导读:本文包含了无毒诱变超抗原论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:金黄色葡萄球菌,GST-mTSST-1,理化因素,免疫学活性
无毒诱变超抗原论文文献综述
郭海勇,郭伟生,崔京春,钱爱东[1]（2011）在《理化因素对葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1免疫活性的影响》一文中研究指出应用免疫琼脂扩散法检测温度、pH、反复冻融、保护剂等理化因素对GST-mTSST-1融合蛋白免疫活性的影响,结果表明,在4℃30 d、20℃72 h、37℃72 h条件下,GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性不受影响,但该蛋白不耐高温,60℃5 min完全失活,耐碱不耐酸,对反复冻融有较好的稳定性,50 mg/mL蔗糖保护剂有利于提高该蛋白的免疫稳定性,为GST-mTSST-1融合蛋白规模化生产工艺的设计奠定了基础.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2011年02期）
郭海勇[2]（2005）在《葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1对小鼠免疫保护性的研究》一文中研究指出金黄色葡萄球菌是引起医院内外感染的重要病原菌,也是引起奶牛乳房炎的主要致病菌。金黄色葡萄球菌能产生多种超抗原毒素,其中TSST-1是一种分子量为22kD,含194个氨基酸残基的直链多肽的热源性超抗原,是引起奶牛乳房炎的关键致病因子。无毒诱变超抗原GST-mTSST-1(Glutathione S-transferase and Mutation Toxic Shock Syndrome Toxic 1)融合蛋白是利用基因工程定点诱变技术将TSST-1的致病碱基置换,使其失去致病性获得的融合蛋白。 本实验的目的主要是研究应用基因工程技术获得的金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性、理化特性及其诱导小鼠抗S. aureus834株感染的免疫保护效果,确定小鼠最佳免疫剂量,建立检测特异性抗毒素抗体的间接ELISA方法。这将为金黄色葡萄球菌奶牛乳房炎疫苗的研究开发奠定科学依据和理论基础。 将DH5α/pGXmTSST基因工程菌用IPTG诱导表达,经超声波粉碎、离心、收集上清再用GS4B胶亲和层析分离纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白。用纯化GST-mTSST-1融合蛋白按常规多点免疫法免疫家兔获取抗血清,经双向免疫琼脂扩散试验测定抗血清效价,鉴定GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性,研究了温度、酸碱度、反复冻融等理化因素对其免疫活性的影响,同时以SDS-PAGE和薄层凝胶扫描分析GST-mTSST-1融合蛋白的表达量和纯度。免疫攻毒保护性试验中,免疫组用不同剂量的纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白抗原加5%氢氧化铝佐剂背部皮下多点免疫昆明系小白鼠,对照组用无菌PBS加佐剂免疫。第3次免疫后用5×10~7 cfu S. aureus834鼠攻击感染,观察15d记录小鼠的存活率及检测攻毒3d后免疫组小鼠肝、脾、肾脏中的细菌数变化。并分别采集试验小鼠初次免疫后14、28、42、60、90、120d的血清,间接ELISA检测血清中特异性抗体的效价及抗体水平动态变化规律。对ELISA方法各反应条件进行优化,建立检测血清中特异性抗体的间接ELISA方法。 在宿主菌DH5α中表达出可溶性GST-mTSST-1融合蛋白,经SDS-PAGE和薄层凝胶扫描分析表达的融合蛋白占菌体总蛋白的25%,GST-mTSST-1融合蛋白的纯度达到95%,分子量为47KD与理论值一致。纯化后的GST-mTSST-1融合蛋白免疫家兔产生特异性抗体,双向琼扩试验测得抗体效价>1:32。该特异抗血清可识别天然rTSST-1蛋白中与融合蛋白GST-mTSST-1相对应的抗原组份,证实GST-mTSST-1融合蛋白具有与野生型rTSST-1相同的表面抗原决定簇。不同理化因素对GST-mTSST-1融合蛋白免疫活性的影响表明该蛋白是一种相当稳定的蛋白质,4℃30d、20℃72h、37℃72h蛋白的免疫活性不受影响,反复冻融多次也不影响其免疫活性,可耐受的pH值范围为5～11。对小鼠的(本文来源于《吉林农业大学》期刊2005-06-01）
无毒诱变超抗原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
金黄色葡萄球菌是引起医院内外感染的重要病原菌,也是引起奶牛乳房炎的主要致病菌。金黄色葡萄球菌能产生多种超抗原毒素,其中TSST-1是一种分子量为22kD,含194个氨基酸残基的直链多肽的热源性超抗原,是引起奶牛乳房炎的关键致病因子。无毒诱变超抗原GST-mTSST-1(Glutathione S-transferase and Mutation Toxic Shock Syndrome Toxic 1)融合蛋白是利用基因工程定点诱变技术将TSST-1的致病碱基置换,使其失去致病性获得的融合蛋白。 本实验的目的主要是研究应用基因工程技术获得的金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性、理化特性及其诱导小鼠抗S. aureus834株感染的免疫保护效果,确定小鼠最佳免疫剂量,建立检测特异性抗毒素抗体的间接ELISA方法。这将为金黄色葡萄球菌奶牛乳房炎疫苗的研究开发奠定科学依据和理论基础。 将DH5α/pGXmTSST基因工程菌用IPTG诱导表达,经超声波粉碎、离心、收集上清再用GS4B胶亲和层析分离纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白。用纯化GST-mTSST-1融合蛋白按常规多点免疫法免疫家兔获取抗血清,经双向免疫琼脂扩散试验测定抗血清效价,鉴定GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性,研究了温度、酸碱度、反复冻融等理化因素对其免疫活性的影响,同时以SDS-PAGE和薄层凝胶扫描分析GST-mTSST-1融合蛋白的表达量和纯度。免疫攻毒保护性试验中,免疫组用不同剂量的纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白抗原加5%氢氧化铝佐剂背部皮下多点免疫昆明系小白鼠,对照组用无菌PBS加佐剂免疫。第3次免疫后用5×10~7 cfu S. aureus834鼠攻击感染,观察15d记录小鼠的存活率及检测攻毒3d后免疫组小鼠肝、脾、肾脏中的细菌数变化。并分别采集试验小鼠初次免疫后14、28、42、60、90、120d的血清,间接ELISA检测血清中特异性抗体的效价及抗体水平动态变化规律。对ELISA方法各反应条件进行优化,建立检测血清中特异性抗体的间接ELISA方法。 在宿主菌DH5α中表达出可溶性GST-mTSST-1融合蛋白,经SDS-PAGE和薄层凝胶扫描分析表达的融合蛋白占菌体总蛋白的25%,GST-mTSST-1融合蛋白的纯度达到95%,分子量为47KD与理论值一致。纯化后的GST-mTSST-1融合蛋白免疫家兔产生特异性抗体,双向琼扩试验测得抗体效价>1:32。该特异抗血清可识别天然rTSST-1蛋白中与融合蛋白GST-mTSST-1相对应的抗原组份,证实GST-mTSST-1融合蛋白具有与野生型rTSST-1相同的表面抗原决定簇。不同理化因素对GST-mTSST-1融合蛋白免疫活性的影响表明该蛋白是一种相当稳定的蛋白质,4℃30d、20℃72h、37℃72h蛋白的免疫活性不受影响,反复冻融多次也不影响其免疫活性,可耐受的pH值范围为5～11。对小鼠的
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
无毒诱变超抗原论文参考文献
[1].郭海勇,郭伟生,崔京春,钱爱东.理化因素对葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1免疫活性的影响[J].华南农业大学学报.2011
[2].郭海勇.葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1对小鼠免疫保护性的研究[D].吉林农业大学.2005
标签：金黄色葡萄球菌; GST-mTSST-1; 理化因素; 免疫学活性;