本文主要研究内容
作者胡万盛（2019）在《三维培养高传代脂肪干细胞与内皮集落形成细胞治疗慢性放射性溃疡的实验研究》一文中研究指出：背景和目的:干细胞是体内一种可以自我增殖、多向分化以及具有强大的旁分泌功能的细胞。而脂肪干细胞因其大量体内脂肪组织来源,其强大的自我增殖及旁分泌能力可应用于临床,治疗多种疾病,例如糖尿病足的难愈性创面[1]。但干细胞经过体外的培养扩增过程中,细胞会出现衰老,形态会发生改变,其增殖分化潜能会明显的降低,并且细胞更容受到外界的环境影响而死亡[2]。这无疑大大影响了细胞的治疗效果。对于提升干细胞治疗潜能的方法有很多,例如人工支架材料[3]、异种生物材料[4]等。这些方法都不可避免的引入了外来材料,或者加入可能对机体有害的化学试剂[5]。本身存在相对更高的治疗成本,更是引入了相对潜在的危险因素,可能对机体造成损害。根据研究团队成员之前的实验发现可以知道,本身存在于细胞外基质中的成分透明质酸可以用于三维的细胞培养[6]。其具有非常安全的生物性能。通过三维培养微球的方式可以增加干细胞的干细胞潜能,细胞的干细胞标志物明显发生上调,细胞存活率大大增加[7],其增殖分化旁分泌功能得到明显提升。同时来自于外周血中的内皮细胞集落形成细胞,其具有非常强的自我增殖潜能。其中高增值潜能的内皮细胞集落形成细胞单个细胞具有集落形成能力。其与脂肪干细胞存在相互作用。一方面可以增加其干细胞潜能。另一方面可以增加脂肪干细胞的存活[8]。本实验的目的在于通过利用透明质酸三维培养经过反复传代后的衰老脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞构建三维空间结构,从而增加脂肪干细胞的干细胞潜能,减少其在体内过快死亡,增加对疾病的治疗效果。实验方法:1、获取经过反复传代的衰老脂肪干细胞常规用直径3.5mm多侧孔吸脂针对健康女性病人腹部脂肪进行抽脂。将获取的脂肪注入血袋中,在冰水混合物中静置直至血水与上层脂肪明显分层。放出下层血水,留置上层脂肪分装于50ml离心管至一半。加入25ml磷酸缓冲盐溶液到离心管中,充分摇匀后离心机1200g离心3分钟。弃去下层液体,保留中层的脂肪,倒除上层过多的油滴。配置0.075%胶原酶I溶液消化脂肪组织,放置在37度水浴摇床30分钟。用全培中和胶原酶I,离心后去上层油滴和未消化完的脂肪组织,取下层细胞团接种于培养皿上。反复培养至第八代(即为是衰老脂肪干细胞)。2、获取内皮细胞集落形成细胞抽取健康女性外周血20毫升,1:1混合磷酸盐溶液后加入淋巴细胞分离液。低速离心30分钟。取中间白色云雾状细胞层,即血液中的单个核细胞。接种于胶原I铺板的培养皿中直至细胞集落出现。细胞个数约为2000个时传代。3、本课题实验选取的实验动物为裸鼠,自制小型圆柱形铅柱,中间留一缝隙揪出裸鼠皮肤,透明胶带固定。麻醉裸鼠后固定在放射源下,辐照15格雷。静待一个月使裸鼠皮肤发生慢性纤维化,此时用剪出剪出一个7mm的全层皮肤创面。用三维培养后的细胞与对照组治疗创面。对照组划分为:第八代脂肪干细胞、三维培养第八代脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞、内皮细胞集落形成细胞。4、实验结果三维培养内皮细胞集落形成细胞和脂肪干细胞的组出现类似于血管结构的空间结构,尝试单纯用第八代的脂肪干细胞三维培养存在大量无法形成空间结构的单个细胞,其漂浮于透明质酸中发生死亡。随着创面治疗时间的推移,所有的实验组和对照组创面都趋于愈合。然而,三维培养内皮细胞集落形成细胞和脂肪干细胞的组治疗效果最佳,其余三组之间无明显差异。三维培养组能更好的组织中存活下来,并且参与组成血管结构,而单纯脂肪干细胞组在宿主体内大量被代谢掉仅少量残存在间质中,也未能参与机体组织结构组成。组织的再生情况也明显不如三维培养组。
Abstract
bei jing he mu de :gan xi bao shi ti nei yi chong ke yi zi wo zeng shi 、duo xiang fen hua yi ji ju you jiang da de pang fen bi gong neng de xi bao 。er zhi fang gan xi bao yin ji da liang ti nei zhi fang zu zhi lai yuan ,ji jiang da de zi wo zeng shi ji pang fen bi neng li ke ying yong yu lin chuang ,zhi liao duo chong ji bing ,li ru tang niao bing zu de nan yu xing chuang mian [1]。dan gan xi bao jing guo ti wai de pei yang kuo zeng guo cheng zhong ,xi bao hui chu xian cui lao ,xing tai hui fa sheng gai bian ,ji zeng shi fen hua qian neng hui ming xian de jiang di ,bing ju xi bao geng rong shou dao wai jie de huan jing ying xiang er si wang [2]。zhe mo yi da da ying xiang le xi bao de zhi liao xiao guo 。dui yu di sheng gan xi bao zhi liao qian neng de fang fa you hen duo ,li ru ren gong zhi jia cai liao [3]、yi chong sheng wu cai liao [4]deng 。zhe xie fang fa dou bu ke bi mian de yin ru le wai lai cai liao ,huo zhe jia ru ke neng dui ji ti you hai de hua xue shi ji [5]。ben shen cun zai xiang dui geng gao de zhi liao cheng ben ,geng shi yin ru le xiang dui qian zai de wei xian yin su ,ke neng dui ji ti zao cheng sun hai 。gen ju yan jiu tuan dui cheng yuan zhi qian de shi yan fa xian ke yi zhi dao ,ben shen cun zai yu xi bao wai ji zhi zhong de cheng fen tou ming zhi suan ke yi yong yu san wei de xi bao pei yang [6]。ji ju you fei chang an quan de sheng wu xing neng 。tong guo san wei pei yang wei qiu de fang shi ke yi zeng jia gan xi bao de gan xi bao qian neng ,xi bao de gan xi bao biao zhi wu ming xian fa sheng shang diao ,xi bao cun huo lv da da zeng jia [7],ji zeng shi fen hua pang fen bi gong neng de dao ming xian di sheng 。tong shi lai zi yu wai zhou xie zhong de nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao ,ji ju you fei chang jiang de zi wo zeng shi qian neng 。ji zhong gao zeng zhi qian neng de nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao chan ge xi bao ju you ji la xing cheng neng li 。ji yu zhi fang gan xi bao cun zai xiang hu zuo yong 。yi fang mian ke yi zeng jia ji gan xi bao qian neng 。ling yi fang mian ke yi zeng jia zhi fang gan xi bao de cun huo [8]。ben shi yan de mu de zai yu tong guo li yong tou ming zhi suan san wei pei yang jing guo fan fu chuan dai hou de cui lao zhi fang gan xi bao he nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao gou jian san wei kong jian jie gou ,cong er zeng jia zhi fang gan xi bao de gan xi bao qian neng ,jian shao ji zai ti nei guo kuai si wang ,zeng jia dui ji bing de zhi liao xiao guo 。shi yan fang fa :1、huo qu jing guo fan fu chuan dai de cui lao zhi fang gan xi bao chang gui yong zhi jing 3.5mmduo ce kong xi zhi zhen dui jian kang nv xing bing ren fu bu zhi fang jin hang chou zhi 。jiang huo qu de zhi fang zhu ru xie dai zhong ,zai bing shui hun ge wu zhong jing zhi zhi zhi xie shui yu shang ceng zhi fang ming xian fen ceng 。fang chu xia ceng xie shui ,liu zhi shang ceng zhi fang fen zhuang yu 50mlli xin guan zhi yi ban 。jia ru 25mllin suan huan chong yan rong ye dao li xin guan zhong ,chong fen yao yun hou li xin ji 1200gli xin 3fen zhong 。qi qu xia ceng ye ti ,bao liu zhong ceng de zhi fang ,dao chu shang ceng guo duo de you di 。pei zhi 0.075%jiao yuan mei Irong ye xiao hua zhi fang zu zhi ,fang zhi zai 37du shui yu yao chuang 30fen zhong 。yong quan pei zhong he jiao yuan mei I,li xin hou qu shang ceng you di he wei xiao hua wan de zhi fang zu zhi ,qu xia ceng xi bao tuan jie chong yu pei yang min shang 。fan fu pei yang zhi di ba dai (ji wei shi cui lao zhi fang gan xi bao )。2、huo qu nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao chou qu jian kang nv xing wai zhou xie 20hao sheng ,1:1hun ge lin suan yan rong ye hou jia ru lin ba xi bao fen li ye 。di su li xin 30fen zhong 。qu zhong jian bai se yun wu zhuang xi bao ceng ,ji xie ye zhong de chan ge he xi bao 。jie chong yu jiao yuan Ipu ban de pei yang min zhong zhi zhi xi bao ji la chu xian 。xi bao ge shu yao wei 2000ge shi chuan dai 。3、ben ke ti shi yan shua qu de shi yan dong wu wei luo shu ,zi zhi xiao xing yuan zhu xing qian zhu ,zhong jian liu yi feng xi jiu chu luo shu pi fu ,tou ming jiao dai gu ding 。ma zui luo shu hou gu ding zai fang she yuan xia ,fu zhao 15ge lei 。jing dai yi ge yue shi luo shu pi fu fa sheng man xing qian wei hua ,ci shi yong jian chu jian chu yi ge 7mmde quan ceng pi fu chuang mian 。yong san wei pei yang hou de xi bao yu dui zhao zu zhi liao chuang mian 。dui zhao zu hua fen wei :di ba dai zhi fang gan xi bao 、san wei pei yang di ba dai zhi fang gan xi bao he nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao 、nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao 。4、shi yan jie guo san wei pei yang nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao he zhi fang gan xi bao de zu chu xian lei shi yu xie guan jie gou de kong jian jie gou ,chang shi chan chun yong di ba dai de zhi fang gan xi bao san wei pei yang cun zai da liang mo fa xing cheng kong jian jie gou de chan ge xi bao ,ji piao fu yu tou ming zhi suan zhong fa sheng si wang 。sui zhao chuang mian zhi liao shi jian de tui yi ,suo you de shi yan zu he dui zhao zu chuang mian dou qu yu yu ge 。ran er ,san wei pei yang nei pi xi bao ji la xing cheng xi bao he zhi fang gan xi bao de zu zhi liao xiao guo zui jia ,ji yu san zu zhi jian mo ming xian cha yi 。san wei pei yang zu neng geng hao de zu zhi zhong cun huo xia lai ,bing ju can yu zu cheng xie guan jie gou ,er chan chun zhi fang gan xi bao zu zai su zhu ti nei da liang bei dai xie diao jin shao liang can cun zai jian zhi zhong ,ye wei neng can yu ji ti zu zhi jie gou zu cheng 。zu zhi de zai sheng qing kuang ye ming xian bu ru san wei pei yang zu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自南方医科大学的胡万盛，发表于刊物南方医科大学2019-09-02论文，是一篇关于内皮祖细胞论文,脂肪干细胞论文,三维培养论文,干细胞潜能论文,南方医科大学2019-09-02论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自南方医科大学2019-09-02论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：内皮祖细胞论文; 脂肪干细胞论文; 三维培养论文; 干细胞潜能论文; 南方医科大学2019-09-02论文;