导读:本文包含了单链产物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:单链抗体,肝炎表面抗原,乙型,内化,基因,Tat
单链产物论文文献综述
孟艳玲,温伟红,薛茜,贾林涛,鲍炜[1]（2005）在《人抗HBsAg单链抗体-Tat融合基因的构建、表达及表达产物的活性鉴定》一文中研究指出目的:构建人抗HBsAg单链抗体Tat蛋白转导结构域(ScFvTat)融合基因,在大肠杆菌中进行表达,并分析ScFvTat融合蛋白的活性及内化情况.方法:设计引物扩增人抗HBsAg单链抗体基因,克隆入含有蛋白转导结构域Tat序列的原核表达载体pTATHA,在大肠杆菌BL2l(DE3)LysS内诱导融合蛋白表达.表达产物用SDSPAGE及Westernblot鉴定,用亲和层析柱纯化.间接ELISA和ELISA竞争抑制实验分析ScFvTat融合蛋白的亲和活性,将纯化蛋白与HBsAg阳性或阴性肝癌细胞共孵育后,免疫细胞化学染色分析ScFvTat融合蛋白的结合及内化情况.结果:成功地构建了人抗HBsAg单链抗体Tat融合蛋白的原核表达载体,在IPTG诱导下获得了表达,表达的ScFvTat融合蛋白具有与HBsAg结合的活性,并且能够特异性内化入HBsAg阳性肝癌细胞.结论:单链抗体与Tat蛋白转导结构域融合后,实现了ScFvTat融合蛋白的特异性内化,为该单链抗体的进一步应用奠定了基础.(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2005年20期）
舒薇,郭勇,贺丽苹,温宏睿[2]（2005）在《木瓜凝乳蛋白酶的单链单甲氧基聚乙二醇修饰产物的检测与分析》一文中研究指出在底物保护下,采用叁聚氰氯活化的单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,反应混合物经毛细管电泳(CE)分析及SephadexG75分离纯化获得修饰度为平均每分子Cp偶联3～4个mPEG1长链的修饰纯酶(mPEG1Cp).以叁硝基苯磺酸(TNBS)法与CE法作对比测定了该修饰酶的平均氨基修饰度;以ELISA法检测mPEG1Cp的抗原性;用紫外吸收光谱和荧光发射光谱对mPEG1Cp进行了结构的测定分析.结果表明:Cp的mPEG1修饰产物经毛细管电泳检测为多组分体系,最大产物峰为平均每分子Cp偶联3～4个mPEG1的低修饰度修饰酶,其相对分子质量为40712～46044;该修饰酶抗原抗体结合能力完全消失,体内活性半衰期是原酶的1.6倍,同时酶活力保持在36.5%;紫外吸收光谱和荧光发射光谱分析表明:mPEG1Cp结构有轻度的改变.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2005年03期）
温伟红[3]（2003）在《人抗HBsAg单链抗体基因的构建、表达及其表达产物的活性鉴定》一文中研究指出目的 构建人抗HBsAg单链抗体基因，在真核细胞和原核细胞中进行表达，并对其表达产物的活性进行鉴定。 方法 以从噬菌体抗体库中筛选获得的抗HBsAg的Fab抗体基因为模板，分别扩增出其轻、重链可变区(V_L、V_H)基因，通过重组PCR方法将轻、重链可变区基因用连接肽(Gly_4Ser)_3的编码序列连接，并引入前导肽编码序列，构建具有L-V_H-Linker-V_L结构的单链抗体基因。 将所构建的单链抗体基因克隆入绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-N3，瞬时转染COS-7细胞，分析其表达情况。稳定转染Jurkat细胞，建立稳定表达ScFv融合蛋白的细胞系，并分析其表达产物的活性。 将获得的不含前导肽的单链抗体基因克隆入HA和6His融合的原核表达载体pTAT-HA，在大肠杆菌BL21中进行表达，分析其表达情况。表达产物并经NiNTA柱纯化后，分析其活性。 结果 经测序表明，前导肽、连接肽、V。及V。的序列正确，经酶切鉴定证实成功地构建了绿色荧光蛋白基因融合表达载体。瞬时转染COS刁细胞后，通过荧光显微镜观察、间接免疫荧光检测、免疫组化检测证实了SCFV融合蛋白的表达。稳定转染 Jurkat细胞，经 G4筛选，建立了稳定表达 ScFv融合蛋白的细胞系。建系细胞裂解产物和浓缩的培养上清经SDS－PAGE及Western Blot分析，证实了ScFv融合蛋白的分泌性表达。间接ELISA检测证实所表达的单链抗体具有与HBSAg结合的特异性。建系细胞培养上清与肝癌细胞作用后，经荧光显微镜观察、间接免疫荧光及流式细胞仪检测进一步确定表达的SCFV融合蛋白具有与HBSAg特异性结合的活性。 经酶切鉴定证实原核表达载体pTAT爿ASCFV构建成功。在大肠杆菌BLZI中实现了 SCFV融合蛋白的表达。经 Ni－NTA柱纯化获得纯化产物，经间接ELISA分析确定所得产物具有与HBSAg结合的特异性。与肝癌细胞作用后，通过间接免疫荧光检测、免疫组化捡测进一步确定所获得的纯化产物具有与HBSAg特异性结合的功能。 结论 门）成功地构建了五种人抗HBSAg单链抗体基因。Q）瞬时转染COS7细胞，获得了分泌性表达。稳定转染Jurkat细胞，经筛选获得稳定表达SCFV融合蛋白的细胞系，并证实表达产物具有与HBSAg特异性结合的功能。（3）在大肠杆菌 BLZI中进行表达，经 Ni－NTA柱纯化获得了纯化产物，并证实纯化产物具有与HBSAg特异性结合的功能。(本文来源于《中国人民解放军第四军医大学》期刊2003-04-01）
杨雅平[4]（2001）在《旋毛虫和伪旋毛虫的E-S产物中单链核酸内切酶的活性》一文中研究指出旋毛虫是一种寄生在哺乳动物横纹肌中的致病性线虫,伪旋毛虫是一种与之有很近亲缘关系的种系,它既能感染哺乳动物又能感染鸟类。核酸内切酶在其他微生物,例如支原体,在调节宿主细胞的基因组表达中扮演着重要的角色或者作为一种潜在的致病因(本文来源于《国外医学(寄生虫病分册)》期刊2001年02期）
李彪,朱承谟,吴祥甫[5]（2000）在《CEA单链抗体表达质粒构建及产物纯化》一文中研究指出目的单链抗体基因的构建并在大肠杆菌中进行表达以及表达产物的纯化研究。 方法采用重组PCR技术将已获得的抗癌胚抗原 (CEA)鼠源单克隆抗体E7B10 重、轻链可变区基因 (VH、Vk)经 (Gly4 Ser) 3 编码的寡核苷酸拼接成单链抗体基因 ,并在大肠杆菌中表达了单链抗体C端融合 6×His蛋白 ,表达产物经Ni2 +-IDASepharose 6B亲和柱纯化。 结果表达的融合蛋白在胞内主要以可溶性存在 ,其表达量达到菌体总蛋白的 10 % ,SDS -PAGE和Western印迹图谱显示表达产物分子量为 2 7kd ,与其基因编码蛋白的理论推算值相符。表达产物经Ni2 +-IDASepharose 6B亲和柱纯化 ,纯度可达 90 %以上 ,得率为 0 .8mg/ 10 0ml。 结论纯化后的融合蛋白具有CEA结合活力 ,其亲和常数为 5 .4× 10 7/M(抗体结合浓度 ) ,略低于其亲本单抗E7B10 2 .7× 10 9/M。(本文来源于《上海第二医科大学学报》期刊2000年03期）
张用书,李秀珍,程度胜,刘凤云[6]（1997）在《低分子量单链尿激酶与血纤蛋白粘附肽融合基因的构建、表达及产物活性分析》一文中研究指出低分子量单链尿激酶(scu-PA-32)可通过激活纤溶酶原转变成纤溶酶溶解血栓,其溶栓具有一定的选择性,出血副作用比双链尿激酶小,但缺少对纤维蛋白的特异亲和力;2种血纤蛋白粘附肽(四肽A4;十二肽A12)都可和纤维蛋白特异性地结合,具有抗纤维蛋白单体聚合的功能,并因此有一定的抗血栓形成作用。本研(本文来源于《生物技术通讯》期刊1997年Z1期）
阎岩,徐志凯,姜绍谆,尹文,王海涛[7]（1997）在《抗肾综合征出血热病毒McAb 1A8单链抗体基因的构建及表达产物的检测》一文中研究指出我们将抗肾综合征出血热（HFRS）病毒MCAbIA8重链可变区（VH）基因的3’端与轻链可变区（VI＿）基因的5’端用一编码《｝Iv。Ser）3的基因连接于（I。Inker）连接，构建f单链抗体（SCFV）表达载体，转化至五．V；；人．＊MIO9中，用辅(本文来源于《第四军医大学学报》期刊1997年06期）
张用书,李秀珍,程度胜,刘凤云[8]（1997）在《血纤蛋白粘附肽与低分子量单链尿激酶融合产物活性分析》一文中研究指出人工合成了血纤蛋白粘附肽基因，构建了粘附肽与低分子量单链尿激酶ｃＤＮＡ的融合基因，在大肠杆菌中表达了融合基因。融合基因表达产物的抗原性和天然尿激酶相同，并具有尿激酶的溶纤活性和粘附肽的抗纤维蛋白单体聚合的功能。(本文来源于《生物工程学报》期刊1997年04期）
王春杰,王文亮,逯好英,徐东刚,孟庆华[9]（1997）在《丙型肝炎病毒5’非编码区PCR产物单链构象多态性分析及序列测定》一文中研究指出目的：研究慢性肝炎病人血清、肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇非编码区变异情况．方法：收集１０例慢性肝炎病人及４例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织，检测抗ＨＣＶ抗体阳性，进行ＨＣＶ５＇非编码区ＲＮＡ的逆转录ＰＣＲ扩增，ＰＣＲ产物进行单链构象多态性分析，并对部分病例序列进行测定．结果：６例慢性肝炎病人血清及３例肝细胞肝癌组织中检测到ＨＣＶＲＮＡ，单链构象多态性分析显示各例条带之间无明显差异，对１例肝细胞肝癌组织中ＨＣＶ５＇非编码区ｃＤＮＡＰＣＲ产物的序列测定表明它与ＨＣＶ－１的同源性为９７．３％，与ＨＣＶ－ＢＫ的同源性为９７．７％．结论：我们的结果提示在西安地区ＨＣＶ５＇非编码区几乎是一样的，并进一步证实不同地区ＨＣＶ５＇非编码区的高度保守性．(本文来源于《第四军医大学学报》期刊1997年03期）
刘凤云,李秀珍,李风知,程度胜[10]（1996）在《水蛭素12肽与低分子量单链尿激酶融合基因的构建、表达及产物特性分析》一文中研究指出用化学合成的方法合成了水蛭素12肽基因的编码序列,通过DNA重组技术将水蛭素12肽基因片段与低分子量单链尿激酶cDNA片段连接构建了融合基因。融合基因在大肠杆菌中获得表达。体外实验结果表明,表达的融合蛋白具有溶纤活性和抗凝活性。(本文来源于《生物技术通讯》期刊1996年03期）
单链产物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
在底物保护下,采用叁聚氰氯活化的单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,反应混合物经毛细管电泳(CE)分析及SephadexG75分离纯化获得修饰度为平均每分子Cp偶联3～4个mPEG1长链的修饰纯酶(mPEG1Cp).以叁硝基苯磺酸(TNBS)法与CE法作对比测定了该修饰酶的平均氨基修饰度;以ELISA法检测mPEG1Cp的抗原性;用紫外吸收光谱和荧光发射光谱对mPEG1Cp进行了结构的测定分析.结果表明:Cp的mPEG1修饰产物经毛细管电泳检测为多组分体系,最大产物峰为平均每分子Cp偶联3～4个mPEG1的低修饰度修饰酶,其相对分子质量为40712～46044;该修饰酶抗原抗体结合能力完全消失,体内活性半衰期是原酶的1.6倍,同时酶活力保持在36.5%;紫外吸收光谱和荧光发射光谱分析表明:mPEG1Cp结构有轻度的改变.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单链产物论文参考文献
[1].孟艳玲,温伟红,薛茜,贾林涛,鲍炜.人抗HBsAg单链抗体-Tat融合基因的构建、表达及表达产物的活性鉴定[J].第四军医大学学报.2005
[2].舒薇,郭勇,贺丽苹,温宏睿.木瓜凝乳蛋白酶的单链单甲氧基聚乙二醇修饰产物的检测与分析[J].华南农业大学学报.2005
[3].温伟红.人抗HBsAg单链抗体基因的构建、表达及其表达产物的活性鉴定[D].中国人民解放军第四军医大学.2003
[4].杨雅平.旋毛虫和伪旋毛虫的E-S产物中单链核酸内切酶的活性[J].国外医学(寄生虫病分册).2001
[5].李彪,朱承谟,吴祥甫.CEA单链抗体表达质粒构建及产物纯化[J].上海第二医科大学学报.2000
[6].张用书,李秀珍,程度胜,刘凤云.低分子量单链尿激酶与血纤蛋白粘附肽融合基因的构建、表达及产物活性分析[J].生物技术通讯.1997
[7].阎岩,徐志凯,姜绍谆,尹文,王海涛.抗肾综合征出血热病毒McAb1A8单链抗体基因的构建及表达产物的检测[J].第四军医大学学报.1997
[8].张用书,李秀珍,程度胜,刘凤云.血纤蛋白粘附肽与低分子量单链尿激酶融合产物活性分析[J].生物工程学报.1997
[9].王春杰,王文亮,逯好英,徐东刚,孟庆华.丙型肝炎病毒5’非编码区PCR产物单链构象多态性分析及序列测定[J].第四军医大学学报.1997
[10].刘凤云,李秀珍,李风知,程度胜.水蛭素12肽与低分子量单链尿激酶融合基因的构建、表达及产物特性分析[J].生物技术通讯.1996