304+-AtJMT.克隆到的AtJMT编码区序列为1 170 bp,编码389个氨基酸的多肽.生物信息学分析该蛋白理论分子量为43.37 kD,等电点为5.18.叁级结构预测表明其具有典型的羧基甲基转移酶蛋白功能域甲基供体的结合位点,蛋白质叁维模型具有典型的甲基转移酶的蛋白立体结构.获得的工程菌可用于遗传转化长春花等,为萜类吲哚生物碱代谢工程新型策略奠定基础.(本文来源于《西南大学学报(自然科学版)》期刊2009年06期）
武玉永,马立新,蒋思婧[8]（2004）在《甘蓝型油菜羧基转移酶α亚基全长cDNA的克隆及在大肠杆菌中表达》一文中研究指出通过分析拟南芥与大豆的羧基转移酶α亚基的cDNA序列,运用RT PCR、RACE和基因组步行(Genomewalking)叁种技术进行组合克隆,首次从油菜开花后 2 0～ 2 9天的幼胚中,克隆到质体定位的羧基转移酶α亚基的全长cDNA.同源性分析表明,其开放阅读框(ORF)编码的氨基酸序列与拟南芥、大豆的羧基转移酶α亚基的同源性分别为 85 %、5 9%.将此cDNA去除叶绿体转运肽编码序列的成熟肽编码序列,克隆到表达载体pHBM6 2 5上,蛋白质印迹分析,它在大肠杆菌中成功表达(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2004年09期）
万升标,褚凤鸣,郭宗儒[9]（2002）在《7-(咪唑-4-烷基酰胺基) -1,3-二氢-1-羧基烷基-5 -苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮——一类新的法呢基蛋白转移酶抑制剂(英文)》一文中研究指出目的 设计并合成新结构类型的法呢基蛋白转移酶抑制剂。方法 本文结合法呢基蛋白转移酶(FTase)的作用机理和已有FTase抑制剂结构特征 ,设计了一类以苯并二氮杂为分子骨架 ,一端连接有可与锌离子配位结合的咪唑基 ,另一端连接不同长度的末端含羧基的侧链的化合物。此类化合物模拟了FTase配体之一CAAX四肽片段 ,共合成 10个此类新化合物 (6～ 12 ,16～ 18) ,并对其进行体外生物活性测定。结果所有新目的化合物均经1HNMR和HRMS方法确证结构。结论 对FTase抑制活性测定结果表明其中 5个化合物 (9,10 ,16～ 18)有较强的抑制活性。(本文来源于《药学学报》期刊2002年07期）
廖福荣[10]（1999）在《菜油对弗氏链霉菌甲基丙二酰CoA羧基转移酶活性的影响》一文中研究指出大环内酯类抗生素泰洛星(tylosin)在养猪业上用作生长促进剂,并作为兽药用于治疗由革兰氏阳性菌和枝原体所引起的感染.对泰洛星的生物合成及其调节已研究多年.最近有关泰洛星生物合成途径的发现,使研究该途径所包含的酶以及任何可提高泰洛星产量的信息成为可能.泰洛星具有16元分支的内酯环,其生物合成需要3种前体:5个丙酸,2个乙酸,和1个丁(本文来源于《国外医药(抗生素分册)》期刊1999年05期）
羧基转移酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT~(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病锦橙中CsSAMT~(-1)在感染HLB后上调表达,且在叶脉中的表达量显着高于叶肉;而耐病酸柚中CsSAMT~(-1)呈组成型表达。外源水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理锦橙和酸柚,均可诱导CsSAMT~(-1)上调表达。HLB侵染前,耐病酸柚叶脉中SA和水杨酸甲酯(MeSA)含量分别为11.85和18.18 ng·g~(-1),显着高于锦橙(0.82和0.01 ng·g~(-1));HLB侵染后,锦橙中SA和MeSA含量明显上升,酸柚中SA含量明显下降,MeSA含量基本保持原有水平。研究表明,Cs SAMT~(-1)可能通过调节SA和Me SA信号分子转换来增强对柑橘黄龙病的抗性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
羧基转移酶论文参考文献
[1].王荣秀.茶树水杨酸羧基甲基转移酶（CsSAMT）基因的克隆及功能特性[D].安徽农业大学.2018
[2].白晓晶,许兰珍,贾瑞瑞,周鹏飞,陈敏.柑橘黄龙病相关水杨酸羧基甲基转移酶基因CsSAMT-1的克隆与表达分析[J].园艺学报.2017
[3].杨艺,张富春.棉花茉莉酸羧基甲基转移酶基因克隆及其表达分析[J].西北农业学报.2015
[4].羡明杰,翟磊,仲乃琴,马祎玮,薛燕芬.嗜碱单胞菌的新型羧基转移酶α亚基基因Aa-accA及其抗盐碱性能[J].微生物学报.2013
[5].M.R.KARIM,F.HASHINAGA.羧基和咪唑基团在柚柠檬苦素类化合物糖基转移酶催化反应中的作用(英文)[J].催化学报.2010
[6].陶进.乙酰辅酶A羧化酶的羧基转移酶功能域的理论计算研究[D].吉林大学.2010
[7].张婷婷,杨春贤,王宏哲,廖志华.茉莉酸羧基甲基转移酶基因的克隆及其高效表达载体的构建[J].西南大学学报(自然科学版).2009
[8].武玉永,马立新,蒋思婧.甘蓝型油菜羧基转移酶α亚基全长cDNA的克隆及在大肠杆菌中表达[J].生物化学与生物物理进展.2004
[9].万升标,褚凤鸣,郭宗儒.7-(咪唑-4-烷基酰胺基)-1,3-二氢-1-羧基烷基-5-苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮——一类新的法呢基蛋白转移酶抑制剂(英文)[J].药学学报.2002
[10].廖福荣.菜油对弗氏链霉菌甲基丙二酰CoA羧基转移酶活性的影响[J].国外医药(抗生素分册).1999
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