导读:本文包含了密度梯度离心法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:密度梯度离心法,浓缩白细胞悬液,单个核细胞
密度梯度离心法论文文献综述
王富英,廖群艳[1]（2019）在《密度梯度离心法分离单采浓缩白细胞悬液中单个核细胞方法探讨》一文中研究指出目的:对密度梯度离心法分离单采浓缩白细胞悬液中单个核细胞的方法进行优化,以提高该方法分离单个核细胞的收率。方法:单采浓缩白细胞悬液40份,每份10mL,分为常规组和优化组,每组20份。常规组,单采浓缩白细胞悬液与NS 1∶1混合稀释后,直接通过Ficoll分离液分离单个核细胞;优化组,先将单采浓缩白细胞悬液洗涤一次,加入等量NS充分吹打混匀,保持细胞悬液和Ficoll分离液1∶1的体积比进行分离操作。结果:常规组,分离后的白膜层有11份界面不清晰;优化组,分离后的白膜层有1份界面不清晰。两组比较优化组优于常规组(P<0.01)。结论:通过对密度梯度离心法的步骤进行优化,可提高单采浓缩白细胞悬液中单个核细胞的收率。(本文来源于《广东职业技术教育与研究》期刊2019年05期）
梁嘉颖,郑毅春,张杰,黄志承,张曦倩[2]（2019）在《应用单层和双层密度梯度离心法处理男性不育症患者精液效果对比》一文中研究指出目的评价单层和双层密度梯度离心法处理男性不育症患者精液并行宫腔内人工授精(artificial insemination with husband′s sperm,AIH-IUI)的应用效果。方法连续收集在本中心施行IUI手术的男方精液标本500份,随机采用70%单层法(正常精子45份、轻度少精子症90份、轻度弱精子症90份)或90%+45%双层法(正常精子55份、轻度少精子症110份、轻度弱精子症110份)进行密度梯度离心,优选前后均进行精子质量和功能检测,并随访妊娠结局。结果经单层法优选后,正常精子组前向运动精子百分率(PR)和PR精子回收率低于双层法,轻度少精子症组精子总活力[PR+非前向运动镜子百分率(NP)]和PR+NP精子回收率高于双层法(均P <0.05);轻度弱精子症组经两种方法优选后,PR和PR+NP精子回收率高于正常精子组和轻度少精子症组(P <0.05);3组精液经两种方法优选后,正常形态精子百分率、诱发顶体反应(AR)率、DNA碎片化指数(DFI)、精子成熟度和精液白细胞浓度与处理前差异均有统计学意义(P <0.05);研究时间段内采用来曲唑(LE)促排方案的334个周期临床妊娠率,单层法68周期,正常精子15.38%,轻度少精子症14.81%,轻度弱精子症17.86%;双层法266周期,正常精子13.21%,轻度少精子症14.15%,轻度弱精子症15.89%(均P> 0.05)。结论单层和双层密度梯度离心法均能筛选较高质量的精子,应根据不同病因患者的精液情况选用合适的优选方法。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2019年20期）
杨乙,刘秀菊,张丽珍,李晓红,邹华华[3]（2019）在《密度梯度离心法联合上游法处理精液对精子功能的影响》一文中研究指出目的分析密度梯度离心法联合上游法处理精液对精子功能的影响。方法 200份精液标本作为研究材料,根据材料编号不同随机分为对照组与实验组,各100份。对照组使用密度梯度离心法进行精液处理检测,实验组使用密度梯度离心法联合上游法进行精液处理检测,比较两种检测方法对精子功能的影响。结果实验组样本存活率、活力以及形态均显着优于对照组,精子DNA碎片率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组样本精子DNA碎片指数(DFI)、高可染性精子指数(HDS)水平分别为(22.57±4.46)%、(13.89±2.24)%,均明显优于对照组的(13.21±3.18)%、(8.12±2.59)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论密度梯度离心法联合上游法具有较好的精液处理能力,有利于提高精子的存活率,且不会造成精子DNA损伤,在精液处理中发挥出了较好的应用及推广价值。(本文来源于《中国实用医药》期刊2019年12期）
罗靖莹,贺宏丽,郭阳,黄玮玮,黄晓波[4]（2019）在《差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞外泌体提取中的应用对比观察》一文中研究指出目的观察差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体提取中的应用,筛选外泌体最佳离心提取方法。方法取BMSCs培养48 h后收集细胞上清,平均分成A、B、C组,分别使用差速离心技术、密度梯度离心技术、超滤离心技术提取外泌体;记录各组外泌体提取时间;采用负染色技术观察各组外泌体形态;使用纳米颗粒跟踪分析仪测算各组外泌体浓度及大小;采用BCA法测定外泌体总蛋白浓度;采用Western blotting法检测各组外泌体表面标志蛋白CD9、CD63、Alix。将肺微血管内皮细胞(PMVECs)分成5组,EC组上室加入PMVECs及培养基; LPS组上室加入PMVECs及含LPS的培养基(构建内皮细胞损伤模型); A、B、C组上室加入方法同LPS组,下室分别加入A、B、C组外泌体;采用葡聚糖渗漏实验检测外泌体内皮细胞通透性(观察外泌体对内皮细胞的修复作用),以内皮细胞通透指数表示。结果 A、B、C组的外泌体的提取时间分别为(180±8)、(203±10)、(40±5) min,A、B组外泌体的提取时间与C组相比,P均<0. 05。各组外泌体均为大小不等的椭圆形或圆形的膜性结构,边界清晰,但仅A组外泌体可见到典型的杯状结构。A、B、C组的外泌体浓度分别为(4. 46±0. 38)×108/m L、(5. 11±0. 16)×108/m L、(2. 18±0. 17)×108/m L,A、B组与C组外泌体浓度相比,P均<0. 05。A、B、C组的外泌体大小均为20～100 nm。A、B组外泌体总蛋白浓度及CD63、Alix的相对表达量均显着高于C组(P均<0. 05)。A、B、C、LPS、EC组的内皮细胞通透指数分别为2. 17±0. 15、1. 77±0. 32、2. 37±0. 42、2. 93±0. 15、1. 00±0. 00,A、B、C、LPS组的内皮细胞通透指数与EC组相比,P均<0. 05; A、B组的内皮细胞通透指数与LPS组相比,P均<0. 05。结论密度梯度离心技术虽耗时较长,但提取的外泌体纯度、浓度较高,对内皮细胞的修复作用较强,可以作为科研和临床研究的首选外泌体离心提取方法。(本文来源于《山东医药》期刊2019年12期）
傅蓉蓉,李钫,杨丰[5]（2019）在《Percoll不连续密度梯度离心法分离红螯光壳螯虾血细胞》一文中研究指出建立了利用Percoll不连续密度梯度离心分离红螯光壳螯虾血细胞的方法,并对配制分离体系的缓冲液以及分离体系的密度组成进行了优化。结果显示,由20%、65%和100%的Percoll组成的分离体系分离效果最优。在转速为1 810 r/min的条件下离心20 min之后,可将红螯光壳螯虾血细胞分为SGC与GC 2个细胞层。经流式细胞术分析,发现细胞层纯度均在95%以上,细胞死亡比率低于1.5%,可用于后续的细胞功能分析。此方法简单有效,为后续研究螯虾的免疫防御机制及病害防治方法奠定了基础。(本文来源于《水产学报》期刊2019年04期）
谭秀飞,张洪麟,廉征宇,孙德印,李末[6]（2019）在《非连续密度梯度离心法不同离心力对精子DNA完整性的影响》一文中研究指出目的研究非连续梯度离心处理精液时不同离心力对精子活力、存活率、浓度、形态、DNA完整性的影响。方法搜集2016年6月至2017年6月共100例精液质量正常的不育症志愿者精液样本,充分充分混匀后取4mL均分4份,1份作为对照组,其它3份作为处理组,分别使用300×g、400×g、500×g离心力进行非连续密度梯度离心,检测处理前后每组精液浓度、前向运动精子百分率、正常形态率以及精子DNA碎片率,计算每组的前向运动精子回收率。结果离心后3个处理组与对照组在前向运动精子百分比、正常形态率、存活率方面无差异(P>0.05),精子DNA碎片化指数(DFI)在离心力300×g和400×g组明显低于原液组(P<0.05),500×g组DFI与对照组未见统计学差异,前向运动精子回收率在3个处理组之间无显着差异。结论精液处理时使用离心力300×g或400×g可在保证前向运动精子回收率的情况下有效提升样本的DNA完整性,提高辅助生殖的成功率。(本文来源于《中国男科学杂志》期刊2019年01期）
隋玉杰,李凌云,吴飞,杜珍武,杨麒巍[7]（2018）在《叁种常用的密度梯度离心方法富集有核红细胞的比较》一文中研究指出目的探讨富集母血中胎儿有核红细胞的适宜密度梯度离心方法。方法对10例脐血分别用Percoll 1090单密度梯度离法、Percoll 1075与Percoll 1090双密度梯度离心法、Ficoll 1077单密度梯度离心法3种方法进行有核红细胞的分离,然后用适宜的密度梯度离心法分离12例10 mL母血中的胎儿有核红细胞。结果 (1)Percoll 1090单密度梯度离法每mL脐血富集(70. 58±5. 67)×10~4个有核红细胞;Percoll 1075与Percoll 1090双密度梯度离心法每mL脐血富集(23. 62±1. 90)×10~4个有核红细胞; Ficoll1077单密度梯度离心法每mL脐血富集(4. 53±0. 26)×10~4个有核红细胞。(2)采用Percoll 1090单密度梯度离法从12例10 mL母血中富集到的平均有核红细胞数为12. 9±5. 4个。结论 Percoll 1090单密度梯度分离法可有效增加脐血中有核红细胞的分离数量,并从孕妇外周血中成功富集到胎儿有核红细胞。(本文来源于《中国体视学与图像分析》期刊2018年03期）
吕翠,冯金红,侯召华,魏云波,韩婷婷[8]（2018）在《Percoll密度梯度离心法分离中枢神经系统组织中的单个核细胞》一文中研究指出目的建立快速分离小鼠中枢神经系统(CNS)组织中单个核细胞的方法。方法以正常C57BL/6小鼠、实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和阿尔茨海默病(AD)模型小鼠为研究对象,通过70%~30%Percoll密度梯度离心法,获取小鼠脑组织和脊髓中单个核细胞,利用台盼蓝染色检测细胞存活率后,通过流式细胞术进一步分析细胞的表型特点。结果分离得到的单个核细胞存活率在90%以上;流式细胞术分析结果表明,EAE和AD小鼠中浸润到CNS的淋巴细胞群比例明显升高,且介导炎症反应的Th1和Th17细胞亚群比例明显升高,而具有免疫调节作用的Treg细胞亚群比例明显下降。结论采用70%~30%Percoll密度梯度离心法从小鼠CNS中分离的单个核细胞存活率高,细胞活性不受分离过程的影响,可进一步利用流式细胞术分析细胞的表型特征。此方法操作简单快速,适用于对CNS淋巴细胞等单个核细胞的分析。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2018年07期）
高顺平,吴国华,颜新敏,赵志荀,张强[9]（2018）在《蔗糖密度梯度离心技术纯化山羊痘病毒的研究》一文中研究指出为了提纯细胞培养物中的山羊痘病毒(Goat pox virus,GTPV),试验采用低速离心法去除大部分细胞碎片,之后加入聚乙二醇6000(PEG6000)沉淀病毒,用蔗糖密度梯度离心技术进行纯化,然后用双抗体夹心ELISA和电镜观察法对纯化的病毒进行检测。结果表明:病毒得到有效富集,电镜观察可见完整病毒颗粒且背景清晰。说明蔗糖密度梯度离心技术可以有效纯化细胞培养物中的GTPV,且能保留其免疫原性。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年11期）
齐安生,宫枫举,刘爽,凌红丽,张兴进[10]（2018）在《丁达尔效应定位伪狂犬病病毒密度梯度离心区带》一文中研究指出在病毒密度梯度离心纯化过程中,利用光对不同大小粒子发生散射的强弱,即丁达尔效应,定位超速离心后形成的离心区带;以伪狂犬病毒为研究对象,以不连续梯度蔗糖为介质,超速离心后,通过光束对离心区带生的丁达尔效应进行精确分层取样,并对处理后的离心区带样品分别进行透射电镜观察,发现区带3中存在大量符合伪狂犬病病毒形态学特征的病毒颗粒。本研究将光学物理现象与经典病毒纯化方法相结合,大大提高了病毒纯化成功率,对密度梯度离心法提纯各种病毒或者蛋白的实验操作均有指导意义。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2018年04期）
密度梯度离心法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的评价单层和双层密度梯度离心法处理男性不育症患者精液并行宫腔内人工授精(artificial insemination with husband′s sperm,AIH-IUI)的应用效果。方法连续收集在本中心施行IUI手术的男方精液标本500份,随机采用70%单层法(正常精子45份、轻度少精子症90份、轻度弱精子症90份)或90%+45%双层法(正常精子55份、轻度少精子症110份、轻度弱精子症110份)进行密度梯度离心,优选前后均进行精子质量和功能检测,并随访妊娠结局。结果经单层法优选后,正常精子组前向运动精子百分率(PR)和PR精子回收率低于双层法,轻度少精子症组精子总活力[PR+非前向运动镜子百分率(NP)]和PR+NP精子回收率高于双层法(均P <0.05);轻度弱精子症组经两种方法优选后,PR和PR+NP精子回收率高于正常精子组和轻度少精子症组(P <0.05);3组精液经两种方法优选后,正常形态精子百分率、诱发顶体反应(AR)率、DNA碎片化指数(DFI)、精子成熟度和精液白细胞浓度与处理前差异均有统计学意义(P <0.05);研究时间段内采用来曲唑(LE)促排方案的334个周期临床妊娠率,单层法68周期,正常精子15.38%,轻度少精子症14.81%,轻度弱精子症17.86%;双层法266周期,正常精子13.21%,轻度少精子症14.15%,轻度弱精子症15.89%(均P> 0.05)。结论单层和双层密度梯度离心法均能筛选较高质量的精子,应根据不同病因患者的精液情况选用合适的优选方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
密度梯度离心法论文参考文献
[1].王富英,廖群艳.密度梯度离心法分离单采浓缩白细胞悬液中单个核细胞方法探讨[J].广东职业技术教育与研究.2019
[2].梁嘉颖,郑毅春,张杰,黄志承,张曦倩.应用单层和双层密度梯度离心法处理男性不育症患者精液效果对比[J].实用医学杂志.2019
[3].杨乙,刘秀菊,张丽珍,李晓红,邹华华.密度梯度离心法联合上游法处理精液对精子功能的影响[J].中国实用医药.2019
[4].罗靖莹,贺宏丽,郭阳,黄玮玮,黄晓波.差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞外泌体提取中的应用对比观察[J].山东医药.2019
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[9].高顺平,吴国华,颜新敏,赵志荀,张强.蔗糖密度梯度离心技术纯化山羊痘病毒的研究[J].黑龙江畜牧兽医.2018
[10].齐安生,宫枫举,刘爽,凌红丽,张兴进.丁达尔效应定位伪狂犬病病毒密度梯度离心区带[J].中国动物检疫.2018