章毅:人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响论文

章毅:人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响论文

本文主要研究内容

作者章毅,陈侃俊,伍婷,祁成,金魏名,孔凡瑞,陈亮(2019)在《人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响》一文中研究指出:目的探讨人脐带间充质干细胞(huc MSCs)对人真皮成纤维细胞(HDFib)增殖与细胞外基质相关基因表达的影响及其可能机制。方法采用II型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备huc MSCs,用流式细胞术鉴定P3代huc MSCs表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行间充质干细胞三向分化能力鉴定;随后与P3代HDFib进行transwell共培养,对照组transwell小室上添加等量培养基,观察24、48和72 h时两组HDFib的细胞形态,CCK8法进行细胞增殖检测,q RT-PCR法测定培养24和48h时HDFib主要细胞外基质蛋白collagenI、elastin、fibronectin、MMP-1和细胞信号转导相关基因PI3K、Akt、p38和caspase3 mRNA表达水平。结果制备获得的hucMSCs呈典型成纤维细胞样并贴壁生长,其表面间充质干细胞标志性抗原CD105、CD90、CD73阳性表达率分别为96.97%、99.75%和99.81%,诱导培养16d后出现明显的成脂、成骨和成软骨细胞特性。huc MSCs共培养处理24、48和72 h,HDFib细胞存活率较对照组分别显著增加了7.29%(P<0.01)、25.82%(P <0.05)和11.74%(P <0.05),与形态学观察结果一致。q RT-PCR结果显示,huc MSCs共培养处理24h,HDFib elastin和fibronectin基因表达分别上调为对照组的1.45倍(P <0.01)和1.30倍(P <0.05),PI3K mRNA水平上调为对照组的1.19倍(P <0.05);共培养48 h时,collagen I、elastin、fibronectin和PI3K、Akt分别上调2.60倍(P<0.001)、3.66倍(P <0.05)、3.45倍(P <0.01)和1.43倍(P <0.05)、1.65倍(P <0.05),MMP-1、p38和caspase3转录水平显著降低至对照组的0.70倍(P <0.01)、0.60倍(P <0.01)和0.86倍(P <0.05)。结论 huc MSCs能够显著促进正常HDFib增殖,同时提高HDFibI型胶原、弹性蛋白和纤维粘连蛋白转录水平,是理想的皮肤组织工程学种子细胞。hucMSCs对HDFib细胞外基质的调节作用可能与激活HDFib皮肤创伤修复信号通路PI3K/Akt、下调细胞外基质调节基因p38、凋亡基因caspase3的m RNA水平有关。

Abstract

mu de tan tao ren qi dai jian chong zhi gan xi bao (huc MSCs)dui ren zhen pi cheng qian wei xi bao (HDFib)zeng shi yu xi bao wai ji zhi xiang guan ji yin biao da de ying xiang ji ji ke neng ji zhi 。fang fa cai yong IIxing jiao yuan mei xiao hua fa cong xin sheng er qi dai zhong fen li zhi bei huc MSCs,yong liu shi xi bao shu jian ding P3dai huc MSCsbiao mian biao ji kang yuan ,yong you gong Oran se 、qian su gong Sran se he Massonran se jin hang jian chong zhi gan xi bao san xiang fen hua neng li jian ding ;sui hou yu P3dai HDFibjin hang transwellgong pei yang ,dui zhao zu transwellxiao shi shang tian jia deng liang pei yang ji ,guan cha 24、48he 72 hshi liang zu HDFibde xi bao xing tai ,CCK8fa jin hang xi bao zeng shi jian ce ,q RT-PCRfa ce ding pei yang 24he 48hshi HDFibzhu yao xi bao wai ji zhi dan bai collagenI、elastin、fibronectin、MMP-1he xi bao xin hao zhuai dao xiang guan ji yin PI3K、Akt、p38he caspase3 mRNAbiao da shui ping 。jie guo zhi bei huo de de hucMSCscheng dian xing cheng qian wei xi bao yang bing tie bi sheng chang ,ji biao mian jian chong zhi gan xi bao biao zhi xing kang yuan CD105、CD90、CD73yang xing biao da lv fen bie wei 96.97%、99.75%he 99.81%,you dao pei yang 16dhou chu xian ming xian de cheng zhi 、cheng gu he cheng ruan gu xi bao te xing 。huc MSCsgong pei yang chu li 24、48he 72 h,HDFibxi bao cun huo lv jiao dui zhao zu fen bie xian zhe zeng jia le 7.29%(P<0.01)、25.82%(P <0.05)he 11.74%(P <0.05),yu xing tai xue guan cha jie guo yi zhi 。q RT-PCRjie guo xian shi ,huc MSCsgong pei yang chu li 24h,HDFib elastinhe fibronectinji yin biao da fen bie shang diao wei dui zhao zu de 1.45bei (P <0.01)he 1.30bei (P <0.05),PI3K mRNAshui ping shang diao wei dui zhao zu de 1.19bei (P <0.05);gong pei yang 48 hshi ,collagen I、elastin、fibronectinhe PI3K、Aktfen bie shang diao 2.60bei (P<0.001)、3.66bei (P <0.05)、3.45bei (P <0.01)he 1.43bei (P <0.05)、1.65bei (P <0.05),MMP-1、p38he caspase3zhuai lu shui ping xian zhe jiang di zhi dui zhao zu de 0.70bei (P <0.01)、0.60bei (P <0.01)he 0.86bei (P <0.05)。jie lun huc MSCsneng gou xian zhe cu jin zheng chang HDFibzeng shi ,tong shi di gao HDFibIxing jiao yuan 、dan xing dan bai he qian wei nian lian dan bai zhuai lu shui ping ,shi li xiang de pi fu zu zhi gong cheng xue chong zi xi bao 。hucMSCsdui HDFibxi bao wai ji zhi de diao jie zuo yong ke neng yu ji huo HDFibpi fu chuang shang xiu fu xin hao tong lu PI3K/Akt、xia diao xi bao wai ji zhi diao jie ji yin p38、diao wang ji yin caspase3de m RNAshui ping you guan 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国医药生物技术的章毅,陈侃俊,伍婷,祁成,金魏名,孔凡瑞,陈亮,发表于刊物中国医药生物技术2019年03期论文,是一篇关于人脐带间充质干细胞论文,人真皮成纤维细胞论文,细胞外基质论文,胶原论文,中国医药生物技术2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国医药生物技术2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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