王艳丽1王莹1刘君炎2
（1武汉市儿童医院呼吸内科湖北武汉430016）
（2武汉大学医学部免疫教研室湖北武汉430071）
【中图分类号】R562.2+5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)31-0050-03
【摘要】目的通过检测哮喘患儿血清中TNF-α与IgE水平，以观察和揭示它们在儿童哮喘发病中的作用和与发病程度的关系。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测哮喘发作期40例、缓解期30例患儿及健康对照组30例儿童TNF-α水平和IgE水平。所有结果使用SPSS11.5统计软件分析。结果哮喘组的IgE与TNF-α水平均较对照组高，且发作期与缓解期、缓解期与对照组比较均有极显著性差异。哮喘发作组中10例哮喘持续状态者IgE水平与其他哮喘发作者IgE水平经比较无显著性差异，而这10例哮喘持续状态者TNF-α水平与其他哮喘发作患儿TNF-α进行比较有显著性差异。结论IgE和TNF-α在支气管哮喘发病中起着重要作用,而且TNF-α水平与哮喘的病情程度呈正相关。
【关键词】哮喘免疫球蛋白E肿瘤坏死因子-α儿童
支气管哮喘是由多种细胞（如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等）和细胞组分共同参与的气道慢性炎症，是一种严重危害患者身体健康的常见慢性呼吸道疾病，而且发病率高，目前已成为全世界范围内最常见的慢性疾病之一。近20年来，哮喘的患病率尤其是儿童哮喘的患病率有了明显的升高。儿童和青少年多见外源性哮喘属于I型超敏反应。I型超敏反应又叫过敏反应，指由肥大细胞、嗜碱性粒细胞释放大量过敏介质而造成的一组临床征候群，其主要表现为局部血管扩张、血管通透性增高、器官平滑肌收缩及腺体分泌增强。IgE类型的抗体是这类反应的始动因素，而肿瘤坏死因子-α可启动炎症级联反应，所以，TNF-α与IgE在哮喘的发生中发挥着重要的作用。本文通过检测哮喘患儿血清中TNF-α与IgE水平以观察和揭示它们在哮喘患儿发病中的作用，探讨其与儿童哮喘的关系。
1材料与方法
1.1研究对象
哮喘组源于2000年9月～2001年5月入住我院呼吸科和门诊复诊的患儿70例。发作组40例，男27例，女13例，年龄3.2～9.4岁，平均年龄（6.3±3.1）岁，其中哮喘持续状态者10例；缓解组30例，男18例，女12例，年龄4.9～10.1岁，平均年龄（7.3±2.8）岁。诊断标准均符合1998年全国儿科哮喘防治协作组制定的小儿哮喘诊断标准[1]。所有患儿在两周内均未使用过糖皮质激素类药物。正常对照组源于门诊体检的健康儿童，共30例，男18例，女12例，年龄3.9～9.9岁,平均年龄（6.9±3.0）岁。哮喘组和对照组的年龄、性别均无显著性差异。
1.2研究方法
清晨空腹时，取哮喘组和对照组静脉血2ml，3000r/min离心10分钟后取血清，-20℃待测，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患儿血清IgE与TNF-α水平。试剂盒由海南华美生化有限公司提供，采用美国Hyperion，MRⅢ型酶标仪测定。利用生物素-亲和素技术的原理进行检测，严格按产品说明书操作。所有样本均采用复管进行检测，每项实验每次均同步制作标准曲线。
1.3统计学处理
所有结果使用SPSS11.5统计软件分析，数据均以x±s表示，三组比较采用方差分析，并采用LSD法进行多重比较，显著性检验采用配对t检验，IgE水平采用双变量相关分析，用Pearson相关系数。
2结果
2.1哮喘发作组的IgE与TNF-α水平均高于缓解组和对照组（F值分别为131.069、81.914,P均<0.01）,而且哮喘缓解组患儿的IgE、TNF-α水平也均高于正常对照组（P均<0.01）,差异具有极显著性。
2.2哮喘发作组中10例哮喘持续状态者IgE水平为1558.59±351.871Iu/ml，其他哮喘发作者IgE水平为1537.31±431.028Iu/ml，经比较无显著性差异。
2.3哮喘发作组中10例哮喘持续状态者TNF-α水平与其他哮喘发作患儿TNF-α进行比较，t=2.373，P<0.05。
3讨论
支气管哮喘是由多种炎性细胞参与的慢性变态反应性疾病，炎性细胞通过合成和释放多种炎症介质及细胞因子而诱发哮喘发作。支气管哮喘按病因不同可分为内源性哮喘和外源性哮喘[2]，后者又称为过敏性哮喘，我们研究的主要对象均属于外源性哮喘。过敏性哮喘为IgE介导的I型变态反应，故IgE的增加与哮喘有关，也与哮喘的严重程度有关。
研究发现，支气管哮喘是变应原或其它因素引起的支气管高反应性下出现的广泛而可逆的气道慢性炎症。一般而言，反复接触某一变应原才会引起对该变应原的特应性反应。而接触变应原的机会是特异性IgE抗体水平高低的重要决定因素[3]。当外源性变应原通过吸入、接触或食入途径进入机体，在T淋巴细胞协助下，使B淋巴细胞转化为浆细胞，产生IgE抗体。IgE黏附于支气管粘膜下肥大细胞和血循环中的嗜碱性粒细胞表面的IgEFc受体上，使这些效应细胞致敏。当机体再次接触相同变应原时，变应原即以变应原桥联形式与效应细胞上的IgE结合，通过变应原-抗体相互作用，从而使膜上两个相邻近的FcεRI发生相互连接（桥联），FcεRI桥联后触发细胞膜一系列的生物化学反应，使肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放出颗粒中预合成的介质和合成新的介质（NCF、LTB4、PGD2、组胺等），立即直接作用于靶细胞、靶组织、靶器官，引起速发的临床症状，主要表现为局部血管扩张、血管通透性增高、器官平滑肌收缩及腺体分泌增强。近年来还发现嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和血小板上还存在第二类IgE受体（FcεRII）。它虽属于低亲和力IgE受体，但在IgE与变应原存在的情况下，可使这些效应细胞直接地、特异性地参与变态反应及其炎症反应过程。
本研究结果提示，哮喘组IgE的水平明显较对照组高，而且哮喘发作组较缓解组水平也明显升高，差异具有极显著性。由此可见，IgE是支气管哮喘发病中的重要抗体。但哮喘持续状态组与其他哮喘发作组IgE水平比较无显著性差异，说明IgE水平的高低与哮喘发作的严重程度不相关。
TNF-α是由单核巨噬细胞产生的具有广泛生物学活性的多肽调节因子，在正常机体内浓度较低,主要调节机体免疫应答。TNG-α是一种重要的前炎症细胞因子，它可启动炎症反应，是气道强有力的刺激剂，能诱发哮喘发作，与遗传过敏性哮喘有关。与其它细胞因子一样，适量TNF-α对机体的保护反应是必需的，但过量的TNF-α则对机体会产生损害反应[4]。国外一些文献研究显示，支气管哮喘患儿发作期血清TNG-α明显高于缓解组和对照组,而且哮喘病情越严重,持续时间越长,TNG-α浓度也越高[5]。我们的研究结果与此不谋而合。这说明TNG-α参与整个哮喘过程，而且TNG-α活性与哮喘病情轻重程度呈正相关。其发生机制可能是由于哮喘时各种过敏原使呼吸道上皮细胞、血管内皮细胞及肺外周血白细胞活化，释放TNF。而TNG-α主要是通过作用于血管内皮细胞，增加某些粘附分子如ICAM-1的表达，诱发血小板活化因子（PAF）和IL-1，5，8的释放而促进炎症细胞粘附、游走、浸润及细胞脱颗粒，它还可以刺激一些过敏毒素的合成，增加血管壁的通透性，使呼吸道分泌物大量增加[6]；同时TNG-α也可通过自分泌方式作用于单核巨噬细胞本身而释放炎症介质（如白三烯、前列腺素等），加剧炎症反应，导致组织损伤，从而引发哮喘发作。在本文资料中，哮喘患儿血清TNF-α明显增高，也证实了TNF-α在支气管哮喘发作过程中起着重要的作用。
参考文献
[1]陈育智，俞善昌，董宗祈等.儿童哮喘防治常规.中华儿科杂志，1998，36（12）：747-751.
[2]沈华浩主编.哮喘手册.北京：人民卫生出版社，2004，9：6-7.
[3]龙振洲主编.医学免疫学.北京：人民卫生出版社，1995,5:154.
[4]徐玲玲,华雪玲,陈晓东等.儿童哮喘血浆肿瘤坏死因子活性观察.中华结核病呼吸杂志,1995,18(3):135.
[5]NajamFI,GiasuddinAS,ShembeshAN.Tumournecrosisfactorsinchildhoodasthma.IndianJPediatr,2001,68(3):217-222.
[6]HughesJM,RimmerSJ,SalomeCMetal.Eosinophilia,interleukin-5,andtumournecrosisfactor-alphainasthmaticchildren.Allergy,2001,56(5):412.