导读:本文包含了愈伤组织受体系统论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:巴西橡胶,遗传转化受体优化,低温冷藏,遗传转化
愈伤组织受体系统论文文献综述
周广振[1](2018)在《橡胶树花药愈伤组织遗传转化受体系统的优化及橡胶树HbCERK1基因的转化》一文中研究指出巴西橡胶树是天然橡胶的主要来源,并且是我国的战略性物资,但我国天然橡胶自给率仅约为18%,提高橡胶产量是缓解我国天然橡胶供需矛盾的有效途径。病害导致橡胶产量每年损失10~30%,是制约天然橡胶安全生产的主要因素之一。当前的栽培措施与农药防治橡胶树病害的能力有限,且长期大量使用农药,对橡胶林土壤肥力保持、生态环境和人畜的安全都构成很大威胁,故培育抗病高产品种成为我国乃至全世界产胶国家的橡胶树育种的有效途径。橡胶树因本身为热带高大乔木,操作不易、遗传上高度杂合、育种周期长且环节多等多种因素影响,利用常规育种进行品种改良进展缓慢,转基因技术的应用与抗病相关基因的克隆为橡胶树分子抗病育种提供了新的途径。遗传转化效率低是我国橡胶树功能基因研究和抗病分子育种的瓶颈,优良的遗传转化受体系统是提高橡胶树植物再生和遗传转化效率的重要环节和前期基础。本试验利用热研7-33-97品种的橡胶树花药为外植体,通过花粉发育时期检测;胚性愈伤组织的诱导、甄别和增殖等环节来优化橡胶树花药愈伤组织,提高体细胞胚的分化、成熟和植株再生。创建了优化胚性愈伤组织的保存方法,降低因频繁继代造成的愈伤组织胚性丧失和人工劳作的繁琐。利用优化的花药胚性愈伤组织作为遗传转化受体,以根癌农杆菌为介导,GUS、GFP为报告基因,建立和优化了橡胶树花药体细胞胚性愈伤组织的遗传转化体系,并利用该体系转化橡胶树HbCERK1基因。主要结果如下:1、热研7-33-97橡胶树品种雄花蕾纵径约2.81~3.20 mm时,花粉粒发育多为单核靠边期,是诱导易碎爽脆型花药脱分化愈伤组织的适宜外植体;雄花蕾纵径是筛选外植体的适宜指标。2、单粒花药接种是诱导橡胶树易碎爽脆型花药脱分化愈伤组织的适宜接种方式,比雄花整枚单体雄蕊接种方式的诱导率显着提高了 60.6%。3、小球状、易碎爽脆、颜色嫩黄是橡胶树花药胚性愈伤组织的典型特征,可借助解剖镜进行甄别,提高胚性愈伤组织的识别和利用效率。4、辅以花药子叶形体细胞胚看护哺育甄选胚性愈伤组织,在体胚萌发培养基上进行增殖培养,是胚性愈伤组织快速增殖的适宜方式,增殖速率比正常增殖显着增加2.9倍。5、优化的花药胚性愈伤组织的体细胞胚诱导分化率比花药脱分化愈伤组织显着提高2.04倍,体细胞胚总数和正常子叶胚数分别显着增加了 69.2%和168.0%,植株再生率也显着增加了 2.7倍。6、低温冷藏胚性愈伤组织的相对生长量比对照的显着降低83.1%,但细胞活力相对强;低温冷藏胚性愈伤组织的SOD、POD、CAT和APX等抗氧化酶活性与对照无显着差异,但GR酶活性比对照的显着增加4.21倍;恢复(25±2)℃、正常增殖培养,胚性愈伤组织的存活率、相对生长量、体细胞胚诱导率与对照的无显着差异,但植株再生能力提高47.2%。7、优化的花药胚性愈伤组织是橡胶树良好的遗传转化受体,以GUS、GFP为报告基因,建立了橡胶树花药胚性愈伤组织的遗传转化体系:以花药胚性愈伤组织为转化受体,通过无钙离子培养基预培养10 d,菌液侵染浓度OD600为0.6~1.0,侵染时间为20~40 min,暗培养共培养3 d,乙酰丁香酮(AS)浓度为100μM,其遗传转化率大于5%。8、利用建立的花药胚性愈伤组织遗传转化体系转化橡胶树PTI先天免疫途径基因HbCERK1,通过PCR、RT-PCR以及western blot等方法检测,确定外源基因HbCERK1成功导入整合到橡胶基因组DNA中。本研究优化了橡胶树花药胚性愈伤组织的诱导、增殖和保存,为今后适时提供橡胶树遗传转化受体材料提供理论依据和方法;建立了稳定的花药胚性愈伤组织遗传转化体系,为完善橡胶树高效、稳定的遗传转化体系奠定基础;转橡胶树HbCERK1的转基因株系经过扩繁和移栽,可为后期进行橡胶树HbCERK1基因功能研究提供研究材料。(本文来源于《海南大学》期刊2018-05-01)
高策[2](2017)在《铅胁迫下黑心菊转录组分析及拟南芥愈伤组织受体系统的建立》一文中研究指出铅是一种有毒的重金属元素,不仅对生态环境造成危害,也会通过食物链等途径进入人体,严重危害人体健康。利用重金属超富集植物对土壤中的重金属的超量吸收并向地上部分转运的特点,可以对被重金属污染的土壤进行修复。黑心菊是一种对铅转运系数较高的植物,通过添加1500mg/kg的醋酸铅溶液对黑心菊幼苗进行铅胁迫处理,6个月后采集整株黑心菊作为样品,通过高通量测序技术Illumina Hi Seq,对黑心菊进行转录组测序,获得了大量的测序信息。采用农杆菌介导法进行转基因实验,将选取的目的基因Rh NRAMP1转入到受体植物拟南芥中,通过对转基因拟南芥进行PCR鉴定,初步证明了目的基因已经被整合到拟南芥的基因组中,拟南芥愈伤组织受体系统初步建立。研究结果如下:(1)黑心菊样品经过RNA提取、c DNA文库制备、Illumina Hi Seq测序、过滤不合格序列及组装等步骤后,最终得到147131条黑心菊Unigene序列,总长度为86268038 bp,平均长度为586bp,其中长度在1000bp以上的Unigene有44653条。(2)获得的Unigene与Nr,Nt,Pfam,KOG,Swiss-prot,KEGG,GO七个库进行比对后,分别有51915、18447、36337、16381、36016、15455、36957条比对到以上数据库。(3)对Unigene进行GO和Pathway富集分析,得到46个不同功能分类和32条代谢通路。其中GO富集分析较多的是细胞过程、代谢过程等,Pathway富集分析较多的是转导、碳水化合物代谢、翻译等。(4)通过对Unigene进行CDS预测共得到111320个CDS,其中比对到公共数据库共得到了51853个CDS,用estscan软件预测获得59467个CDS。(5)6-BA浓度为1.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L的MS培养基较适合诱导拟南芥叶片愈伤组织;农杆菌介导法转化Rh NRAMP1基因的拟南芥愈伤组织,6-BA浓度为2.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L的MS培养基利于芽分化、6-BA浓度为1.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L的MS培养基有利于根的分化。(本文来源于《贵州师范大学》期刊2017-06-06)
陈智勇,易自力,蒋建雄,覃静萍,刘清波[3](2007)在《多年生黑麦草愈伤组织遗传转化受体系统的建立》一文中研究指出多年生黑麦草成熟胚为外植体,选择CC+2,4-D 4 mg/L为诱导培养基,NB+6-BA 2 mg/L为分化培养基,1/2 NB+IAA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L为生根培养基,建立了多年生黑麦草胚性愈伤组织高频诱导与再生系统,确定了G418(150~200 mg/L)、Hpt(50 mg/L)、Basta(20~30 mg/L)的筛选临界浓度,确定了最佳分化时间,探讨了建立多年生黑麦草转化受体系统的必要条件。(本文来源于《草原与草坪》期刊2007年03期)
陈智勇,易自力,蒋建雄,覃静萍,刘清波[4](2007)在《草地早熟禾愈伤组织遗传转化受体系统的建立》一文中研究指出以草地早熟禾成熟胚为外植体,并去除部分胚乳,或用浓盐酸处理,选择NB+2,4-D 2mg/L为诱导培养基,NB+6-BA 2mg/L为分化培养基,1/2NB+IAA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为生根培养基,建立了这些品种的胚性愈伤组织高频诱导与再生系统,确定了G418(40-50mg/L)Hpt(50mg/L)的筛选临界浓度,确定了最佳分化时间,探讨了建立草地早熟禾转化受体系统的必要条件。(本文来源于《中国草地学报》期刊2007年02期)
张颖,孙庆泉,刘玉贞,曹墨菊[5](2006)在《玉米胚性愈伤组织转基因受体系统建立的研究初报》一文中研究指出通过对几个常用玉米自交系的幼胚培养,探讨不同基因型、不同培养条件对幼胚离体培养的影响。结果表明,相同自交系在MS和N6不同培养基上胚性愈伤的诱导率存在显着或极显着的差异;不同自交系材料在相同培养条件下其愈伤诱导率存在显着或极显着差异。并发现N6A培养基为供试材料的最适培养基,18-599(红)为胚性愈伤诱导率最高的基因型。研究的结果还表明,不同基因型要求的最适培养基存在差异,2,4-D对愈伤组织的诱导率影响显着,NAA的添加不能显着提高愈伤组织的诱导率。(本文来源于《玉米科学》期刊2006年04期)
唐东芹,钱虹妹,黄丹枫,唐克轩[6](2003)在《百合基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立》一文中研究指出为建立稳定高效的胚性愈伤组织基因转化受体系统,以麝香百合Liliumlongiflorum花丝为外植体进行了愈伤组织诱导、植株再生研究以及抗生素敏感性试验。结果表明:愈伤组织诱导增殖培养基为MS+NAA1 0mg·L-1+BA0 5mg·L-1,分化培养基为MS+KT1 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1。抗生素敏感性试验表明,百合基因转化胚性愈伤组织的卡那霉素选择压为75mg·L-1,潮霉素的选择压为20mg·L-1,头孢霉素选择压为250mg·L-1。表4参10(本文来源于《浙江林学院学报》期刊2003年03期)
愈伤组织受体系统论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
铅是一种有毒的重金属元素,不仅对生态环境造成危害,也会通过食物链等途径进入人体,严重危害人体健康。利用重金属超富集植物对土壤中的重金属的超量吸收并向地上部分转运的特点,可以对被重金属污染的土壤进行修复。黑心菊是一种对铅转运系数较高的植物,通过添加1500mg/kg的醋酸铅溶液对黑心菊幼苗进行铅胁迫处理,6个月后采集整株黑心菊作为样品,通过高通量测序技术Illumina Hi Seq,对黑心菊进行转录组测序,获得了大量的测序信息。采用农杆菌介导法进行转基因实验,将选取的目的基因Rh NRAMP1转入到受体植物拟南芥中,通过对转基因拟南芥进行PCR鉴定,初步证明了目的基因已经被整合到拟南芥的基因组中,拟南芥愈伤组织受体系统初步建立。研究结果如下:(1)黑心菊样品经过RNA提取、c DNA文库制备、Illumina Hi Seq测序、过滤不合格序列及组装等步骤后,最终得到147131条黑心菊Unigene序列,总长度为86268038 bp,平均长度为586bp,其中长度在1000bp以上的Unigene有44653条。(2)获得的Unigene与Nr,Nt,Pfam,KOG,Swiss-prot,KEGG,GO七个库进行比对后,分别有51915、18447、36337、16381、36016、15455、36957条比对到以上数据库。(3)对Unigene进行GO和Pathway富集分析,得到46个不同功能分类和32条代谢通路。其中GO富集分析较多的是细胞过程、代谢过程等,Pathway富集分析较多的是转导、碳水化合物代谢、翻译等。(4)通过对Unigene进行CDS预测共得到111320个CDS,其中比对到公共数据库共得到了51853个CDS,用estscan软件预测获得59467个CDS。(5)6-BA浓度为1.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L的MS培养基较适合诱导拟南芥叶片愈伤组织;农杆菌介导法转化Rh NRAMP1基因的拟南芥愈伤组织,6-BA浓度为2.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L的MS培养基利于芽分化、6-BA浓度为1.0mg/L和NAA浓度为0.1mg/L的MS培养基有利于根的分化。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
愈伤组织受体系统论文参考文献
[1].周广振.橡胶树花药愈伤组织遗传转化受体系统的优化及橡胶树HbCERK1基因的转化[D].海南大学.2018
[2].高策.铅胁迫下黑心菊转录组分析及拟南芥愈伤组织受体系统的建立[D].贵州师范大学.2017
[3].陈智勇,易自力,蒋建雄,覃静萍,刘清波.多年生黑麦草愈伤组织遗传转化受体系统的建立[J].草原与草坪.2007
[4].陈智勇,易自力,蒋建雄,覃静萍,刘清波.草地早熟禾愈伤组织遗传转化受体系统的建立[J].中国草地学报.2007
[5].张颖,孙庆泉,刘玉贞,曹墨菊.玉米胚性愈伤组织转基因受体系统建立的研究初报[J].玉米科学.2006
[6].唐东芹,钱虹妹,黄丹枫,唐克轩.百合基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立[J].浙江林学院学报.2003