导读:本文包含了基因内重组论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:水稻,株高,产量,赤霉素
基因内重组论文文献综述
吴比[1]（2016）在《相引相株高基因qPh3和产量QTL qYd3的遗传解析和SD1基因内重组的鉴定》一文中研究指出高产是水稻遗传育种的重要目标。水稻产量由分蘖数、千粒重和每穗实粒数构成,此外,株型对水稻产量也有重要的影响。QTL定位以及图位克隆是发掘新基因的重要手段。利用前期02428和Teqing(TQ)的重组自交系(Recombinant Inbred Lines,RILs)群体定位到的主效株高QTL q Ph3,构建了以TQ为供体02428背景的近等基因系,在此基础上进行q Ph3的图位克隆以及功能研究。同时,在珍汕97(Zhenshan 97,ZS97)和明恢63(Minghui 63,MH63)的RILs群体中发现一个株高达到160 cm的家系RI92,通过与ZS97回交的方法构建近等基因系,并对控制株高的基因进行图位克隆。主要结果如下:1.对qPh3进行遗传分析发现,02428等位基因型具有6.2 cm的加性效应和3.5 cm的显性效应,并有增加产量的效应。q Ph3初步定位在WPh1到RM7389之间,通过筛选大群体中的重组单株,进行后代测验确定q Ph3的基因型,把q Ph3精细定位在19-kb的区域内,两端标记分别为WPh10-1和RM7389,其中包含Os GA20Ox1在内的两个基因,亲本间比较测序发现Os GA20Ox1的编码区有一个SNP改变蛋白质的编码序列,由02428等位基因型的丙氨酸(Ala)改变为TQ等位基因型的缬氨酸(Val)。对Os GA20Ox1在近等基因系间的表达量分析发现,02428基因型具有比TQ基因型更高的表达。2.超表达Os GA20Ox1的中花11株高增加,证明Os GA20Ox1就是qPh3中控制株高的基因。因为,Os GA20Ox1编码GA20氧化酶,催化GA12和GA53到GA9和GA20过程中一系列的反应,所以测定了近等基因系和转基因植株中内源GAs的含量,结果表明,Os GA20Ox1的底物GA12和GA53在TQ近等基因系和转基因阴性植株中得到积累,而产物GA20在02428近等基因系和转基因阳性植株中明显提高,最终导致了02428近等基因系和转基因阳性植株中活性GAs不同程度地提高,印证了Os GA20Ox1是通过GAs含量影响水稻株高。3.超表达Os GA20Ox1并不增加产量的现象与近等基因系中02428等位基因型增加产量不一致,所以此基因组区段很可能还有一个控制产量的基因q Yd3,并通过挑选Os GA20Ox1纯合为02428等位基因型,其他区段为分离的家系与02428回交获得BC5F2群体用于产量QTL的定位和克隆。对BC5F2中q Yd3的定位分析发现,其具有较高的增产潜力,q Yd3对每穗实粒数具有24粒的加性效应和14.9粒的显性效应,对粒宽具有0.08 mm的加性效应和0.03 mm的显性效应,对千粒重具有0.7 g的加性效应和1.0 g的显性效应,对产量具有4.1 g的加性效应和4.3 g的显性效应。而且定位到这些的增效等位基因均是来源于02428。所以连锁的q Yd3和q Ph3是一对相引相基因,在育种过程中只要针对一种性状进行选择就可以实现产量和株高的改良。4.对RI92家系中控制株高的基因定位分析发现,SD1很有可能是候选基因,两亲本以及RI92中SD1测序确定了RI92中在+1721到+2575之间发生了一次基因内的重组,导致由ZS97的提前终止密码子TAG改变为MH63的TAC,从而使SD1可以翻译成完整的GA20氧化酶蛋白,苗期多效唑的处理进一步证明了SD1/SD1近等基因系具有更强的GAs合成能力。近等基因系产量性状的考察显示SD1/SD1具有增加单株产量的作用,但是降低收获指数和单位面积植株数目,同时具有容易倒伏的风险。5.qPh3和SD1均在染色体端粒附近,在定位过程中,二基因所在染色体区段的重组率比基因组平均增高4倍左右,显示重组热点特征。这与染色体端粒附近一般具有重组热点的观点一致。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-12-01）
关玮琨[2]（2016）在《基于假基因内插入的嵌合肠毒素重组减毒大肠杆菌口服疫苗候选菌株的研究》一文中研究指出产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichiacoli,ETEC)是引起婴幼儿、幼龄动物腹泻的主要病原之一,它所引起的仔猪腹泻甚至死亡给畜牧业生产造成巨大的经济损失。流行病学调查结果显示,ETEC的耐药性在不断提高,而其黏附素的检出率却在下降,所以继续使用传统药物以及使用以黏附素为抗原的疫苗进行防治已达不到理想的预防效果,生产上急需新的有效疫苗得到研制与开发。为明确嵌合基因在具有天然佐剂功能的不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin-1,LT1)骨架上的插入位置,先制备了一株针对LT1,具有中和活性的特异性单克隆抗体,该单抗能有效的阻断LT1毒素与GM1受体的结合。通过生物信息学软件ABCpred预测,然后用单抗对LT1B进行分段筛选,鉴定出与GM1受体结合的肽段MBP-LT1B-7(61QKKAIERMKDTLRITY76)。以此为依据,在不影响段肽MBP-LT1B-7结构的位置插入外源基因。本研究以大肠杆菌K12基因序列为参照,使用在线服务软件ABCpred预测出6个可插入外源基因的假基因位置,分别是yaiT、yaiX、ygeO和ygeQ、wbbL、insN、eaeH+和ykgA。进一步经PCR鉴定发现我们分离并改造的野生E.coli O142:△STa菌株中yaiT和yaiX两个假基因位置可作为携带外源基因的插入点。分别以假基因yaiT和yaiX为模板扩增出假基因yaiT和yaiX的左右同源臂,连入pDOC-K质粒上,构建PRPL-Kil双向筛选平台质粒,然后将平台质粒与pACBSCE质粒共转化减毒E coli O142:△STa中。经L-阿拉伯糖诱导使其中的pACBSCE质粒表达I-Sce切割酶和Red重组酶,含有假基因yaiT和yaiX同源臂的PRPL-Kil操纵子分别被切下后与E.coli 0142:△STa中的yaiT和yaiX假基因位置发生同源重组,构建成0142(yaiT::PRPL-Kil)和0142(yaiX::PRPL-Kil)两株双向筛选平台。经鉴定当温度升高到43℃时平台中温敏开关打开,kill基因可杀死菌体起到反向筛选效果,表明平台具有相应生物活性。通过SOE-PCR构建嵌合类毒素基因,先将致弱的STaA13Q(以下简写为STa_(13))连在致弱的LT1R192G(以下简写为LT1_(192))操纵子B亚单位后端,再利用SOE-PCR的方法将STb和LT1天然转录终止子连到LT1_(192)-STa_(13)后,获得LT1_(192)-STa_(13)-STb操纵子。将LT1A分为LT1A1和LT1A2两段,再将STa_(13)-STb从LT1 192-STa_(13)-STb上克隆下来,与LT1A1相连获得LT1A1-(STa_(13)-STb),最后再将LT1A2-LT1B-STa_(13)-STb与其进行组装获嵌合基因LT1A1-(STa_(13)-STb)-LT1A2-LT1B-(STa_(13)-STb)操纵子。在其两端分别连上假基因 yaiT 和 yaiX的左右同源臂,构建pDOC-C同源重组系统,按照建立平台时的方法,用LT1 A1-(STa_(13)-STb)-LT1A2-LT1 B-(STa_(13)-STb)操纵子去替换插在不同假基因位置上的双向筛选平台,得到重组E.coliER-T和E.coliER-X。通过对重组菌毒性、模拟消化道环境耐受、口服安全性、生长性能、遗传稳定性、菌毛生长能力和肠道定植能力等检测,结果显示,重组E.coli ER-T和E.coli ER-X安全、遗传稳定,可在肠道定植。进一步以重组E.coli ER-T和E.coli ER-X对BALB/c小鼠进行口服免疫,检测各时间点小鼠特异性IgG及IgA抗体水平,结果显示:实验组小鼠首次免疫后7～21d,在其血清中均可检测到抗 LT1A(P<0.05)、LT1B(P<0.05)、STa(P<0.05)、STb(P<0.05)、F41(P<0.05)的IgG抗体。各实验组小鼠免疫后7～28d在其粪便中可检测出抗LT1A(P<0.05)、LT1B(P<0.05)、STa(P<0.05)、STb(P<0.05)、F41(P<0.05)的 IgA 抗体。首次免疫后 42d在小鼠乳汁、脾脏、肠黏液、肠系膜淋巴结中仍能检测到抗LT1A(P<0.05)、LT1B(P<0.05)、STa(P<0.05)、STb(P<0.05)、F41(P<0.05)的 IgG 和 IgA 抗体;在细胞增殖实验中,实验组脾细胞经STa毒素、LT1_(192)-STa_(13)重组蛋白、STb毒素、LT1_(192)-STb重组蛋白、LT1毒素刺激后增殖效果明显好于对照组(P<0.05);各组脾细胞培养上清液中的细胞因子IFN-γ和IL-4检测结果显示,免疫组小鼠IFN-γ水平有所上升但没有IL-4上升明显。体外中和试验和体内中和试验结果显示,口服免疫后的小鼠血清、脾细胞裂解液、肠黏液、肠系膜淋巴细胞裂解液对肠毒素具有中和作用。乳鼠攻毒保护试验结果显示,获得母源抗体的乳鼠具有抵抗肠毒素侵袭的能力。重组E.coli ER-T和E.coli ER-X免疫仔猪和妊娠母猪后进行IgG及IgA抗体检测、细胞增殖实验、细胞因子检测、体内中和试验以及体外中和试验所得结果的趋势与小鼠基本相似。攻毒保护试验中,免疫组仔猪肠绒毛的各项检测数据优于对照组仔猪,两者差异显着(P<0.05),表明免疫后仔猪可以抵抗肠毒素攻击。本研究为增强大肠杆菌重组活载体疫苗的免疫效果,通过表位筛选确定了 LT1与GM1受体的结合域,构建了可以稳定表达嵌合肠毒素基因的重组减毒E.coliER-A和E.coli ER-B,探索了不同假基因携带外源基因的差异,为重组减毒大肠杆菌口服疫苗研究提供了科学的实验依据。(本文来源于《东北农业大学》期刊2016-06-01）
任皓,朱虹,汪燕,王启松,卢圣栋[3]（1991）在《人心钠素的蛋白质工程研究Ⅱ.基因内重组构建心钠素衍生物基因RH-2、RH-3》一文中研究指出以精确设计的基因内重组法,利用已有的心钠素衍生物RH—1基因和心钠素α-hANP基因的重组交换,设计并构建了两种新的心钠素衍生物RH-2和RH-3基因。衍生物RH-2相当于α-hANP的N端嵌合羧肽酶抑制剂SQ20881,衍生物RH-3相当于α—hANP的C端嵌合两个脯氨酸。基因内重组获得的重组体用叁种探针以原位杂交和斑点杂交等方法进行DNA区域组合分析,再经限制性酶谱分析筛选出目的克隆。DNA序列测定确认了所构建得的RH-2和RH-3基因。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊1991年02期）
基因内重组论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichiacoli,ETEC)是引起婴幼儿、幼龄动物腹泻的主要病原之一,它所引起的仔猪腹泻甚至死亡给畜牧业生产造成巨大的经济损失。流行病学调查结果显示,ETEC的耐药性在不断提高,而其黏附素的检出率却在下降,所以继续使用传统药物以及使用以黏附素为抗原的疫苗进行防治已达不到理想的预防效果,生产上急需新的有效疫苗得到研制与开发。为明确嵌合基因在具有天然佐剂功能的不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin-1,LT1)骨架上的插入位置,先制备了一株针对LT1,具有中和活性的特异性单克隆抗体,该单抗能有效的阻断LT1毒素与GM1受体的结合。通过生物信息学软件ABCpred预测,然后用单抗对LT1B进行分段筛选,鉴定出与GM1受体结合的肽段MBP-LT1B-7(61QKKAIERMKDTLRITY76)。以此为依据,在不影响段肽MBP-LT1B-7结构的位置插入外源基因。本研究以大肠杆菌K12基因序列为参照,使用在线服务软件ABCpred预测出6个可插入外源基因的假基因位置,分别是yaiT、yaiX、ygeO和ygeQ、wbbL、insN、eaeH+和ykgA。进一步经PCR鉴定发现我们分离并改造的野生E.coli O142:△STa菌株中yaiT和yaiX两个假基因位置可作为携带外源基因的插入点。分别以假基因yaiT和yaiX为模板扩增出假基因yaiT和yaiX的左右同源臂,连入pDOC-K质粒上,构建PRPL-Kil双向筛选平台质粒,然后将平台质粒与pACBSCE质粒共转化减毒E coli O142:△STa中。经L-阿拉伯糖诱导使其中的pACBSCE质粒表达I-Sce切割酶和Red重组酶,含有假基因yaiT和yaiX同源臂的PRPL-Kil操纵子分别被切下后与E.coli 0142:△STa中的yaiT和yaiX假基因位置发生同源重组,构建成0142(yaiT::PRPL-Kil)和0142(yaiX::PRPL-Kil)两株双向筛选平台。经鉴定当温度升高到43℃时平台中温敏开关打开,kill基因可杀死菌体起到反向筛选效果,表明平台具有相应生物活性。通过SOE-PCR构建嵌合类毒素基因,先将致弱的STaA13Q(以下简写为STa_(13))连在致弱的LT1R192G(以下简写为LT1_(192))操纵子B亚单位后端,再利用SOE-PCR的方法将STb和LT1天然转录终止子连到LT1_(192)-STa_(13)后,获得LT1_(192)-STa_(13)-STb操纵子。将LT1A分为LT1A1和LT1A2两段,再将STa_(13)-STb从LT1 192-STa_(13)-STb上克隆下来,与LT1A1相连获得LT1A1-(STa_(13)-STb),最后再将LT1A2-LT1B-STa_(13)-STb与其进行组装获嵌合基因LT1A1-(STa_(13)-STb)-LT1A2-LT1B-(STa_(13)-STb)操纵子。在其两端分别连上假基因 yaiT 和 yaiX的左右同源臂,构建pDOC-C同源重组系统,按照建立平台时的方法,用LT1 A1-(STa_(13)-STb)-LT1A2-LT1 B-(STa_(13)-STb)操纵子去替换插在不同假基因位置上的双向筛选平台,得到重组E.coliER-T和E.coliER-X。通过对重组菌毒性、模拟消化道环境耐受、口服安全性、生长性能、遗传稳定性、菌毛生长能力和肠道定植能力等检测,结果显示,重组E.coli ER-T和E.coli ER-X安全、遗传稳定,可在肠道定植。进一步以重组E.coli ER-T和E.coli ER-X对BALB/c小鼠进行口服免疫,检测各时间点小鼠特异性IgG及IgA抗体水平,结果显示:实验组小鼠首次免疫后7～21d,在其血清中均可检测到抗 LT1A(P<0.05)、LT1B(P<0.05)、STa(P<0.05)、STb(P<0.05)、F41(P<0.05)的IgG抗体。各实验组小鼠免疫后7～28d在其粪便中可检测出抗LT1A(P<0.05)、LT1B(P<0.05)、STa(P<0.05)、STb(P<0.05)、F41(P<0.05)的 IgA 抗体。首次免疫后 42d在小鼠乳汁、脾脏、肠黏液、肠系膜淋巴结中仍能检测到抗LT1A(P<0.05)、LT1B(P<0.05)、STa(P<0.05)、STb(P<0.05)、F41(P<0.05)的 IgG 和 IgA 抗体;在细胞增殖实验中,实验组脾细胞经STa毒素、LT1_(192)-STa_(13)重组蛋白、STb毒素、LT1_(192)-STb重组蛋白、LT1毒素刺激后增殖效果明显好于对照组(P<0.05);各组脾细胞培养上清液中的细胞因子IFN-γ和IL-4检测结果显示,免疫组小鼠IFN-γ水平有所上升但没有IL-4上升明显。体外中和试验和体内中和试验结果显示,口服免疫后的小鼠血清、脾细胞裂解液、肠黏液、肠系膜淋巴细胞裂解液对肠毒素具有中和作用。乳鼠攻毒保护试验结果显示,获得母源抗体的乳鼠具有抵抗肠毒素侵袭的能力。重组E.coli ER-T和E.coli ER-X免疫仔猪和妊娠母猪后进行IgG及IgA抗体检测、细胞增殖实验、细胞因子检测、体内中和试验以及体外中和试验所得结果的趋势与小鼠基本相似。攻毒保护试验中,免疫组仔猪肠绒毛的各项检测数据优于对照组仔猪,两者差异显着(P<0.05),表明免疫后仔猪可以抵抗肠毒素攻击。本研究为增强大肠杆菌重组活载体疫苗的免疫效果,通过表位筛选确定了 LT1与GM1受体的结合域,构建了可以稳定表达嵌合肠毒素基因的重组减毒E.coliER-A和E.coli ER-B,探索了不同假基因携带外源基因的差异,为重组减毒大肠杆菌口服疫苗研究提供了科学的实验依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因内重组论文参考文献
[1].吴比.相引相株高基因qPh3和产量QTLqYd3的遗传解析和SD1基因内重组的鉴定[D].华中农业大学.2016
[2].关玮琨.基于假基因内插入的嵌合肠毒素重组减毒大肠杆菌口服疫苗候选菌株的研究[D].东北农业大学.2016
[3].任皓,朱虹,汪燕,王启松,卢圣栋.人心钠素的蛋白质工程研究Ⅱ.基因内重组构建心钠素衍生物基因RH-2、RH-3[J].中国医学科学院学报.1991