王奎1邵东2黄琳2
（1杭州艾森医药研究有限公司310030）
（2常州四药制药有限公司213004）
【摘要】目的建立与探究通过HPLC法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚的方法。方法填充剂使用十八烷基键合硅胶,流动相采用0.05mol/L的磷酸二氢钠-甲醇-0.05mol/L的磷酸氢二钠。结果间氨基酚的线性范围为0.603至7.239ug/ml（r=0.9997），定量限为3.5ng，检测限为1.3ng，回收率为99.83%，RSD为0.82%（n=6）。结论采用HPLC法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚十分可靠，结果准确，操作简单。
【关键词】高效液相色谱法对氨基水杨酸钠间氨基酚
【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2013）21-0328-02
对氨基水杨酸钠，因其能够抑制结核菌的对氨基苯甲酸的合成而达到了抑制细菌生长的作用，临床上为常用的抗结核药物[1]。由于该药物存在一定的副作用，因此该药物中各有关物质的含量需要严格地进行控制。传统的检测仅对总的有关物质和单个有关物质进行控制，并未对其中的杂质进行定性。本文旨在建立与探究通过HPLC法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚的方法。
1实验仪器及试剂
1.1仪器：
Waters高效液相色谱仪（包括717型泵，717型双通道紫外检测器，717型自动进样器）C18色谱柱（大连依利特，规格为150mm×4.6mm，5um）。
1.2试剂：
磷酸二氢钠（分析纯）、甲醇（色谱纯）、磷酸氢二钠（分析纯），以上试剂均由北京化工厂提供。对氨基水杨酸钠对照品、对氨基水杨酸钠原料药、间氨基酚对照品（所有药物均由北京紫竹药业有限公司生产）。
2方法与结果
2.1试验条件
填充剂使用十八烷基键合硅胶,流动相采用0.05mol/L的磷酸二氢钠-甲醇-0.05mol/L的磷酸氢二钠，比例为425:150:425。检测波长：280nm。流速设置为1.0ml/min。柱温为室温。
2.2方法验证
2.2.1系统适用性试验
记录测定各组溶液的色谱图，间氨基酚和对氨基水杨酸钠的分离度为5.22，分离情况良好。溶剂对测定不产生干扰。此外，理论板数以间氨基酚计为2182，拖尾因子1.03，均符合相关规定。
2.2.2检测限与定量限试验
采用流动相对间氨基酚对照品进行逐级的稀释，记录色谱图。通过检测测得间氨基酚的定量限为3.5ng，而检测限为1.3ng。
2.2.3线性试验
精密地称取12.08mg间氨基酚的对照品，加样至100ml的容量瓶，并加入流动相，混合稀释，摇匀。精密地分别吸取0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml于不同的100ml容量瓶，分别加入流动相混合稀释，摇匀，以此作为标准溶液。分别再取20ul注入色谱仪，记录相应的色谱图。根据所测色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归分析。通过测定可得到回归方程为A=1.2765×107C+184.63，r=0.9997，在0.603至7.239ug/ml范围内的线性关系尚可。
2.2.4精密度试验
将20ul的间氨基酚对照品溶液注入液相色谱仪，重复进样操作6次，进行计算。计算结果RSD为0.82%。
2.2.5回收率试验
取约69mg左右的对氨基水杨酸钠（已测定间氨基酚含量），分别放置于6个不同容量瓶。其中往1号与2号瓶中各加入间氨基酚1.ml（约0.1208mg间氨基酚），而3号和4号加入2.0ml，5号和6号瓶加入3.0ml，分别测定，并记录色谱图。根据样品间氨基酚含量、加入量、测得量以及回收率计算平均回收率，结果为99.83%。
3讨论
虽然目前口服对氨基水杨酸钠抗结核已经不再采用，但通过静脉滴注给药对于长期存在发热、中度症状的肺结核患者仍有一定的疗效。据有关研究表明[3]，该药物在一些肺结核患者中存在独特的疗效，但其各组分需要严格的控制。为了更好地在临床上使用该药物，避免一些药物的不良反应，需要建立起检测对氨基水杨酸钠的各组分的含量。目前临床上采用HPLC的方法具有很多优点，本文也采用HPLC的方法进行了相关的检测与分析。
本次研究中，间氨基酚的线性范围为0.603至7.239ug/ml（r=0.9997），定量限为3.5ng，检测限为1.3ng，回收率为99.83%，RSD为0.82%（n=6）。以上数据说明本次试验的结果是可靠的，提示采用HPLC测定对氨基水杨酸钠中的间氨基酚具有一定的准确性，结果比较可靠。
综上所述，采用高效液相色谱法测定对氨基水杨酸钠药物中的间氨基酚十分可靠，结果准确，且操作简单，值得在临床上推广与应用。
参考文献
[1]李春盈，何宇芬，卢俊钢，等.HPLC法测定对氨基水杨酸钠中有关物质的含量[J].广东药学院学报，2013，29（2）：1-2.
[2]徐向利.HPLC法检查对氨基水杨酸钠中的间氨基酚[J]，首都医药，2009,2（3）：47-49.
[3]邓梅，黄洁，单敏.反相高效液相色谱法测定对氨基水杨酸钠片的有关物质[J]，中国药业，2012，21（19）：41-43.