茨城病病毒论文-张文龙,殷喆,吴东来,王君伟

茨城病病毒论文-张文龙,殷喆,吴东来,王君伟

导读:本文包含了茨城病病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:茨城病,截短VP7蛋白,间接ELISA

茨城病病毒论文文献综述

张文龙,殷喆,吴东来,王君伟[1](2010)在《茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立》一文中研究指出为建立以茨城病病毒(IBAV)VP7蛋白为诊断抗原的茨城病(IBAD)血清学检测方法,本研究克隆了VP7蛋白抗原性、亲水性较强部分的编码基因,并在原核表达系统中表达了可溶性截短VP7蛋白。用截短VP7蛋白建立了IBAV间接ELISA检测方法。确定的阳性血清的判定标准为不低于0.32。特异性试验表明建立的ELISA方法可以特异性检测IBAV阳性血清。建立的ELISA方法与中和试验结果比较,符合率为77%。用建立的ELISA方法检测70份来自云南的牛血清样品进行检测,IBAV血清阳性率为45.7%。该方法的建立为IBAD的诊断提供了一种简单快速的辅助手段。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2010年07期)

张文龙,殷喆,王君伟,杨涛,吴东来[2](2009)在《茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立》一文中研究指出茨城病病毒(Ibaraki virus,IBAV)是呼肠孤病毒科、环状病毒属成员。其VP7蛋白保守程度高,适宜作为茨城病(Ibaraki disease,IBAD)血清学检测方法的诊断抗原。本研究克隆了VP7蛋白抗原性、亲水性较强部分的编码基因,并在原核表达系统中表达了可溶性截短VP7蛋白。用表达的重组蛋白初步建立了IBAD间接ELISA检测方法。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集》期刊2009-07-01)

张文龙[3](2008)在《茨城病病毒S7基因的克隆表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立》一文中研究指出茨城病(ibaraki disease)是由茨城病病毒引起的牛急性、热性、病毒性传染病。该病毒是呼肠孤病毒科、环状病毒属成员。该病在东南亚、澳大利亚及美洲一些国家广泛流行,我国在《中华人民共和国进境动物一、二类传染病、寄生虫名录》中将其列为二类传染病。目前,国内外对本病的诊断方法主要采用中和试验、补体结合试验和琼脂扩散试验等方法。本研究采用RT-PCR技术扩增得到了全长的茨城病病毒No.2株的S7基因,将其分别克隆入pET-28a(+)原核表达载体和pFasBactHTa转座载体中;同时,使用生物学软件对S7基因的编码蛋白进行了抗原性、疏水性预测,选择其中抗原性、亲水性较强片段进行亚克隆,并连接入pET-32a(+)原核表达载体中。将阳性重组原核表达质粒分别转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3),并进行诱导表达。同时,用阳性重组转座载体转化含有穿梭载体(Bacmid)的感受态细胞DH10Bac中,经筛选获得重组穿梭载体。用携带全长S7基因的重组穿梭载体转染草地夜蛾卵巢细胞(Sf9细胞),获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染Sf9细胞,表达重组VP7蛋白。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot分析,重组蛋白在真、原核两种表达系统中都获得了表达。对表达条件进行优化,以获得最佳表达状态和最大表达量,并用Ni2+螯合亲和层析方法对表达蛋白进行了纯化。用原核表达的重组茨城病病毒VP7蛋白作为抗原初步建立间接ELISA方法,结果表明原核表达截短VP7更适于用作ELISA作包被抗原。以截短VP7蛋白为抗原建立间接ELISA方法,对抗原包被条件、封闭条件、抗原包被浓度、一抗浓度、二抗浓度和洗涤条件进行了优化。用建立的方法对几种常见的牛病阳性血清进行检测,检测结果证明该间接ELISA方法能有效地将茨城病阳性血清与口蹄疫、病毒性腹泻、传染性鼻气管炎和牛结核病阳性血清区分开。应用建立的ELISA方法对来自内蒙古地区的95份现地血清样品进行检测,与血清中和试验结果相比较,符合率为81%。对来自云南的70份血清样品进行检测,再次证明了我国的确存在茨城病抗体阳性牛。两处现地血清的检出阳性率符合茨城病的流行病学特征,说明本方法可初步用于茨城病特异性抗体的检测。本研究克隆了茨城病病毒No.2株的S7基因,并利用大肠杆菌表达系统或杆状病毒表达系统成功表达了全长或截短的茨城病病毒VP7蛋白。用纯化后的重组VP7蛋白作为抗原初步建立了茨城病间接ELISA诊断方法,并初步运用该方法对现地血清进行了检测。实验证明该间接ELISA方法可以快速、有效地检测牛只茨城病的感染状况,将为我国茨城病的检测和血清流行病学调查提供更加快速、有效的技术手段。(本文来源于《东北农业大学》期刊2008-04-10)

王险峰[4](1985)在《茨城病病毒血细胞凝集素的理化特性》一文中研究指出茨城病病毒血细胞凝集素(HA 素)能迅速吸附在置于37、22或4℃高渗稀释液(0.6M 的氯化钠,pH7.5)中的牛红细胞上。吸附在红细胞上的这种 HA 素即使经过等渗磷酸盐缓冲液重新悬浮,37或50℃培养或在有神经氨酸苷酶存在时培养均不能从细胞上洗下。HA 素在0.6M的氯化钠溶液中的效价比在0.2M 中的高(本文来源于《吉林畜牧兽医》期刊1985年06期)

茨城病病毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

茨城病病毒(Ibaraki virus,IBAV)是呼肠孤病毒科、环状病毒属成员。其VP7蛋白保守程度高,适宜作为茨城病(Ibaraki disease,IBAD)血清学检测方法的诊断抗原。本研究克隆了VP7蛋白抗原性、亲水性较强部分的编码基因,并在原核表达系统中表达了可溶性截短VP7蛋白。用表达的重组蛋白初步建立了IBAD间接ELISA检测方法。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

茨城病病毒论文参考文献

[1].张文龙,殷喆,吴东来,王君伟.茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立[J].中国预防兽医学报.2010

[2].张文龙,殷喆,王君伟,杨涛,吴东来.茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集.2009

[3].张文龙.茨城病病毒S7基因的克隆表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立[D].东北农业大学.2008

[4].王险峰.茨城病病毒血细胞凝集素的理化特性[J].吉林畜牧兽医.1985

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