导读:本文包含了分泌型碱性磷酸酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:牵张应力,碱性磷酸酶,右归饮
分泌型碱性磷酸酶论文文献综述
张葆鑫,王兴国,郝廷[1](2017)在《右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响》一文中研究指出目的该文对采用右归饮含药血清对大鼠成骨细胞进行牵张应力的刺激后形成的骨细胞以及分泌的碱性磷酸酶的影响进行评价,重点论证了在模拟的人体应力环境中使用右归饮进行治疗后,促进了骨细胞增殖分化的作用。方法将随机选择的40只SD大鼠分为两组一组为右归饮组,每天进行灌胃治疗,右归饮的含生药量为20 g/kg,一组为生理盐水组,每天进行灌胃,生理盐水组的灌胃量等同于右归饮组~([1])。两组均进行连续灌胃1周。末次灌胃后2 h,采用常规麻醉心脏取血的方法,将血清分离出来,在-20℃进行保存。骨细胞的培养采用序列酶消化法,将细胞进行等量分组,共分为6组,每组6孔,标注为:右归饮含药血清牵张形变组、生理盐水血清组、右归饮含药血清组、无血清培养基对照组、无血清牵涨形变组、生理盐水血清12牵张形变组。进行血清同步培养24 h,生成各组细胞,采用0.5 Hz PINLV、12%形变量的牵张力对相应的右归饮血清组、无血清组细胞等进行力学记载。采用ALP定量测定的方法检测各组的细胞ALP活性,分别于12、24 h进行加力,使用显微镜进行镜检和拍照,监测成骨细胞胞浆内的CAKP颗粒书目。使用统计学软件进行分析。结果在0.5 Hz、12%牵张应力条件下,采用常规培养条件和无血清细胞进行细胞培养的比较,前者的ALP表达受到限制,右归饮血清培养液在力学环境下的ALP比另一组要高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在无血清条件下,右归饮能够促进模拟人体牵张应力环境下的骨细胞的分化的增值。(本文来源于《双足与保健》期刊2017年23期)
汤小康[2](2014)在《右归饮对牵张应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响及其机制的实验研究》一文中研究指出目的明确序列酶消化法从乳鼠骨骼中分离培养骨细胞、成骨细胞在细胞形态学、细胞碱性磷酸酶(cAKP)染色、免疫细胞化学法骨钙素(BGP)染色及细胞碱性磷酸酶活性(ALP)测定上的差异。用右归饮含药血清对应力条件下培养的成骨细胞、骨细胞分别进行干预。观察应力环境中右归饮对成骨细胞ALP分泌和cAKP颗粒表达的影响,及其对骨细胞前列腺素E2(prostag-landin E2PGE2)、一氧化氮(Nitric oxide NO)表达的影响。探讨右归饮在应力环境中调控骨细胞PGE2或NO分泌,进而影响成骨细胞ALP分泌的可能存在的机制。方法实验室条件下,采用序列酶消化法分别从3d龄SD乳鼠骨骼中分离培养骨细胞、成骨细胞,运用24h后细胞形态学观察,第一代细胞碱性磷酸酶(cAKP)染色、免疫细胞化学法骨钙素(BGP)染色,及细胞碱性磷酸酶活性(ALP)测定法,对骨细胞与成骨细胞的细胞形态、碱性磷酸酶和骨钙素分泌差异等特性进行鉴别比较。将两组细胞以2mL×2×105个的数量接种于力学加载培养板上,无血清同步化培养24h后分别予无血清培养基、右归饮含药血清培养基及生理盐水血清培养基,采用0.5HZ频率、12%形变量的牵张应力对实验组无血清培养细胞、含药血清培养细胞及生理盐水血清培养细胞进行力学加载,对照组常规条件下培养。分别于12h和24h对各组成骨细胞行碱性磷酸酶(ALP)定量测定,检测各组细胞ALP活性;加力24h后对成骨细胞行重氮盐法碱性磷酸酶(cAKP)染色,显微镜镜检拍照,检测成骨细胞胞浆内cAKP颗粒数目及分布;通过硝酸还原酶法、生物素双抗体夹心酶联合免疫吸附法(ELISA)对各组骨细胞24h后一氧化氮(NO)及前列腺素E2(PGE2)表达量进行检测。运用统计学软件对数据进行分析。结果观察示骨细胞多呈星状或树枝状,且有很多的突触;成骨细胞呈长梭形,有少量的突触。骨细胞碱性磷酸酶染色,胞浆内cAKP颗粒不明显;成骨细胞碱性磷酸酶染色,胞浆内可见众多cAKP颗粒。骨细胞BGP染色阳性明显,成骨细胞BGP染色阳性不如骨细胞明显。ALP在骨细胞中分泌较成骨细胞低,且有显着统计学差异。12%牵张应力环境中无血清组成骨细胞与常规培养条件下无血清组成骨细胞比较,前者ALP表达受抑制(P<0.05);12%牵张应力环境中右归饮血清培养液与空白血清培养液,较常规培养条件下两种血清培养液比较,均能刺激成骨细胞ALP表达(P<0.05),且12%牵张应力环境中右归饮组ALP值高于空白血清组(P<0.05)。骨细胞在12%牵张应力环境中右归饮含药血清培养24h其NO表达显着高于对照组(P<0.05),各组PGE2表达无明显差异(P>0.05)。结论骨细胞在ALP表达、BGP分泌等方面与成骨细胞存在差异,12%牵张应力环境中右归饮能有效刺激成骨细胞ALP的表达,这种刺激作用的实现与其调控骨细胞NO形成存在联系。(本文来源于《浙江中医药大学》期刊2014-03-01)
汤小康,应航,倪哲吉,樊燕华,李敏[3](2013)在《右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响》一文中研究指出目的探究牵张应力作用下右归饮含药血清刺激大鼠成骨细胞后,对其碱性磷酸酶(ALP)分泌的影响,评价右归饮在模拟人体内应力环境中促进成骨细胞增殖分化的作用。方法随机将40只SD大鼠均分为右归饮组和生理盐水组,右归饮组每天按含生药量20 g/kg灌胃,生理盐水组灌以等量的生理盐水,连续灌胃1周;末次灌胃2 h后,常规麻醉,心脏取血,分离提取血清,-20℃保存2组血清;采用序列酶消化法培养成骨细胞,传至第4代将细胞等量接种为6组,每组6孔,分别标记为无血清培养基对照组、生理盐水血清组、右归饮含药血清组、无血清12%牵张形变组、生理盐水血清12%牵张形变组和右归饮含药血清12%牵张形变组,无血清培养基同步化培养24 h;将右归饮含药血清及生理盐水血清分别作用于右归饮含药血清组、右归饮含药血清12%牵张形变组和生理盐水血清组、生理盐水血清12%牵张形变组细胞,同时采用0.5 Hz频率、12%形变量的牵张力对相应无血清组细胞、右归饮血清组细胞及生理盐水血清组细胞进行力学加载。分别于12 h和24 h对各组细胞行ALP定量测定,检测各组细胞ALP活性;加力24 h后,行碱性磷酸酶染色(CAKP),显微镜镜检拍照,检测成骨细胞胞浆内CAKP颗粒数目及分布;并利用统计学软件对数据进行分析。结果 0.5 Hz、12%牵张应力条件下无血清组细胞与常规培养条件下无血清组细胞比较,前者ALP表达受抑制(P<0.05);牵张应力条件下右归饮血清培养液与生理盐水血清培养液,较常规培养条件下2种血清培养液比较,均能刺激成骨细胞ALP表达(P<0.05),且力学环境下右归饮组ALP值高于生理盐水血清组(P<0.05)。结论无血清条件下,牵张应力表现出抑制成骨细胞ALP表达现象;右归饮在模拟人体牵张应力环境下能促进成骨细胞的增殖分化。(本文来源于《北京中医药大学学报》期刊2013年08期)
张洪海,计云霞,孙玉,张玉林,乔录新[4](2010)在《分泌型碱性磷酸酶示踪的TA克隆真核表达载体的构建》一文中研究指出目的制备具有分泌型碱性磷酸酶示踪作用和真核表达功能的TA克隆载体。方法把CMV启动子区-TA克隆位点-BGH多聚腺苷酸区序列克隆到pSEAP2-control载体中,构建成具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶(SEAP)的pcDNA5AP-前T载体。增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆到pcDNA5AP-T载体上并进行EGFP表达分析和SEAP活性检测。结果 pcDNA5AP-EGFP以400ng/孔转染6孔板293T细胞,EGFP表达率达50%,SEAP活性比对照组高20倍。结论成功构建了具有真核表达功能并外分泌碱性磷酸酶的pcDNA5AP-T载体。(本文来源于《北京医学》期刊2010年06期)
刘水平,谭德明,杨永峰,侯周华[5](2004)在《丙型肝炎病毒5'端非编码区和NS3蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶表达细胞模型的建立及意义》一文中研究指出目的 构建丙型肝炎病毒5'端非编码区(HCV 5'NCR)和NS3丝氨酸蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶(SEAP)表达细胞模型,并分析其用于抗HCV药物筛选和评价的可行性。 方法 用聚合酶链反应技术扩增HCV 5'NCR和NS3/4A片段,定向克隆至表达质粒pSEAP2-Control的SEAP基因上游,构建含HCV 5'NCR-NS3/4A-SEAP嵌合基因的重组表达质粒pNCR-NS3/4A-SEAP。将重组质粒转染至肝细胞株QSG7701,用化学发光法检测SEAP的表达,并观察HCV 5'NCR区对应的反义寡聚核苷酸(ASODN)和丝氨酸蛋白酶抑制剂TPCK对SEAP表达的影响。 结果 重组质粒pNCR-NS3/4A-SEAP有高强度SEAP表达,5μmol/L、10μmol/L ASODN和100μmol/L TPCK对SEAP表达有显着抑制作用(t值分别为4.315、6.985、6.949,P值均<0.01)。 结论 重组质粒pNCR-NS3/4A-SEAP的SEAP表达受HCV 5'NCR和NS 3蛋白酶共调控,建立的细胞模型可用于以HCV 5'NCR和NS3蛋白酶为靶位点的药物筛选和评价。(本文来源于《中华肝脏病杂志》期刊2004年09期)
刘水平,谭德明,侯周华,刘双虎,文质[6](2003)在《HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶基因在肝细胞中的表达》一文中研究指出目的 :构建HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶 (SEAP)基因表达的细胞模型。方法 :用PCR技术扩增HCV 5′NCR片段 ,定向克隆至表达质粒 pSEAP2 Control的SEAP基因上游 ,构建HCV 5′NCR调控SEAP表达的重组质粒 pdNCRSEAP。用脂质体基因转染技术 ,将pdNCRSEAP转染至肝细胞株QSG770 1。用化学发光法检测SEAP的表达 ,并观察不同浓度反义寡聚核苷酸 (ASODN)对SEAP表达的影响。结果 :重组质粒 pdNCRSEAP表达的发光强度为pSEAP2 Control的 76 %,5 μmol和 10 μmolASODN对pdNCRSEAP发光强度的抑制率分别为2 9.2 %和 44 .6 %,而对 pSEAP2 Control的SEAP表达无显着抑制作用 (P >0 .0 5 )结论 :重组质粒 pdNCRSEAP的SEAP表达受HCV 5′NCR调控 ,为以HCV 5′NCR为靶位点的药物评价建立了检测方便的细胞模型。(本文来源于《湖南医科大学学报》期刊2003年04期)
胡立桉,陈卫民,毛靖,吴慧华[7](2003)在《持续压力对大鼠成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响》一文中研究指出目的 研究持续压力对体外培养大鼠成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响。方法 利用自行研制的细胞加力装置给大鼠成骨细胞施加不同大小的静压力 ,观察加力不同时程后的碱性磷酸酶分泌活性。结果 加力后成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性降低 ,停止加力后 2 4h碱性磷酸酶的分泌活性在 3× 10 5Pa组恢复正常 ,而在 4× 10 5Pa和 5× 10 5Pa组未完全恢复。结论 持续压力可降低成骨细胞碱性磷酸酶的分泌活性 ,适当力值的压力在恢复正常后碱性磷酸酶的分泌活性可恢复正常 ,力值过大则可能影响细胞的功能。(本文来源于《临床口腔医学杂志》期刊2003年02期)
师伟,郝玉庆,王国荃,刘开泰[8](2002)在《氟对人牙乳头间充质细胞及分泌碱性磷酸酶活性的影响》一文中研究指出为了明确氟对人牙乳头间充质细胞和分泌碱性磷酸酶活性的影响 ,体外培养人牙乳头间充质细胞 ,给予不同浓度氟处理 :0 μmol,10 μmol(0 .2× 10 - 6 g/ L) ,5 2 μmol (1.0× 10 - 6 g/ L) ,2 6 3μmol(5 .0× 10 - 6 g/ L) ,1315 μmol (2 5×10 - 6 g/ L) ,2 6 30 μmol(5 0× 10 - 6 g/ L) ,用四唑盐比色法 (MTT法 )测定细胞活力 ,酶联免疫法检测碱性磷酸酶活性 ,结果显示 ,当氟浓度为 2 6 3μmol时 ,培养 2 4 h后 ,细胞活性明显抑制 ,AL P活性无明显改变 ;当氟浓度为 1315 μmol和2 6 30 μmol时 ,培养 12 h细胞活性明显抑制 ,分泌的 AL P活性升高 ,培养 72 h时 2 6 30 μmol氟浓度组几乎无活细胞 ,而AL P活性仍较对照组高 ,由此提示 ,氟作用于人牙乳头细胞时 ,细胞活性与 AL P活性升高不一致(本文来源于《地方病通报》期刊2002年02期)
张丽青[9](2000)在《釉基质蛋白促进牙周膜成纤维细胞的附着,提高碱性磷酸酶的活性,并使牙周膜及牙龈成纤维细胞TGF-B分泌量增加》一文中研究指出釉基质蛋白 (EMP)可促进牙周组织新附着的形成 ,但其生物学机理尚不清楚。作者通过实验探讨了 EMP对人牙周膜成纤维细胞 (HPL F)及人牙龈成纤维细胞 (HGF)的作用 ,主要观察 EMP对两种细胞的附着 ,碱性磷酸酶活性 ,转移生长因子β(TGF(本文来源于《医学信息》期刊2000年09期)
李小彤,张丁,傅民魁[10](2000)在《比较间歇性牵张力和持续性牵张力对成骨样细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响》一文中研究指出目的 比较间歇性牵张力和持续性牵张力对UMR10 6成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响。方法 利用已建立的细胞体外加力装置 ,比较在间歇性和持续性牵张力的作用下 ,UMR10 6成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的改变。结果 施加间歇力和持续力后UMR10 6成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性均有增加 ,间歇力作用 2小时和 4小时 ,UMR10 6成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性增加均有统计学意义P <0 .0 5 ,持续力 4小时时加力组与对照组相比有显着性差异P <0 .0 5 ;间歇力与持续力相比 ,无论 2小时和 4小时其碱性磷酸酶分泌活性的改变间歇力组都高于持续力组 ,差异有显着性P <0 .0 5。(本文来源于《口腔正畸学》期刊2000年02期)
分泌型碱性磷酸酶论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的明确序列酶消化法从乳鼠骨骼中分离培养骨细胞、成骨细胞在细胞形态学、细胞碱性磷酸酶(cAKP)染色、免疫细胞化学法骨钙素(BGP)染色及细胞碱性磷酸酶活性(ALP)测定上的差异。用右归饮含药血清对应力条件下培养的成骨细胞、骨细胞分别进行干预。观察应力环境中右归饮对成骨细胞ALP分泌和cAKP颗粒表达的影响,及其对骨细胞前列腺素E2(prostag-landin E2PGE2)、一氧化氮(Nitric oxide NO)表达的影响。探讨右归饮在应力环境中调控骨细胞PGE2或NO分泌,进而影响成骨细胞ALP分泌的可能存在的机制。方法实验室条件下,采用序列酶消化法分别从3d龄SD乳鼠骨骼中分离培养骨细胞、成骨细胞,运用24h后细胞形态学观察,第一代细胞碱性磷酸酶(cAKP)染色、免疫细胞化学法骨钙素(BGP)染色,及细胞碱性磷酸酶活性(ALP)测定法,对骨细胞与成骨细胞的细胞形态、碱性磷酸酶和骨钙素分泌差异等特性进行鉴别比较。将两组细胞以2mL×2×105个的数量接种于力学加载培养板上,无血清同步化培养24h后分别予无血清培养基、右归饮含药血清培养基及生理盐水血清培养基,采用0.5HZ频率、12%形变量的牵张应力对实验组无血清培养细胞、含药血清培养细胞及生理盐水血清培养细胞进行力学加载,对照组常规条件下培养。分别于12h和24h对各组成骨细胞行碱性磷酸酶(ALP)定量测定,检测各组细胞ALP活性;加力24h后对成骨细胞行重氮盐法碱性磷酸酶(cAKP)染色,显微镜镜检拍照,检测成骨细胞胞浆内cAKP颗粒数目及分布;通过硝酸还原酶法、生物素双抗体夹心酶联合免疫吸附法(ELISA)对各组骨细胞24h后一氧化氮(NO)及前列腺素E2(PGE2)表达量进行检测。运用统计学软件对数据进行分析。结果观察示骨细胞多呈星状或树枝状,且有很多的突触;成骨细胞呈长梭形,有少量的突触。骨细胞碱性磷酸酶染色,胞浆内cAKP颗粒不明显;成骨细胞碱性磷酸酶染色,胞浆内可见众多cAKP颗粒。骨细胞BGP染色阳性明显,成骨细胞BGP染色阳性不如骨细胞明显。ALP在骨细胞中分泌较成骨细胞低,且有显着统计学差异。12%牵张应力环境中无血清组成骨细胞与常规培养条件下无血清组成骨细胞比较,前者ALP表达受抑制(P<0.05);12%牵张应力环境中右归饮血清培养液与空白血清培养液,较常规培养条件下两种血清培养液比较,均能刺激成骨细胞ALP表达(P<0.05),且12%牵张应力环境中右归饮组ALP值高于空白血清组(P<0.05)。骨细胞在12%牵张应力环境中右归饮含药血清培养24h其NO表达显着高于对照组(P<0.05),各组PGE2表达无明显差异(P>0.05)。结论骨细胞在ALP表达、BGP分泌等方面与成骨细胞存在差异,12%牵张应力环境中右归饮能有效刺激成骨细胞ALP的表达,这种刺激作用的实现与其调控骨细胞NO形成存在联系。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
分泌型碱性磷酸酶论文参考文献
[1].张葆鑫,王兴国,郝廷.右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响[J].双足与保健.2017
[2].汤小康.右归饮对牵张应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响及其机制的实验研究[D].浙江中医药大学.2014
[3].汤小康,应航,倪哲吉,樊燕华,李敏.右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响[J].北京中医药大学学报.2013
[4].张洪海,计云霞,孙玉,张玉林,乔录新.分泌型碱性磷酸酶示踪的TA克隆真核表达载体的构建[J].北京医学.2010
[5].刘水平,谭德明,杨永峰,侯周华.丙型肝炎病毒5'端非编码区和NS3蛋白酶共调控外分泌性碱性磷酸酶表达细胞模型的建立及意义[J].中华肝脏病杂志.2004
[6].刘水平,谭德明,侯周华,刘双虎,文质.HCVIRES调控外分泌性碱性磷酸酶基因在肝细胞中的表达[J].湖南医科大学学报.2003
[7].胡立桉,陈卫民,毛靖,吴慧华.持续压力对大鼠成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响[J].临床口腔医学杂志.2003
[8].师伟,郝玉庆,王国荃,刘开泰.氟对人牙乳头间充质细胞及分泌碱性磷酸酶活性的影响[J].地方病通报.2002
[9].张丽青.釉基质蛋白促进牙周膜成纤维细胞的附着,提高碱性磷酸酶的活性,并使牙周膜及牙龈成纤维细胞TGF-B分泌量增加[J].医学信息.2000
[10].李小彤,张丁,傅民魁.比较间歇性牵张力和持续性牵张力对成骨样细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响[J].口腔正畸学.2000