导读:本文包含了苯丙烷途径论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:硝普钠,苹果,品质,抗病性
苯丙烷途径论文文献综述
陈延儒[1](2019)在《采后硝普钠处理对苹果果实品质、莽草酸和苯丙烷代谢途径的影响》一文中研究指出衰老和腐烂是加速苹果果实采后品质劣变和烂损的重要原因。硝普钠(SNP)是外源一氧化氮(NO)的供体,可通过还原反应自发分解并释放NO,是研究NO特性及功能的重要载体。本文以“富士”苹果果实为材料,采后经1.0 mmol/L的SNP溶液浸泡10 min,研究常温贮藏期间苹果果实品质指标、蔗糖代谢、莽草酸及苯丙烷代谢途径的变化。得到以下主要结果:1.采后SNP处理显着延缓了贮藏期间苹果果实呼吸高峰出现的时间,并降低了果实的呼吸强度;保持了较高的果实硬度、可滴定酸(TA)及抗坏血酸(AsA)的含量;减少了可溶性固形物含量(SSC)的消耗;并延缓了丙二醛(MDA)和可溶性糖含量的上升。但对果实的失重率没有显着影响。2.采后SNP处理显着抑制了苹果果实蔗糖代谢中转化酶和蔗糖合酶-分解方向(SS-c)活性,提高了蔗糖磷酸合成酶(SPS)和蔗糖合酶-合成方向(SS-s)活性以及蔗糖代谢酶净活性;SNP处理还上调了果实MdNI、蔗糖合酶(MdSS)和MdSPS基因的表达,同时还上调了己糖代谢中已糖激酶(MdHK)和果糖激酶(MdFK)基因的表达。3.采后SNP处理显着降低了损伤接种扩展青霉(Penicillium expansum)苹果果实的病斑直径,并上调了莽草酸途径中3-脱氢奎尼酸合成酶(MdDHQS)、莽草酸脱氢酶(MdSKDH)、莽草酸激酶(MdSK)和5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(MdEPSPS)基因的表达;促进了贮藏前期莽草酸和色氨酸的积累,且提高了整个贮藏期间酪氨酸和苯丙氨酸的含量。4.采后SNP处理显着上调了苯丙烷代谢途径中苯丙氨酸解氨酶(MdPAL)、肉桂酰乙醇脱氢酶(MdC4H)、4-香豆酸辅酶A连接酶(Md4CL)及查尔酮异构酶(MdCHI)基因的表达,并提高了贮藏期间类黄酮、总酚和木质素的含量。这些结果表明,采后SNP处理可以通过调节苹果果实中蔗糖代谢相关酶活性和基因表达来延缓常温贮藏过程中果实品质的下降,并可以通过调控莽草酸和苯丙烷代谢途径以提高果实对青霉病的抗性。(本文来源于《渤海大学》期刊2019-06-01)
赵英[2](2019)在《丹参SmMYB36基因对萜类和苯丙烷代谢途径调控的研究》一文中研究指出丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)又称红根、大红袍等,是草本植物,属于双子叶植物唇形科鼠尾草属。于《神农本草经》、《本草纲目》等均有记载,主要治疗妇科病,具有活血化瘀、调经等功效,此外对神经性衰弱失眠、冠心病、关节痛等均有疗效。丹参的有效药用成分有亲水性的酚酸类物质和亲脂性的丹参酮类物质,其中酚酸类物质包括迷迭香酸(Rosmarinicacid,RA)、丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)和阿魏酸等。丹参酮类物质包括丹参酮I(Tanshinone I)、丹参酮IIA(Tanshinone IIA)、二氢丹参酮I(Dihydrotanshinone I)、隐丹参酮(Cryptotanshinone)等。近几年来,丹参次生代谢途径受到越来越多的关注,本研究以丹参毛状根为模式材料,通过转基因和转录组及代谢组联合分析,尝试探讨丹参SmMYB36基因对萜类和苯丙烷代谢途径调控的机制。1.对SmMYB36进行截短并构建到酵母表达载体,得到pDEST-GADT7-SmMYB36、pDEST-GADT7-SmMYB36~(1-111),pDEST-GADT7-SmMYB36~(112-160),pDEST-GADT7-Sm MYB36~(112-160)。酵母双杂交验证发现SmMYB36全长和C端具有自激活活性,N端不具有自激活活性。2.克隆IIId、IIIe和IIIf家族的SmbHLH基因,将克隆成功的SmbHLH构建到酵母表达载体上,得到pDEST-GADT7-SmbHLH128、pDEST-GADT7-SmbHLH31、pDEST-GADT7-SmbHLH37、pDEST-GADT7-SmbHLH43、pDEST-GADT7-SmbHLH53、pDEST-GBKT7-SmbHLH51和pDEST-GADT7-SmbHLH6,通过酵母双杂交,验证得到SmbHLH128和SmMYB36发生互作。3.构建过表达载体pGWB18-SmMYB36和显性抑制载体pK7WG2R-SRDX-SmMYB36,并诱导得到过表达和显性抑制转基因丹参毛状根。使用高效液相(High performance li-quid chromatography,HPLC)分析转基因丹参毛状根次生代谢物含量,发现pGWB18-SmMYB36过表达丹参稳定的提高了丹参酮类物质:隐丹参酮、丹参酮II A、丹参酮I和二氢丹参酮;而降低了酚酸类物质:迷迭香酸和丹酚酸B。pK7WG2R-SRDX-SmMYB36检测结果与过表达丹参毛状根相反。4.荧光定量PCR分析转基因丹参毛状根次生代谢通路上关键酶基因的表达量。过表达丹参毛状根丹参酮合成途径中,过表达材料的SmCPS1、SmCYP76AH1和SmKSL1的表达量较野生型和空载都有明显升高;酚酸合成途径中,过表达材料的SmPAL1表达量较野生型和空载有明显的下降,SmRAS1和SmCYP98A41表达量没有明显的变化。反之,显性抑制材料的SmCYP76AH1、SmKSL1和SmCPS1表达量较野生型和空载的材料没有明显变化,SmPAL1和SmRAS1的表达量较野生型和空载有明显的升高,但是SmCYP98A41的表达量没有明显的变化。5.对pGWB18-SmMYB36过表达转基因丹参毛状根进行转录组分析,初生代谢中SmGAPDH、SmGPI、SmPEPCK和SmCS表达量降低,SmMDH表达量升高;次生代谢中SmGGPPS、SmTAT1和SmPAL3表达量升高,SmDXS2、Sm4CL2和SmHPPR2表达量降低。代谢组分析得到初生代谢产物无水葡萄糖、果糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸、苹果酸、柠檬酸、延胡索酸。莽草酸和奎宁酸含量升高,琥珀酸、景天庚酮糖-7-磷酸和核糖-5-磷酸降低,次生代谢中二氢丹参酮I和隐丹参酮含量升高,迷迭香酸、丹酚酸C和阿魏酸降低。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01)
李雪,葛永红,李灿婴,段斌,魏美林[3](2019)在《硝普钠对生姜根茎抗氧化酶和苯丙烷途径的影响》一文中研究指出以生姜根茎为试材,研究采后不同浓度硝普钠溶液浸泡处理10 min对其呼吸强度和失重率的影响并筛选最佳浓度,同时分析最佳浓度处理后生姜根茎抗氧化酶活性及苯丙烷途径关键酶活性和产物含量的变化。结果表明,0.25 mmol/L硝普钠处理降低了生姜根茎呼吸强度、抑制了失重率的升高,硝普钠处理还显着提高了生姜根茎过氧化氢含量、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和抗坏血酸过氧化物酶的活性。此外,硝普钠处理还提高了苯丙氨酸解氨酶活性、显着提高了4-香豆酰CoA连接酶的活性,促进了木质素、总酚和类黄酮的积累。由此表明,硝普钠处理通过调节生姜根茎抗氧化酶活性和苯丙烷途径延缓其衰老。(本文来源于《食品工业科技》期刊2019年02期)
文欢,张大燕,彭成,王伟,谢晓芳[4](2017)在《天麻苯丙烷代谢途径的转录组学分析》一文中研究指出目的:对天麻进行转录组学分析,从转录组水平阐释天麻次级代谢产物含量与相关酶活性关系。方法:采用Illumina Hiseq 4000对新鲜天麻及采后敞放5天天麻进行转录组测序分析,通过与基因数据库比对分析注释和发现差异表达基因。结果:新鲜天麻及采后敞放5天天麻分别获得了18772600、19353329条Clean Reads,Trinity组装后得到63455条Unigene,通过与NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、KEGG数据库比对,最终获得18913个有注释信息的Unigene。天麻采收放置5天后有953个基因转录表达量上升,1876个基因转录表达量下降,合计2829个差异表达基因。634条差异表达基因被COG注释到的25个功能类别中,612条差异性表达基因被KEGG注释归属于50条代谢通路。天麻转录组差异表达数据中共11个关键基因被KEGG数据库苯丙烷类合成途径注释,与新鲜天麻相比,放置5天的天麻CM、PDT、PAL、4CL、CHS、F5H、F3'M基因表达量下降,C4H、CCR表达量上升,CAD表达量既有上升又有下降。结论:本研究第一次获得了较完整的天麻苯丙烷类产物合成代谢通路图,并注释了大量相关基因序列。通过本研究为后续深入的基因功能研究及天麻药材品质形成的分子机理研究、天麻栽培过程的质量控制以及采收后的保鲜处理等奠定了一定的参考依据。(本文来源于《2017第五届全国天麻会议暨中国(小草坝)天麻产业发展高峰论坛论文集》期刊2017-10-21)
文欢,张大燕,彭成,王伟,谢晓芳[5](2017)在《天麻苯丙烷代谢途径的转录组学分析》一文中研究指出目的:对天麻进行转录组学分析,从转录组水平阐释天麻次生代谢产物含量与相关酶活性的关系。方法:采用Illumina Hiseq 4000对新鲜天麻及采后敞放5 d天麻进行转录组测序分析,通过与基因数据库比对分析注释和发现差异表达基因。结果:新鲜天麻及采后敞放5 d天麻分别获得了18 772 600、19 353 329条Clean Reads,Trinity组装后得到63 455条Unigene,通过与NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、KEGG数据库比对,最终获得18 913个有注释信息的Unigene。天麻采收放置5 d后有953个基因转录表达量上升,1 876个基因转录表达量下降,合计2 829个差异表达基因。634条差异表达基因被COG注释到25个功能类别中,612条差异性表达基因被KEGG注释归属于50条代谢通路。天麻转录组差异表达数据中共11个关键基因被KEGG数据库苯丙烷类合成途径注释,与新鲜天麻相比,放置5 d的天麻CM、PDT、PAL、4CL、CHS、F5H、F3'M基因表达量下降,C4H、CCR表达量上升,CAD表达量既有上升又有下降。结论:本研究获得了较完整的天麻苯丙烷类产物合成代谢通路图,并注释了大量相关基因序列。通过本研究为后续深入的基因功能研究及天麻药材品质形成的分子机理研究、天麻栽培过程的质量控制以及采收后的保鲜处理等奠定了基础。(本文来源于《中药材》期刊2017年04期)
田海丽[6](2015)在《黄芩总黄酮累积规律及苯丙烷途径基因克隆与表达分析》一文中研究指出黄芩(Sutellaria baicalensis Georgi)为唇形科多年生草本植物,其主要活性成分是黄酮类化合物,是黄芩发挥药理活性的分子基础和物质基础,而黄酮类化合物主要是由植物次级代谢产生,苯丙烷代谢途径则是连接初级代谢和次级代谢的桥梁,黄酮类化合物的生物代谢是苯丙烷代谢途径的一个重要分支途径。通过对长白山地区黄芩栽培过程中不同生长时期总黄酮含量的测定,发现一、二年生黄芩根及不定根和愈伤组织具有不同的总黄酮累积机制,因此,建议长白山一年生黄芩9月份采收为宜,二年生黄芩6月份采收为宜;在离体组织培养过程中,不定根培养40 d时,总黄酮含量及产量分别达到最大值,显着高于其他时期,因此40 d为不定根培养的最佳收获时间;愈伤组织培养28 d时,总黄酮含量及产量分别达到最大值,因此28 d为愈伤组织培养的最佳收获时间。为了探究长白山黄芩的整个生长发育过程中,总黄酮的累积以及苯丙烷代谢途径基因转录表达的关系,我们克隆了SbPAL(SbPAL1、SbPAL2、SbPAL3)、SbC4H、Sb4CL的cDNA全长序列,结果表明其中3个PAL cDNA序列长度有所不同,分别为2532 bp、2275 bp、2485 bp,分别编码708、670、704个氨基酸;同样地,1个C4H cDNA序列长度为1724 bp,编码507个氨基酸;4CL cDNA序列长度为1858bp,编码549个氨基酸。生物信息学分析表明,SbPAL、Sb4CL均为亲水性蛋白,定位于细胞质基质中,SbC4H存在信号肽。半定量PCR分析表明,总黄酮的累积以及苯丙烷代谢途径基因的表达是一个十分复杂的过程,SbPAL、SbC4H、Sb4CL在黄芩的各个生长时期中持续表达,它们在一年生和二年生黄芩植株中表达模式不同,在离体的愈伤组织和不定根中也有不同的表达模式。(本文来源于《延边大学》期刊2015-06-01)
张爽爽[7](2015)在《玉米MYB111和MYB148转录因子调控苯丙烷代谢途径的初步研究》一文中研究指出MYB转录因子是植物基因组内数量庞大、功能多样化的转录因子家族之一,广泛地参与植物体的苯丙烷类物质代谢调控、细胞形态建成调控、细胞周期循环调控以及对逆境胁迫做出应答等生理活动,在植物生长发育和抵御逆境的过程中发挥着不可替代的作用。苯丙烷代谢是植物体一条非常重要的次生代谢途径,所有包含苯丙烷骨架的化合物都是通过这条代谢途径生成的。苯丙烷类物质代谢出现在维管植物发生分离之前,单子叶植物与双子叶植物之间某些苯丙烷类衍生物的代谢具有进化上的保守性。苯丙烷类衍生物在植物抵御微生物入侵、环境胁迫等过程中发挥重要作用;木质素作为保护植物细胞壁的天然屏障,赋予细胞壁机械强度和硬度的同时为植物提供疏水的维管系统,参与植物抵御真菌性病害胁迫的过程、增强植物抗倒伏及抗旱能力;花青素可清除植物体内因逆境胁迫而积累的活性氧及自由基,保护植物免受因逆境胁迫而造成的氧化性损伤;原花青素积累在种子的种皮中,能加固种皮、诱导种子进行冬眠、防御病原菌胁迫,保护种子不受物理及生物伤害;黄酮醇能够吸收紫外光,发挥“紫外光过滤器”的作用,防止植物体及光合作用器官受到紫外光的辐射等。玉米是我国第一大作物,深入研究玉米苯丙烷代谢途径对于通过分子手段选育高抗、优质玉米品种具有重要意义,但是玉米中苯丙烷代谢途径的研究远滞后于双子叶植物。拟南芥等双子叶植物中的R2R3MYB转录因子广泛的参与类黄酮、木质素等苯丙烷类衍生物的调控,为玉米中苯丙烷代谢调控的研究提供重要信息。同时本课题组前期对玉米基因组中158个R2R3MYB转录因子的分布规律及进化机制进行了研究,并通过同源性分析、共表达分析、线性分析等方法筛选到苯丙烷代谢途径中高度保守的R2R3MYB转录因子基因,可能参与苯丙烷类衍生物代谢的调控。本研究以玉米优良自交系B73为材料,从中克隆到两个R2R3MYB转录因子ZmMYB111和ZmMYB148,并对其功能进行了初步研究;研究结果表明,ZmMYB111和ZmMYB148可能通过激活苯丙烷代谢途径限速酶PAL的活性来调控玉米中苯丙烷类衍生物的合成,但是具体影响到哪一种苯丙烷类衍生物还需进一步研究。本研究具体结果如下:1、克隆ZmMYB111和ZmMYB148基因,得到了完整的开放阅读框。对ZmMYB111和ZmMYB148蛋白的高级结构预测分析,结果表明ZmMYB111和ZmMYB148具有典型的R2R3MYB蛋白的二级结构、叁级结构及结构域。将ZmMYB111和ZmMYB148与拟南芥等植物中调控苯丙烷代谢的R2R3MYB转录因子构建亲缘进化树(NJ树)并对其保守基序进行分析,结果表明ZmMYB111和ZmMYB148与其他调控苯丙烷代谢的R2R3MYB有较近的亲缘关系并含有保守的基序。2、实时定量PCR分析ZmMYB111和ZmMYB148在不同组织中的表达情况。结果表明ZmMYB111在苗期叶片、茎秆的髓部、雌花中几乎不表达,在成熟期叶、苗期根、雄花中表达量较低,在成熟期根、胚乳、成熟种子中表达量中等,茎杆上部表达量较高,茎秆下部表达量最高;ZmMYB148在苗期叶片、茎秆的髓部、雌花中几乎不表达,在成熟期叶、雄花中表达量较低,在苗期根、茎杆上部、成熟种子中表达量中等,在成熟期根、茎秆下部表达量较高,玉米胚乳中表达量最高。3、利用酵母转化实验分析ZmMYB111和ZmMYB148是否具有转录激活活性。结果显示PGBDKT7-111和PGBDKT7-148可以在SD/-Trp/-His/3-AT/X-a-gal的缺陷型培养基上生长,说明ZmMYB111和ZmMYB148都具有转录激活活性。4、基因枪轰击洋葱表皮细胞对ZmMYB111和ZmMYB148蛋白亚细胞定位。结果表明ZmMYB148定位在细胞核中,可能在转录水平调控基因的表达;ZmMYB111主要定位在细胞核中,但是细胞膜上也有少量荧光,说明ZmMYB111可能除了在转录水平调控基因的表达之外,也许还参与细胞膜的保护或者膜蛋白的转运等过程。5、克隆苯丙烷代谢途径中关键酶基因苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4-香豆酸COA连接酶(4CL)的启动子pPAL、p4CL,利用酵母单杂交实验验证克隆的转录因子与pPAL、p4CL在玉米体外是否可以结合。结果表明ZmMYB111和ZmMYB148可以与pPAL、p4CL结合,而且ZmMYB148与pPAL、p4CL结合能力比ZmMYB111与pPAL、 p4CL结合能力强。6、PAL是苯丙烷代谢途径的限速酶,为了进一步验证ZmMYB111和ZmMYB148与pPAL的结合及对pPAL活性的影响(激活或抑制),利用基因枪轰击玉米胚乳细胞进行瞬时表达实验。结果表明ZmMYB111和ZmMYB148在玉米胚乳中可以与pPAL结合,增加pPAL的活性;并且ZmMYB148对pPAL的激活作用比ZmMYB111强,该结果与酵母单杂交实验结果一致。(本文来源于《四川农业大学》期刊2015-05-01)
秦玉芝,George,Tai,谢开云,何长征,熊兴耀[8](2014)在《环境光照改变马铃薯苯丙烷代谢途径相关酶和转录因子基因对低温胁迫的应答模式(英文)》一文中研究指出[目的]通过实时荧光定量PCR分析不同环境温度和光照强度处理下,马铃薯苯丙烷类代谢途径关键酶基因,转录调节因子St R2R3-MYB和TGA基因表达情况。[方法]运用多因子及其互作逐步回归法建立光照强度、温度和处理时间影响基因表达的模式,逐步回归分析法研究St R2R3-MYB和TGA转录因子对苯丙烷类代谢途径关键酶基因的影响力。[结果 ]环境温度与St PAL、St DFR和St R2R3-MYB基因的表达量负相关,St TGA表达与温度正相关;环境光照强度与St CHS、St DFR和St R2R3-MYB表达正相关。环境光照强度和温度对St PAL和St DFR基因表达存在显着交互作用。[结论]环境光照强度影响马铃薯苯丙烷代谢途径关键酶St PAL和St DFR基因对温度的响应模式。马铃薯St R2R3-MYB转录调节因子对St CHS基因表达具有明显正向影响,而马铃薯St TGA转录调节因子对St DFR表达具有明显反向作用。(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2014年11期)
于利,张彦,陈爱国,梁洪波,Qamaruddin,Jogi[9](2014)在《烟草苯丙烷代谢途径关键酶肉桂酸-4-羟化酶、4-香豆酸-辅酶A基因的分离及表达特性分析》一文中研究指出肉桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酸-辅酶A(4CL)是烟草苯丙烷代谢途径的关键酶,其多酚类产物与烟草品质密切相关。本研究以酚类物质含量合成差异较大的2个烤烟品种红花大金元(HD)和K326为试验材料,利用同源克隆技术获得这2种烟草Ntc4h和Nt4cl基因的cDNA序列并进行表达特性分析。结果表明,在2个品种中Ntc4h和Nt4cl各有2个同源基因,Ntc4h1、Ntc4h2、Nt4cl1和Nt4cl2的ORF长度分别为1518 bp、1518 bp、1644 bp和1629 bp。Nt4cl1、Ntc4h1和Ntc4h2在编码序列上存在品种间差异。实时荧光定量PCR分析结果表明,该2种酶的基因在烟草中具有明显的时空表达特异性,2种酶基因在根、茎、叶、花和萼片中都有表达,在茎的木质部和韧皮部中的表达量均显着高于其他组织;在圆顶期和适熟期表达水平较高,在适熟期达到最高;且两品种中的表达模式存在差异。(本文来源于《植物遗传资源学报》期刊2014年05期)
李晓东,杨洋,李波,杨家平,范玲[10](2013)在《外源松柏醛和芥子醛影响棉纤维苯丙烷代谢途径基因表达及生长》一文中研究指出利用棉花胚珠离体培养和半定量RT-PCR及数字化图像处理技术,通过体外饲喂不同浓度苯丙烷代谢途径中间代谢物松柏醛(CA)和芥子醛(SA)来研究在棉花纤维发育过程中苯丙烷代谢关键中间产物对棉花纤维发育的影响。结果表明,在离体培养棉纤维中,不同浓度(100μmol.L-1、200μmol.L-1)外源松柏醛(CA)和芥子醛(SA)不但诱导了以CA和SA为底物的基因产物表达量增加,也诱导了苯丙烷代谢途径上游基因产物的表达量增加,且高浓度(200μmol.L-1)诱导的表达量高于低浓度(100μmol.L-1),芥子醛高于松柏醛;对GhEx-pansin1的表达和纤维生长均有抑制作用,且高浓度(200μmol.L-1)抑制作用更加明显,芥子醛抑制作用大于松柏醛。(本文来源于《棉花学报》期刊2013年04期)
苯丙烷途径论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)又称红根、大红袍等,是草本植物,属于双子叶植物唇形科鼠尾草属。于《神农本草经》、《本草纲目》等均有记载,主要治疗妇科病,具有活血化瘀、调经等功效,此外对神经性衰弱失眠、冠心病、关节痛等均有疗效。丹参的有效药用成分有亲水性的酚酸类物质和亲脂性的丹参酮类物质,其中酚酸类物质包括迷迭香酸(Rosmarinicacid,RA)、丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)和阿魏酸等。丹参酮类物质包括丹参酮I(Tanshinone I)、丹参酮IIA(Tanshinone IIA)、二氢丹参酮I(Dihydrotanshinone I)、隐丹参酮(Cryptotanshinone)等。近几年来,丹参次生代谢途径受到越来越多的关注,本研究以丹参毛状根为模式材料,通过转基因和转录组及代谢组联合分析,尝试探讨丹参SmMYB36基因对萜类和苯丙烷代谢途径调控的机制。1.对SmMYB36进行截短并构建到酵母表达载体,得到pDEST-GADT7-SmMYB36、pDEST-GADT7-SmMYB36~(1-111),pDEST-GADT7-SmMYB36~(112-160),pDEST-GADT7-Sm MYB36~(112-160)。酵母双杂交验证发现SmMYB36全长和C端具有自激活活性,N端不具有自激活活性。2.克隆IIId、IIIe和IIIf家族的SmbHLH基因,将克隆成功的SmbHLH构建到酵母表达载体上,得到pDEST-GADT7-SmbHLH128、pDEST-GADT7-SmbHLH31、pDEST-GADT7-SmbHLH37、pDEST-GADT7-SmbHLH43、pDEST-GADT7-SmbHLH53、pDEST-GBKT7-SmbHLH51和pDEST-GADT7-SmbHLH6,通过酵母双杂交,验证得到SmbHLH128和SmMYB36发生互作。3.构建过表达载体pGWB18-SmMYB36和显性抑制载体pK7WG2R-SRDX-SmMYB36,并诱导得到过表达和显性抑制转基因丹参毛状根。使用高效液相(High performance li-quid chromatography,HPLC)分析转基因丹参毛状根次生代谢物含量,发现pGWB18-SmMYB36过表达丹参稳定的提高了丹参酮类物质:隐丹参酮、丹参酮II A、丹参酮I和二氢丹参酮;而降低了酚酸类物质:迷迭香酸和丹酚酸B。pK7WG2R-SRDX-SmMYB36检测结果与过表达丹参毛状根相反。4.荧光定量PCR分析转基因丹参毛状根次生代谢通路上关键酶基因的表达量。过表达丹参毛状根丹参酮合成途径中,过表达材料的SmCPS1、SmCYP76AH1和SmKSL1的表达量较野生型和空载都有明显升高;酚酸合成途径中,过表达材料的SmPAL1表达量较野生型和空载有明显的下降,SmRAS1和SmCYP98A41表达量没有明显的变化。反之,显性抑制材料的SmCYP76AH1、SmKSL1和SmCPS1表达量较野生型和空载的材料没有明显变化,SmPAL1和SmRAS1的表达量较野生型和空载有明显的升高,但是SmCYP98A41的表达量没有明显的变化。5.对pGWB18-SmMYB36过表达转基因丹参毛状根进行转录组分析,初生代谢中SmGAPDH、SmGPI、SmPEPCK和SmCS表达量降低,SmMDH表达量升高;次生代谢中SmGGPPS、SmTAT1和SmPAL3表达量升高,SmDXS2、Sm4CL2和SmHPPR2表达量降低。代谢组分析得到初生代谢产物无水葡萄糖、果糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸、苹果酸、柠檬酸、延胡索酸。莽草酸和奎宁酸含量升高,琥珀酸、景天庚酮糖-7-磷酸和核糖-5-磷酸降低,次生代谢中二氢丹参酮I和隐丹参酮含量升高,迷迭香酸、丹酚酸C和阿魏酸降低。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
苯丙烷途径论文参考文献
[1].陈延儒.采后硝普钠处理对苹果果实品质、莽草酸和苯丙烷代谢途径的影响[D].渤海大学.2019
[2].赵英.丹参SmMYB36基因对萜类和苯丙烷代谢途径调控的研究[D].西北农林科技大学.2019
[3].李雪,葛永红,李灿婴,段斌,魏美林.硝普钠对生姜根茎抗氧化酶和苯丙烷途径的影响[J].食品工业科技.2019
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